HDAC3基因在β-地中海贫血中甲基化状态及其意义研究

目的 通过寡核苷酸芯片寻找和分析β-地中海贫血DNA甲基化相关的基因位点,进一步探讨早期诊断β-地中海贫血的新方法.方法 利用含有人30 178个DNA甲基化探针的寡核苷酸芯片,对2例β地中海贫血患儿脐血与2例正常脐血分别配对检测差异基因DNA甲基化情况,并用甲基化特异PCR(MSP)和DNA荧光定量PCR验证芯片结果.结果 两组芯片结果显示,差异基因共209条(ratio≥2.0 or≤0.50);其中上调基因共113条,下调基因共96条.验证结果显示,DNA甲基化相关基因组蛋白甲基转移酶3(HDAC3)与正常血样比较呈高甲基化状态.结论 高通量的DNA甲基化基因芯片技术能够筛选出大量的地中海贫血差异表达基因,DNA甲基化相关基因HDAC3在地中海贫血中呈高甲基化.预示着利用DNA甲基化芯片分析地中海贫血中甲基化特异相关分子的规律和特点为临床上早期诊断地中海贫血开拓了新的思路和方法.     

164例地中海贫血基因诊断的分析与研究

目的 了解北海市育龄人群地中海贫血基因的携带率,预防地中海贫血重症患儿的出生,减少出生缺陷.方法 对3 028例育龄人群采用地中海贫血定量法进行筛查,夫妻筛查均为携带者用单管多重PCR(mPCR)及DNA芯片反向点杂交(ASO/RBD-PCR)检测技术,分别进行α、β地中海贫血基因检测.结果 3 028例受检者中筛查阳性479例,其中164例接受α、β地中海贫血基因诊断,基因携带率α地贫为9.45%、β地贫为4.24%.结论 选择适当的检测方法对孕龄人群进行地贫诊断,对优生优育、干预地贫儿出生有着重要作用.     

贵州地区160例产前地中海贫血基因诊断分析

目的通过分析贵州地区160例产前地中海贫血基因诊断结果,探讨预防重型地中海贫血的有效方法和意义。方法贵州地区2015年1月至2016年8月在我院接受产前地中海贫血基因诊断的160例孕产妇作为研究对象,分析其筛查及基因诊断结果。结果在160例孕产妇当中,基因诊断结果表型为阳性76例,其中α-重型地贫4例,β重型地贫5例,地中海贫血病3例,轻型α-地中海贫血携带者29例,轻型β-地中海贫血携带者34例以及α/β复合型地中海贫血携带者1例。结论加强贵州地区孕产妇地中海贫血基因诊断,可最大程度降低重型地贫患儿的出生率,对提高我省人口遗传素质具有重要意义。     

深圳地区1442例儿童疑似地中海贫血的基因检测分析

目的了解深圳地区儿童地中海贫血的发生率、基因突变类型及构成比。方法选取2015年1-12月在深圳市儿童医院经贫血筛查疑似地中海贫血的1 442例儿童进行地中海贫血基因检测。采用多重PCR技术检测3种缺失型α地中海贫血基因,反向斑点杂交法检测3种非缺失型α地中海贫血基因以及17种β地中海贫血的基因突变。结果 1 442例贫血儿童中,地中海贫血934例(64.77%),其中α地贫497例(53.21%),β地贫405例(43.36%),复合型地贫32例(3.43%)。497例α地贫中,静止型地贫49例(9.86%),轻型地贫399例(80.28%),中间型地贫49例(9.86%);405例β地贫中,β~+地贫149例(36.79%),β~0地贫256例(63.21%);32例复合型地贫中,轻型地贫22例(68.75%),中间型地贫3例(9.38%),重型地贫7例(21.88%)。结论深圳地区儿童地中海贫血突变类型、基因类型多样。α与β中间型、重型及α复合β地中海贫血检出率高,应加强地中海贫血干预工作,以避免中间型及重型地贫患儿的出生。     

