人脐血及骨髓淋巴细胞免疫表型的比较及其意义

为比较脐血和骨髓淋巴细胞及祖细胞分化抗原，通过流式细胞术（FCM）双标法对38份脐血及10份骨髓免疫细胞表型进行了分析研究。研究发现：（1）脐血及骨髓淋巴细胞中均测到稚淋巴细胞（CD3^-CD4^ )，且前中含量较多，但脐血细胞毒T细胞含量（CTL，CD3^ CD16^ 56^ )低于骨髓；（2）脐血中NK细胞（CD3^-CD16^ 56^ )比例高于骨髓；（3）脐血有核细胞中CD34^ 细胞的比值接近于骨髓，但脐血CD34^ 细胞中髓系祖细胞（CD34^ CD13^ ,CD34^ HLA-DR^ )及淋巴系祖细胞（CD34^ CD19^ )含量均低于骨髓，结论：（1）脐血免疫细胞具有不成熟性，这估计是脐血移植后GVHD程度轻的主要原因；（2）脐血淋巴细胞中NK细胞含量较高，推测脐血移植后移植物抗白血病效应（GVL）并不会降低；（3）脐血CD34^ 细胞中髓系祖细胞及淋巴系祖细胞比例均低于骨髓，可能是脐血移植后造血及免疫重建速度较慢的原因之一。     

CD4^+T细胞老化与冠状动脉粥样硬化性心脏病严重程度的相关性研究

目的探讨稳定型冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary heart disease,CHD)和急性ST段抬高型心肌梗死(ST segment elevationmyocardialinfarction,STEMI)患者外周血CD4^+T细胞正性共刺激分子表达及老化情况。方法纳入2016年9月1日至2016年10月31日首都医科大学附属北京地坛医院年龄>18岁的受试者,根据临床症状分为对照组36例、稳定性冠状动脉(冠脉)疾病(stable coronary artery disease,SCAD组13例、STEMI组18例。流式细胞学检测对照组、SCAD组和STEMI组患者CD4^+T细胞表面CD28、CD27、OX40、4-1BB的表达率,CD4^+CD27^-CD28^-T细胞百分率,并进行组间比较。检验STEMI组上述指标与Genisi评分的相关性。结果与对照组CD4^+T细胞比较,STEMI组和SCAD组4-1BB表达率显著增高,SCAD组OX40表达率显著增高,STEMI组的CD28百分率和CD4^+CD28^-CD27^-T细胞百分率分别显著降低和增高。STEMI组CD4^+T细胞的CD28和CD27表达率均与Gensini评分负相关,而CD4^+CD28^-CD27^-T细胞百分率与Gensini评分正相关。CD4^+CD28^+T细胞及CD4^+CD27^-CD28^-T细胞百分率与Gensini评分独立相关。结论 STEMI患者CD4^+T细胞显著老化,且CD28分子表达降低及CD4^+CD27^-CD28^-T细胞百分比增高与STEMI患者冠状动脉狭窄程度独立相关。     

胶原支架促进人类多能干细胞向红细胞的诱导分化

目的建立人胚胎干细胞(hESCs)来源的造血干/组细胞向红细胞分化的体外3D培养方法。方法hESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾区(AGM-S3)基质细胞共培养14 d后获得CD34~+CD45~+造血干/祖细胞,对获得的CD34~+CD45~+细胞扩增5 d后,以相同初始接种数量分别接种于胶原水凝胶、透明质酸水凝胶、Ⅰ型胶原蛋白构建的三维(3D)支架材料(简称胶原支架)中,在体外模拟骨髓微环境,做红细胞定向分化,以普通液体悬浮培养(简称液体培养)为对照,通过MGG染色、流式细胞术、免疫染色、qRT-PCR等手段分别对收获的细胞做形态学、红系特异性表面标志表达情况、红系细胞成熟程度以及红系细胞发育过程中相关基因的表达情况分析。结果红系定向分化14 d后,胶原支架中收获的总细胞数量分别是液体培养、透明质酸水凝胶、胶原水凝胶的1.50、1.19、1.33倍,GPA~+CD71~+细胞数量分别是液体培养、透明质酸水凝胶、胶原水凝胶的1.55、1.25及1.48倍;GPA~+CD36~+细胞数量分别是液体培养、透明质酸水凝胶、胶原水凝胶的1.65、1.07、1.36倍。结论利用Ⅰ型胶原蛋白构建的3D支架材料可模拟骨髓微环境,促进红细胞分化。     

