延迟应用TNF-α单抗治疗重度失血性休克的实验研究

目的：观察延迟应用肿瘤坏死因子－α单抗（ＴＮＦ ＭＡｂ）对失血性休克所致血液动力学改变、多器官损伤及存活率的影响，并对其作用机理进行探讨。方法：采用大鼠重度失血性休克（４．００￣４．６６ｋＰａ，１８０分钟）、复苏模型，实验动物随机分成治疗组（复苏后注射ＴＮＦ ＭＡｂ２０．０ｍｇ／ｋｇ）和对照组（白蛋白，２０．０ｍｇ／ｋｇ）。结果：延迟应用ＴＮＦ单抗治疗后，心脏指数有所增高、外周血管阻力指数显著降低     

TNF-α McAb对急性失血性休克大鼠肝脏的作用

目的探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在急性失血性休克大鼠肝损伤中的作用及TNF-α单克隆抗体的保护作用。方法将24只雄性SD大鼠随机均分为三组:对照组(A组)、休克+乳酸林格氏液复苏组(B组)和休克+TNF-α单克隆抗体复苏组(C组)。B和C组大鼠通过股动脉放血,制作急性失血性休克动物模型;B组用乳酸林格氏液复苏,C组用含TNF-α单克隆抗体(3mg/kg)的乳酸林格氏液复苏,而A组在同等条件下不进行失血。分别检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、TNF-α水平和肝组织中MDA、SOD含量,并在光镜和电镜下观察各组大鼠肝组织的病理变化。结果 B、C组大鼠血清ALT、AST、TNF-α水平和肝组织中MDA含量较A组升高,SOD含量降低;C组ALT(343.63±35.61)U/L、AST(748.75±49.76)U/L、TNF-α(99.38±13.16)pg/mL、丙二醛(26.33±1.30)nmol/mgProt较B组ALT、AST、TNF-α、MDA含量降低,C组肝组织中SOD含量(510.14±47.44)U/mgProt较B组升高;在光镜、电镜下观察,C组肝组织损伤较B组减轻。结论 TNF-α可能是急性失血性休克肝损伤的重要因子之一,使用TNF-αMcAb复苏可以减轻失血性休克时大鼠肝损伤,具有一定的保护作用。     

肝硬化大鼠出血性休克后血内毒素,TNF—α,NO水平的变化及其与？…

此研究观察了经大鼠出血性休克后血内毒素、ＴＮＦ－α、ＮＯ水平的变化及其与门静脉压力的关系，结果表明：出血性休克可以在门静脉高压大鼠引起明显的内毒素血症，以及继发性血浆肿瘤坏死因子和一氧化氮水平的升高；小剂量多粘菌素Ｂ的事先使用可以抑制这种反应。内毒素移位知肝硬化伴门静脉高压大鼠出血性休克后的高水平门静脉压的维持中起重要作用。     

肝硬化大鼠出血性休克后血内毒素、TNF_(-α)、NO水平的变化及其与门静脉压力的关系

此研究观察了肝硬化大鼠出血性休克后血内毒素、ＴＮＦ－α、ＮＯ水平的变化及其与门静脉压力的关系,结果表明：出血性休克可以在门静脉高压大鼠引起明显的内毒素血症,以及继发性血浆肿瘤坏死因子和一氧化氮水平的升高;小剂量多粘菌素Ｂ的事先使用可以抑制这种反应。内毒素移位在肝硬化伴门静脉高压大鼠出血性休克后的高水平门静脉压的维持中起重要作用。     

大鼠烫伤后创面渗液中细胞因子的变化

以大鼠为模型，探讨浅Ⅱ度烫伤后不同时期局部渗液中细胞因子的动态变化。１２０只大鼠分两组。Ｓｂ组：皮下包埋海绵后再造成１０％浅Ⅱ度烫伤；Ｓ组：单埋海绵对照。于伤后６，２４小时，３，７，１０和１４天检测海绵渗液中ＩＬ－１、ＩＬ－６和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的活性。结果三种细胞因子活性的升降规律相似。在致伤７２小时内一致表现为短暂骤升和回落，７２小时后又持续上升。ＩＬ－６于６小时达高峰；ＩＬ－１与ＴＮＦα于２４小时达峰值。早期的细胞因子可能由局部细胞应激产生；后期主要产自单核细胞。当细胞因子活性处于各自峰值时，两组间有较明显差异。其中早期水平Ｓ＞Ｓｂ，可能的原因：①组织受损Ｓｂ组更严重，致产细胞因子的局部细胞数Ｓ组＞Ｓｂ组；②烫伤改变了局部组织通透性致使细胞因子外渗。后期Ｓｂ组水平持续较高；另外，ＩＬ－１与ＩＬ－６活性在Ｓ组内有显著相关，而在Ｓｂ组，仅６小时有较明显相关。提示：Ｓｂ组的修复过程更复杂、耗时。     

