PI3K/AKT/FKHRL1信号通路对CXLCl6诱导的平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨PI3K/AKT/FKHRL1信号转导通路在CXCL16诱导的血管平滑肌增殖中的作用。方法 运用细胞计数法及MTT法检测CXCL16对于平滑肌细胞增殖的影响;免疫组化法观察CXCL16对PI3K/AKT/FKHRL1信号转导通路的作用,同时观察PI3K/AKT抑制剂LY294002对CXCL16诱导的上述变化的影响。结果 CXCL16可明显诱导平滑肌细胞增殖,作用高峰时间在第4天,并且可增加磷酸化AKT及磷酸化FKHRL1的表达。PI3K/AKT阻断剂LY294002可明显抑制CXCL16诱导的平滑肌增殖,同时下调磷酸化AKT及磷酸化FKHRL1的表达。结论 CXCL16可能是通过激活平滑肌细胞的AKT通路,诱导AKT及FKHRL1的磷酸化,从而影响平滑肌细胞的增殖。LY294002可以阻断PI3K/AKT/FKHRL1通路而抑制CXCL16诱导的平滑肌细胞增殖。     

LncRNA FTH1P3通过调控PI3K/AKT信号通路促进胃癌细胞增殖和迁移能力

目的 研究长链非编码RNA铁蛋白重链1伪基因3(LncRNA FTH1P3)在胃癌组织中的表达及临床意义,并探讨LncRNA FTH1P3通过调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路促进胃癌细胞增殖和迁移的作用机制。方法 收集胃癌和癌旁组织标本,采用qRT-PCR检测LncRNA FTH1P3在胃癌组织中的表达,分析LncRNA FTH1P3的表达与胃癌患者病理参数和预后的关系。常规培养胃癌细胞,分为si-NC组和si-LncRNA FTH1P3-1组、si-LncRNA FTH1P3-2组,采用LncRNA FTH1P3 siRNA转染胃癌细胞,qRT-PCR检测各组细胞中LncRNA FTH1P3的表达;CCK8实验检测各组细胞增殖能力;Transwell实验检测各组细胞迁移能力;体内成瘤实验检测各组细胞体内成瘤能力;Western blot检测各组细胞PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、AKT、磷酸化PI3K(pPI3K)、磷酸化AKT(pAKT)的表达。结果 LncRNA FTH1P3在胃癌组织中表达上调(P<0.05)。LncRNA F...     

SH2B1沉默对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT通路的影响

目的研究沉默SH2B1基因表达对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及3-磷酸肌醇激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)通路的影响。方法体外培养胃癌SGC-7901细胞,采用SH2B1 siRNA转染SGC-7901细胞作为研究组,采用国际通用的与所有基因均无同源序列的non-target siRNA转染作为阴性对照组(NC组),以未经处理的胃癌SGC-7901细胞作为空白对照组(BC组),48h后收集各组转染成功细胞,采用荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SH2B1 mRNA表达情况,采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测SH2B1蛋白表达情况;采用细胞计数试剂盒(CKK-8)检测细胞增殖情况,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,同时检测Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)、Caspase-9、PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达情况。结果研究组SGC-7901细胞SH2B1蛋白及mRNA表达量较BC组和NC组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);转染后,siRNA组SGC-7901细胞增殖明显受到抑制、平板克隆形成率较BC组和NC组明显降低,凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与BC和NC组比较,研究组SGC-7901细胞PI3K、p-AKT蛋白、Ki67及PCNA蛋白呈低表达,差异有统计学意义(P<0.05),Caspase-9蛋白呈高表达,AKT蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论沉默SH2B1基因表达可能通过抑制PI3K/ATK信号通路激活,抑制SGC-7901细胞增殖,促进凋亡。     