地中海贫血羊水及脐血产前基因诊断的临床研究

目的:研究检测α-地中海贫血及β-地中海贫血在产前基因诊断中的临床应用价值.方法:对48例地中海贫血的风险胎儿的羊水(或脐血)应用单管多重PCR体系和反向点杂交法检测α-地中海贫血和β-地中海贫血基因诊断.结果:共有38例胎儿检测出携有地中海贫血.其中α-地贫14例,包括东南亚缺失型杂合子(--SEA/αα)2例,东南亚缺失型纯合子(--SEA--SEA)8例;左缺失型杂合子(-α4.2/αα)1例,右缺失型杂合子(-α3.7/αα)2例,非缺失型点突变(ααT/αα)1例;β-地中海贫血24例,包括CD 41～42杂合子16例,-28(A-G)杂合子3例,双重杂合子3例(ⅣS2nt654/CD41-42,-28(A-G)/CD71-72( A),-α3.7/CD41-42).其中10例重型地贫儿引产,1例重型地贫儿产后新生儿死亡.所有病例经引产或正常分娩后均留取脐带血作地贫基因诊断证实产前诊断.结论:应用单管多重PCR体系及反向点杂交法能快速、准确进行α和β-地中海贫血产前羊水基因检测,这对于有效预防重型地中海贫血胎儿出生具有重大临床意义.     

基于寡核苷酸芯片的β-地中海贫血DNA甲基化的研究

目的 通过寡核苷酸芯片寻找和分析β-地中海贫血DNA甲基化相关的基因位点,进一步探讨产前筛查及诊断β-地中海贫血的新方法.方法 利用含有人30 178个DNA甲基化探针的寡核苷酸芯片,对2例β地中海贫血患儿脐血与2例正常脐血分别配对检测差异基因DNA甲基化情况,并用甲基化特异PCR(methylation-specific PCR,MSP)和荧光定量PCR(RT-PCR)验证芯片结果.采用非监督聚类(hierarchical clustering)等方法发现统计学意义上差异表达的基因.结果 两组芯片结果显示,差异基因共209条(ratio≥2.0,ratio≤0.5);其中上调基因共113条,下调基因共96条.验证结果显示,DNA甲基化相关基因成红细胞增多型白血病致病因子(erythroblastie leukemia viral,v-erb-a)与正常血样比较呈高甲基化状态.结论 利用DNA甲基化芯片及甲基化特异PCR技术检测并验证出成红细胞增多型白血病致病因子(v-erb-a)在地中海贫血中呈高甲基化.     

地中海贫血基因携带者孕期红细胞参数特征分析

目的了解孕期地中海贫血基因携带者红细胞参数变化特征.方法从2012年8-12月来我院产检并做地中海贫血基因诊断的孕12-16周孕妇中选取地中海贫血基因携带者78例分为静止型α-地贫基因携带组、轻型α-地贫基因携带组、β-地贫基因携带组及地中海贫血基因检测为阴性对照组4组.统计3组的红细胞参数.结果3组的RBC MCH与对照组差异均有统计学意义(P<0.05);轻型α-地贫基因携带组及β-地贫基因携带组RBC MCV MCH与对照组有差异明显差异(P<0.05).结论RBC>4.3×1012/L、MCH<27 pg或RBC>4.3×1012/L、MCV<82 fl、 MCH<27 pg串联,可用于孕期筛查轻型地贫基因携带者的指标.     

168例高危地中海贫血儿童基因谱分析

目的应用基因诊断技术探讨高危地中海贫血（地贫）儿童的常见基因谱的分布特征。方法用钦州地区168例高危地贫的儿童样本分别检测α-地贫及β-地贫基因型,而α-地贫分为3种α缺失型基因检测（--SEA/,-α3.7/-α4.2）和3种非缺失突变型α地贫（HbCS,HbQS,HbWS）。α缺失型基因检测应用单管多重PCR技术进行检测,非缺失突变型α地贫和β-地贫（检测中国人常见的17种位点）均采用反向斑点杂交法。结果在168例进行地贫基因检查的钦州地区高危地贫儿童中,检出α-地贫49例,占29.17%;其中缺失型α-地贫39例,占α-地贫79.59%,非缺失突变型α地贫10例,占α-地贫20.41%,检出β-地贫27例,占16.07%;其中双重杂合子5例,占2.98%;检出复合αβ-地贫12例,占7.14%;总检出率是55.36%。结论钦州地区是地贫高发区,应选择适当的检测方法对育龄人群进行大面积的地贫产前筛查,这对优生优育、干预地贫儿出生有着重要作用。     

