c-myc、c-myb基因在白血病骨髓基质细胞中的表达及相关性研究

本研究检测分析c-myc、c-myb原癌基因在白血病细胞和骨髓基质细胞(BMSC)中的表达及其相关性。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术定量分析原癌基因c-myc、c-myb的表达水平,通过流式细胞术分析白血病细胞和BMSC的膜表面抗原,同时采用染色体显带技术分析细胞核型。结果表明:①c-myc、c-myb基因在白血病细胞及其BMSC中均有一定的表达,尤其是在染色体异常的白血病细胞中高表达,其均值分别为1.15±0.38和1.03±0.48,与对照组比较均具有统计学差异(P<0.05);在染色体异常的BMSC中其均值分别为2.08±0.82(P<0.05)和1.46±0.29(P<0.05);②在白血病细胞和BMSC中,c-myc mRNA、c-myb mRNA的表达水平均与血小板计数具有相关性;③在不同预后组中,c-myc mRNA、c-myb mRNA表达呈线性相关;④在白血病细胞及急性组BMSC中原癌基因c-myc、c-myb的表达存在正相关;⑤白血病细胞中c-myc的表达量分别与BMSC中c-myc、c-myb的表达量有相关性。结论:在白血病中降低c-myc或c-myb原癌基因的表达水平可能成为治疗白血病的一种治疗方案。     

光生物素探针对白血病患者c-myc和c-fos原癌基因表达水平的检测

用国产光生物素标记探针,经RNA-DNA斑点杂交技术检测了41例白血病患者中c-myc和c-fos原癌基因的RNA表达水平。c-myc和c-fos的强阳性表达率分别为82.8%和76.6%,c-myc在急性白血病和慢性粒细胞白血病急变时表达水平明显高于慢性粒细胞白血病和慢性淋巴细胞白血病及对照组,化疗完全缓解后表达水平下降,而与FAB分型无关;c-fos在AML的M_4和M_5中表达水平明显增高。提示c-myc表达与细胞增殖潜能有关,能为诱导缓解治疗结果的预测提供有意义的临床和生物学方面的信息,c-fos反映细胞分化状态,可作为白血病亚型分类的辅助指标之一。同时,本研究还探讨了光生物素探针标记技术的优越性,操作简便,方法敏感,可代替放射性核素探针在一般实验室的常规实验和诊断之用。     

癌基因与白血病临床生物学特性

白血病癌基因的研究,标志着人们对白血病的认识进入分子生物学水平。从基因学角度探索白血病的生物学特性,对于揭示白血病的本质有十分重要的意义。本文就癌基因与白血病某些临床生物学特性的研究进展,做一简要概述。一、几种细胞癌基因对正常造血细胞的调控 c-myc:几乎所有脊椎动物有c-myc基因。c-myc在人类肿瘤尤其是白血病中占重要地位。原癌基因激活有3种方式:点突变激活;基因扩增;基因重排。c-myc激活主要是第2及第3种方式。c-myc位于第8     

9例伴有染色体t(8;14)(q24;q32)和1q重复的B细胞肿瘤患者临床和实验研究

t(8;14)(q24;q32)是伯基特淋巴瘤或急性淋巴细胞白血病-L3型(ALL-L3)最为常见的再现性染色体易位[1],在分子水平该易位导致原位于8q24的原癌基因c-myc和位于14q32的免疫球蛋白重链基因(IgH)并置,促使c-myc基因调控失常而致高表达.     

急性髓系白血病细胞中c-myc蛋白的表达及其临床意义

目的探讨c-myc蛋白在急性髓系细胞白血病细胞中的表达极其临床意义.方法采用免疫细胞组织化学染色方法,检测20例急性髓系细胞白血病病人化疗前后及20例非白血病病人的c-myc蛋白的表达水平.结果白血病组c-myc蛋白表达较非白血病组明显增高,两者呈显著性差异(P＜0.01).白血病组中,化疗后完全缓解与不缓解病人c-myc基因的表达有显著性差异(P＜0.05).结论 c-myc蛋白在急性髓系细胞白血病细胞中高表达,而且与化疗疗效密切相关,提示c-myc蛋白的检测对于急性髓系细胞白血病的诊断、疗效评价及预后估计均有一定意义.     

