IL-6对M1型巨噬细胞向肿瘤相关M2型巨噬细胞转化过程的诱导作用

目的 共培养小鼠M1型巨噬细胞RAW 264.7与乳腺癌细胞4T1,观察白介素6(IL-6)在 M1型巨噬细胞向肿瘤相关M2型巨噬细胞转化过程中的作用.方法 实验共分为以下3组:A组(4T1细胞),B组(RAW 264.7细胞),C组(RAW264.7与4T1以1:4比例混合培养).流式细胞技术检测M2型巨噬细胞比例,随后加入IL-6特异性抑制剂激活素A(ACTA,25μg/ml)或重组IL-6(rIL-6,10μg/ml)后再行检测.RT-PCR检测M1、M2型巨噬细胞功能相关细胞因子及IL-6、IL-6Rα的mRNA表达量.ELISA法检测3组细胞上清中IL-6的含量,随后改变两种细胞的混合比例后再行检测.结果 RAW264.7和4T1细胞共培养后,M2型巨噬细胞比例显著增加,添加ACTA后该比例显著下降,而添加rIL-6后该比例增加.与B组比较,C组的M2型巨噬细胞相关细胞因子(CCL22、CCL2、YM1、PDGF-c、HIMP、MMP-9、IL-10)mRNA表达水平明显增高,M1型巨噬细胞相关因子(IL-12、IL-15、IL-18)mRNA表达水平明显降低.IL-6 mRNA在A组呈微量表达,在B组元表达,在C组表达明显增高,而IL-6Ra mRNA在3组中均呈高表达.与A、B组比较,C组细胞上清液中IL-6含量明显增加(P均<0.05);以不同比例将两种细胞混合后发现RAW264.7细胞数量的改变显著影响了共培养细胞上清中IL-6的水平.结论 将4T1和RAW264.7细胞共培养后,前者能促进后者分泌IL-6,并诱导其向肿瘤相关M2型巨噬细胞转化.IL-6在转化过程中发挥重要作用,阻断其作用可以遏制转化.     

DDX5基因表达下调对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭影响

目的探讨DDX5基因表达下调对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用慢病毒介导的DDX5-shRNA下调人胃癌HGC-27细胞中DDX5的表达。实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹(Western blot)法验证下调效果。CCK8和平板克隆检测细胞增殖能力,Transwell检测细胞迁移和侵袭能力的改变。结果 DDX5-shRNA可有效下调人胃癌HGC-27细胞中DDX5的mRNA和蛋白质表达。DDX5表达下调后,人胃癌HGC-27细胞的增殖受到抑制,24、48、72 h细胞增殖能力较转染了control-shRNA的细胞分别降低25.0%、33.3%和44.6%;转染了control-shRNA的细胞和转染了DDX5-shRNA的细胞克隆形成的数目分别为(162.6±10.3)个和(68.7±11.2)个,两组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);转染了control-shRNA的细胞和转染了DDX5-shRNA的细胞24 h迁移数目分别为(153.7±9.2)个和(78.0±6.7)个,两组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);转染了control-shRNA的细胞和转染了DDX5-shRNA的细胞24 h侵袭数目分别为(83.7±12.8)个和(40.2±7.6)个,两组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DDX5表达下调可明显抑制人胃癌HGC-27细胞的增殖、迁移及侵袭,其有可能成为胃癌的治疗靶点。     

胃癌中TIMP3基因的甲基化与表达间的相关性分析

目的探讨转移抑制基因TIMP3(金属组织蛋白酶抑制因子-3)在胃癌和胃癌细胞系中启动子甲基化及其蛋白和mRNA表达的特点,并分析两者之间的关联。方法应用MSP法检测TIMP3基因启动子区的甲基化状态;RT-PCR和免疫组织/细胞化学法检测TIMP3基因mRNA和蛋白的表达;观察DNA去甲基化剂(5-aza-2’-deoxycitydine)对人胃癌细胞系(MGC803和HGC-27)细胞系TIMP3基因表达的影响。结果TIMP3基因于胃癌组织中的甲基化频率为17/33(51.5%);四个胃癌细胞系均存在TIMP3基因的甲基化,而MGC803、BGC823和HGC-27仍有该基因的表达或低水平表达;在去甲基化剂的作用下TIMP3基因的表达水平明显上调。结论TIMP3的异常甲基化是其表达下调或沉默的主要原因并存在部分甲基化的倾向。该指标可作为胃癌的敏感性表观遗传学标记物在胃癌的筛查和诊断中应用。     

