人外周血T淋巴细胞表型改变与衰老相关性研究

目的：探讨人T淋巴细胞表型随年龄变化的规律，寻找敏感的免疫衰老生物标志。方法：取年轻组(20—35岁)和年老组(50—75岁)志愿者的新鲜肝素抗凝静脉血，进行三色或四色直接免疫荧光染色，获取有核细胞后以流式细胞仪分析T细胞亚群的表型。结果：2个年龄组的总T细胞(CD3^ )、辅助T细胞(CD4^ )以及细胞毒T细胞(CD8^ )亚群的相对百分率没有明显差别，但年老组T细胞上CD3分子的密度(MFI)明显下降；粘附分子CD44与CD62L在3群T细胞上阳性率的差别均无统计意义；而2组间总T细胞、辅助T细胞以及细胞毒T细胞亚群的CD95阳性率都有显著差别，表现为随年龄增加，CD95表达率上升。结论：在所研究的年龄组间，T细胞及其亚群的相对数量没有显著改变，而CD3表达密度随年龄增加而下调；T细胞的凋亡诱导分子CD95阳性率随年龄增加而上升，提示CD95可能是评价免疫衰老的潜在生物标志。     

白癜风患者外周血T淋巴细胞异常活化

本文以人类白细胞抗原ＤＲ位点（ＨＬＡ－ＤＲ）及白细胞介素２受体亚单位Ｐ５５和Ｐ７５（ＩＬ－２Ｒ，Ｐ５５和ＩＬ－２Ｒ，Ｐ７５）的表达为Ｔ淋巴细胞活化的指标，用双色免疫标记流式细胞法对白癜风患者外周血Ｔ淋巴细胞（ＶＰＢＴＬ）进行分析。实验发现：ＨＬＡ－ＤＲ在ＶＰＢＴＬ及其亚群Ｔ辅助细胞（Ｔｈ，ＣＤ４＾＋细胞）和Ｔ抑制细胞（Ｔｓ，ＣＤ８＾＋细胞）的表达均明显高于正常人，分别为：４９．６２％比１４．５４％     

脐血B淋巴细胞的免疫表型及临床意义

目的分析脐血 B淋巴细胞 ( B细胞 )的免疫表型及其临床意义。方法直接免疫荧光标记 ,流式细胞仪检测并对比研究 2 6例正常足月儿脐血和 15例正常成人外周血 B细胞相关表型表达。结果足月儿脐血中成熟 B细胞表型 CD19+ ,CD2 0 + CD19+ ,CD2 2 + CD19+ ,CD2 3 + CD19+ ,CD4 0 + CD19+ 的表达以及不成熟 B细胞表型 CD10 + CD19+ ,CD5 + CD19+ 的表达 ,除 CD2 3 + CD19+ 和 CD4 0 + CD19+ 外 ,均比正常人外周血高 ( P<0 .0 5 ) ,并且无性别之间差异 ( P>0 .0 5 )。结论与成人外周血比较脐血 B淋巴细胞相对不成熟     

双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠后不同部位淋巴细胞表型的变化

目的:观测双价痢疾工程菌苗滴鼻免疫小鼠后,不同时间、不同部位淋巴组织细胞表型的变化,探讨痢疾菌苗滴鼻免疫对黏膜和系统免疫应答的影响。方法:BALB/c小鼠随机分为3组,每组30只,分别以FSM-2117和FS-5416痢疾菌苗经滴鼻途径免疫小鼠4次,菌量依次为5×106、1×107、4×107和4×107CFU/只,对照组给予PBS,间隔2 wk。4次免疫后7、30和90 d活杀,分离NALT、鼻通道、脾、小肠PP结淋巴细胞,采用流式细胞术检测其淋巴细胞表型的变化。结果:4次免疫后7 d,小鼠鼻相关淋巴组织(NALT)、鼻通道(NP)和Peyer’s结(PP)淋巴细胞中,CD3 T细胞数均显著增加,其中以CD4 T细胞增加为主。FSM-2117免疫组的脾细胞中B220 细胞显著增加;而FS 5416免疫组的脾细胞中CD3 T细胞显著增加。4次免疫后30 d,NALT、NP和脾淋巴细胞仍出现上述变化;而90 d,仅NALT和NP淋巴细胞出现上述同样变化。结论:两株双价痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠后,能有效地诱导黏膜和系统免疫应答,且持续时间较长,但该免疫应答的减弱是从距免疫部位较远的部位而开始的。     