急性髓系白血病细胞中c—myc蛋白的表达及其临床意义

目的：探讨c-myc蛋白在急性髓系细胞白血病细胞中的表达极其临床意义。方法：采用免疫细胞组织化学染色方法,检测20例急性髓系细胞白血病病人化疗前后及20例非白血病病人的c-myc蛋白的表达水平。结果 白血病组c-myc蛋白表达较非白血病组明显增高,两者呈显著性差异（P＜0．01）,白血病组中,化疗后完全缓解与不缓解病人c-myc基因的表达有显著性差异（P＜0．05）。结论 c-myc蛋白在急性髓系细胞白血病细胞中高表达,而且与化疗疗效密切相关,提示c-myc蛋白的检测对于急性髓系细胞白血病的诊断、疗效评价及预后估计均有一定意义。     

长期培养的急性粒细胞白血病患者骨髓贴壁细胞中src原癌基因的高水平表达

在人骨髓细胞长期培养中,观察造血细胞与基质细胞的关系,检测不同类型的白血病患者及其他非血液病患者骨髓贴壁细胞中src原癌基因的mRNA表达水平。基质细胞培养采用人骨髓细胞长期培养的方法,mRNA表达的检测采用地高辛标记cDNA探针和细胞原位斑点杂交法。培养4-6周时,部分急性粒细胞白血病(AML),慢性粒细胞白血病(CML)及骨髓增生异常综合征(MDS)患者的造血细胞获得独立生长的能力。与对照组相比,AML患者骨髓贴壁细胞中src原癌基因表达明显增高(P<0.05)。src原癌基因的高表达,提示在白血病发病中有造血微环境异常。     

急性巨核细胞白血病癌基因表达及其意义研究

采用生物素标记探针核酸分子原位杂交(ISH)对5例急性巨核细胞白血病(acutemegakaryoblastic leukemia,AMKL,FAB-M7)患者细胞的癌基因表达进行了观察。2例慢性粒细胞白血病(CML)巨核细胞变患者的N-ras、c-sis、c-abl和c-myc mRNA高表达,其中1例同时高表达c-fms;1例骨髓增生异常综合征(MDS)转化M7患者c-mvc、c-sis和c-fms mRNA高表达;另2例急性非淋巴细胞白血病-M7(ANLL-M7)患者c-myc和c-fms mRNA高表达。本文对癌基因与AMKL恶性克隆扩增和急性非淋巴细胞白血病巨核细胞多倍体化障碍关系进行了讨论。     

血小板疾病中原癌基因c-myc,c-myb的研究进展

原癌基因c-myc和c-myb对造血系统有重要的调节作用.c-myc基因表达的变化与细胞增殖、分化状态有关,其表达产物在调节细胞生长、分化或恶性转化中发挥作用.c-myb参与转录,影响细胞增殖、分化、凋亡.近年来,随着分子生物学、分子免疫学、细胞生物学等相关技术的日趋成熟,原癌基因c-myc、c-myb在造血调控中的研究逐渐增多.研究发现,巨核-红系祖细胞的定向分化及血小板的异常与其表达水平有关.常见的血小板疾病见于血小板减少症、血小板增多症等,此类疾病的病因和发病机制尚未明T.本文就c-myc和c-myb基因的结构、功能及其在血小板疾病中的表达水平与意义作-综述.     