真核起始因子(eIF6)对M2型巨噬细胞炎性介质表达的影响

目的探讨真核细胞起始因子(e IF6)基因对M2型巨噬细胞纤维化相关因子分泌及重要蛋白酶表达的影响。方法采用e IF6野生型(e IF6+/+)及敲降型(e IF6+/-)C57BL/6雄性小鼠,腹腔灌洗获得巨噬细胞,通过白介素4(IL-4)诱导形成M2型巨噬细胞。应用基因芯片比较e IF6+/+与e IF6+/-小鼠M2型巨噬细胞基因表达谱的差异,并通过RT-PCR及ELISA对芯片检测结果进行验证。结果基因芯片检测结果显示,与e IF6+/-小鼠组比,e IF6+/+小鼠M2型巨噬细胞中血管内皮生长因子(VEGF)及金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)基因表达显著下调,基质金属蛋白酶2(MMP-2)基因表达显著上调。RT-PCR及ELISA检测结果显示,与e IF6+/-小鼠相比,e IF6+/+小鼠M2型巨噬细胞中VEGF、TIMP-2 m RNA及蛋白表达水平明显下降(P<0.05),而MMP-2 m RNA及蛋白表达水平明显上升(P<0.05)。结论 e IF6可能通过抑制VEGF生成而防止血管及肉芽组织过度增生,同时通过调节MMP-2/TIMP-2的比例以平衡细胞外基质的降解与沉积,从而缓解瘢痕形成。     

低氧预处理的人脐带间充质干细胞对巨噬细胞极化的调节作用观察

目的 探讨低氧培养的人脐带间充质干细胞对巨噬细胞极化的影响.方法 采用组织块贴壁法获取人脐带来源的间充质干细胞(hUC-MSCs),分别将细胞置入常氧(氧浓度21％)和低氧(氧浓度5％)条件下培养,通过细胞成脂、成骨分化诱导观察其多向分化能力,Live/death染色检测细胞活性,ELISA法检测其细胞因子蛋白含量.利用Transwell将常氧和低氧培养的hUC-MSCs与脂多糖(IPS)刺激后的巨噬细胞(THP-1)共培养,免疫荧光检测THP-1的极化情况,ELISA检测THP-1分泌炎症因子以及抗炎因子的情况.结果 低氧条件下培养的hUC-MSCs具有成脂、成骨的多向分化潜能;Live/death染色结果显示常氧和低氧培养下的hUC MSCs均具有较高的细胞活性;低氧条件下培养的hUC-MSCs中前列腺素E2(PGE2)、吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)表达水平明显高于常氧培养的hUC-MSCs;低氧条件下培养的hUC-MSCs可促进THP-1向M2型巨噬细胞转化,同时炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的表达明显降低,而抗炎因子IL-10的表达明显增强.结论 低氧培养的hUC-MSCs可促使THP-1 向M2巨噬细胞转化,提高其抗炎能力.     

