留兰香油对博莱霉素致小鼠肺纤维化的干预作用及α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

 目的 观察在不同时期给予留兰香油对博莱霉素引起的小鼠肺纤维化病理改变及肺组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响。方法 ICR小鼠一次性气道内滴入博莱霉素建立肺纤维化模型,实验动物分为留兰香油治疗组和预防组,分别于造模后第8天和第1天开始给予留兰香油灌胃3周和4周。每7 d记录小鼠体重、死亡率;肺组织切片行HE、Masson染色观察气道炎症及纤维化程度,并对病理图片进行形态学测量分析;测定肺组织中羟脯氨酸（hydroxyproline）、TNF-α、TGF-β1、MMP-9及TIMP-1含量;测定肺组织中α-SMA表达水平。结果 留兰香油14、42、140 mg·kg^-1预防组能明显减少组织纤维化区域,部分肺泡结构得以保留,肺泡间隔胶原沉积减少;留兰香油14和140 mg·kg^-1预防组能够明显降低肺组织中羟脯氨酸、TGF-β1和MMP-9含量;留兰香油14、42、140 mg·kg^-1预防组能够明显降低肺内α-SMA表达水平。留兰香油治疗组除14 mg·kg^-1组明显减弱α-SMA表达外对其余各项指标均没有明显作用。结论 早期给予留兰香油对博莱霉素引起的小鼠肺纤维化有减轻作用,其机制可能是通过降低肺组织中MMP-9及TGF-β1的含量,减少基底膜断裂,减少成纤维细胞增殖和转化,减少肌成纤维细胞α-SMA表达及细胞外基质的合成,对肺纤维化初期起到干预作用。
     

加味小苦辛汤对博来霉素A5致肺纤维化小鼠肺组织形态及转化生长因子β1的影响

目的 探讨加味小苦辛汤对博来霉素A5(BLM A5)所致肺纤维化动小鼠组织形态及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法 小鼠腹腔注射BLM A5 造模.随机分为正常对照组、模型组、西药组及加味小苦辛汤高、中、低剂量组(中药高、中、低剂量组).各药物组于造模次日起每日连续给予相应药物,正常对照组与模型组给予羧甲基纤维素灌胃,于给药第14、28 日分批随机处死小鼠,观察各组病理切片肺组织形态学改变,免疫组化方法观察肺组织TGF-β1 阳性细胞积分光密度和平均光密度.结果 模型组较正常对照组细胞积分光密度、平均光密度均显著增加(P ＜0.01);中药高、中、低剂量组均较模型组显著降低(P ＜0.01);中药高剂量组较西药组第14 日积分光密度差异无统计学意义(P ＞0.05),第28 日较西药组降低(P ＜0.05),而平均光密度2 组差异无统计学意义(P ＞0.05),且2 组较正常对照组增加亦不显著(P ＞0.05).结论 加味小苦辛汤可显著降低肺纤维化小鼠的肺泡炎程度与肺纤维化程度,降低肺组织细胞TGF-β1 的表达.     

丹参对实验性肺纤维化小鼠病理变化和转化生长因子-β表达的影响

目的：探讨丹参水煎液对实验性肺纤维化形成的影响。方法：气管内注射博莱霉素复制小鼠肺纤维化模型。以肺指数、肺组织病理学变化及形态学定量测量，并用免疫组织化学方法测定肺组织中TGF-β的表达，以观察丹参水煎液对肺纤维化形成的影响。结果：丹参水煎液能抑制实验性肺纤维化小鼠的肺指数及肺组织中TGF-β的异常升高。结论：丹参水煎液能缓解博莱霉素所致的肺纤维化。     

芪术合剂对肺纤维化大鼠TGF-β1表达及肺组织形态的影响

目的:观察芪术合剂对博莱霉素致大鼠肺间质纤维化的干预作用及其机制。方法:将60只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、芪术合剂组和强的松组。经气管滴入博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型,并分组予以治疗,于治疗3、7、21天分批处死各组大鼠,每次每组6只。观察肺组织TGF-β1的表达和病理变化。结果:模型组在不同时段TGF-β1表达较正常对照组明显增高,芪术合剂组与同期模型组比较明显降低,芪术合剂组和强的松组经干预后肺泡炎和肺纤维化有所减轻。结论:中药芪术合剂具有显著抑制博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用,抑制TGF-β1的表达是其可能的机制之一。     

