表皮生长因子在血管瘤和血管畸形中的表达

目的 了解表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)与血管瘤及血管畸形的关系.方法 标本选自1998年3月至2005年10月经手术切除的先天性皮肤血管病变92例患儿,女52例,男40例,年龄为40 d至13岁,平均年龄为1.6岁.组织标本取出后立即浸入10%的中性甲醛溶液中固定,常规石蜡包埋,5μm连续切片,HE染色,同时采用含有正常血管的皮肤标本10例作为对照.采用免疫组织化学方法,对72例血管瘤和20例血管畸形组织切片进行EGF表达的测定.结果 EGF在血管瘤组织中高表达,而在血管畸形组织中低表达(P<0.01).在血管瘤增殖期、退化早期和退化完成期三者之间,EGF的表达存在着差异.在血管瘤中EGF的表达与其内皮细胞的增生程度有关.内皮细胞增生越强,EGF的表达越高(P<0.05).结论 提示EGF与血管瘤的增生及退化有关,而与血管畸形无明显关系.     

Rb和P21基因在婴幼儿皮肤血管瘤中的表达及意义

目的探讨Rb和P21蛋白在婴幼儿血管瘤发生、发展及退化过程中的表达及与血管瘤退化有关的可能机制。方法采用免疫组织化学方法（SP法）检测Rb、P21WAF1/CIP1及增殖细胞核抗原在婴幼儿皮肤血管瘤标本增生期、退化期以及血管畸形标本中的表达情况,并用末端脱氧核苷酸基转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸-生物素颈端标记法检测血管内皮细胞凋亡情况,结合CD34相关抗原的免疫组织化学染色,证实Rb和P21表达的细胞是血管内皮细胞。结果增生期血管瘤内皮细胞Rb和P21表达水平低于退化期,差异有统计学意义（P〈0．05）,退化期血管瘤Rb和P21表达水平与血管畸形组织相比,差异有显著统计学意义（P〈0．001）。结论Rb和P21可能通过抑制血管瘤内皮细胞增殖和促进血管内皮细胞凋亡,而在血管瘤的退化过程中起重要作用。     

血管内皮祖细胞在血管瘤中的表达和作用

目的探讨血管内皮祖细胞在血管形成和血管瘤的发病中的作用。方法应用RT—PCR荧光探针法定量检测CD133mRNA在28例血管瘤（包括增生期血管瘤13例,消退期血管瘤15例）、11例血管畸形、12例正常皮肤组织和10例胎盘绒毛膜标本中的表达。比较不同组织中CD133mRNA的阳性率及含量。应用免疫组化方法检测血管内皮祖细胞标志抗原CD133、成熟血管内皮细胞标志抗原CD31、端粒逆转录酶（TERT）和细胞增殖核抗原（Ki-67）在血管瘤、血管畸形及正常皮肤组织中的表达。观察血管内皮祖细胞在血管瘤血管形成中的形态学及组织学特征。结果13例增生期血管瘤中,9例有CD133 mRNA表达;10例胎盘绒毛膜组织中,7例有CD133mRNA表达,二者阳性率及表达量比较无统计学意义（P〉0．05）。消退期血管瘤、血管畸形和正常皮肤无CD133mRNA表达。8例增生期血管瘤CD133免疫组化染色阳性,而消退期血管瘤、血管畸形和正常皮肤CD133免疫组化染色均呈阴性。CD31在增生期血管瘤、消退期血管瘤、血管畸形和皮肤组织中均有表达,但增生期血管瘤中的表达阳性指数高于其它三组（P〈0．01）。增生期血管瘤TERT和Ki-67的表达均高于消退期血管瘤、血管畸形和正常皮肤（P〈0．01）。血管瘤中TERT和Ki-67存在直线正相关关系（r=0．983,P〈0．01）。结论增生期血管瘤中存在血管内皮祖细胞,而消退期血管瘤、血管畸形和正常皮肤组织中无血管内皮祖细胞。血管内皮祖细胞参与了血管瘤中内皮细胞的增殖和血管形成,是血管瘤血管内皮细胞活性异常的来源。     