线粒体钙单向转运体在模拟失重所致巨噬细胞极化改变中的调控作用研究

目的 探究线粒体钙单向转运体(mitochondrial calcium uniporter,MCU)在模拟失重状态下对巨噬细胞极化的调控作用及其机制。方法 体外培养小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM),采用配对比较法将野生型(wild type,WT)小鼠的BMDM分为2D回转模拟失重组和同步对照组,2D回转模拟失重组细胞在2D细胞回转仪中回转24 h模拟失重效应,同步对照组细胞在2D细胞回转仪中静置24 h;按照小鼠基因型将2D回转模拟失重的细胞分为LysM ^Cre、MCU ^{f l/f l}与同窝对照MCU ^{f l/f l}组,2组均在2D细胞回转仪中回转24 h模拟失重效应。采用实时荧光定量核酸扩增检测系统(realtime quantitative PCR detecting system,Q-PCR)和流式细胞术检测BMDM向M1、M2型巨噬细胞极化的能力;蛋白免疫印迹检测BMDM在模拟失重状态下巨噬细胞线粒体融合分裂蛋白的表达水平;实时荧光定量核酸扩增检测...     

CUL3对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用及其机制

目的 探讨泛素连接酶Cullin3(CUL3)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法基于TCGA数据库分析CUL3在胃癌和癌旁组织中的表达及其与临床预后的关系。采用CUL3 shRNA和空载慢病毒转染HGC-27和BGC-823细胞，构建CUL3敲低胃癌细胞系组(shCUL3组)与空载慢病毒转染组(空载组)。采用CCK-8法、克隆形成实验、EdU染色、划痕实验和Transwell实验检测两组的增殖、迁移和侵袭能力；采用Western blotting检测两组上皮-间质转化(EMT)相关蛋白和PI3K/Akt/GSK3β通路蛋白的表达情况；应用PI3K激动剂740 Y-P后检测shCUL3组细胞迁移和侵袭能力的变化。结果 TCGA数据库中CUL3在胃癌中呈高表达，且与胃癌患者预后不良明显相关。CCK-8、克隆形成实验和EdU染色结果显示，与空载组比较，shCUL3组胃癌细胞增殖能力受到抑制(P<0.05)，且CUL3 shRNA可明显抑制细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05)。与空载组比较，shCUL3组E-cadherin蛋白表达升高，波形蛋白、β-caten...     

巨噬细胞对血管内皮细胞周期和VEGF受体、HOXB2 mRNA表达的影响

目的　研究巨噬细胞调节内皮细胞参与血管生成的机制。方法　将人脐静脉血管内皮细胞系 (ECV 30 4 )细胞接种培养 ,待细胞 6 0 %融合时 ,以刀豆蛋白A(ConA)作为人巨噬细胞系U937的激活剂 ,将细胞分为 4组进行培养 ,即单纯ECV 30 4培养组 (对照组 ) ,ConA与ECV 30 4共培养组 ,U937与ECV 30 4共培养组 ,ConA、U937与ECV 30 4共培养组。于共培养 4 8h后在倒置显微镜下观察细胞形态学的变化 ;用流式细胞仪检测细胞周期的变化 ;用RT PCR技术检测内皮细胞VEGF受体KDR和同源盒 (homeobox)HOXB2mRNA表达水平的变化。结果　ConA刺激的U937细胞使内皮细胞间隙变大 ,细胞出现明显的类似神经元样的突起 ,形态不一 ,且S期明显增加(P <0 0 1) ,并使内皮细胞VEGF受体KDR和HOXB2mRNA的表达水平明显上调 (P <0 0 1)。结论　ConA活化的巨噬细胞通过影响内皮细胞的形态、细胞周期、KDR及HOXB2mRNA的表达来促进内皮细胞的增殖和迁移 ,从而调节血管的生成     