凉血活血法对肺纤维化小鼠羟脯氨酸和转化生长因子-β1含量的影响

目的研究凉血活血法防治肺纤维化的作用,并探讨其作用机制。方法将雄性ICR小鼠随机分为4组：阴性对照组、肺纤维化模型组、凉血活血法组、强的松阳性对照组。经鼻滴入博莱霉素建立小鼠肺纤维化模型,造模8h开始常规灌胃给药。应用凉血活血法（犀角地黄汤）防治28d后进行取材及实验指标检测：用酶联免疫吸附法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中转化生长因子-β1（TGF—β1）含量变化,用样本碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸（HYP）的含量。结果肺组织病理形态学观察发现模型组小鼠肺泡炎及纤维化程度明显高于阴性对照组;与模型组比较,凉血活血法组肺组织中HYP含量显著降低（P〈0．01）,BALF中TGF-β1含量显著降低（P〈0．01）。结论凉血活血法能明显减轻博莱霉素所致的小鼠肺纤维化程度,降低肺组织中HYP含量。其机制可能是通过抑制TGF—β1蛋白表达,减少胶原蛋白的产生,使肺纤维化病变减轻。     

姜黄素对肺纤维化大鼠肺组织胶原沉积及转化生长因子β1表达的影响

目的观察姜黄素对博莱霉素诱导肺纤维化大鼠胶原沉积、转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法SD雄性大鼠144只,分为假手术组、模型组、醋酸泼尼松组、姜黄素高剂量组、姜黄素中剂量组、姜黄素低剂量组,每组24只.除假手术组外其余各组大鼠气管内1次性滴注盐酸博莱霉素,假手术组大鼠气管内1次性滴注等体积的生理盐水.造模后第1天开始给药,持续到处死动物的前1天.姜黄素高、中、低剂量组分别为200、100、50 mg·kg-1,醋酸泼尼松组每天为0.56 mg·kg-1,假手术组,模型组分别灌服等体积的生理盐水.各组动物于7、14、28天随机处死8只,取肺组织进行HE和Mallory染色,同时进行免疫组化显色,结合图像分析来检测各组肺组织中转化生长因子的表达水平.结果模型组支气管黏膜下、血管壁及周围、肺泡壁、肺间质均有胶原大量沉积;姜黄素治疗组胶原沉积明显轻于模型组;假手术组最轻,胶原沉积不明显.免疫组化发现模型组TGF-β1表达最强,姜黄素治疗组较弱,假手术组微弱表达.结论姜黄素可抑制肺纤维化大鼠肺组织的胶原沉积,在延缓肺纤维化形成中起重要作用,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1的表达来实现.     

养阴清肺方含药血清对60Co照射后肺成纤维细胞转化生长因子β1及α-肌动蛋白表达的影响

目的 探讨养阴清肺方治疗放射性肺纤维化的可能作用机制. 方法 将20只大鼠随机分为养阴清肺组[予养阴清肺方浓缩液(浓度0.97 g/ml)1 ml/100 g]、激素组[予醋酸泼尼松龙片水溶液(浓度0.125g/ml)1 ml/100g]、养阴清肺加激素组(养阴清肺方浓缩液、醋酸泼尼松龙片水溶液各0.5ml/100g)、模型组和未照射对照组(均给予生理盐水1 ml/100 g),每天早晚各灌胃1次,连续3天,第4天早上给药1h后经腹主动脉取血制备含药血清.取人胚肺成纤维细胞接种于6孔板内,分为未照射对照组、模型组、养阴清肺组、激素组、养阴清肺加激素组,除未照射对照组外其余各组用钴60射线照射,剂量为8Gy.照射后将各组上清液吸弃,并分别换上相应的含药血清培养液,于24、48、72h检测转化生长因子β1(TGF-β1)含量.细胞培养同前,于照射后24h检测肺成纤维细胞α-肌动蛋白(α-SMA)的表达. 结果 模型组、养阴清肺组、激素组、养阴清肺加激素组在各个时间点比较TGF-β1表达水平均较未照射对照组显著升高(P＜0.05).在24h时激素组、养阴清肺加激素组TGF-β1表达水平较模型组降低,在48h时养阴清肺组、养阴清肺加激素组TGF-β1表达水平较模型组降低,72 h时养阴清肺组、激素组TGF-β1表达水平较模型组降低(P＜0.05).与模型组比较,激素组、养阴清肺组、养阴清肺加激素组α-SMA表达均明显降低(P＜0.05);并且养阴清肺加激素组α-SMA表达明显低于养阴清肺组和激素组(P＜0.05). 结论 养阴清肺方能抑制照射后肺成纤维细胞分泌TGF-β1和α-SMA表达,可能是其治疗放射性肺纤维化的作用机制之一.     