地中海贫血孕妇基因学诊断结果分析

目的 探讨地中海贫血孕妇基因学诊断结果,提高分娩质量,有效防控重型地中海贫血患儿的出生。方法 选取2019 年5 月～2020 年2 月在我院门诊进行血常规初筛检测提示贫血的孕妇50 例为研究对象,采集夫妻双方标本,通过聚合酶链反应（PCR）+反向斑点杂交法检测确认地中海贫血基因类型,对地中海贫血阳性标本进行基因诊断,判断其是否患有地中海贫血及所属基因类型,对夫妻为同型地中海贫血者行产前诊断,统计地中海贫血筛查结果、基因诊断结果及产前诊断结果。结果 （1）50 例孕妇地中海贫血筛查中阳性12 例（24.00%）,其中α-地中海贫血8 例（16.00%）,β-地中海贫血3 例（6.00%）,αβ 混合地中海贫血1 例（2.00%）。（2）α-地中海贫血确诊7 例（14.00%）,均为缺失型,其中-SEA 3 例,-α3.7 2 例,-α4.2 2 例;β-地中海贫血确诊2 例（4.00%）,CD41-42、IVS-Ⅱ-654 各1 例;αβ 混合地中海贫血（-α3.7 合并-28/N）确诊1 例（2.00%）。（3）夫妻为同型地中海贫血3 例,经产前基因诊断,重症地中海贫血1 例（33.33%）,自愿终止妊娠后再次基因诊断与产前基因诊断结果相符。结论通过对孕妇实施地中海贫血产前基因诊断,有助于及时发现重症地中海贫血胎儿,提高分娩质量。     

娄底市育龄人群地中海贫血筛查与诊断结果分析

目的了解湖南娄底市育龄人群地中海贫血基因型分布情况。方法通过血液学表型分析、PCR和导流杂交技术对娄底市育龄人群进行地中海贫血筛查和基因诊断。结果2021年娄底市育龄人群地中海贫血电泳筛查数为7320例,初筛阳性数为1633例,其中进行地中海贫血基因诊断592人,检出地贫基因携带136例,其中α地贫基因携带73例(12.33%),β地贫基因携带59例(9.97%),α地贫基因合并β地贫基因携带4例(0.68%)。α地贫以--SEA/αα(41.1%)、-α3.7/αα(36.99%)、-α4.2/αα(13.71%)为主,β地贫以IVS-Ⅱ-654(C>T)(33.9%)、CD41-42(-TTCT)(32.2%)、CD17(AAG>TAG)(22.03%)为主。结论娄底市地贫基因携带率及基因型分布与湖南省的分布特点基本相符,为预防重型地贫患儿出生,应加强地贫防控工作,引导育龄人群进行地中海贫血筛查和基因诊断。     

Thalassemia in Canadians

Thirteen Canadians with a mild hypochromic anemia were found to have beta thalassemia trait. The families of these individuals had resided in Canada for two to five generations and, where known, had not emigrated from areas with a high incidence for the thalassemia gene. A Negro family with abnormal erythrocyte morphology was suspected to be carrying the thalassemia gene although the hemoglobin A₂ concentration was normal and abnormal minor components were not detected. Thalassemia trait has been detected in practically every ethnic group, and its sporadic occurrence among Canadians without Mediterranean ancestry can be expected.     

地中海贫血的铁负荷状况

地中海贫血是由于血红蛋白的珠蛋白链合成受到部分或完全抑制所引起的一组遗传性溶血性贫血,重型及部分中间型地中海贫血多需反复输血治疗,可导致铁负荷过重,血色病,临床上可出现心肌病、充血性心力衰竭、肝硬化、糖尿病、关节炎、垂体功能减退等。轻型地中海贫血一般不需特殊治疗,比较关注的是其遗传学意义,但是机体铁负荷情况不甚明了,了解其铁负荷情况,对防治可能发生的高铁负荷危害有重要价值。     