凋亡抑制因子survivin在肝癌中的表达和意义及其与c-myc的相关性

目的检测肝细胞癌中凋亡抑制因子survivin的表达,研究其与肝癌临床病理特征的关系;同时研究survivin与原癌基因c-myc表达的相关性。方法采用免疫组织化学技术和Western Blotting技术,检测59例肝癌组织及癌旁非癌组织中survivin和c-myc蛋白的表达。结果59例肝癌组织中36例表达survivin蛋白,其中29例c-myc表达阳性,7例c-myc表达呈阴性或弱阳性;23例不表达survivin蛋白或弱阳性表达者,c-myc的表达5例阳性,18例阴性或弱阳性,而在癌旁非癌组织中未检测到survivin蛋白的表达。survivin的表达与HCC镜下门静脉癌栓及局部肿瘤复发密切相关(P<0.05),而与肿瘤大小,肿瘤包膜,肝硬化及病理分期无关(P>0.05)。HCC中survivin和c-myc表达呈明显正相关(P<0.05)。结论survivin在肝细胞癌中通过加强c-myc的功能促进肝癌的发生发展,survivin有望成为HCC诊断和治疗的新靶点。     

白血病患者血清IL-8的测定

目的：探讨血清白细胞介素８（ＩＬ－８）变化在白血病中的意义。方法：采用平似酶联免疫吸附法测定了１０例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）,２５例急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）,１１例慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）慢性期血清ＩＬ－８浓度。结果：ＡＬＬ、ＡＮＬＬ和ＣＭＬ患者血清ＩＬ－８水平显著高于正常对照组,ＡＬＬ与ＡＮＬＬ患者无显著性差异,急性单细胞白血病组水平显著高于急粒白细胞病（Ｍ１￣Ｍ３）组,治疗有铲的     

外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率对血小板减少性疾病鉴别诊断的价值

目的探讨外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率对不同血小板减少性疾病鉴别诊断的价值。方法应用流式细胞术检N28例正常对照者、47例特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者、16例再生障碍性贫血（AA）患者、18例骨髓增生异常综合征（MDS）患者、13例急性淋巴细胞白血病（ALL）患者、37例急性非淋巴细胞白血病（ANLL）患者、11例慢性粒细胞白血病（CML）患者、6例慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者和12例自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率。结果ITP组外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率低于正常对照组（P〈0．05）;AA组低于正常对照组（P〈0．05）,高于MDS（P〈0．05）;白血病组较正常对照组明显降低（P〈0．05）,ALL组、ANLL组、CML组、CLL组之间无明显差异,白血病患者外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率随病情发展、复发而降低,病情控制缓解而上升;AIHA组与正常对照组相比无明显差异。结论外周血淋巴细胞CD16＋CD56表达率的检测对鉴别血小板减少性疾病有重要意义,对患者的疗效及预后判断有一定的参考价值。     

以VNTR多态性分析检测人类白血病RB基因的杂合子性缺失

对30个正常个体进行RB1.20 PCR-VNTR分析,其多态性为86.7％。28例白血病的VNTR多态性为64.3％,显著低于正常对照(P<0.05)。以各种不同类型白血病分组分析,发现其中急淋组仅为37.5％,显著低于正常(P<0.05),其它各型白血病与正常比较无显著差异(P>0.05)。进一步对24例急性白血病病例作发作期和完全缓解期的配对VNTR分析,发现其中1例急淋在完全缓解期是多态性,但发作期呈均一性。提示一些急淋病例有RB基因杂合子性缺失。RB基因功能失活在急淋的发病中可能也起一定的作用。     

T细胞特异转录因子GATA3在白血病中的表达

应用聚合酶链反应(PCR)方法检测了ANLL,CML,T-ALL,c-ALL和CLL等共119例病人的白血病细胞和14例正常人外周血单个核细胞中T细胞特异转录因子GATA3的表达情况。在T-ALL,c-ALL,CLL及CML中,其表达率很高,分别为75％、85.71％、100％及76.47％;在ANLL中的表达率则为42.68％;在正常外周血中为28.57％。同时,分析了ANLL各亚型GATA 3基因的表达情况,各型间的阳性率没有显著性差异(P=0.3118)。本结果提供了GATA 3基因在白血病中异常表达的情况,提示该转录因子在白血病细胞的分化过程中可能起到一定的调节作用。同时,由于该基因在白血病中的高表达现象,有应用于临床作为检测微小残留病变的价值。     