microRNA-423-5p调节PI3K/AKT通路在大鼠心力衰竭进展中的作用探究

目的探究microRNA-423-5p(miR-423-5p)调节磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)通路在心力衰竭进展中的作用。方法构建大鼠心力衰竭模型,同时用AngⅡ处理(100 n M,24 h)大鼠心肌细胞H9C2构建心力衰竭体外模型。H9C2细胞转染miR-423-5p的抑制剂和模拟剂实现miR-423-5p的敲除和过表达;LY294002用来抑制PI3K/AKT通路的激活。RT-PCR技术检测miR-423-5p的表达; Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、casapse-3/9及PI3K、AKT总蛋白及磷酸化蛋白的表达;流式细胞术检测细胞凋亡。结果 miR-423-5p的表达水平在模型组大鼠心肌组织和AngⅡ处理的H9C2细胞中升高;敲除miR-423-5p可抑制由AngⅡ造成的H9C2细胞凋亡,并促进了p-PI3K及p-AKT的表达,但敲除miR-423-5p的以上作用在PI3K/AKT通路被抑制后全部削弱。结论敲除miR-423-5p可通过激活PI3K/AKT通路抑制心肌细胞凋亡,进而缓解心力衰竭的恶性进展。     

Cripto-1、PI3K、AKT及mTOR在宫颈癌组织中的表达及其意义

[目的]探讨畸胎癌衍生生长因子-1(Cripto-1)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)、雷帕霉素靶体蛋白(mTOR)在宫颈癌组织中的表达及其意义.[方法]选择2016年4月至2017年12月在本院诊治的宫颈癌患者41例及宫颈上皮内瘤变患者37例.收集其宫颈癌组织、癌旁正常宫颈组织及宫颈上皮瘤变组织,采用免疫组化检测Cripto-1、PI3K、AKT及mTOR阳性率,Western blot法检测各组组织中Cripto-1、PI3K、AKT及mTOR蛋白表达水平,分析各蛋白与患者临床特征间的关系及Cripto-1与PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的相关性.[结果]宫颈癌中Cripto-1、PI3K、AKT与mTOR蛋白表达水平均明显高于正常宫颈组织及宫颈上皮瘤变组织(P<0.05);TNM分期、分化程度及淋巴结转移情况不同的宫颈癌患者癌组织中Cripto-1、PI3K、AKT及mTOR蛋白表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌组织中Cripto-1蛋白表达水平与PI3K、AKT和mTOR蛋白呈明显正相关(P<0.05).[结论]宫颈癌组织中Cripto-1、PI3K、AKT及mTOR蛋白呈高表达,其表达与宫颈癌患者TNM分期、组织分化程度及淋巴结转移情况有关,且Cripto-1表达与PI3K、AKT及mTOR蛋白表达均呈正相关.     

AKT是骨髓增殖性肿瘤的治疗靶点

目的:研究AKT抑制剂对骨髓增殖性肿瘤(MPN)的治疗效果及其意义。方法:逆转录病毒感染介导MPL W515L过表达,构建M PN细胞模型。蛋白印迹实验检测信号通路的组成型活化。AKT信号通路抑制剂处理细胞并行细胞计数法,应用克隆形成单位试验检测MPN细胞的增殖。Annexin V染色检测细胞凋亡,Brd U法检测细胞周期。应用动物生存实验分析AKT信号通路抑制剂对MPN小鼠模型存活率的影响。结果:MPL W515L过表达可以显著活化PI3K/AKT、JAK/STAT等信号通路。阻滞上述信号通路能够抑制MPN细胞模型的增殖、促进凋亡,其中以PI3K/AKT抑制剂效果最显著,并使G1ME细胞处于有丝分裂S期的比例减少、处于G_1/G_0期的比例升高,显示出细胞周期阻滞功能。同时,在MPN病人的血液样本中,阻滞PI3K/AKT也能够抑制骨髓祖细胞的克隆形成单位,并显著增加动物模型的存活率。结论:AKT是骨髓增殖性肿瘤的治疗靶点。     