大鼠烫伤后创面渗液中细胞因子的变化

以大鼠为模型,探讨浅Ⅱ度烫伤后不同时期局部渗液中细胞因子的动态变化。120只大鼠分两组。Sb 组:皮下包埋海绵后再造成10%浅Ⅱ度烫伤;S 组:单埋海绵对照。于伤后6,24小时,3,7,10和14天检测海绵渗液中 IL-1、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)的活性。结果三种细胞因子活性的升降规律相似。在致伤72小时内一致表现为短暂骤升和回落,72小时后又持续上升。IL-6于6小时达高峰;IL-1与TNFα于24小时达峰值。早期的细胞因子可能由局部细胞应激产生;后期主要产自单核细胞。当细咆因子活性处于各自峰值时,两组间有较明显差异。其中早期水平 S>Sb,可能的原因:①组织受损 Sb 组更严重,致产细胞因子的局部细胞数 S 组>Sb 组;②烫伤改变了局部组织通透性致使细胞因子外渗。后期Sb 组水平持续较高;另外,IL-1与 IL-6活性在 S 组内有显著相关,而在 Sb 组,仅6小时有较明显相关。提示:Sb 组的修复过程更复杂、耗时。     

维生素C减轻失血性休克引起的大鼠肺树突细胞聚集及肺损伤

目的 探讨失血性休克对大鼠肺组织树突细胞聚集及肺损伤的影响,以及维生素C的保护作用.方法 SD大鼠(6～7周龄)42只,按数字随机法随机分为对照组、失血性休克2h、6h、24 h组及失血性休克+维生素C2h、6h、24 h组等7组,每组各6只.以股动脉放血法建立大鼠失血性休克模型.免疫组化和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织树突细胞特异性细胞间粘附分子非整合素蛋白-3(DC-SIGN)表达情况.同时检测肺TNF-α、IL-6含量,髓过氧化物酶(MPO)活性,并进行肺损伤评分.结果 对照组肺中DC-SIGN蛋白表达很少,失血性休克组表达显著升高(P＜0.05),失血性休克后2h肺DC-SIGNmRNA含量就开始增高,休克后24 h仍呈升高趋势.失血性休克组大鼠肺TNF-α、IL-6 mRNA水平升高(P＜0.05),MPO活性增加(P＜0.05),病理损伤显著加重(P＜0.05).失血性休克大鼠在复苏前给予维生素C干预后,上述现象均减轻(P＜0.05).结论 失血性休克可能通过促进肺组织树突细胞聚集引起急性肺损伤.维生素C对这一过程有抑制作用.     

血管活性肠肽对脓毒性休克大鼠的保护作用

目的探讨血管活性肠肽（VIP）对脓毒性休克大鼠的保护作用及其可能机制。方法采用盲肠结扎加穿孔（CLP）法制备脓毒性休克大鼠模型。将30只雄性SD大鼠随机分成3组：假手术组（SO,n=10）、CLP组（n=10）和VIP组（n=10）。VIP组大鼠在行CLP术后即刻给予5nmol VIP,持续监测各组大鼠的平均动脉压（MAP）,统计20h存活率;应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-10（IL-10）水平;取大鼠肺、肾和肠等组织行病理检查。结果在8h以后的各时间点,VIP组的MAP显著高于CLP组（P〈0．05）;与CLP组比较,VIP组的TNF-α水平明显降低、IL-10水平明显升高。20h存活率显著提高（P〈0．05）。各脏器病理损伤明显改善。结论VIP通过抑制促炎因子的生成并促进抗炎因子的产生在大鼠脓毒性休克中发挥保护作用。     