急慢性白血病P27(Kip1)表达及其临床意义

为观察P2 7(Kip1)蛋白在常见白血病患者中的表达 ,探讨其与白血病类别、染色体异常、临床疗效和预后的关系 ,用蛋白印迹法加化学发光法对 82例初诊或复发白血病患者的骨髓或外周血进行P2 7(Kip1)蛋白的检测。结果显示 ,P2 7(Kip1)在急性淋巴细胞白血病 (ALL)中表达高于在急性非淋巴细胞白血病 (ANLL) (P =0 .0 33)和慢性粒细胞白血病 (CML) (P =0 .0 0 8)中表达。P2 7(Kip1)在慢性淋巴细胞白血病 (CLL)中表达高于在CML中表达 (P =0 .0 17)。P2 7(Kip1) >0 .6 5 5组首次化疗有效率 (CR和PR)高于P2 7(Kip1)≤ 0 .6 5 5组 ,两者有显著差异(P =0 .0 4 1)。急性白血病患者中 ,P2 7(Kip1) >0 .6 5 5组生存期长于P2 7(Kip1)≤ 0 .6 5 5组 ,P =0 .0 0 6 5 ;而且在ANLL(P =0 .0 2 71)、ALL(P =0 .0 2 6 6 )组中均有显著差异 ,P2 7(Kip1)表达高的 ,生存时间长 ,P2 7(Kip1)表达低的 ,生存时间短。P2 7(Kip1)表达低似乎与ALL患者多种染色体异常相关 (r =- 0 .775 ,P =0 0 4 )。而P2 7(Kip1)表达与白血病患者的性别、年龄、外周血白细胞数、原始细胞数、血LDH以及血尿酸水平无明显相关性。结论 :P2 7(Kip1)表达的高低与急性白血病的首次化疗效果、生存时间密切相关 ,低表达预示着不良预后。     

Allogeneic bone marrow transplantation for malignant hematologic disorders in children.

In the present study we carried out allogeneic bone marrow transplantation (BMT) in 14 leukemia children with high risk prognostic factors. Six patients with acute nonlymphocytic leukemia (ANLL), four with acute lymphocytic leukemia (ALL), two with chronic myelogenous leukemia (CML), and two with myelodysplastic syndrome (MDS). Among these patients, six with ANLL, two with ALL, one with CML and one with MDS were alive in complete remission 8 to 58 months post-BMT. Four patients died of relapse (one with ALL, and one with MDS), and chronic GVHD (one with ALL and one with CML). In six patients recombinant granulocyte colony stimulating factor (rG-CSF) was used to shorten the period of granulocytopenia. The mean time of recovery to granulocyte count of 500/mm3 was 13.2 days in the rG-CSF+ group, being 15.9 days faster than that in the rG-CSF- group. In light of these results, allogeneic BMT is shown to be a choice of treatment for leukemia children with high risk prognostic factors and rG-CSF may be an effective reagent to prevent infectious episodes in BMT.     

儿童白血病患者PTPN11基因突变及其临床意义分析

本研究探讨儿童白血病患者PTPN11基因的突变率及其临床意义。提取初诊101例急性淋巴细胞白血病(ALL)、26例急性髓系白血病(AML)、3例慢性髓系白血病(CML)、1例幼年粒单核细胞白血病(JMML)患者外周血基因组DNA,运用聚合酶链反应(PCR)扩增PTPN11基因突变热点外显子3、8及13,并对研究病例进行临床随访,分析PTPN11基因突变的临床意义。结果表明:在101例ALL中发生PTPN11突变10例,突变率9.9%。PTPN11基因突变与初诊时年龄、性别、白细胞数、强的松敏感试验反应、临床危险度、疾病复发等因素无关(P>0.05)。在26例AML中发生突变2例,其中AML-M2及M4各1例;在3例CML中无1例突变;在1例JMML中可见PTPN11基因突变。结论:PTPN11基因3号外显子E76密码子是儿童白血病的突变热点,G503E为新检测出的JMML突变方式,PTPN11基因突变与初诊时年龄、性别、白细胞数、强的松敏感试验反应、临床危险度、早期复发等无关。     