红景天苷通过抑制PI3K/AKT/GSK3β通路对AMI后心衰大鼠ColⅠ和Profilin-1蛋白表达的影响

目的探究红景天苷通过抑制PI3K/AKT/GSK3β通路对急性心肌梗死(AMI)后心衰大鼠胶原蛋白Ⅰ(ColⅠ)、前纤维蛋白-1(Profilin-1)蛋白表达的影响。方法 45只SD大鼠随机分为3组(n=15),假手术组,模型组和红景天苷组。模型组和红景天苷组建立AMI后心力衰竭模型,红景天苷组大鼠使用红景天苷灌胃干预。通过心电图和血清B型脑钠肽(BNP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平评估心衰情况。HE染色和Masson染色检测心肌组织变化和纤维化情况。分别使用Western blot和qRT-PCR检测PI3K/AKT/GSK3β通路和ColⅠ、Profilin-1表达水平。结果模型组大鼠血清BNP、AngⅡ水平显著高于假手术组,并且BNP水平均高于100 pg/ml;红景天苷组的血清BNP、AngⅡ水平显著低于模型组。模型组心肌细胞形状发生改变,排列紊乱,细胞间系变小,出现炎性反应,并出现纤维化状态。红景天组细胞排列异常、炎性反应及纤维化情况均较轻。模型组出现大量的纤维化组织,红景天苷组的纤维化情况显著低于模型组。与假手术组比较,建模后大鼠心肌组织中Col I和Profilin-1的表达水平均显著升高,红景天苷组的Col I和Profilin-1蛋白和mRNA水平均显著低于模型组;建模后大鼠心肌组织中PI3K/AKT/GSK3β通路蛋白磷酸化水平显著升高,红景天组的大鼠心肌组织中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-GSK3β/GSK3β水平显著低于模型组。结论红景天苷通过抑制PI3K/AKT/GSK3β通路中蛋白的磷酸化,抑制AMI后心力衰竭大鼠心肌组织中ColⅠ、Profilin-1蛋白表达,减轻心肌纤维化水平,减轻心力衰竭。     

PI3K/AKT信号通路与Survivin在上皮性卵巢肿瘤中的表达及相关性

目的:探讨PI3K/AKT信号通路中PI3K、AKT及Survivin在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其相关性。方法:应用免疫组织化学SP法及Image-Pro Plus图像分析软件检测PI3K、AKT、Survivin蛋白分别在30例正常卵巢组织、30例上皮性卵巢良性肿瘤、30例上皮性卵巢交界性肿瘤及30例上皮性卵巢癌中的表达情况。结果:PI3K、AKT、Survivin在恶性组中的阳性表达率显著高于其它三组,其表达与患者临床病理特征无关,PI3K与Survivin、PI3K与AKT及AKT与Survivin之间的表达呈正相关。结论:PI3K/AKT信号通路中PI3K、AKT及凋亡抑制蛋白Survivin与上皮性卵巢癌的发生、发展有关;联合检测PI3K、AKT、Survivin有望成为上皮性卵巢癌临床诊断与鉴别诊断的参考指标。     

血小板生成素通过PI3K/AKT通路防止CoCl_2诱导内皮细胞凋亡

目的:研究血小板生成素(TPO)对化学性缺氧模拟剂氯化钴(CoCl_2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的作用及其机制。方法:实验分为4组,体外培养的未经处理的HUVEC为对照组,CoCl_2与HUVEC共培养的为CoCl_2组,在加入CoCl_2前用TPO预处理HUVEC为TPO+CoCl_2组,TPO单独处理HUVEC为TPO组。使用CCK-8法检测各组细胞的细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率、凋亡蛋白酶Caspase-3的表达以及线粒体膜电位的变化。Western blot检测TPO对AKT通路磷酸化水平表达的影响。结果:CoCl_2可以明显抑制HUVEC的生长,细胞存活率随着CoCl_2的浓度的升高逐渐下降(r=-0.997);与对照组相比较,CoCl_2组的细胞凋亡率明显升高(P0.001),而TPO+CoCl_2组的细胞凋亡率较前者明显下降(P0.001),提示TPO对HUVEC有保护作用。TPO还能减少细胞凋亡蛋白酶Caspase-3的表达和抑制细胞线粒体膜电位的降低,以及刺激HUVEC PI3K/AKT通路的活化。结论:TPO具有防止化学性缺氧所致的细胞凋亡作用,其机制可能是通过活化PI3K/AKT通路,从而减少细胞凋亡蛋白酶Caspase-3的活化表达和稳定线粒体膜电位来发挥细胞保护作用。     