高盐诱导下以 TonEBP/NF-κB 通路为基础的小鼠巨噬细胞表型偏移机制的研究

 目的 探讨高盐刺激下巨噬细胞表型偏移的可能机制,为相关心血管疾病的防治提供新的实验依据。方法 选取Raw264.7小鼠巨噬细胞为研究对象,构建TonEBP慢病毒干扰稳定细胞株,利用Real-time PCR技术检测TonEBP干扰效率,选取干扰效率最高的感染组细胞株用于后续实验。给予各组相应干预后同步培养24 h,利用Real-time PCR检测各组细胞TonEBP、NF-κB及其M1、M2型巨噬细胞表型标志物mRNA的表达水平;Western blot法检测各组TonEBP、NF-κB、pNF-κB、pIKKα/β的蛋白表达水平。结果 成功构建TonEBP -shRNA稳定干扰细胞株,与Control组相比其TonEBP干扰效率达70％;Real-time PCR结果显示单纯高盐干预下Raw264.7细胞TonEBP、NF-κB和M1型巨噬细胞表型标志物的mRNA表达水平显著上调(P＜0.05),M2型巨噬细胞表型标志物mRNA表达水平显著下调(P＜0.05);高盐刺激下分别干扰TonEBP、NF-κB的表达后,M1型巨噬细胞表型标志物的mRNA表达水平显著下调,M2型巨噬细胞表型标志物mRNA表达水平显著上调。Western blot结果显示单纯高盐刺激下Raw264.7细胞TonEBP、p-IKKα/β、NF-κB、p-NF-κB的蛋白表达水平均明显上调,NF-κB,p-NF-κB,p-NF-κB与NF-κB比值增加;高盐刺激下分别干扰TonEBP、NF-κB的表达后,p-IKKα/β、p-NF-κB蛋白表达水平均显著下调。结论 TonEBP/NF-κB信号通路的激活是高盐刺激下Raw264.7细胞向M1型巨噬细胞发生偏移的可能机制;调节TonEBP/NF-κB信号通路,可改变高盐诱导下Raw264.7细胞表型偏移方向。     

安罗替尼联合抗PD-1抗体重塑小鼠结肠癌模型免疫微环境的机制研究

目的 探讨抗血管生成小分子药物安罗替尼联合抗PD?1抗体对小鼠结肠癌的抑制效应,并探索其可能的重塑肿瘤免疫微环境机制。方法 构建肠癌细胞CT26荷瘤BALB/c小鼠模型,随机分为对照组、安罗替尼组、抗PD?1抗体组和安罗替尼/抗PD?1抗体联合组,每组6只。期间每2 d用游标卡尺测量肿瘤体积,在实验结束(d14)后对各组移植瘤称重,并使用流式细胞仪检测肿瘤组织中免疫浸润细胞如CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、单核细胞型髓源性抑制细胞(M?MDSC)、粒细胞型髓源性抑制细胞(G?MDSC)以及M2型肿瘤相关巨噬细胞(M2型TAM)数量变化。采用ELISA方法检测小鼠血清中血管内皮生长因子(VEGF)、干扰素γ(IFN?γ)、白细胞介素17(IL?17)和IL?10的水平。结果 与对照组、安罗替尼组及抗PD?1抗体组相比,联合组小鼠移植瘤体积及重量下降(P<0.05),细胞因子VEGF、IL?10水平下降(P<0.05),IL?17水平下降(P<0.01),IFN?γ水平升高(P<0.05)。在免疫浸润细胞数量方面,与对照组...     

β3肾上腺素能受体激动剂对小鼠巨噬细胞胞葬的影响

目的 探讨β₃肾上腺素能受体(β₃ adrenoceptor,β₃ AR)激动剂对小鼠巨噬细胞胞葬的影响及其可能机制。方法 (1)紫外线照射诱导Jurkat细胞凋亡。紫外线分别照射Jurkat细胞60、75、90 min后,以Annexin V-FITC/PI标记,运用流式细胞仪检测Jurkat细胞凋亡率。(2)构建巨噬细胞胞葬模型。以荧光探针分别标记RAW264.7细胞和Jurkat细胞,将紫外线照射后凋亡Jurkat细胞加入巨噬细胞中共培养,构建巨噬细胞胞葬模型。运用流式细胞术分别比较加药组和对照组巨噬细胞胞葬率。(3)检测β₃ AR及胞葬相关分子mRNA表达水平。运用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)进一步检测对照组和1μmol/L β₃ AR激动剂组β₃ AR及胞葬相关分子mRNA表达水平。结果 (1)与对照组比较,紫外线照射60、75、90 min后Jurkat细胞晚期凋亡率均显著升高[(8.17±1.27)%vs(39.7±14.63)%...     