血清结合珠蛋白的遗传多态性与白血病相关的研究

用盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法对１９２例成都地区汉族白血病患者作ＨＰ分型，并与２０９例同地区正常献血员比较发现，除ＣＬＬ外，各型白血病人的ＨＰ基因频率高于正常人。ＨＰ基因与白血病的发病有正相关关系，Ｏ．Ｒ值的点估计是１．８２，其９５％的可信区间１．３５－２．４５。本结果说明：ＨＰ的遗传多态性与成都地区汉族人的ＡＮＬＬ，ＡＬＬ和ＣＭＬ相关联。     

中国安徽地区白血病患者与HLA-A、B、DRB1基因关联性研究

本研究旨在探讨中国安徽地区人群中白血病的易感性与HLA—A、B、DRB1基因多态性之间的关联。采用聚合酶链反应序列特异性引物（PCR—SSP）方法对安徽地区140例慢性髓系白血病（CML）、84例急性淋巴细胞性白血病（AIJL）、90例急性非淋巴细胞性白血病（ANLIJ）患者以及916名健康的非血缘造血干细胞捐献者作为正常对照组进行了HLA基因分型,分别比较了病人组及正常对照组的HLA—A、B、DRB1位点的基因频率,通过x。检验进行统计学分析。结果表明,CML患者A2、A11、B58、DR9基因频率较对照组明显升高,DR7基因频率较对照组明显降低：AIJIJ患者A11、B13基因频率明显高于对照组;ANLL患者A24、B58、DR9基因频率较对照组明显升高。结论：HIA—A2、A11、B58、DR9是CML的易感基因,DR7是其拮抗基因;HLA—A11、B13是ALL的易感基因;HLA—A24、B58、DR9是ANLL的易感基因。     

Lrp16基因在白血病细胞系及白血病患者骨髓中的表达及其临床意义

本研究分析lrp16基因在白血病细胞系及白血病患者骨髓中的表达,探讨lrp16基因与白血病发生、发展的关系。采用逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）技术检测lrp16基因mRNA在4种白血病细胞系及115例白血病患者骨髓中的表达水平,并结合患者临床特征分析lrp16基因在白血病发生、发展中的作用。4种白血病细胞系包括慢性髓系白血病细胞系K562、急性早幼粒细胞白血病细胞系HL-60、急性淋巴细胞白血病细胞系MOLT4及具有单核细胞特征的白血病细胞系U937。结果表明：lrp16基因在K562、HL-60、MOLT4及U9374种细胞系中均表达。lrp16基因在急性髓系白血病患者表达阳性率为38％（16／42）,其中完全缓解者表达阳性率为13％（4／30）,未缓解者为100％（12／12）;在急性淋巴细胞白血病患者表达阳性率为38％（10／26）,其中完全缓解者阳性率为16％（3／18）,未缓解者为87％（7／8）;在慢性髓系白血病患者表达阳性率为36％（9／25）,其中完全缓解者阳性率为20％（4／20）,未缓解者为100％（5／5）;在慢性淋巴细胞白血病患者表达阳性率为31％（7／22）,其中完全缓解者阳性率为11％（2／17）,未缓解者为100％（5／5）。lrp16基因表达在各种白血病亚型之间无差异,但各亚型中完全缓解者与未缓解者之间存在显著差异（P〈0．001）。结论：lrp16基因是一个白血病癌基因,与白血病的发生、发展密切相关,有可能作为临床白血病治疗疗效的评价指标。