柴胡对肝硬化大鼠α-肌动蛋白及转化生长因子β1表达的影响

目的:本实验通过观察柴胡不同剂量对肝硬化形成过程中肝组织转化生长因子β1(TGF-β1):α-肌动蛋白(α-SMA)的表达影响效果,探讨柴胡治疗肝硬化的药效学差异,为临床用药提供动物实验依据。方法:以复合造膜法复制实验性肝硬化大鼠动物模型共8周。成膜大鼠随机分为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。实验结束时,做肝组织HE染色、Masson染色。检测肝组织免疫组织化学TGF-β1、α-SMA的表达。结论:柴胡可有效抑制肝纤维化,下调细胞因子α-SMA、TGF-β1的表达,其中高剂量效果显著,并可以改善肝硬化以及纤维组织增生、炎性细胞浸润程度。     

红花注射液对肺纤维化小鼠TGF-β1/Smad3信号通路的影响

目的:探讨红花注射液对肺纤维化小鼠的影响及其机制是否与转化生长因子(TGF)-β1/Smad3信号通路有关.方法:60只雌性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组(3mg·kg-1·d-1,地米组)及红花注射液组(50mg·kg-1·d-1,红花组),每组15只.除空白组外,其余3组经鼻腔滴注博来霉素建立肺纤维化...     

升陷汤对肺纤维化大鼠肺组织Q-平滑肌肌动蛋白、肺表面活性蛋白D及TGF-β1 /Smads通路蛋白表达的影响

目的 观察升陷汤对肺纤维化大鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、肺表面活性蛋白D(SP-D)及TGF-β1/Smads通路蛋白表达的影响,探讨其作用机制.方法 SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为正常组、模型组、吡非尼酮组和升陷汤高、中、低剂量组.除正常组外,其余大鼠采用气管内注射硫酸博莱霉素建立肺纤维化模型,造...     

红芪黄酮对肺纤维化模型大鼠肺组织转化生长因子-β1表达及超微结构的影响

目的观察红芪黄酮对肺间质纤维化模型大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达及肺组织超微结构的影响,并探讨其作用机理。方法 Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、强的松组及红芪黄酮高、中、低剂量组,采用气管内滴注博莱霉素方法建立肺纤维化模型,造模后第2日起,各给药组分别给予相应剂量药物,连续灌胃治疗,于第7、14、28日采用免疫组化法检测各组大鼠肺组织TGF-β1的含量表达,透射电镜观察第28日各组大鼠肺组织超微结构变化。结果空白组少数细支气管黏膜上皮细胞胞浆内可见少量TGF-β1蛋白表达;第7、14、28日模型组大鼠支气管、细支气管黏膜上皮细胞TGF-β1表达与空白组比较明显增强(P0.05),第7、14、28日红芪黄酮高、中剂量组及强的松组与模型组比较,TGF-β1表达均显著减弱(P0.05,P0.01)。第28日电镜观察模型组大鼠肺泡纵隔内胶原纤维明显增多,肺泡Ⅱ型细胞胞质线粒体肿胀,线粒体嵴断裂或消失,板层体明显减少;各给药组胶原纤维明显减少,均可改善肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构的异常改变。结论红芪黄酮可明显改善肺纤维化大鼠的病理损伤、减少细胞外基质沉积,可能与抑制TGF-β1表达有关。     

金匮肾气丸对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1表达的影响

目的探讨金匮肾气丸防治肺纤维化作用机理。方法用平阳霉素复制肺纤维化模型大鼠后,用药组每天灌胃金匮肾气丸,28d后处死,观察、比较各组大鼠肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。结果模型组大鼠肺组织中TGF-β1表达均明显高于正常对照组及用药组(P<0.05)。结论金匮肾气丸能明显抑制肺组织中TGF-β1过度表达。     