休克期切痂对大鼠肺组织ICAM-1、TNF-α mRNA表达的影响

目的 研究烧伤后肺组织细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达和肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性变化的规律,探讨实施休克期切痂对上述指标变化的影响。方法 Wistar大鼠176只,30％体表面积Ⅲ度烫伤,采用逆转录PCR方法分别观察伤后不同时相点及不同时机切痂后肺组织ICAM-1、TNFα mRNA的表达及肺脏：MPO活性变化。结果烫伤后肺组织ICAM-1及TNFα的mRNA表达在伤后4h即已升高,分别在伤后12h和24h达到高峰,伤后8h和24h切痂组动物切痂后再次出现一峰值,但低于第一个峰值,伤后96h恢复正常。未切痂组和96h切痂组在伤后7d仍未恢复正常;休克期切痂动物的肺组织MPO活性伤后96h恢复正常,而非休克期切痂组动物一直维持较高水平。结论 尽早切痂去除坏死组织可阻断炎症介质及细菌毒素的释放,避免了内皮细胞大量合成ICAM-1等粘附分子,减轻由粘附分子介导的中性粒细胞对内皮细胞的进一步损害。     

失血性休克后大鼠腹腔巨噬细胞的功能改变

目的 探讨失血性休克对腹腔巨噬细胞功能变化的影响。方法 成年Wistar大鼠随机分为对照组和失血性休克组,建立失血性休克模型,于失血性休克1h后,运用流式细胞术检测和评价两组腹腔巨噬细胞的凋亡、吞噬凋亡细胞及主要组织相容性复合物Ⅱ(Major histocompatibility complex,MHCⅡ)表达能力的变化。同时,利用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)分析腹腔巨噬细胞释放肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(Interleukin,IL)-6的情况。结果 ①失血性休克组大鼠腹腔巨噬细胞的凋亡比例为(8.08±0.75％),对照组为(1.64±0.37％),二者有明显差别(P<0.01)。②失血性休克组腹腔巨噬细胞吞噬凋亡细胞的比例为(17.68±2.53％),对照组为(38.74±7.07％),二者有明显差别(P<0.01);腹腔巨噬细胞MHCⅡ表达能力失血性休克组为(24.04±6.26％),对照组为(45.73±4.63％),二者有明显差别(P<0.01)。③失血性休克组大鼠腹腔巨噬细胞释放TNF-α(99.7±8.4 pg/ml)、IL-6(9.8±0.7pg/ml)分别较对照组(205.3±11.3 Pg/ml)、(30.7±1.8 pg/ml)显著减少(P<0.01)。结论 失血性休克后腹腔巨噬细胞功能明显受损,细胞凋亡能力增加。失血性休克后机体免疫功能降低,凋亡细胞增加而不能及时清除,是机体易感性增加的重要机制     

甘氨酸对出血性休克大白鼠生存率的影响

目的　研究甘氨酸对出血性休克大白鼠生存率的影响并探讨机制。方法　大白鼠经动脉放血 ,造成出血性休克 ,随后用自体血和生理盐水回输进行复苏。复苏前大白鼠分成 3组 :假休克组 ,休克组和甘氨酸治疗组。结果　 (1)复苏后 72h ,休克组与甘氨酸治疗组的生存率分别为 2 0 0 %和 77 8% ,差异有显著意义 (P <0 0 5 )。 (2 )复苏后 18h器官取材显示 :休克组大白鼠的肺、肾等组织出现水肿、变性、炎性细胞浸润等 ,甘氨酸治疗组上述的病理改变明显减轻。 (3)复苏后 18h ,肌酸磷酸激酶、肌酐、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶检测 ,休克组明显升高 ,而甘氨酸治疗组只有轻度增高 ,差异有非常显著性意义 (P <0 0 1)。 (4)复苏后 2h ,肝脏分离培养的枯否细胞用内毒素刺激后 ,休克组细胞内Ca2 浓度和TNF α产量明显高于甘氨酸治疗组 ,差异有非常显著性意义 (P <0 0 1)。结论　甘氨酸通过抑制枯否细胞内Ca2 浓度升高和抑制TNF α的过度产生 ,降低机体全身炎症反应程度 ,减轻出血性休克大白鼠脏器的损伤和降低病死率。     