T细胞受体γδ表型淋巴细胞与肿瘤免疫

Ｔ细胞受体γδ表型细胞是一个新发现的Ｔ淋巴细胞亚群，约占人外周血淋巴细胞总数的３－１０％。实验证明，此类细胞具有多种细胞因子的分泌能力且可表现出对多种自体及建纱肿瘤细胞较强的细胞毒活性。因其具有特殊的ＭＨＣ非限制性的抗原识别方式，在某些肿瘤浸润淋巴细胞中的存在以及经过继免疫实验可获得明显的抗肿瘤效应而引起了免疫学工作者们的兴趣。本文仅就γδＴ细胞在肿瘤免疫研究的近年进展作一综述。     

流式细胞术在弥漫性大B细胞淋巴瘤伴大量T细胞反应病理诊断中的应用

目的探讨流式细胞免疫分型技术在弥漫大B细胞淋巴瘤伴大量T细胞反应病例诊断中的应用价值。方法对3例弥漫大B细胞淋巴瘤伴大量T细胞反应病例病理形态、免疫组织化学染色及流式细胞免疫分型进行回顾性分析。结果例1：在CIM5-SSC（Side Scatter,侧向散射角）点图上可见CD45阳性细胞明显分2群,强阳性细胞由T细胞和B细胞共同组成,但以T细胞为主,其中B细胞为免疫球蛋白轻链非限制性表达。而CD45弱阳性细胞基本都是B细胞,且为免疫球蛋白轻链入限制性表达。例2：在CD45-SSC点图中可见CD45阳性细胞因SSC大小不同而分2群,SSC较小的细胞群为T、B细胞混合存在,SSC较大,相当于单核细胞位置的细胞群主要为B细胞,且为免疫球蛋白轻链K限制性表达;例3：再作CD19／κ／CD20,CD19／λ／CD20三重标记发现部分CD19阳性细胞CD20阴性,该群细胞呈κ限制性表达。结论通过多参数、多组合流式细胞免疫分型技术可以从抗原表达减弱或增强、抗原丢失、是否表达非B系抗原、FSC（前向散射光）和（或）SSC的变化以及是否有表达不成熟B细胞的抗原6个方面将肿瘤性B细胞与反应性细胞区分开。     

T细胞受体γδ表型淋巴细胞与肿瘤免疫

T细胞受体γδ表型细胞是一个新发现的T淋巴细胞亚群，约占人外周血淋巴细胞总数的3％～10％。实验证明，此类细胞具有多种细胞因子的分泌能力且可表现出对多种自体及建系肿瘤细胞较强的细胞毒活性。因其具有特殊的MHC非限制性的抗原识别方式，在某些肿瘤浸润淋巴细胞中的存在以及经过继免疫实验可获明显的抗肿瘤效应而引起了免疫学工作者们的兴趣。本文仅就γδT细胞在肿瘤免疫研究的近年进展作一综述。     

血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤的形态及免疫表型研究

目的 研究血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(AITL)形态学特点、特异性标志物,并探讨AITL中滤泡树突状细胞网的增生状况及其起源.方法 对29例AITL行bcl-6、CD10、CXCL13、CD21染色(EliVision法)及bcl-6/CD3、CD10/CD21及CD10/CD20双重染色,并选取外周T细胞淋巴瘤,非特殊类型(PTL-U);结外NK/T细胞淋巴瘤,鼻型;间变性大细胞淋巴瘤(ALCL);肠病性T细胞淋巴瘤(ETTL);皮下脂膜炎性T细胞淋巴瘤及淋巴结反应性增生作为对照.结果 (1)22例(75.9%)AITL表达CD10,对照组除1例PTL-U外均阴性;24例(82.8%)AITL表达CXCL13,所有PTL-u均阴性;而AITL中bcl-6的表达情况和PTL-u及反应性增生病例有一定程度的交叉.(2)29例AITL显示特征性的CD21阳性滤泡树突状细胞网增生,4例具有明显生发中心的病例,2例显示增生的滤泡树突状细胞网覆盖并超过生发中心.结论 AITL具有典型的形态学变化,CD10和CXCL13是AITL特异性标志物,而bcl-6不具有特异性;AITL中增生的滤泡树突状细胞网可能部分起源于生发中心.     

