佛波脂及Microcystine-LR对SHRsp内脏阻力血管平滑肌钙通道的影响

目的 研究佛波脂及ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｎｅ－ＬＲＭＣＹＳＴ－ＬＲ）对卒中易感型自发性高血压大鼠（ＳＨＲｓｐ）及常压对照Ｗｉｓｔａｒ大鼠肠纱膜动脉Ａ４－Ａ５段分支阻力血管平滑肌电压依赖性钙通道的影响。方法 采用膜片箍全细胞钡电流方式记录钙通道的活力。结果 佛波脂激活蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）或ＭＣＹＳＴ－ＬＲ换制细胞蛋白磷酸酶（ＰＰＩＡ、ＰＰⅡＡ）而相对增加磷酸化过程,均可激活内脏阻力血管平滑肌电压依赖性     

GTPγS及GDPβS对SHRsp内脏阻力血管平滑肌钙通道的影响△

目的研究G蛋白激动剂GTPγS和抑制剂GDPβS对卒中易感型自发性高血压大鼠(SHRsP)及常压大鼠(Wistar)肠系膜动脉A4～A5分支阻力血管平滑肌钙通道的影响.方法应用膜片箝全细胞钡电流方式.结果 (1)GTPγS使SHRsp和Wistar两种大鼠阻力血管平滑肌全细胞峰值钡电流(peak IBa2+)明显增加,且SHRsP大鼠显著大于Wistar大鼠.GDPβS则可抑制两种大鼠的全细胞峰值钡电流,对于SHRsP大鼠的抑制程度显著大于对照Wistar大鼠.(2)GTPγS使SHRsp和Wis tar两种大鼠阻力血管平滑肌钙通道稳态激活曲线右移,并且SHRsp大鼠右移量显著大于Wistar大鼠.GDPβS也可使两种大鼠钙通道稳态失活曲线右移,SHRsP的右移量在HP=-80mV时明显大于Wistar大鼠.结论G蛋白可激活自发性高血压大鼠内脏阻力血管平滑肌电压依赖性钙通道.其作用特点有利于外钙内流,这可能是高血压时外周阻力增高的原因之一.     

诱导EAMG耐受性机制初探

目的：探讨鼻腔耐受和Ｗｉａｔａｒ大鼠对ＥＡＭＧ耐受的机理。方法：「＾３Ｈ」ＴｄＲ掺入和酶联免疫斑点法。结果：免疫后第３、５、７周ＥＡＭＧ大鼠Ｇｕｏ窝和腹股沟淋巴结（ＰＩＬＮ）中ＡＣｈＲ特异的淋巴细包增生反应（ＬＰＲ）刺激指数比鼻腔耐受大鼠高,第７周比Ｗｉｓｔａｒ大鼠高（Ｐ〈０．０５）。免疫后第５、７周ＥＡＭＧ大鼠ＰＩＬＮ中ＡＣｈＲ反应性γ干扰素分泌细胞数比鼻腔耐受大鼠和Ｗｉｓｔａｒ大鼠高（Ｐ〈０．     

红核内与调节心血管活动有关的受体

本文在４８只Ｗｉｓｔａｒ大鼠上证明向红核（ＲＮ）内注射微量γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）和５－羟色胺（５ＨＴ）均能通过抑制ＲＮ，使心血管活动减弱：血压（ＢＰ）降低，心率（ＨＲ）减慢（Ｐ〈０．０５）；印防己毒素（ＰＴＸ）能有效地拮抗ＧＡＢＡ对ＲＮ的抑制效应（Ｐ〈０．０５）；而多巴胺（ＤＡ）则仅有降低ＢＰ作用（Ｐ〈０．０５），对ＨＲ无明显影响（Ｐ〉０．０５）。结果表明，ＲＮ能感受脑内ＧＡＢＡ、５ＨＴ和ＤＡ等     