思密达在重度失血性休克中的应用

目的 研究口服思密达对重度失血性休克预后的影响。方法 经股动脉放血制作兔失血性休克模型，分为休克组、思密达组（休克前经胃管注入思密达），观察休克前后血浆内毒素、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、白介素６（ＩＬ－６）、一氧化氮（ＮＯ）水平的动态变化及２４、４８小时的存活率。结果 休克组休克后血浆ＴＮＦα、ＩＬ－６、ＮＯ水平明显高于休克前（Ｐ〈０．０１）；与休克组比较，思密达组动态休克后血浆上述物质水平时显     

Opioid receptors associated with cardiovascular depression following traumatic hemorrhagic shock in rats

ＡＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＳｕｒｇｅｒｙ,ＤａｐｉｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ,ＴｈｉｒｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ,Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００４２,Ｃｈｉｎａ（ＬｉｕＬＭ,ＣｈｅｎＨＳ,ＨｕＤＹ,ＬｕＲＱ,ＣｈｅｎＹ...     

联合应用甘氨酸和甲强龙对失血性休克大鼠肝脏枯否细胞的影响

目的探讨失血性休克大鼠肝脏枯否细胞的功能变化以及联合应用甘氨酸和甲强龙对枯否细胞的影响。方法50只大鼠随机分成假休克组（仅进行手术操作但不放血诱导休克）、休克组、甘氨酸组、甲强龙组和联合治疗组（甘氨酸＋甲强龙）,每组10只。大鼠经动脉放血,造成失血性休克,随后用自体血和生理盐水回输进行复苏。复苏后2h,行肝脏枯否细胞的分离和培养,细胞培养24h后分别用1、10、100和1000ng/ml的脂多糖（LPS）刺激,测定细胞内Ca^2＋和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。结果枯否细胞内Ca^2＋在20min左右开始大幅度增高,大约27min达到高峰,同时细胞内Ca^2＋浓度增加呈现LPS剂量依赖性。联合治疗组细胞内Ca^2＋浓度和TNF-a含量明显低于休克组以及低于甘氨酸、甲强龙治疗组,差异具有统计学意义（P〈0．005）。结论联合应用甘氨酸和甲强龙比单一制剂更有效抑制失血性休克后枯否细胞内Ca^2＋升高、抑制枯否细胞的激活,抑制TNF-α的过度产生和机体炎症反应。     

Effects of two fluid resuscitations on the bacterial translocation and inflammatory response of small intestine in rats with hemorrhagic shock

Objective： To investigate the effects of two fluid resuscitations on the bacterial translocation and the inflammatory factors of small intestine in rats with hemorrhagic shock. Methods： Fifty SD healthy male rats were randomly divided into 5 groups （ n = 10 per group） ： Group A （ Sham group）, Group B （ Ringer＇ s solution for 1 h ）, Group C （Ringer＇ s solution for 24 h ）, Group D （ hydroxyethyl starch for 1 h ） and Group E （（ hydroxyethyl starch for 24 h）. A model of rats with hemorrhagic shock was established. The bacterial translocation in liver, content of tumor necrosis factor-α （TNF-α） and changes of myeloperoxidase enzyme （MPO） activities in small intestine were pathologically investigated after these two fluid resuscitations, respectively. Results ： The bacterial translocation and the expression of TNF-α in the small intestine were detected at 1 h and 24 h after fluid resuscitation. There were significant increase in the number of translocated bacteria, TNF-α and MPO activities in Group C compared with Group B, significant decrease in Group E compared with Group D and in Group B compared with Group D. The number of translocated bacteria and TNF-α expression significantly decreased in Group E as compared with Group C. Conclusions： The bacterial translocation and the expression of TNF-α in the small intestine exist 24 h after fluid resuscitation. 6 % hydroxyethyl starch can improve the intestinal mucosa barrier function better than the Ringer＇ s solution.     