葛根素对支气管上皮细胞和中性粒细胞共培养体系中黏附分子表达的影响

目的 探讨葛根素抑制支气管上皮细胞(BEAS-2B)与中性粒细胞(NEU)的相互作用进而调控气道炎症反应的机制.方法 实验分为BEAS-2B单独培养组、NEU单独培养组、BEAS-2B+NEU共培养组、BEAS-2B+NEU+50μg/ml葛根素共培养组、BEAS-2B+NEU+100μg/ml葛根素共培养组、BEAS-2B+NEU+200μg/ml葛根素共培养组,应用流式细胞术检测BEAS-2B和NEU两种细胞中胞间黏附分子ICAM-1、ICAM-3蛋白的表达,Real-time PCR检测两种细胞中ICAM-1、ICAM-3 mRNA的表达.结果 与单独培养组相比,BEAS-2B+NEU共培养组中BEAS-2B细胞ICAM-1、ICAM-3及NEU细胞ICAM-1蛋白和mRNA表达均明显增强(P＜0.05,P＜0.01),而NEU细胞ICAM-3蛋白和mRNA表达无明显改变(P＞0.05).在BEAS-2B+NEU共培养体系中分别加入50、100、200μg/ml葛根素干预后,流式细胞术检测显示仅葛根素浓度为200μg/ml时BEAS-2B细胞ICAM-1蛋白表达显著低于BEAS-2B+NEU共培养组(P＜0.05),余与BEAS-2B+NEU共培养组比较差异均无统计学意义,而Real-time PCR检测显示,除NEU细胞的ICAM-3 mRNA与BEAS-2B+NEU共培养组比较差异无统计学意义外,余均显著低于BEAS-2B+NEU共培养组(P＜0.05,P＜0.01).结论 葛根素可有效抑制BEAS-2B与NEU共同培养诱导的BEAS-2B及NEU细胞ICAM-1、ICAM-3基因和蛋白的表达.     

腺病毒介导p53基因转染增加人胃癌细胞的放射敏感性

目的评价腺病毒介导p53基因(Adp53)转染对人胃癌细胞的凋亡效应和放射增敏作用。方法以重组腺病毒介导p53基因感染4种不同p53状况的人胃癌细胞，用免疫组织化学法和Western blot法检测P53蛋白在胃癌细胞中的表达；用细胞集落形成法检测细胞存活率；用TUNEL法检测细胞凋亡。胃癌细胞感染Adp53后照射4Gy，用流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡；胃癌细胞种植肿瘤内注射Adp53后照射6Gy，以肿瘤相对体积增长曲线观察肿瘤抑制情况。结果1：100效靶比(MOI)Adp53产生细胞高转染率，以及p53基因在4种胃癌细胞中均高表达，并产生G2/M期阻滞、凋亡增加和细胞增殖抑制。如果以凋亡评价放射效应，Adp53转染对4Gy照射4种细胞的凋亡率比值为：W细胞3．0，M细胞3．6，neo细胞2．2，823细胞2．5。体内实验结果显示，Adp53对w细胞肿瘤6Gy照射的抑瘤率比值为1．41，而对M细胞肿瘤为1．91。结论腺病毒介导p53基因转染产生细胞凋亡并提高人胃癌细胞的放射敏感性，这种作用不依赖于细胞内在的p53状况。     

TRIM33基因对人胃癌细胞SGC-7901增殖及迁移的影响及意义

目的 观察三结构域家族33(TRIM33)基因对人胃癌细胞SGC-7901增殖及迁移的影响及意义.方法 通过TCGA和TIMER数据库分析TRIM33在胃正常黏膜组织和胃癌组织中的表达及与临床病理特征、预后的关系.将人胃癌细胞SGC-7901分为阴性对照组(NC组)、对照组(空载体组)与转染组(si-TRIM33组),...     