Lewis和Wistar Furth大鼠T细胞对AChR的免疫应答不同

为探讨Ｔ细胞对乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）免疫应答在实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）发病中的作用，本文用酶联免疫斑点技术（ＥＬＩＳＰＯＴＳ）和＾（３Ｈ）ＴｄＲ掺入法检测Ｌｅｗｉｓ大鼠和ＷｉｓｔａｒＦｕｒｔｈ（Ｗｉｓｔａｒ）大鼠ＡＣｈＲ加完全弗氏佐剂（ＣＦＡ）免疫后不同时间点，窝和腹股沟淋巴结（ＰＩＬＮ），脾脏及胸腺中ＡＣｈＲ反应性ｒ干扰素分泌细胞和淋巴细胞增生反应，结果表明，免疫后第５周ＰＩＬＮ     

用放免测定观察自发性高血压大鼠脑底动脉上血管活性肠肽和…

应用放射免疫分析的方法，观察了自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）脑底动脉上血管活性肠肽（ＶＩＰ）和Ｐ物质（ＳＰ）含量的变化。结果表明，ＳＨＲ各主要脑底动脉ＳＰ的含量在２．６０￣３．５１ｐｇ／ｍｇ之间，大脑前动脉（ＡＣＡ）ＳＰ的含量ＳＨＲ比对照京都Ｗｉｓｔａｒ（ＷＫＹ）大鼠小，在其它脑底动脉上ＳＰ的含量ＳＨＲ和ＷＫＹ大鼠无差异。ＳＨＲ各主要脑底动脉上的ＶＩＰ含量在２．３０￣２．５５ｐｇ／ｍｇ之间，和ＷＫＹ大     

人参茎叶皂甙和大豆皂甙对糖尿病大鼠血小板聚集率和TX…

本实验分别经胃给予雄性Ｗｉｓｔａｒ糖尿病（ＤＭ）大鼠人参茎叶皂甙（ＧＳ）１５０ｍｇ／ｋｇ．日大豆皂甙（ＳＳ）１０ｍｇ／ｋｇ．日２０周，观察ＧＳ和ＳＳ对ＤＭ大鼠血糖、胰岛素、血小板聚集率（ＰＡＲ）和ＴＸＡ２／ＰＧＩ２／（Ｔ／Ｐ）的影响。结果显示ＧＳ和ＳＳ均能降低ＤＭ大鼠的血糖、ＰＡＲ和Ｔ／Ｐ值，提高胰岛素水平。     

用放免测定观察自发性高血压大鼠脑底动脉上血管活性肠肽和P物质含量的变化

应用放射免疫分析的方法，观察了自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）脑底动脉上血管活性肠肽（ＶＩＰ）和Ｐ物质（ＳＰ）含量的变化．结果表明，ＳＨＲ各主要脑底动脉ＳＰ的含量在２．６０～３．５１ｐｇ／ｍｇ之间．大脑前动脉（ＡＣＡ）ＳＰ的含量ＳＨＲ比对照京都Ｗｉｓｔａｒ（ＷＫＹ）大鼠小，在其它脑底动脉上ＳＰ的含量ＳＨＲ和ＷＫＹ大鼠无差异．ＳＨＲ各主要脑底动脉上的ＶＩＰ含量在２．３０～２．５５ｐｇ／ｍｇ之间，和ＷＫＹ大鼠均无明显差异．同时对ＳＨＲ脑底动脉上肽类物质含量的变化的意义作了进一步的讨论．     

前列腺素和血管紧张素Ⅱ在SHR高血压发病中的作用

采用放射免疫法测定８周龄、２５周龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）,和正常血压Ｗｉｓｔａｒ－ｋｙ－ｏｔｏ（ＷＫＹ）大鼠血浆血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）、６－酮－前列腺素Ｆ１α（６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α）、前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）、血管紧张素Ⅱ（ＡＴ－Ⅱ）和肾髓质ＰＧＥ２浓度,并计算６－Ｋｅｔｏ／ＴＸＢ２比值。结果表明：（１）各周龄ＳＨＲ组血浆ＴＸＢ２浓度均显著高于ＷＫＹ组（Ｐ〈０．００１）,且有随周龄增长而增     