Toll样受体4在失血性休克复苏致小鼠急性肺损伤中的作用

目的 探讨Toll样受体4(TLR4)在失血性休克复苏致小鼠急性肺损伤中的作用.方法 TLR4基因突变型C3H/HeJ小鼠和野生型C3H/HeN小鼠各24只,两种品系小鼠各随机分为2组:假手术组(S组,n=6)、失血性休克复苏组(HSR组,n=18)制备失血性休克复苏模型,并于复苏后6、24、48 h时各取6只小鼠颈动脉放血处死后开胸取肺组织,免疫组织化学法检测p38 MAPK表达水平,酶联免疫吸附法测定白细胞介素(IL)-10和IL-6含量,透射电镜下观察肺组织超微结构.结果 与C3H/HeN小鼠比较,C3H/HeJ小鼠复苏后肺组织p38 MAPK表达下调,IL-6和IL-10含量降低(P<0.05或0.01),病理损伤程度减轻.两种品系小鼠中,与S组比较,HSR组复苏后24 h时肺组织IL-6和IL-10含量增加,复苏后48 h时肺组织IL-6含量增加(P<0.05或0.01);C3H/HeN小鼠中,与S组比较,HSR组复苏后6 h和24 h时肺组织p38 MAPK蛋白表达上调,复苏后48 h时肺组织IL-10含量增加(P<0.01).结论 TLR4参与小鼠失血性休克复苏致急性肺损伤的发生,其机制与激活p38 MAPK信号转导通路有关.     

高渗复合液治疗失血性休克的机制研究

目的　研究高渗复合液的脱水作用治疗失血性休克的机制。方法　利用大鼠Wigger′s失血性休克模型 ,通过对比不同复苏液对大鼠下肢腓肠肌水含量的影响来评价高渗复合液的作用效果。结果　在出血性休克并复苏后 ,高渗复合液组的组织水含量 (73 0 %± 1 5 % )较平衡液组(74 8%± 2 0 % )及对照组 (75 4 %± 1 6 % )少 ,差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　高渗复合液无论在休克状态与水肿状态均可以将细胞和间隙内的水分抽取至血管内 ,从而扩大血容量。     

血管活性肠肽对感染性休克大鼠肠道的保护作用

目的：探讨血管活性肠肽(VIP)对感染性休克大鼠肠道的保护作用及其机制。方法：采用盲肠结扎加穿 孔(CLP)法制备感染性休克模型。30只健康 SD 大鼠随机分成3组：对照组(假手术组，SO)、CLP 组和 VIP 组。SO 组和 CLP 组术后经股静脉注射生理盐水，VIP 组则注射 V1P 5nmol，持续监测平均动脉压(MAP)、采集血样，采用酶联免 疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10) 水平，并取小肠标本行病理和电镜检查。结 果：与对照组比较，CLP 组术后 MAP 进行性下降，血清 TNF-α、IL-10水平升高，显微镜和电镜下小肠有明显的病理改 变。VIP 能有效阻止 MAP 的下降，降低血清 TNF-α和提高 IL-10水平，显微镜和电镜下小肠的病理损害明显改善。结 论：VIP 对感染性休克大鼠及其小肠结构和功能有明显的保护作用，其机制可能与影响细胞因子的产生有关。     

Changes of interleukin-1 β, tumor necrosis factor α and interleukin-6 in brain and plasma after brain injury in rats

Objective: To study the changes of interleukin-1 β(IL-1β), tumor necrosis factor α (TNFα) and interleukin-6 (IL-6) levels in brain and plasma after brain injury and to assess the relationship between the cytokine levels and injury severity in rats. Methods. A total of 51 male Wistar rats, weighing 280-340g, were anesthetized with chloral hydrate(400 mg/kg body weight) through intraperitoneal injection and fixed on a stereotaxic instrument. Severe brain injury was created in 16 rats (severe injury group) and moderate brain injury in 18 rats (moderate injury group) by a fluid percussion model, and cytokine levels of IL-1β, TNFα and IL-6 were measured with biological assay. And sham operation was made on the other 17 rats (control group). Results: In the control group, the levels of IL-1β,TNFα and IL-6 were hardly detected in the cortex of the rats, but in the ipsilateral cortex of the rats in both injury groups, they increased obviously at 8 hours after injury.The increasing degree of these cytokines had no significant difference between the two injury groups. The levels of IL-6 in the plasma of all the rats increased slightly, whereas the levels of IL-1β and TNFα were undetectable. Conc|usions: The increase of IL-1β, TNFα and IL-6 levels is closely related to brain injury. The increased cytokine levels in the central nervous system are not parallel to those in the peripheral blood. It suggests that inflammatory cytokines play important roles in the secondary neural damage after brain injury.