异体角膜刺激引起的人外周血T细胞及其亚群CD25分子表达

目的：观察异体角膜体外对人外周血T细胞及其亚群CD25分子表达的影响。方法： 异体角膜与外周血淋巴细胞体外共同培养后，进行单克隆抗体标记和流式细胞分析。结果： 对照组T细胞CD25表达为25.2％；受角膜或沸波醇酯（PDB）激活后T细胞CD25表达分别为56.8％和80.9％；受角膜和沸波醇酯共同激活后T细胞CD25表达为70.2％；受异体角膜激活后，CD4和CD8 T淋巴细胞CD25表达分别为67.3％和52.3％。结论： 异体角膜组织体外能够刺激人外周T细胞CD25表达和T细胞活化，CD4 T细胞比CD8 T细胞活化更明显。     

类风湿性关节炎患者2H4+T淋巴细胞亚群的流式细胞仪分析

了解类风湿性关节炎患者免疫功能的异常变化，探讨其发病机制。方法，使用间接免疫荧光和直接免疫荧光方法对１１例ＲＡ患者和１２例健康人的外周血Ｔ淋巴细胞进行了研究。结果：ＲＡ患者与对照组比较ＣＤ３＾＋Ｔ细胞和ＣＤ＾＋４Ｔ细胞地明显变化，ＣＤ８＾＋Ｔ细胞明显减少，     

甲真菌病患者外周血淋巴细胞免疫表型的分析

目的 探讨甲真菌病患者外周血淋巴细胞免疫表型的情况.方法 应用流式细胞仪对24例甲真菌病患者及20例健康人的外周血淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞进行测定与分析.结果 甲真菌患者外周血CD8+淋巴细胞明显高于健康对照组(P<0.05),而CD3+细胞,CD4+细胞,CD4+/CD8+、CD19+细胞、CD16+CD 56+细胞与对照组变化不明显.结论 甲真菌患者存在着一定程度的细胞免疫异常,以CD8+细胞介导的免疫反应占主要地位.     

CD30在肾综合征出血热患者T细胞表达的检测及其临床意义

目的 :研究CD3 0 在肾综合征出血热 (HFRS)患者急性期外周血T淋巴细胞亚群的表达及意义。方法 :应用免疫荧光抗体双重标记和流式细胞仪技术分析CD3 0 在HFRS患者急性期外周血CD 4,CD 8T细胞表达的水平。结果 :CD 4CD-3 0 细胞在重型组 ,中轻型组和正常组三组间均无显著差异 (P >0 0 5 ) ;患者CD 4CD 3 0 ,CD 8CD-3 0 细胞明显增加 ,且重型组 ,中轻型组和正常组三组间均有极显著差异 (P <0 0 1)。结论 :HFRS患者急性期存在体液免疫和细胞免疫功能亢进 ,各种T淋巴细胞亚群的比例失衡与该病免疫发病机制及病情的严重程度密切相关。     

应用四色荧光标记流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群的变化

目的 探讨四色荧光标记流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测鼻咽癌患者服用云芝丹参胶囊后外周血淋巴细胞亚群:辅助性T淋巴细胞(CD4 ),抑制性和细胞毒T淋巴细胞(CD8 ),B淋巴细胞(CD19 ),NK(CD16 CD56 ) 细胞的绝对数和百分率等的变化.方法 收集鼻咽癌患者27例,设立中药组和安慰剂对照组,采用四色荧光标记流式细胞术对服用云芝丹参胶囊后的鼻咽癌患者外周抗凝全血的淋巴细胞亚群CD4 细胞、CD8 细胞、B细胞、NK细胞进行绝对计数和相对计数,并对两组结果进行比较分析.结果 四色荧光标记流式细胞术结果显示:接受放射治疗的鼻咽癌患者在服用云芝丹参胶囊16周后,外周血T淋巴细胞的绝对数和百分率,以及Ts、Th细胞绝对数的下降均明显低于安慰剂组(P＜0.05);中药组和安慰剂组NK细胞百分率的变化均显著增高(P＜0.05); 但两组NK细胞绝对值的变化不存在明显差异(P＞0.05).结论 云芝丹参能明显减轻放射治疗对鼻咽癌患者的淋巴毒性.     