人参茎叶皂甙和大豆皂甙对糖尿病大鼠血小板聚集率和TXA_2／PGI_2系统的影

本实验分别经胃给予雄性Ｗｉｓｔａｒ糖尿病（ＤＭ）大鼠人参茎叶皂甙（ＧＳ）１５０ｍｇ／ｋｇ·日和大豆皂甙（ＳＳ）１０ｍｇ／ｋｇ·日２０周，观察ＧＳ和ＳＳ对ＤＭ大鼠血糖、胰岛素、血小板聚集率（ＰＡＲ）和ＴＸＡ２／ＰＧＩ２（Ｔ／Ｐ）的影响。结果显示ＧＳ和ＳＳ均能降低ＤＭ大鼠的血糖、ＰＡＲ和Ｔ／Ｐ值，提高胰岛素水平。     

G蛋白对阿片受体调节延迟整流钾通道的影响

目的观察G蛋白在阿片受体激动剂对钾通道的双相调节中所起的作用。方法利用膜片钳技术(patchclamp),采用全细胞记录方式,观察在电极液中分别加入G蛋白稳定抑制剂(GDPβS)、百日咳毒素(PTX)、二磷酸核苷酸激酶(NDPK)及环磷酸腺苷(cAMP)后,对阿片受体激动剂调节NG108-15细胞膜延迟整流钾通道作用的影响。结果(1)GDPβS能够阻断高浓度δ-阿片受体选择性激动剂(DPDPE)对钾电流的兴奋作用及低浓度DPDPE对钾电流的抑制作用(P<0.05)。(2)高浓度DPDPE对钾电流的兴奋性调节作用完全被PTX阻断(P<0.05),而霍乱毒素CTX对DPDPE对钾电流的双相调节作用无影响。(3)尿苷二磷酸(UDP)能够阻断NDPK对高浓度阿片受体激动剂对细胞膜钾通道兴奋性调节作用,而UDP对低浓度阿片受体激动剂的抑制作用无影响。(4)cAMP对高浓度阿片受体激动剂具有调节作用(P<0.05),而对低浓度阿片受体激动剂的抑制作用无影响。结论阿片受体对NG108-15细胞膜上延迟整流钾通道具有双相调节作用,其中高浓度激动剂引起的兴奋作用可能由Gi/o介导,并与cAMP有关,而其抑制作用可能是由G蛋白βγ亚单位直接作用。     

一种有效记录人心房肌细胞小电导钙激活钾通道电流的方法

目的：探讨一种有效的记录人心房肌细胞小电导钙激活钾通道（small conductance Ca2＋-activated K＋channels,SK）电流的全细胞膜片钳方法。方法：以人心房肌细胞为研究对象,采用传统全细胞膜片钳技术,记录人心房肌细胞的小电导钙激活钾通道的宏观电流。传统全细胞模式形成后,分别记录在浴液中加入apamin（100 nM）前后的电流,两者相减就得到了apamin敏感的SK2的电流。结果：采用传统全细胞膜片钳技术,能有效记录人心房肌细胞上apamin敏感的宏观电流。该电流是内向整流,去极化激活时,无明显失活现象,无尾电流出现,这些都符合SK2电流特性。结论：本实验提供了一种简单、有效的记录人心房肌细胞SK2宏观电流的方法,为今后深入的研究提供了实验基础。     

M受体-G蛋白信号转导途径研究进展

毒蕈碱乙酰胆碱受体（mAChR）是G蛋白偶联受体超家族中的一员，具有该家族特征性的结构和信号转导方式。GTP结合蛋白（G protein）是一类具有GTP酶活性的蛋白质，由α、β和γ三个亚基构成。mAChR可以与G蛋白偶联，引起GTP与α亚基结合，导致Gα与Gβγ分离。近年来发现，不但Gα-GTP可以调节效应分子，Gβγ也可以调节许多效应分子如腺苷酸环化酶、磷脂酶C、K⁺通道、Ca²⁺通道、MAPK和受体激酶等，介导一系列的生物学效应，在信号转导过程中发挥重要的作用。     