逻辑设门方法在B-ALL免疫表型检测中的作用

目的评价逻辑设门白血病细胞方法在B-ALL免疫表型检测中的应用。方法采用FSC-SSC和CD45-SSC逻辑设门方法识B-ALL患者白血病细胞,分析其免疫表型,并与CD45-SSC设门方法进行比较。结果逻辑设门法检测白血病细胞阳性细胞百分率高于CD45-SSC设门法,两种设门方法结果有显著性差异。18例B-ALL患者中(阳性标本数/总标本数)CD19+100%、CD19+CD10+88.9%、CD34+94.4%、HLA-DR+88.9%。B系伴CD13+变异型33.3%,伴CD33+变异型11.1%。结论逻辑设门方法在B-ALL免疫表型分析中优于CD45-SSC法。     

逻辑设门方法在B-ALL免疫表型检测中的作用

目的评价逻辑设门白血病细胞方法在B-ALL免疫表型检测中的应用.方法采用FSC-SSC和CD45-SSC逻辑设门方法识B-ALL患者白血病细胞,分析其免疫表型,并与CD45-SSC设门方法进行比较.结果逻辑设门法检测白血病细胞阳性细胞百分率高于CD45-SSC设门法,两种设门方法结果有显著性差异.18例B-ALL患者中(阳性标本数/总标本数)CD19+100%、CD19+CD10+88.9%、CD34+94.4%、HLA-DR+88.9%.B系伴CD13+变异型33.3%,伴CD33+变异型11.1%. 结论逻辑设门方法在B-ALL免疫表型分析中优于CD45-SSC法.     

致敏的脐血源树突状细胞诱导CTL特异杀伤白血病细胞的实验研究

探讨脐血单个核细胞（MNC）诱导的树突状细胞（DC）通过负载冻融的HL-60、K562细胞抗原体外诱导产生细胞毒性T淋巴细胞（CTL）对HL-60、K562的杀伤作用。取脐血12份,分离MNC。在MNC中加入细胞因子GM-CSF（granulocyte monocyte colony-stimulating factor）、IL-3（interleukin 3）、SCF（stemcell factor）和EPO培养4周。使用CD83、CD1a、CD11C和CDw123单克隆抗体、流式细胞仪测定培养前后脐血DC抗原变化及扩增情况。DC通过负载HL-60、K-562白血病细胞抗原致敏T淋巴细胞产生CTL^3H-TdR掺入试验测定DC免疫刺激活性,MTT法观察CTL对HL-60、K562细胞的特异性杀伤活性。结果表明：新鲜脐血CD1a^＋、CD11c^＋、CD83^＋、CDw123^＋细胞数分别为0．27×10^5／ml、5．87×10^5／ml、1．94×10^5／ml、2．73×10^5／ml。加入上述细胞因子培养的脐血MNC分化为CD1a^＋、CD11C^＋、CD83^＋、CDw123^＋DC,经培养2—4周,DC数明显增多,分别达11．02×10^5／ml、28．24×10^5／ml、10．57×10^5／ml、18．7×10^5／ml,此后逐渐减少。细胞因子诱导脐血DC具有免疫刺激活性,且DC与CBMNC细胞比例为1：40时的刺激活性最佳。冻融法得到的HL-60、K562白血病细胞抗原致敏DC诱导的CTL对HL-60、K562细胞的杀伤率分别为（42．04±8．46）％和（31．25±11．07）％,与实验组比较有显著性差异（P〈0．01）。结论：加入细胞因子GM—CSF、IL-3、SCF和EPO培养2-4周的脐血MNC可分化为cD1a^＋、CD11C^＋、CD83^＋、CDw123^＋DC。冻融法得到的HL-60、K562白血病细胞抗原致敏DC,其诱导的CTL对HL-60、K562细胞具有特异的杀伤作用。脐血DC作为抗原呈递细胞在肿瘤免疫治疗上将起到重要作用。     