葛根素对百草枯诱导大鼠肺纤维化转化生长因子β1的影响

[目的]探讨葛根素（puerarin）对百草枯（paraquat,PQ）致肺纤维化的治疗作用,及其对大鼠肺组织转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF—β1）的影响。[方法]复制大鼠百草枯致肺纤维化模型,光镜观察组织学改变,测定血浆中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）和肺组织均浆中羟脯氨酸（HYP）和转化生长因子β1（TGF—β1）含量。[结果]PQ染毒后血浆中超氧化物歧化酶（SOD）降低,血浆丙二醛（MDA）和肺组织均浆中HYP和TGF-β1含量升高,与正常对照组相比,相应观察时间点差异有统计学意义（P〈0．01）。葛根素能降低PQ致肺纤维化大鼠肺组织中过高的HYP和TGF—β1水平和血浆中MDA的含量,提高大鼠体内的SOD的活性。病理组织学检查亦表明,葛根素明显改善PQ致大鼠肺纤维化程度。[结论]葛根素对百草枯致肺纤维化具有一定的治疗作用,其作用机制可能与降低大鼠肺组织TGF—β1水平有关。     

滋阴益气活血方对免疫性卵巢早衰小鼠转化生长因子-β1及PI3K相关蛋白表达的影响

目的观察滋阴益气活血方对免疫性卵巢早衰小鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)、PI3K、AKT1蛋白表达的影响,探讨其改善卵巢功能的作用机制。方法取Balb/C雌性小鼠60只,随机选取10只为空白组,其余50只用于造模。用透明带3作抗原,皮下多点注射制作免疫性卵巢早衰动物模型。成模后实验小鼠随机分为模型组、阳性对照组和滋阴益气活血方低、中、高剂量组,各给药组给予相应药物,连续给药30 d。HE染色观察小鼠卵巢组织病理形态,免疫组化检测小鼠卵巢组织TGF-β1、PI3K、AKT1蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠卵巢组织TGF-β1、PI3K、AKT1蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组小鼠卵巢内成熟卵泡数量均明显增多,闭锁卵泡数量相对减少,滋阴益气活血方中、高剂量组和阳性对照组小鼠卵巢组织TGF-β1、PI3K、AKT1蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论滋阴益气活血方可改善模型小鼠卵巢功能,其机制可能与升高TGF-β1、PI3K、AKT1蛋白的表达相关。     

葛根素对酒精性肝损伤大鼠肝组织TGF-β_1和α-SMA表达的影响

目的：研究葛根素对酒精性肝损伤大鼠肝组织转化生长因子-β1（TGF-β1）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的调控作用，探讨葛根素对酒精性肝损伤的防治机制。方法：将75只SD大鼠随机分成5组：正常组10只、模型组20只（乙醇等混合液，2次／d）、阳性对照组15只（乙醇等混合液＋复方鳖甲软肝片，1g&#183;kg^-1&#183;d^-1。）、葛根素大剂量组15只（乙醇等混合液＋葛根素片1．5g&#183;kg^-1&#183;d^-1）、葛根素小剂量组15只（乙醇等混合液＋葛根素片0．75g&#183;kg^-1&#183;d^-1），8周后抽取股静脉血并处死，观察肝脏组织病理变化，检测肝组织TGF-β1和α-SMA的表达。结果：模型组大鼠肝组织病理变化和肝纤维化积分与其他各组相比都有显著性改变（P〈0．05）；葛根素大、小剂量组肝组织TGF--β1和α-SMA表达水平明显低于模型组（P〈0．01）；且葛根素大剂量组α-SMA水平明显低于对照组（P〈0．05），小剂量组与模型组相比无显著性差异。结论：酒精性肝损伤大鼠肝脏组织TGF-β1和α-SMA有不同程度的升高，葛根素对其有调控作用，葛根素对酒精性肝损伤有保护作用。     

扁蒴藤素抑制NCI-H1299细胞迁移侵袭的作用与机制研究

  目的：探讨扁蒴藤素对非小细胞肺癌NCI-H1299细胞迁移侵袭的抑制作用及其分子机制。  方法：采用不同浓度(0～80 μmol/L)的扁蒴藤素处理NCI-H1299细胞,CCK-8法检测细胞增殖的情况,确定扁蒴藤素对NCI-H1299细胞的非毒剂量,并以此作为后续的药效与分子机制研究剂量。划痕实验评价扁蒴藤素对NCI-H1299细胞横向迁移能力的影响;transwell迁移与侵袭实验评价扁蒴藤素对NCI-H1299细胞纵向迁移能力与侵袭能力的影响;免疫印迹法与荧光定量PCR实验分别测定上皮-间充质相关标记物蛋白与mRNA的表达水平。  结果：扁蒴藤素浓度<2.5 μmol/L时,对NCI-H1299细胞无明显的细胞毒性。与空白对照组比较,非毒剂量的扁蒴藤素(0.5 μmol/L、1.0 μmol/L和2.0 μmol/L)可明显抑制NCI-H1299细胞的横向迁移以及纵向的迁移与侵袭能力(P<0.01)。扁蒴藤素处理后,上皮细胞标记物E-cadherin与ZO1的表达水平明显升高,间充质细胞标记物N-caherin与Vimentin的表达水平明显降低(P<0.01)。  结论：扁蒴藤素具有抑制NCI-H1299细胞迁移与侵袭的能力,且这一作用可能与其调控NCI-H1299细胞的上皮-间充质转化相关。     