氯胺酮对大鼠海马神经元瞬间外向钾电流的抑制作用

目的：观察氯胺酮对大鼠海马锥体神经元瞬间外向钾电流（I_A）的影响。方法：酶消化法急性分离Wistar大鼠海马锥体神经元,采用全细胞膜片钳技术测定I_A。加用不同浓度（10、30、100、300和1 000 μmol/L）氯胺酮后,计算I_A抑制率,建立氯胺酮的浓度-效应曲线,选择30 μmol/L氯胺酮作I_A稳态激活（及失活）曲线。结果：10 μmol/L的氯胺酮对I_A的电流幅度无影响;30、100、300和1 000 μmol/L的氯胺酮对I_A的电流幅度抑制率分别为（11±2）%、（22±3）%、（45±5）%和(53±5)%。IC₅₀为（130±24）μmol/L, Hill系数为1.19±0.56。30 μmol/L氯胺酮使激活曲线的半数最大激活膜电位（V _{1/ 2}）从（-8.70±0.13） mV 移动到 （-11.2±2.10） mV (n=8, P<0.05), K从（15.0±4.6） mV移动到（17.6±5.7）mV (n=8, P>0.05);失活曲线的V _1/2从（-75.53±7.98） mV移动到（-91.94±11.85） mV（n=8, P < 0.05）,K从（10.5±2.2） mV移动到（8.0±1.2） mV（n=8, P>0.05）。30 μmol/L氯胺酮使I_A的激活和失活曲线均向超极化方向明显移动。 结论： 临床浓度的氯胺酮能够同时加速I_A的激活和失活过程,但加速I_A失活的能力大于其加速I_A激活的能力。氯胺酮对中枢神经系统的作用可能与I_A抑制有关。     

Interplay of hydrogen sulfide and nitric oxide on the pacemaker activity of interstitial cells of cajal from mouse small intestine

We studied whether nitric oxide (NO) and hydrogen sulfide (H(2)S) have an interaction on the pacemaker activities of interstitial cells of Cajal (ICC) from the mouse small intestine. The actions of NO and H(2)S on pacemaker activities were investigated by using the whole-cell patch-clamp technique and intracellular Ca(2+) analysis at 30℃ in cultured mouse ICC. Exogenously applied (±)-S-nitroso-N-acetylpenicillamine (SNAP), an NO donor, or sodium hydrogen sulfide (NaHS), a donor of H(2)S, showed no influence on pacemaker activity (potentials and currents) in ICC at low concentrations (10 μM SNAP and 100 μM NaHS), but SNAP or NaHS completely inhibited pacemaker amplitude and pacemaker frequency with increases in the resting currents in the outward direction at high concentrations (SNAP 100 μM and NaHS 1 mM). Co-treatment with 10 μM SNAP plus 100 μM NaHS also inhibited pacemaker amplitude and pacemaker frequency with increases in the resting currents in the outward direction. ODQ, a guanylate cyclase inhibitor, or glibenclamide, an ATP-sensitive K(+) channel inhibitor, blocked the SNAP+NaHS-induced inhibition of pacemaker currents in ICC. Also, we found that SNAP+NaHS inhibited the spontaneous intracellular Ca(2+) ([Ca(2+)](i)) oscillations in cultured ICC. In conclusion, this study describes the enhanced inhibitory effects of NO plus H(2)S on ICC in the mouse small intestine. NO+H(2)S inhibited the pacemaker activity of ICC by modulating intracellular Ca(2+). These results may be evidence of a physiological interaction of NO and H(2)S in ICC for modulating gastrointestinal motility.     

骨髓间充质干细胞离子通道的表达及意义

目的：研究分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）膜表面离子通道的表达,为研究干细胞在分化过程中离子通道变化奠定基础。方法：采用Percoll分离液体外分离法,体外培养出能稳定传代的大鼠BMSCs,利用膜片钳技术记录BMSCs的离子电流。通过设定不同的实验程序,记录通道电流的幅度、激活和失活电流的峰值与时程、离子通道的选择性、Ⅰ-Ⅴ曲线。利用各种通道阻滞剂对记录到的电流进行鉴定、分析。结果：培养的细胞接种后24 h开始贴壁,传代后细胞呈漩涡状。流式细胞术检测培养的细胞CD71、CD44呈阳性,CD34、CD45阴性,证实其为大鼠BMSCs。利用膜片钳技术在大鼠BMSCs上记录到延迟整流钾电流,并且在24%的BMSCs中发现了对河豚毒素（TTX）敏感的钠电流,在25%的BMSCs中记录到L-型电压依赖型钙电流。RT-PCR法证实BMSCs存在SCN5A、 Kv4.3 和CACNA1C 3种通道。结论：记录到的离子电流具有兴奋细胞的特点。     

Flunarizine inhibits sensory neuron excitability by blocking voltage-gated Na+ and Ca2+ currents in trigeminal ganglion neurons

Background  Although flunarizine has been widely used for migraine prophylaxis with clear success, the mechanisms of its actions in migraine prophylaxis are not completely understood. The aim of this study was to investigate the effects of flunarizine on tetrodotoxin-resistant Na⁺ channels and high-voltage activated Ca²⁺ channels of acutely isolated mouse trigeminal ganglion neurons.