CD66c在成人急性白血病细胞上的表达及意义

目的探讨CD66c及其基因CEACAM6在成人急性白血病细胞上的表达及意义.方法体外培养HL-60、K562、LCL721.221和Jurkat等急性白血病细胞,RT-PCR检测急性白血病患者骨髓细胞和白血病细胞中CEACAM6 mRNA的表达,并用多参数流式细胞术检测白血病细胞及白血病患者骨髓细胞CD66c分子的表达.同时对199例白血病患者骨髓细胞作细胞遗传学分析,并对25例CD66c阳性急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者进行白血病微量残留病（MRD）分析.结果①HL-60、K562、LCL721.221和Jurkat细胞的细胞膜和细胞质CD66c均阴性.②127例急性髓系白血病（AML）患者中4例CD66c阳性（3.15%）,以M2、M4为主;79例ALL中CD66c阳性28例（35.44%）,均为B-ALL;CD66c只在common B-ALL（54例中有20例）和pre B-ALL（11例中有8例）亚型表达,8例Ph＋B-ALL患者CD66c均阳性.③MRD阳性与阴性组患者比较,6个月内复发率差异有统计学意义（维持治疗14周时MRD阳性者8例,其中6例复发;MRD阴性者17例,其中2例复发）.④CEACAM6 mRNA在CD66c阳性B-ALL细胞强表达,在HL-60细胞呈弱表达,在K562、LCL721.221和Jurkat细胞不表达.结论CD66c在ALL中阳性表达是白血病MRD检测的标志之一.CD66c抗原表达与CEACAM6 mRNA的表达高度相关.     

CD30+间变性大细胞淋巴瘤细胞系的建立及其生物学特性

由1例非霍奇金淋巴瘤患者的胸水标本通过液体培养法建立了1株CD30^ 间变性大细胞淋巴瘤细胞后，并对其生物学特性进行研究。所建立的细胞系可以在含10%小牛血清的RPMI 1640培养液中持久增殖，倍增时间约为36小时，目前已传代120余次，生长良好，暂命名为SH-1。光镜下细胞形态与典型的CD30^ 间变性大细胞淋巴瘤（anaplastic large cell lymphoma,ALCL）细胞的形态十分类似，电镜下可观察到胸浆内存在较多病毒颗粒。细胞组织化学染色：光镜下过氧化物酶POX阴性，糖原染色PAS阳性，酸性磷酸酶（ACP）呈强阳性；电镜下髓过氧化物酶（MPO）阴性，血小板过氧化物酶（PPO）阴性。EB病毒核心抗原-1（EBNA-1）呈阳性。细胞免疫表型为CD30^ 、CD45^ 、HLA-DR^ ，而EMA、CD34、CD38、CD2、CD3、CD4、CD7、CD8、CD10、CD15、CD19、CD20均呈阴性。染色体分析示SH-1细胞系核型为二倍体或四倍体核型，并具有明显的结构和数量异常，但未见典型t(2;5)。结论：所建立的细胞系为CD30^ ALCL细胞系。     

肺部相关疾病外周血T淋巴细胞表面标志物表达分析

目的观察肺部相关疾病外周血T淋巴细胞表面标志物的表达,从细胞免疫水平探究肺部相关疾病发病机制。方法选择2016年1-12月于浙江省绍兴市立医院呼吸科就诊的肺部疾病患者84例,根据诊断结果分为肺结核组(n=34)、肺癌组(n=25)及非结核性肺炎组(n=25),同时设立健康对照组(n=35)。检测各组外周血T细胞表面表达CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+、CD3^+CD45RA+/CD45RO^+、CD3^+HLA-DR^+、CD8^+HLA-DR^+、CD4^+CD25^+的百分比,采用t检验对结果进行统计分析。结果肺结核组、肺癌组、非结核性肺炎组外周血T淋巴细胞表面标志物CD4^+/CD8^+比值(1.01±0.48、1.17±0.39、1.35±0.55)低于健康对照组(1.48±0.52,t=2.562,t=2.341,t=2.112,P<0.05);肺结核组、肺癌组、非结核性肺炎组表达CD3^+CD45RO^+的T细胞占总淋巴细胞百分比(65.20%±12.63%、56.70%±9.98%、55.90%±9.29%)高于健康对照组(49.60%±11.52%,t=3.422,t=2.647,t=2.084,P<0.05),且肺结核组高于肺癌和非结核性肺炎组(t=2.153,t=3.112,P<0.05);肺结核组、肺癌组表达CD3^+HLA-DR^+的T细胞占总淋巴细胞百分比(19.59%±7.01%、21.7%±7.34%)高于健康对照组(11.40%±5.33%,t=2.383,t=2.533,P<0.05);肺结核组表达CD8^+HLA-DR^+T细胞占总淋巴细胞百分比(11.26%±4.88%)高于健康对照组(7.10%±3.07%,t=2.244,P<0.05);肺结核组和肺癌组表达CD4^+CD25^+的T细胞占总淋巴细胞百分比(10.70%±3.06%、10.40%±2.33%)高于健康对照组(8.20%±2.79%,t=2.647,t=2.662,P<0.05)。结论肺结核、肺癌和肺炎患者外周血T淋巴细胞表面标志表达改变,尤以肺结核患者改变最显著,可能与肺结核独特的发病机制有关。     