巨噬细胞胆碱能通路对急性缺糖缺氧性肾小管细胞损伤的影响

目的 探讨胆碱能通路对急性缺糖缺氧性肾小管细胞损伤的影响.方法 分离培养大鼠肾内巨噬细胞,构建巨噬细胞与肾小管上皮细胞共培养体系及缺糖缺氧(OGD)细胞模型,据处理不同将细胞分为OGD组、乙酰胆碱(ACh 100μmol/L)+OGD组和ACh+加兰他敏(Gal 10μmol/L)+OGD组.采用ELISA法检测各组上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-10的表达;MTT法检测肾小管细胞活力;RT-qPCR及Western blotting检测胆碱酯酶(AChE)mRNA和蛋白表达;比色法检测AChE活性.结果 ACh+OGD组TNF-α和IL-1β水平均低于OGD组,加入Gal之后,TNF-α和IL-1β水平进一步下降;ACh+OGD组肾小管活力高于OGD组,加入Gal之后,肾小管活力进一步增强,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).3组之间巨噬细胞AChE mRNA和蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05).与OGD组比较,ACh+OGD组与ACh+Gal+OGD组肾小管细胞活力减弱,但ACh+OGD组与ACh+Gal+OGD组间差异无统计学意义(P=0.368).结论 ACh和Gal可抑制肾脏巨噬细胞分泌炎性介质并抑制胆碱酯酶活性,减轻急性缺氧性肾小管细胞损伤.调控巨噬细胞的胆碱能通路可能是未来急性缺氧性肾损伤的治疗方向.     

急性酶解血管平滑肌及Genistein对其泡沫化的影响

目的 探讨大豆异黄酮(Genistein)对原代大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞(MASMC)泡沫化影响.方法 木瓜蛋白酶-胶原酶F消化法获取MASMC,与氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)共培养建立泡沫细胞模型,分为对照组、模型组、Genistein组、大豆苷元(Daidzein)组、酪氨酸激酶抑制剂(Tyrphostin)...     

雷帕霉素激活M2巨噬细胞自噬影响大肠癌放射敏感性的研究

目的 探讨雷帕霉素(RAP)激活M2巨噬细胞(type-Ⅱ macrophage)自噬对大肠癌移植瘤放射敏感性的影响。方法 经佛波酯(PMA)单独及联合人重组白介素4(IL-4)诱导人单核白血病细胞THP-1分化为M0和M2型巨噬细胞。使用RAP激活M2自噬,设置巴弗洛霉素(bafilomycin A1)下调M2已被激活的自噬作为对照。将大肠癌LoVo细胞接种于BALB/c-nu/nu裸鼠,待形成直径10 mm瘤体后,利用随机数表法,将18只裸鼠分为M2自噬未激活组、激活组和激活后下调组,LoVo细胞单独成瘤为阴性对照组,每组6只。对荷瘤鼠行2次8 Gy X射线局部照射,分析各组间移植瘤放射敏感性的变化。结果 M2巨噬细胞标志物Arg-1、CCL-22的相对表达量显著高于M0巨噬细胞(t=78.77、60.02,P＜0.05)。M2自噬未激活组瘤体质量、体积和微血管密度(MVD)[(1.93±0.05)g、(2.14±0.06) cm³、36.37±1.04]较阴性对照组[(1.35±0.05) g、(1.77±0.02) cm³、25.69±1.34]显著提高(t=20.07、14.56、10.92,P＜0.05);激活M2自噬后,瘤体重量、体积和微血管密度均显著下降[(0.89±0.03) g、(1.24±0.01) cm³、13.60±1.52](t=44.37、40.32、21.43,P＜0.05)。利用巴弗洛霉素下调M2自噬后,瘤体质量、体积和微血管密度有所回升[(1.02±0.07) g、(1.37±0.02) cm³、21.06±1.41](t=4.67、13.79、6.23,P＜0.05)。与阴性对照组相比,自噬未激活的M2能够抑制Livin和Survivin在瘤体组织中的表达(t=2.64、7.90,P＜0.05);RAP激活M2自噬后,可进一步下调上述蛋白的表达(t=5.43、9.39,P＜0.05)。利用巴弗洛霉素下调M2自噬后,Livin、Survivin表达量均有所回升(t=2.80、3.17,P＜0.05)。结论 利用RAP激活M2自噬,可抑制M2促进肿瘤微血管形成的能力,从而抑制移植瘤生长;同时,通过下调大肠癌移植瘤中抗凋亡基因Livin与Survivin的表达,诱导大肠癌移植瘤放疗后凋亡的发生,提高大肠癌的放射敏感性。     