Methods  Sodium currents and calcium currents in trigeminal ganglion neurons were monitored using whole-cell patch-clamp recordings. Paired Student’s t test was used as appropriate to evaluate the statistical significance of differences between two group means.

Results  Both tetrodotoxin-resistant sodium currents and high-voltage activated calcium currents were blocked by flunarizine in a concentration-dependent manner with the concentration producing half-maximal current block values of 2.89 μmol/L and 2.73 μmol/L, respectively. The steady-state inactivation curves of tetrodotoxin-resistant sodium currents and high-voltage activated calcium currents were shifted towards more hyperpolarizing potentials after exposure to flunarizine. Furthermore, the actions of flunarizine in blocking tetrodotoxin-resistant sodium currents and high-voltage activated calcium currents were use-dependent, with effects enhanced at higher rates of channel activation.

Conclusion  Blockades of these currents might help explain the peripheral mechanism underlying the preventive effect of flunarizine on migraine attacks.

     

褪黑激素对新生大鼠海马神经元延迟整流钾电流的影响

目的 用膜片钳技术观察褪黑激素对电压门控性延迟整流钾电流(Ik)的影响,探讨褪黑激素在中枢神经系统的作用机制及其生物学意义.方法 选择7～12 d原代培养的新生Wistar大鼠海马锥体神经元,用膜片钳电压钳全细胞记录模式观察Ik的基本电生理特点,并观察不同浓度褪黑激素,包括1、10、100 nmol/L、1、10、100 μmol/L和1 mmol/L对Ik的幅度及动力学特性的影响.结果 利用海马锥体神经元的钾电流对4-AP、TEA的敏感性及电生理特性的不同可分离出激活、失活缓慢,具有强烈外向整流特性的延迟整流钾电流.褪黑激素对海马锥体神经元Ik的影响是快速、可逆、呈电压依赖性的,但对其激活曲线没有影响.褪黑激素对Ik的作用具有浓度依赖性.1～100nmoI/L的褪黑激素可逐渐递增地增加Ik幅度;1～100 μmol/L褪黑激素对Ik的增加程度随浓度增加而增大,而1 mmol/L褪黑激素的增加程度却减小.结论 褪黑激素可逆地增强体外培养新生大鼠海马神经元的Ik电流,这或许参与了神经元损伤和记忆损害的某些环节.     

小鼠初级听皮层SOM中间神经元突触输入的时空特性研究

目的 研究小鼠初级听皮层SOM+神经元接受刺激后突触输入的时空特性.方法 通过局部场电位记录方法对初级听皮层进行定位后,采用电压钳全细胞记录方法在离体脑片上分别记录SOM+神经元和锥体神经元在接受刺激后诱发的兴奋后突触后电流和抑制性突触后电流.通过对两类神经元的兴奋性突触后电流和抑制性突触后电流时间特性以及幅度上的比较,从而分析SOM+神经元突触输入的时空特性.结果 SOM+神经元与锥体神经元的突触输入在时间特性上表现出相似的起始潜伏期.SOM+神经元的兴奋性突触后电流和抑制性突触后电流的峰值潜伏期[(14.35 ±2.74) ms,(18.26 ±3.24) ms]明显要短于锥体神经元的兴奋性突触后电流和抑制性突触后电流的峰值潜伏期[(18.81 ±3.76) ms,(21.08 ±3.93)ms],差异具有统计学意义(EPSC P＜0.05,IPSC P＜0.01).在突触后电流的幅度上两类神经元差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 SOM+中间神经元接受的突触输入与锥体神经元接受的突触输入在基本电生理特性上类似,但时间特性上的差异提示两者接受的突触输入在皮层内环路来源上可能存在一定差异.