MaFGF对慢性脑缺血再灌注损伤小鼠神经功能保护的机制研究

目的探讨改构型酸性成纤维细胞生长因子(MaFGF)对慢性脑缺血再灌注损伤小鼠神经保护的可能机制。方法将24只雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为Sham组、BCAO组和BCAO+MaFGF组,每组各8只。建模完成后,BCAO+MaFGF组鼻内给药MaFGF20μg/(kg.d),其余2组给予相同体积的生理盐水。采用mNSS评估小鼠神经功能损害程度,通过Morris水迷宫试验评估小鼠的学习记忆能力,Nissl染色法观察小鼠海马CA1区神经元细胞的形态结构学改变,Western biot法检测小鼠海马区p-PI3K、p-AKT、GRP170、CHOP、caspase-12蛋白表达水平,免疫荧光染色法观察小鼠海马CA1区神经元p-AKT、GRP170的表达情况。结果与Sham组比较,BCAO组小鼠mNSS评分明显升高(P<0.05),学习记忆能力下降(P<0.05),BCAO组小鼠海马CA1区神经元细胞结构破坏明显,坏死细胞数目明显增多(P<0.05),其海马区CHOP和caspase-12明显升高(P<0.05),而p-PI3K、p-AKT、GRPI70均未见明显改变(P>0.05);与:BCAO组比较,BCAO+MaFGF组小鼠mNSS评分明显降低(P<0.05),学习记忆能力上升(P<0.05),BCAO组小鼠海马CA1区神经元细胞结构较为完整,排列整齐,坏死细胞数目明显减少(P<0.05),其海马区CHOP和caspase-12表达明显降低(P<0.05),而p-PI3K、p-AKT、GRP170表达明显升高(P<0.05)。结论MaFGF能够改善慢性脑缺血再灌注损伤小鼠的神经功能,其可能机制是通过激活PI3K/AKT信号通路,减轻内质网应激,减少细胞凋亡而起神经保护作用。     

夏枯草提取物对缺氧/复氧诱导心肌细胞氧化应激损伤保护作用及抗凋亡的机制

目的:观察不同浓度的夏枯草提取物(Prunellae Spica extract,PSE)对心肌细胞H9c2缺氧/复氧(hypoxia-reoxygenation,H/R)损伤的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法:体外培养心肌细胞H9c2,构建心肌细胞H/R模型。实验分为对照组、H/R组、H/R+PSE 20μg/mL组、H/R+PSE 40μg/mL组和H/R+PSE 80μg/mL组。采用CCK-8法检测H9c2心肌细胞存活率。检测天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、磷酸肌酸激酶(creatine phosphate kinase,CPK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的变化。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白和PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达。结果:与对照组相比,H/R组H9c2细胞的存活率显著降低(P<0.05),凋亡率显著增加,AST、CPK、LDH、MDA和ROS水平显著增加,SOD水平显著降低(均P<0.05)。与H/R组相比,PSE能够显著促进细胞存活,抑制细胞凋亡,降低AST、CPK、LDH、MDA和ROS水平,提高SOD水平(均P<0.05),并呈浓度依赖性。蛋白质印迹法检测显示:与对照组相比,H/R组H9c2细胞Bax和cleavedcaspase-3蛋白的表达显著增加(均P<0.05),Bcl-2、p-PI3K和p-AKT蛋白的表达显著降低(均P<0.05);与H/R组相比,PSE能够显著抑制Bax和cleaved-caspase-3蛋白的表达(均P<0.05),促进Bcl-2、p-PI3K和p-AKT蛋白的表达(均P<0.05)。结论:PSE对H9c2心肌细胞的H/R损伤具有保护作用,其机制可能与激活PI3K/AKT信号通路有关。     

创伤性脑损伤诱导大鼠脑内巨噬细胞亚群分化与脑外伤后神经元过度自噬和凋亡的关系研究

目的 探讨创伤性脑损伤后大鼠脑内巨噬细胞分化的亚群种类和创伤后神经元过度自噬和凋亡的关系.方法 选择45只雄性SD大鼠建立创伤性脑损伤(TBI)模型,然后根据随机数字表法分为Sham 组(假手术大鼠,右心室注射5 μL氯化钠溶液)、TBI组(TBI模型大鼠,右心室注射5 μL氯化钠溶液)和3 - MA组(TBI模型大鼠...     

