转基因小鼠及其在体内突变研究中的应用

早在十五年前,就有人想到将外源性DNA引入哺乳动物体细胞和生殖细胞中,例如将胚胎从体内移出后在体外培养,再植入假孕的母体内使其完成正常的胚胎发育,这一技术使一个动物的胚胎细胞与其它动物的结合以形成嵌合动物成为可能。他们还发明了将生殖细胞或早期胚胎来源的畸胎瘤培养细胞引入到发育胚胎中的方法。与此同时,遗传学家和病毒学家正在探索将选择的基因引入组织培养细胞的方法。于是便可将基因转入畸胎瘤细胞,并将这些细胞导入发育胚胎的囊胚以产生嵌合动物。到了七十年代中期,有人用小鼠白血病病毒(MuLV)     

携带XylE基因的穿梭质粒诱变分析系统在诱变剂检测中的应用

以邻苯二酚氧化酶基因－ｘｙｌＥ为靶基因，以新霉素抗性基因ｎｅｏ为选择基因构建的ｐＥＳｎｘ穿梭质粒转染人羊膜细胞ＦＬ，得到一株携带有完整的自主复制型ｐＥＳｎｘ质粒的Ｇ４１８抗性细胞株ＦＥＳｌ．７。经测定该细胞株平均每细胞含有质粒２６个拷贝，且在８个月的传代培养中保持稳定，ｐＥＳｎｘ质粒在ＦＥＳ１．７细胞内ｘｙｌＥ基因的自发突变率仅４．３×１０－５。因此由ＦＥＳ１．７细胞构成的系统可在人体细胞中进行诱变检测。该系统灵敏度高，可对低效诱变剂在人体中引起的基因突变进行检测，而且特别适合于研究人体细胞中基因突变的分子机制。利用此ＥＢＶ－ｘｙｌＥ穿梭质粒诱变分析系统我们已对ＥＭＳ进行了诱变分析，对于ＦＥｓ１．７细胞，１８９ｕＭＥＭＳ诱发的ｘｙｌＥ基因突变超过自发突变频率达２２倍。ＥＭＳ处理细胞２４小时能引起细胞内的质粒在ｘｙｌＥ基因座位上发生缺失突变。     

穿梭质粒pSP189/哺乳动物Vero细胞检测系统在喹乙醇诱变分子机制研究中的应用

背景与目的将短暂复制型穿梭质粒pSP189与非洲绿猴肾细胞(Vero细胞系)组成穿梭质粒/哺乳动物细胞诱变检测系统,并将该系统应用于喹乙醇的诱变性检测。材料与方法质粒经6.6μg.ml-1喹乙醇处理后,转染Vero细胞,从细胞中回收质粒转化E.coliMBM7070指示菌筛选突变体。结果喹乙醇处理组的诱变频率(24×10-4)明显高于溶剂对照组(1.2×10-4);试验进一步对61个突变子中的24个突变子质粒靶基因进行序列分析,发现喹乙醇引起质粒靶基因核苷酸序列改变主要表现为点突变和连续缺失,且以引发点突变为主,占总数的70%。点突变主要集中在GC碱基对,且包含在5'-NNTTNN-3'的序列中,其中的N位易发生突变,主要表现为GC-TA或GC-AT置换;而缺失以连续缺失为主,包含在含ANGGCCNAAA的序列中。结论喹乙醇能诱发质粒pSP189靶基因突变。     

癌基因组研究的新成果及其深远意义

肿瘤细胞具有永生化和无限增殖的2大行为特点.肿瘤细胞的癌变过程,困扰着一代又一代的学者.癌变细胞不仅可以破坏其占位的组织和器官(即原位癌),还会侵袭邻近组织和器官,甚至进一步发生远处转移;进行抗癌药物治疗时,某些癌细胞还会产生抗药性.1890年David von Hansemann以及1914年Theodor Boveri曾观察到癌细胞内存在遗传物质的异常,从而导致克隆出具有异常遗传物质的子代癌细胞.     

基于功能组学数据识别卵巢癌风险microRNA

目的通过生物信息学与免疫组化实验相结合的方法,探讨新的卵巢癌发病相关microRNA(miRNA)。方法选取2004年1月至2006年3月间哈尔滨医科大学附属第一医院及哈尔滨医科大学附属第三医院收治的70例上皮性卵巢癌手术病例石蜡包埋样本,采用SP免疫组化法进行检测,设阴性对照组及阳性对照组,阳性反应观察采用双盲法。以Gene Ontology为功能组学背景,度量不同基因之间的功能相似性得分,根据得分综合排序,寻找卵巢癌风险miRNA。应用该方法对2 588个miRNA进行优化排序,通过免疫组化实验方法对风险miRNA在卵巢癌中调控位点进行证实。结果优化后,卵巢癌相关miRNA如miR-200a/b/c排在前列,排序前10位miRNA中的大部分都在正常组织和卵巢癌组织中呈差异表达。miR-125a调控的人表皮生长因子-2(HER-2)呈高表达趋势。HER-2表达水平与临床分期,病理分级及存活时间显著相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-125a通过调控HER-2影响卵巢癌的临床病理特征,可成为新的卵巢癌相关风险因子。     

磁共振功能成像在脑肿瘤诊断中的应用

目前,MRI因软组织分辨率高、无辐射及多平面成像等优势已成为脑肿瘤疾病的一种常规检查手段。近年来,随着磁共振技术的发展及磁场强度的增加,一些新的MR功能成像技术已开始越来越多的应用于临床,如磁共振波谱、脑功能成像、灌注成像、磁敏感加权成像、弥散张量成像等,主要用于脑肿瘤之间及脑肿瘤与非肿瘤性疾病的鉴别、肿瘤的分级、指导外科术式的选择、放疗方案的制订等。     