肺痹汤对肺纤维化大鼠肺组织中p38分裂原激活蛋白酶及转化生长因子β1的影响

目的 探讨肺痹汤防治肺纤维化作用及其机理。方法 SD大鼠随机分为假手术组，模型对照组，肺痹汤高、中、低剂量组。西药对照组，每组10只。用博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型后，肺痹汤高、中、低剂量组每天灌服肺痹汤，西药对照组灌服醋酸强的松，28天后处死大鼠，比较各组大鼠肺组织中p38分裂原激活蛋白激酶（p38 MAPK）以及转化生长因子（TGF—β1）的表达。结果 模型对照组大鼠肺组织中p38 MAPK及TGF—β1表达均明显高于假手术组及各给药组（P〈0．05），肺痹汤能明显减少大鼠肺组织中p38 MAPK以及TGF—β1表达，与模型对照组比较差异具有显著性意义（P〈0．05）。结论 肺痹汤能明显减少博莱霉素所致的大鼠肺组织中p38 MAPK及TGF—β1表达，这可能是其防治肺纤维化的作用机理。．     

芪术合剂对博莱霉素致大鼠肺纤维化白介素-8和转化生长因子-β1的影响

目的探讨中药芪术合剂对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响及其作用机制。方法将60只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、芪术合剂组和强的松组,经气管滴入博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型,并分组予以治疗,于治疗后第3、7、21日分批处死大鼠,每组每次6只;用免疫组化法观察肺组织转化生长因子-β1的表达,并测定支气管肺泡灌洗液中中性粒细胞和白介素-8的水平。结果在第3、7、21日模型组IL-8和TGF-β1表达均较正常对照组明显增高,芪术合剂组与同期模型组比较明显降低,芪术合剂第3日组高于同期强的松组,而第7、21日则明显低于强的松组。结论早期应用芪术合剂可抑制IL-8和TGF-β1的产生,从而预防和阻止实验性大鼠肺纤维化的形成。     

三七总皂苷对肝纤维化小鼠血清中转化生长因子-β1及白介素-1的影响

目的观察三七总皂苷对肝纤维化小鼠血清中TGF-β1及IL-1的影响,探讨三七总皂苷抗肝纤维化可能的免疫学机理。方法用CC l4复制小鼠中毒性肝纤维化模型,同时给与三七总皂苷治疗,酶联免疫吸附实验(ELISA法)测定血清中TGF-β1及IL-1的水平,并行肝脏病理组织切片检测。结果三七总皂苷能显著降低肝纤维化小鼠血清中TGF-βl及IL-1的水平,减轻肝纤维化程度。结论三七总皂苷具有抗肝纤维化作用,其机理可能与降低血清中TGβ-p1及IL-1的水平有关。     

虎杖对肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β1表达的影响

目的：观察博莱霉素致肺纤维化大鼠中转化生长因子（TGF-β1）的表达及虎杖对其影响。方法：SD大鼠120只,随机分成正常对照组、模型组、虎杖预防组各30只,7d治疗组20只和28d治疗组10只。除正常对照组给予生理盐水外,其余各组均予气管内注射博来霉素诱导肺纤维化。虎杖预防组、7d治疗组和28d治疗组胃饲受试药物4g.kg-1.d-1,其余两组则予生理盐水灌胃。用RT-PCR和免疫组化观察各组大鼠肺组织TGF-β1mRNA和TGF-β1蛋白的表达。结果：与模型组比较,虎杖预防组和7d治疗组羟脯氨酸含量下降明显（P〈0.05或P〈0.01）,TGF-β1mRNA和TGF-β1蛋白表达较模型组减弱（P〈0.05或P〈0.01）。结论：虎杖抑制肺组织中TGF-β1的表达,可能是虎杖抑制肺纤维化的作用机制之一。