Potentiation of paclitaxel activity by the HSP90 inhibitor 17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin in human ovarian carcinoma cell lines with high levels of activated AKT

Activation of the phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K)/AKT survival pathway is a mechanism of cytotoxic drug resistance in ovarian cancer, and inhibitors of this pathway can sensitize to cytotoxic drugs. The HSP90 inhibitor 17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin (17-AAG) depletes some proteins involved in PI3K/AKT signaling, e.g., ERBB2, epidermal growth factor receptor (EGFR), and phosphorylated AKT (p-AKT). 17-AAG and paclitaxel were combined (at a fixed 1:1 ratio of their IC(50)) in four ovarian cancer cell lines that differ in expression of p-AKT, EGFR, and ERBB2. The EGFR-overexpressing A431 and KB epidermoid cell lines were also included. Combination indices (CI) were calculated using the median-effect equation and interpreted in the context of 17-AAG-mediated inhibition of PI3K signaling. Synergy was observed in IGROV-1- and ERBB2-overexpressing SKOV-3 ovarian cancer cells that express a high level of constitutively activated p-AKT [CI at fraction unaffected (fu)(0.5) = 0.50 and 0.53, respectively]. Slight synergy was observed in A431 cells (moderate p-AKT/overexpressed EGFR; CI at fu(0.5) = 0.76) and antagonism in CH1 (moderate p-AKT), HX62 cells (low p-AKT), and KB cells (low p-AKT/overexpressed EGFR; CI at fu(50) = 3.0, 3.5, and 2.0, respectively). The observed effects correlated with changes in the rate of apoptosis induction. 17-AAG induced a decrease in HSP90 client proteins (e.g., C-RAF, ERBB2, and p-AKT) or in downstream markers of their activity (e.g., phosphorylated extracellular signal-regulated kinase or p-AKT) in SKOV-3, IGROV-1, and CH1 cells at IC(50) concentrations. A non-growth-inhibitory concentration (6 nmol/L) reduced the phosphorylation of AKT (but not extracellular signal-regulated kinase) and sensitized SKOV-3 cells to paclitaxel. In conclusion, 17-AAG may sensitize a subset of ovarian cancer to paclitaxel, particularly those tumors in which resistance is driven by ERBB2 and/or p-AKT.     

基质细胞衍生因子-1受体CXCR7在急性白血病细胞的表达及意义

目的研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)受体CXCR7在急性白血病(AL)细胞株和AL患者骨髓细胞中的表达及意义。方法使用RPMI-1640培养基培养人单核细胞白血病细胞株(THP-1细胞)、人原髓细胞白血病细胞株(HL-60细胞)和人T淋巴细胞白血病细胞株(Jurkat细胞),分离急性髓系白血病(AML)患者和急性淋巴细胞白血病(ALL)患者和正常人骨髓单个核细胞,抽取新鲜骨髓2 ml/(人)份,分为ALL组、AML组和正常组,用流式细胞仪和Western blot法观察各组CXCR7蛋白的表达情况。结果 1)CXCR7表达水平:THP-1细胞为(69.05±3.04)%,HL-60细胞为(20.17±1.53)%,Jurkat细胞为(3.41±2.46)%,THP-1细胞表达高于HL-60细胞(P0.01),而HL-60细胞表达又明显高于Jurkat细胞(P0.01)。2)CXCR7表达水平:AML组为(19.03±3.84)%,ALL组为(3.34±1.71)%,正常组为(2.40±1.27)%,AML组与正常组、ALL组相比,CXCR7表达水平明显增加(P0.01),ALL组与正常组对比,差异无统计学意义(P0.05)。结论 AML患者和HL-60细胞的CXCR7表达均明显增高,提示其在AML的发生、发展中可能具有有重要作用,并可能成为1种新的血液肿瘤诊断及治疗的思路和靶点。     

急性髓系白血病82例患者VEGF与MMP-2、MMP-9的相关性研究

为了探讨急性髓系白血病（AML）患者中血管内皮生长因子（VEGF）与基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的相互关系及二者在AML中的意义，采用半定量RT—PCR技术检测AML患者与正常人骨髓单个核细胞（MNC）MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA、VEOF mRNA的表达，用明胶酶谱的方法测定原代MNC和HL-60细胞分泌的MMP-2、MMP-9的活性。应用ELISA方法检测AML患者血清中VEGF蛋白的水平，分析VEGF和MMP-2、MMP-9 mRNA之间的关系。结果显示：AML患者MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA与VEGF mRNA的表达和VEGF蛋白水平呈正相关，缓解期患者和正常对照无相关性；VEGF阳性组发生髓外浸润率明显高于阴性组；VEOF上调HL-60细胞中bcl-2的表达：结论：AML患者中MMP-2，MMP-9的表达和VEGF具有正相关性，VEGF可以上调部分AML患者中MMP-2，MMP-9的表达，VEOF可能与MMP-2，MMP-9共同参与了白血病髓外浸润的发生。     