EMSY在乳腺癌中的功能研究进展

EMSY位于染色体11q13,编码约1 322个氨基酸,其N末端有保守的ENT结构域,此结构域可与BRCA2的第3外显子结合并抑制BRCA2的转录活性,自2003年首次报道以来,以EMSY与BRCA2相互作用为基础,EMSY的功能研究不断展开,研究发现EMSY与BRCA2的相互作用可能可以弥补BRCA2在散发性乳腺癌中作用机制的空白,同时EMSY可能与DNA的损伤修复及基因组的稳定性相关,其次,EMSY可能是染色体11q13扩增子的主要候选基因.此外,临床研究显示13%的散发性乳腺癌伴有EMSY扩增,并且在某些亚组中,EMSY扩增患者无病生存较差,提示其可能成为临床预后的一个预测指标.尽管关于EMSY的研究结果尚存在争议,不过作为一种新发现的蛋白,EMSY对散发性乳腺癌发生发展的影响有重要的研究价值.以EMSY与BRCA2相互作用为切入点,结合近年来EMSY的研究结果,对EMSY的结构功能作一简单介绍.     

国产异丙肌苷对小鼠免疫功能影响的研究

 本实验研究了国产异丙肌苷对小鼠几个免疫学指标的影响。结果表明,异丙肌苷在体内外均能有意义地增加淋巴细胞转化,但单独对小鼠淋巴细胞无明显作用。异丙肌苷还能显著增强巨噬细胞的功能及血清溶菌酶含量。此外亦能使抗体反应明显增加。因而提示异丙肌苷对小鼠免疲功能具有促进作用。本文还讨论了其可能的作用机理。     

功能导航在额顶叶胶质瘤手术中的应用

目的:探讨应用功能导航与术中唤醒麻醉联合皮层刺激在手术切除额顶叶胶质瘤中保护运动功能的临床价值。方法:将157例额顶叶胶质瘤患者,分为导航组（91例）和唤醒组（66例）:导航组术中采用BOLD-fMRI联合DTI-FT神经导航技术;唤醒组术中采用唤醒麻醉联合脑皮层电刺激技术。分析患者运动功能保护效果、肿瘤切除率及手术时间。结果:导航组与唤醒组在运动功能保护上效果相当（P＞0.05）。导航组肿瘤切除率优于唤醒组（P＜0.05）。导航组手术时间比唤醒组短（P＜0.05）。结论:BOLD-fMRI联合DTI-FT神经导航技术在切除额顶叶胶质瘤术中运动功能保护与作为金标准的唤醒麻醉效果相当,且能提高肿瘤切除率,减少手术时间,进而改善患者的生存质量,值得推广。     

银耳制剂对受照射荷瘤小鼠免疫功能保护作用的研究

荷S_(180)肉瘤小鼠ip银耳制剂(TFB)200mg/kg·d×7d。在第3、5和7天注药后40分钟分别荷瘤局部照射X射线5Gy。停药后早期,TFB能明显增加受照射荷瘤鼠的脾重、脾有核细胞数和胸腺细胞~3H—TdR自发掺入率;显著提高NK细胞和ADCC活性及增强脾细胞产生IL-2的能力,但不影响胸腺重量和胸腺细胞数。     

比较基因组杂交在肿瘤研究中的应用

比较基因组杂交（CGH）是一种能对不同基因组间染色体上DNA序列拷贝数进行检测并定位的分子细胞遗传学技术.现综述比较基因组杂交的基本原理、方法、应用、优缺点及近期进展.     

自噬在肿瘤细胞中的功能与应用前景

1962 年Ashford 和Porten 在人的干细胞中发现了细胞自噬,随着人类对于自噬研究的不断深入,自噬的机制以及在肿瘤细胞中的作用也逐渐被认知,临床上通过调控自噬以及将自噬和传统疗法结合应用来治疗肿瘤已收到一定的成效,这有可能会给众多肿瘤患者带来生命的希望.     

循证护理在乳腺癌术后功能锻炼中的应用

目的：研究采用循证护理方法对提高乳腺癌术后功能锻炼的效果。方法：将我院自2005年1月至2008年12月收治的乳腺癌患者分为对照组和循证组,对比两组术后第18天功能锻炼达标情况。结果：经统计学检验两组达标率比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：乳腺癌术后功能锻炼中运用循证护理的方法,能有效提高达标率,显著降低上肢功能障碍发生率。     

循证护理在乳腺癌术后功能锻炼中的应用

目的:研究采用循证护理方法对提高乳腺癌术后功能锻炼的效果。方法:将我院自2005年1月至2008年12月收治的乳腺癌患者分为对照组和循证组,对比两组术后第18天功能锻炼达标情况。结果:经统计学检验两组达标率比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:乳腺癌术后功能锻炼中运用循证护理的方法,能有效提高达标率,显著降低上肢功能障碍发生率。     

光学功能成像技术在乳腺癌早期诊断中的应用

乳腺癌的发病率逐年上升,已经成为危害女性健康的第一大疾病,因而乳腺癌的早期发现和诊断对及时治疗和保证生活质量具有关键的意义。光学功能成像技术是乳腺肿瘤常用的检查手段之一,对肿瘤的良恶性能做出较准确的诊断。在过去的几十年中,光纤、光源、探测器、影像及计算机控制仪器的发展,对光学定量技术在临床诊断和治疗中的应用起到了史无前例的促进作用。在乳腺疾病的检测、诊断和监测上,