肺结核患者外周血不同T淋巴细胞亚群中白细胞介素-9产生细胞比例的研究

目的 探讨肺结核病(tuberculosis,TB)患者外周血不同T淋巴细胞亚群中白细胞介素(interluekin,IL)-9产生细胞比例的变化.方法 采集26例活动期肺TB患者(TB组)和23例健康志愿者(HD组)外周血样本,加刺激剂佛波醇酯(PMA)和钙离子霉素(IM),以及阻断剂莫能霉素作用6h后,用荧光标记单克隆抗体作T细胞亚型表面分子和胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测不同T淋巴细胞亚群中分泌IL-9细胞的比例.结果 CD3+总T细胞中产生IL-9的细胞比例在TB组和HD组分别为0.32％和0.35％,在CD4+ αβ T细胞中分别为0.21％和0.22％,在CD8+ αβ T细胞中分别为0.35％和0.32％,差异均无统计学意义(P＞0.05).而在γδ T细胞中产生IL-9细胞的比例,TB组(2.93％)高于HD组(1.07％),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 与HD组比较,TB患者CD4+T细胞和CD8+T细胞中IL-9产生细胞的比例无明显改变,而γδ T细胞中分泌IL-9细胞比例显著增加.     

Pharmacodynamic monitoring of the immunosuppressive therapy in patients after heart transplantation: whole blood flow cytometric analysis of lymphocyte function

Despite therapeutic monitoring and daily measurements of blood concentrations (pharmacokinetics) of immunosuppressive medications, immunosuppressive therapy remains still a challenge after heart transplantation (HTx) due to drug interactions, toxicities and individual responses to drug effects. We established whole blood flow cytometric assays of lymphocyte function to assess the pharmacodynamics of immunosuppressive therapy and investigated both pharmacokinetic and pharmacodynamic approaches after HTx. Our results showed that pharmacodynamic measurements provide a more direct assessment of the functional activity of immunosuppressants on immune cells compared to drug level monitoring alone. The information from both pharmacokinetic and pharmacodynamic monitoring has the potential to increase the efficacy and safety of individual immunosuppressive therapy after HTx.     

流式细胞术检测肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群研究

目的 探讨肿瘤患者T淋巴细胞亚群的变化及临床意义。方法 采用流式细胞术检测27例肿瘤患者和25例正常对照组的T淋巴细胞亚群。结果 肿瘤患者CD3^＋T细胞、CD4^＋T细胞和CD4^＋／CD8^＋比值明显低于对照组并有统计学意义，而CD8^＋T细胞显著高于对照组（P〈0．01）。结论 肿瘤患者的免疫功能下降。流式细胞术对肿瘤患者的免疫功能的检测具有快速、敏感、准确的特点，对于评价疗效、判断预后具有重要价值。     

过敏性哮喘患儿外周血嗜酸性粒细胞及淋巴细胞CCR3的表达

目的 观察过敏性哮喘患儿外周血嗜酸性粒细胞及淋巴细胞表面趋化因子受体CCR3与CCR5表达的改变。方法 以16例急性发作及25例缓解期过敏性哮喘患儿和20例健康儿童为主要观察对象,用流式细胞术测定外周血粒细胞群及淋巴细胞群中CCR3与CCR5的表达。结果 过敏性哮喘患儿缓解组CCR3~+淋巴细胞亚群百分率[(4.2±1.9)％],尤其是CCR3~+嗜酸性粒细胞百分率[(3.5±1.6)％]较正常组[(3.0±1.3)％,(1.2±0.5)％]明显增高;急性发作组CCR3~+淋巴细胞亚群与嗜酸性粒细胞百分率[(3.5±1.5)％,(2.2±1.0)％]虽也高于正常组,但较缓解组则出现下降。发作组CCR5~+淋巴细胞亚群仅见增高趋势。结论 CCR3~+嗜酸性粒细胞与淋巴细胞亚群异常升高可能为过敏性哮喘患儿免疫系统异常的一个特征性表现;与缓解组比较,发作组CCR3~+嗜酸性粒细胞及淋巴细胞亚群反而降低,可能和该类细胞向炎症部位趋化并参与了过敏性免疫炎症反应有关。