分泌型Klotho蛋白抑制肾间质纤维化的机制研究

目的 研究分泌型Klotho蛋白抑制肾间质纤维化的机制,为治疗慢性肾脏病提供理论基础和新思路。方法 通过单侧输尿管梗阻（UUO）诱导C57BL/6小鼠肾纤维化,并分5组处理：假手术[Sham+磷酸盐缓冲液（PBS）]组、模型（UUO+PBS）组、UUO+Klotho组、UUO+Klotho+胰岛素组、UUO+Klotho+胰岛素样生长因子-1（IGF-1）组。检测小鼠左肾组织活性氧水平,并用HE及Masson染色评估肾脏病理改变及纤维化程度。实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法以及免疫荧光化学检测肾组织中超氧化物歧化酶2 （SOD2）、纤连蛋白和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达水平,此外用蛋白免疫印迹法检测磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、AKT、磷酸化磷脂酰肌醇（-3）激酶（p-PI3K）、PI3K、胰岛素受体底物-1（IRS-1）蛋白表达水平。结果 成功建立了UUO小鼠模型。与UUO+PBS组比较,UUO+Klotho组小鼠肾组织的纤维化缓解（P <0.001）,且肾纤维化标志物纤连蛋白和α-SMA mRNA及蛋白的表达降低（P均 < 0.001）,保护因子SOD2 mRNA及蛋白表达升高（P均 < 0.001）。胰岛素及IGF-1可激活肾组织IRS-1/PI3K/AKT通路并破坏Klotho对肾脏的保护作用（P均 < 0.001）。结论 Klotho通过抑制胰岛素下游IRS-1/PI3K/AKT信号通路从而缓解肾脏的纤维化。     

二烯丙基二硫对HL-60细胞血管内皮生长因子表达及分泌的影响

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)对白血病细胞株 HL-60的生长抑制作用和对 HL-60细胞血管内皮生长因子(VFGF)mRNA 的表达及 VEGF 蛋白分泌的影响。方法采用 MTT 法观察DADS 对体外培养的 HL-60细胞的生长抑制;应用 ELISA 法检测药物作用前后 HL-60细胞培养上清液中 VEGF 蛋白的含量;半定量 RT-PCR 法检测药物作用前后 HL-60细胞 VEGF mRNA 表达水平。结果DADS 对 HL-60细胞具有明显的生长抑制效应,0.625,1.250和2.500μg/ml DADS 作用 HL-60细胞24 h 的细胞生长抑制率分别为(8.19±3.34)%,(16.79±2.07)%,(21.30±2.72)%;作用48 h 的细胞生长抑制率分别为(11.93±3.93)%.(22.81±2.31)%,(30.74±2.03)%;作用72 h 的细胞生长抑制率分别为(16.68±2.37)%,(28.54±3.26)%,(36.59±2.37)%,其对 HL-60细胞的生长抑制率与药物浓度有明显依赖关系(r>0.9,P<0.01),各实验组随作用时间增加抑制率明显增加(r>0.7,P<0.01);0.625,1.250,2.500 μg/ml DADS 作用 HL-60细胞48 h 和72 h 与空白对照相比均能下调HL-60细胞 VEGF mRNA 的表达及 VEGF 蛋白的分泌(P<0.01),三个不同浓度 DADS 组间差异均有统计学意义(P<0.01),其下调 HL-60细胞 VEGF mRNA 的表达及 VEGF 蛋白的分泌效果与药物浓度呈相关性(r>0.9,P<0.01)。结论 DADS 能明显抑制 HL-60细胞的增殖;DADS 可能通过抑制 HL-60细胞 VEGF mRNA 的表达及 VEGF 蛋白分泌发挥抗白血病的效应。     

木香烃内酯通过PI3K/AKT通路诱导K562/ADR细胞凋亡

目的:探讨木香烃内酯对慢性粒细胞性白血病细胞耐药细胞株K562/ADR细胞增殖及凋亡的影响及其机制.方法:运用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测相关蛋白的表达.结果:选用木香烃内醋0.01、0.1、0.25、0.5、1、2.5、5、10、25、50和100 μmol/L作用K...