慢性粒细胞白血病患者骨髓来源Flk1^＋CD31^-CD34^-间充质干细胞中BCR／ABL融合基因的检测

背景：免疫表型为Flk1^＋CD31^-CD34^-的问充质干细胞体内外实验研究均证实在单细胞水平可以向造血及内皮细胞分化。目的：观察慢性粒细胞白血病患者骨髓BCPdABL融合基冈的表达情况。方法：体外培养扩增慢性粒细胞白血病患者骨髓来源原始间充质干细胞,测定其生长曲线,分析其细胞剧期及免疫表型,使用RT-PCR和FISH的方法检测其BCR/ABL融合基因的表达情况。结果与结论：慢性粒细胞白血病患者骨髓来源的原始间充质干细胞呈成纤维样生长,人部分细胞处于G0／G1期,并儿高表达Flk1,CD13,CD29,CD44,用RT-PCR和FISH的方法能够检测出BCR／ABL融合基因的表达。提出慢性粒细胞白血病的白血病基因转化可能发生在比造血干细胞更高的血液血管千细胞水平上。     

Three‐dimensional tissue culture model of human breast cancer for the evaluation of multidrug resistance

Multidrug resistance (MDR) is one of the major obstacles to improving outcomes of chemotherapy in tumour patients. However, progress has been slow to overcome this phenomenon due to the limitations of current cell/tissue models in recapitulating MDR behaviour of tumour cells in vitro. To address this issue, a more pathologically relevant, three‐dimensional (3D) culture of human breast cancer cells was developed by seeding the adriamycin‐resistant cells MCF‐7R in silk‐collagen scaffolds. The cultures of the parental cell line MCF‐7 served as controls. Distinct growth profiles of MCF‐7R and MCF‐7 cells were observed when they were cultured in the scaffolds in comparison with those in the monolayer culture, including cell proliferation, cellular aggregate formation, and expression of drug resistance‐related genes/proteins. Moreover, the 3D cultures of these cell lines especially the cultures of MCF‐7R exhibited a significantly enhanced drug resistance evidenced by their increased IC₅₀ values to the anticancer drugs and improved drug efflux capability. An altered cell cycle distribution and improved percentage of breast cancer stem cell (BCSC)‐like cells was also found in the present study. This might play an important role in promoting the drug‐resistance production in those 3D cultures. Thus, we established improved 3D cultures of MDR human breast cancer. It would provide a robust tissue model for use to evaluate the efficacy of anticancer drugs, explore mechanisms of MDR, and enrich BCSCs in vitro.     

急性髓细胞性白血病细胞培养上清对CD4+和CD8+T细胞增殖和凋亡的影响

为了研究不同的急性髓细胞性白血病（AML）细胞株培养上清对CD4^＋和CD8^＋T细胞增殖以及凋亡的影响,探讨AML的免疫抑制的形成机制,将3种AML细胞株（HL-60、NB4和U937）培养上清和普通培养液按不同比例混合,用于培养CFSE染色的淋巴细胞.抗CD3抗体和抗CD28抗体刺激3天后,标记7AAD和相应荧光抗体.利用流式细胞术检测不同T细胞亚群CFSE荧光强度和7AAD表达率的变化,分析其增殖和凋亡变化情况.结果表明：3种AML细胞株中有2种（HL-60和NB4）培养上清可显著抑制CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞的增殖,并随浓度增加而增强.同样,HL-60和NB4细胞株培养上清亦可抑制刺激后的CD4^＋T细胞的凋亡,但对刺激后的CD8^＋T细胞的凋亡并无明显影响.相反,HL-60和NB4细胞株培养上清可显著增加增殖的CD8^＋T细胞的凋亡.结论：AML细胞株培养上清液对CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞增殖的抑制以及对增殖的CD8^＋T细胞凋亡的诱导作用,可能是AML患者免疫功能缺陷的机制之一.     