急性非淋巴细胞性白血病细胞共刺激分子的表达

目的：检测急性非淋巴细胞白血病患者白血病细胞表面MHC—Ⅱ类分子和共刺激分子的表达情况。方法：采集骨髓中白血病细胞大于70％的27例初诊或复发息者骨髓细胞。荧光抗体标记。应用流式细胞仪进行HLA—DR、CD80(B7-1)和CI)和(B7—2)免疫标记检测。结果：27例病人除M3型表达明显低于其他各型外。HLA—DR抗原的表达均较高。其中M2型最高为90％；CD80阳性率很低，最高为M1型只有5％。其余均在l％～3％之间。CD86的表达高于CD80，最高为M5型为48％，最低为M6型为11％。结论：白血病细胞表面共刺激分子表达以CD80缺乏为主。     

巨噬细胞条件培养基对人视网膜色素上皮细胞活性和增殖的影响

 目的探讨激活的巨噬细胞和未激活的巨噬细胞刘视网膜色素上皮(Retinal pigment epithelial,RPE)细胞活性和增殖的影响.方法制备脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)激活的和未激活的人腹腔巨噬细胞条件培养基(MψCM),取3种不同的浓度,分别施加于纯化培养的胎眼RPE细胞,作用24、48、72 h,用MTT比色法测定RPE细胞的OD值.结果LPS激活的MψCM(L-MψCM)和未激活的MψCM(N-MψCM)取不同浓度作用不同时间后均能不同程度地促进RPE细胞的活性和增殖,其中L-MψCM的作用明显强于N-MψCM.结论MψCM中含有促RPE细胞增殖的因子,可能L-MψCM中的促增殖因子在质和量上优于N-MψCM.     

有氧游泳运动对衰老过程大鼠海马IL-6、IL-10及小胶质细胞的影响

目的:探讨有氧运动对衰老过程大鼠海马小胶质细胞、IL-6、IL-10及学习记忆能力的影响。方法:按照处理条件不同将30只SD大鼠分为生理盐水安静组(SS)、D-半乳糖安静组(DS)和D-半乳糖运动组(DE),每组10只。大鼠腹腔注射D-半乳糖150 mg/kg/d,建立衰老模型;DE组每天游泳60 min,5 d/w,持续运动12周。采用免疫荧光染色和Western blot检测大鼠海马内小胶质细胞、IL-6及IL-10的表达;Morris水迷宫观察各组大鼠空间记忆能力变化。结果:(1)Morris水迷宫结果显示,进行有氧游泳训练后,DE组逃避潜伏期和到达平台游过距离较DS组显著缩短(P<0.05),且DE组目标象限停留时间较DS组显著延长8.7s(P<0.05),而与SS组相比无显著差异。(2)免疫荧光染色结果显示,DS组活化状态的小胶质细胞较SS组显著增加(P<0.05),DE组活化状态的小胶质细胞较DS组显著下降20%(P<0.05);(3)DS组海马脑区IL-6阳性细胞数显著高于SS组和DE组(P<0.05);(4)DE组IL-10阳性细胞数较DS组显著增加11%(P<0.05);Western blot实验结果也表明DE组IL-10的表达水平较DS组显著增加0.6倍(P<0.01)。结论:(1)注射D-半乳糖可引起大鼠海马内小胶质细胞活化并释放炎性因子,诱导大鼠出现学习记忆能力下降的衰老表型;(2)有氧运动能够抑制小胶质细胞活化,减轻衰老过程大鼠脑内炎症反应,改善其学习记忆能力。