携带地中海贫血基因对手工分离血小板的影响

目的分析携带地中海贫血基因对手工分离血小板的影响。方法对10例地中海贫血献血者与10例健康对照组制备浓缩血小板,比较制备血小板数目、血小板得率、红细胞残留量,并与红细胞参数行相关分析。结果地贫组与正常对照组血小板得率无显著性差异（P=0.164）;携带地贫基因时,制备的血小板中的残存红细胞计数高于对照组（P=0.000）。残留红细胞计数与平均红细胞体积（mean corpuscular volume,MCV）、平均血红蛋白量（mean corpus-cular hemoglobin,MCH）呈负相关（分别为r=-0.651,P=0.002;r=-0.633,P=0.003）,与红细胞分布宽度（redblood cell distribution width,RDW）呈正相关（r=-0.748,P=0.000）。结论携带地贫基因时不影响分离血小板效率,但增加红细胞的污染率,MCV越低者,红细胞污染越大。在制备战备浓缩血小板时,应尽量避免采用低MCV者,在地贫高发区制备血小板时尤应注意。     

地中海贫血发病机制的研究进展

地中海贫血是一种常染色体遗传病,目前其发病机制主要集中在基因缺陷和突变方面,且这方面的研究已经趋于完善。随着表观遗传学的发展,越来越多的疾病被证实与表观遗传学有密切的关系。地中海贫血的表观遗传学的研究目前在世界范围内正处在起步阶段,这方面的研究有助于发现新的地中海贫血的诊断和治疗方法。     

地中海贫血的快速产前基因诊断

本研究采用聚合酶链反应(PCR)技术,完成了20例重症β-地中海贫血(β-地贫)及2例重症α-地中海贫血(α-地贫)高危胎儿的产前基因诊断。20倒重症β-地贫高危胎儿中,双重杂合子及纯合子6例,杂合子10例,正常胎儿4例,其中10例已经正常分娩后或流产后基因分析验证,结果与产前诊断完全一致。讨论了三种取材方法及影响PCR的主要因素。PCR技术具有简便快速、早期取材、诊断率高及结果准确可靠等优点,便于推广使用。     

地中海贫血基因检测的研究进展

地中海贫血是一组高度异质性的遗传性溶血性疾病。它是由于珠蛋白基因突变,使珠蛋白生物合成受阻、产量不足或缺如所致。我国对地中海贫血的基因诊断和产前诊断始于20世纪80年代初,先后经历了DNA点杂交、限制性内切酶酶谱分析、限制性片段长度多态性(RFLP)连锁分析、寡核苷酸(ASO)探针杂交和PCR体外基因扩增等阶段,特别是PCR技术的不断发展和改进,使地贫基因诊断检测技术日趋成熟。目前,在应用于这种高度异质性遗传病的各种分子诊断方法中,快速简便的基因芯片技术引人注目。     

地中海贫血筛查指标的临床应用价值

目的探讨地中海贫血筛查指标的临床应用价值。方法采用红细胞脆性、平均红细胞体积(MCV)、血红蛋白电泳筛查地中海贫血可疑病例,并对可疑病例进行地中海贫血基因诊断和血清铁蛋白检查。结果①从3644例受检者中筛查出636例可疑地中海贫血患者,红细胞脆性、MCV、HbA2三者检出率分别为17.5%、17.1%、7.1%;可疑地中海贫血患者中,红细胞脆性<70%、MCV<80fL、HbA2≥3.5%的患者分别为100%、97.8%、40.4%。②可疑地中海贫血患者中,红细胞脆性<65%组与脆性为65%～70%组比较,地中海贫血基因诊断符合率差异有统计学意义(P<0.05),但后组基因诊断符合率仍然高达54.3%。③可疑地中海贫血患者中,MCV<80fL组与MCV≥80fL组比较,HbA2≥3.5%且MCV<80fL组与HbA2≥3.5%且MCV≥80fL组比较,地中海贫血基因诊断符合率差异无统计学意义(P>0.05)。④可疑地中海贫血患者中确诊缺铁性贫血、地中海贫血、地中海贫血合并缺铁性贫血比例分别为16.3%、67.0%、16.7%,地中海贫血筛查的特异性为83.7%。结论①红细胞脆性<70%是地中海贫血筛查最敏感简便的指标,宜作为产前检查地中海贫血筛查指标。②MCV<80fL是地中海贫血筛查的简便指标,但需要结合红细胞脆性、HbA2等红细胞参数提高检出率。③对筛查出的可疑地中海贫血患者必须同时进行地中海贫血基因检查和铁代谢检查。