白血病细胞系来源的树突状细胞诱导及其抗肿瘤免疫功能研究

树突状细胞（DC）在抗肿瘤免疫反应中起关键作用，但大多数白血病病病人有DC功能缺陷，在外体扩增DC并增强其抗肿瘤免疫功能及以DC为基础的肿瘤疫苗是对白血病有效的免疫治疗方法，为了探讨由不同的髓性白血病细胞诱生DC的条件及其抗白血病反应，选用HL－60，K562和THP－1细胞与不同的细胞因子组合诱生DC，以光学和电子显微镜术观察形态特征，用流式细胞术和单克隆抗体检测细胞表型，以同种混合淋巴细胞反应观察刺激淋巴细胞增殖，用^51Cr释放法检测诱生细胞的细胞术和单克隆抗体检测细胞表型，以同种混合淋巴细胞反应观察刺激淋巴细胞增殖，用^51Cr释放法检测诱生细胞的细胞毒作用，用ELISA法测定DC培养及DC＋血单个核细胞培养的血清中IL－12及INF－γ的量，结果表明，由K562，HL－60和THP－1细胞诱生的DC具有村突状细胞的形太学特征，细胞表达DC的表面分化抗原，其中GM－CSF＋IL－4＋TNF-γ刺激HL－60－DC和THP－DC和GMCSF＋IL－4＋IL－12刺激的K562－DC中有抗原表达。3种细胞诱生的DC对混合淋巴细胞反应CTL反应有强刺激细胞因子能诱导髓性白细胞产生DC，不同细胞需要不同的细胞因子和培养条件，这些DC表达抗原呈递细胞的表型具有刺激T淋巴细胞增殖和诱导CTL反应以及分泌IL－2和促进T细胞分泌INF－γ的作用。     

干扰素α-2b对HL-60细胞抑增殖与促凋亡的影响

为了研究干扰素α-2b （IFNα-2b）对HL-60细胞增殖与凋亡的影响，采用瑞氏染色观察HL-60细胞的形态变化．吖啶橙／溴化乙锭双染色观察细胞凋亡，通过CDl3测定观察细胞膜抗原表达及成熟分化，MTT实验观察增殖活性。结果显示：加入IFNα-2b 48小时后，HL-60细胞凋亡率升高，增殖活性下降，而且随着IFNα-2b浓度的升高，抑制作用更加明显。CD13表达逐渐下降，细胞形态逐渐向成熟转化。结论：IFNα-2b能促进HL-60细胞凋亡、抑制HL-60细胞增殖和促进分化成熟。     

不同来源骨髓间充质干细胞对CD34~＋细胞增殖的影响

背景：作者前期研究显示,银屑病患者与正常人骨髓间充质干细胞的生物学特性、免疫学反应及抗原提呈功能有明显差异,而与流产胎儿骨髓间充质干细胞无明显差异。目的：观察不同来源骨髓间充质干细胞对正常人骨髓CD34^＋细胞增殖的影响。方法：密度梯度离心法分离银屑病患者和流产胎儿骨髓单一核细胞并培养、传代,传至第2代72h后收集培养上清液,流式细胞仪鉴定骨髓CD34^＋细胞及骨髓间充质干细胞纯度。倒置显微镜下观察培养细胞的生长状态,细胞磁珠分选仪分选出的正常人骨髓CD34^＋细胞加入骨髓间充质干细胞培养上清液培养24h后,四甲基偶氮唑盐比色法检测骨髓CD34^＋细胞的增殖活性。结果与结论：CD34^＋细胞加入银屑病患者和流产胎儿骨髓间充质干细胞培养上清培养24h后,细胞形态无差别。银屑病患者和流产胎儿骨髓间充质干细胞培养上清液对正常人骨髓CD34^＋细胞增殖的影响差异无显著性意义（P〉0.05）。     

外周血中CD4~-CD8~-T细胞的分离及生物学特性检测

目的分离和培养外周血中CD4-CD8-T细胞,检测其生物学活性。方法应用免疫磁珠法分离CD4-CD8-T细胞,流式细胞仪检测CD4-CD8-T细胞纯度,ELISA法检测CD4-CD8-T细胞分泌的IL-4、IFN-γ含量。结果CD4-CD8-T细胞分离后纯度为82.77%,CD4-CD8-T细胞分泌IFN-γ的量为(159.28±38.16)pg/ml,而IL-4含量未能检测出。结论CD4-CD8-T细胞可分泌IFN-γ,基本不分泌IL-4。     

不同培养基中CIK的生物学特性及其对肿瘤细胞的杀伤效果

目的比较健康人和肿瘤患者细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer,CIK）在淋巴细胞无血清培养基及普通无血清培养基中的细胞形态、体外扩增速度、细胞表型及其对肿瘤细胞株的杀伤活性。方法取健康人和肿瘤患者外周血各3例,经密度梯度离心获得外周血单个核细胞（PBMC）,分别在淋巴细胞无血清培养基及普通无血清培养基中,加入基因重组人干扰素γ（rhIFN-γ）、抗人CD3单克隆抗体（OKT3）和基因重组人白细胞介素2（rhIL-2）,体外诱导CIK细胞,比较细胞的形态、扩增速度、细胞表型及杀伤活性。结果在不同培养基中健康人外周血CIK细胞的扩增速度、流式细胞学检测的CD3＋CD8＋和CD3＋CD56＋细胞百分比以及对K562和HL-60肿瘤细胞株的杀伤活性均显著高于肿瘤患者,差异有统计学意义（P〈0.05）;两种来源的PBMC在不同的培养基中经过诱导获得的CIK细胞在增殖速度、流式细胞学分析结果及杀伤活性方面差异亦有统计学意义（P〈0.05）。结论在不同的培养基中肿瘤患者的PBMC经诱导培养获得的CIK细胞可有显著差别,为临床进一步提高CIK细胞的治疗效果提供了实验依据。     

Three‐dimensional spatial configuration of tumour cells confers resistance to chemotherapy independent of drug delivery

Anticancer drug discovery has been hampered by the lack of reliable preclinical models, which routinely use cells grown in two‐dimensional (2D) culture systems. However, many of the characteristics of cells in 2D culture do not translate into the findings in animal xenografts. Three‐dimensional (3D) growth may be responsible for some of these changes, and models using cells grown in 3D may form a more representative step in tumouricidal validation prior to animal implantation and human testing. For the 3D model, we cultured 143.98.2, SaOS2 or U2OS osteosarcoma cells seeded in porous Bombyx mori silk sponges. We conducted real‐time PCR on cells grown in 2D culture and 3D scaffolds for the proliferation markers cyclin B1 and E2F1 and the actin regulator RhoA, and found a significant decrease in expression levels for the 3D tumour models (p = 0.02, < 0.001 and 0.008 for cyclin B1, E2F1 and RhoA for 143.98.2; p = 0.02, 0.002 and 0.02 for cyclin B1, E2F1 and RhoA for U2OS, respectively). In contrast, p21 was upregulated when SaOS2 and U2OS were cultured in the 3D scaffolds (p < 0.001) and there was no increase in DNA quantity during the culture period. We correspondingly observed G₁ arrest when cell cycle analysis was conducted. Cytotoxicity results for cells treated with serial dilutions of doxorubicin and cisplatin showed that cells in 3D scaffolds were less sensitive to drug treatment than in 2D culture, and the difference was more pronounced for cell cycle specific agents. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.     

CD11clowCD45RBhigh调节性树突状细胞的诱导培养及鉴定

背景:新近发现CD11clowCD45RBhigh调节性树突状细胞在参与免疫负向调控机制和临床治疗上有潜在的意义。目前对于健康人骨髓来源的调节性树突状细胞的体外诱导培养及鉴定的研究较少。目的:体外培养正常人骨髓来源的具有CD11clowCD45RBhigh表型的调节性树突状细胞,从细胞形态、免疫表型、吞噬功能及刺激T淋巴细胞增殖能力等方面对其进行鉴定。方法:分离正常人骨髓单个核细胞分别在不同的培养体系中进行体外诱导培养,实验分3组:①调节性树突状细胞组,在含粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素10,转化生长因子β1的1640培养基中培养7d后,用脂多糖刺激24h。②未成熟树突状细胞组,用含粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素4的1640培养基培养8d。③成熟树突状细胞组,用含粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素4的1640培养基培养7d后,予脂多糖刺激24h,使其成熟。光镜和扫描电镜观察树突状细胞的形态,流式细胞仪检测其免疫表型以及吞噬能力,CCK-8法检测其刺激异基因淋巴细胞增殖能力。结果与结论:①人骨髓源单个核细胞在联合应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素10,转化生长因子β1培养8d后获得的细胞具有调节性树突状细胞的典型特征和免疫表型,说明该实验建立的培养调节性树突状细胞的方法是切实可行的。②CD11clowCD45RBhigh调节性树突状细胞这种新亚群具有较强的吞噬能力,刺激T淋巴细胞增殖的能力较弱,为调节性树突状细胞诱导免疫耐受的进一步研究奠定实验基础。