表皮生长因子在血管瘤和血管畸形中的表达

目的 了解表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)与血管瘤及血管畸形的关系.方法 标本选自1998年3月至2005年10月经手术切除的先天性皮肤血管病变92例患儿,女52例,男40例,年龄为40 d至13岁,平均年龄为1.6岁.组织标本取出后立即浸入10%的中性甲醛溶液中固定,常规石蜡包埋,5μm连续切片,HE染色,同时采用含有正常血管的皮肤标本10例作为对照.采用免疫组织化学方法,对72例血管瘤和20例血管畸形组织切片进行EGF表达的测定.结果 EGF在血管瘤组织中高表达,而在血管畸形组织中低表达(P<0.01).在血管瘤增殖期、退化早期和退化完成期三者之间,EGF的表达存在着差异.在血管瘤中EGF的表达与其内皮细胞的增生程度有关.内皮细胞增生越强,EGF的表达越高(P<0.05).结论 提示EGF与血管瘤的增生及退化有关,而与血管畸形无明显关系.     

表皮生长因子在血管瘤和血管畸形中的表达

目的 了解表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)与血管瘤及血管畸形的关系.方法 标本选自1998年3月至2005年10月经手术切除的先天性皮肤血管病变92例患儿,女52例,男40例,年龄为40 d至13岁,平均年龄为1.6岁.组织标本取出后立即浸入10%的中性甲醛溶液中固定,常规石蜡包埋,5μm连续切片,HE染色,同时采用含有正常血管的皮肤标本10例作为对照.采用免疫组织化学方法,对72例血管瘤和20例血管畸形组织切片进行EGF表达的测定.结果 EGF在血管瘤组织中高表达,而在血管畸形组织中低表达(P<0.01).在血管瘤增殖期、退化早期和退化完成期三者之间,EGF的表达存在着差异.在血管瘤中EGF的表达与其内皮细胞的增生程度有关.内皮细胞增生越强,EGF的表达越高(P<0.05).结论 提示EGF与血管瘤的增生及退化有关,而与血管畸形无明显关系.     

血管瘤血管内皮生长因子受体KDR基因异常甲基化的研究

目的通过建立甲基化敏感性高分辨率溶解曲线法（MS-HRM）,检测血管内皮生长因子VEGF受体KDR基因启动子区域在不同时期血管瘤、血管畸形及正常皮肤组织中的甲基化状态,初步探讨基因甲基化在血管瘤形成、增生、退化过程中的作用。方法选取不同时期血管瘤石蜡标本48例、血管畸形石蜡标本15例、正常包皮皮肤组织标本8例,分别提取DNA,经亚硫酸氢盐甲基化修饰、纯化、回收DNA,然后用甲基化敏感性高分辨率溶解曲线法（MS-HRM）,定量检测不同标本中血管内皮生长因子受体KDR甲基化水平。结果48例血管瘤标本共检出32例不同程度KDR基因启动子区域甲基化（66．67％）,其中24例增殖期血管瘤标本中检出21例（87．50％）不同程度甲基化,24例消退期血管瘤标本中检出11例（45．83％）不同程度甲基化,增殖期血管瘤与消退期血管瘤标本中KDR的甲基化程度比较,差异有统计学意义（X^2=9．375,P〈0．05）;15例血管畸形标本中仅检出甲基化程度为0-25％者2例（13．33％）,8例正常包皮皮肤组织中检测到1例甲基化0-5％（12．50％）。与血管瘤相比,差异均有统计学意义（P〈0．05,Fisher’确切概率法）。结论血管瘤中血管内皮生长因子受体KDR基因启动子序列CpG岛存在异常甲基化,血管内皮生长因子受体KDR基因异常甲基化可能与血管瘤增生、退化等有关。     

缺氧诱导因子-1α在婴幼儿血管瘤及血管畸形中的表达与意义

目的 本研究拟通过检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、细胞增殖核抗原Ki-67、血管内皮标志抗原CD34在婴幼儿血管瘤不同时期、血管畸形和儿童正常皮肤中的表达,探讨缺氧在血管瘤血管生成、细胞增殖中的作用.方法 采用免疫组织化学S-P染色法,检测CD34、HIF-1α、VEGF和Ki-67在小儿血管瘤、血管畸形及正常皮肤组织中的表达,并计算微血管密度(MVD).结果 不同时期血管瘤之间,血管瘤与血管畸形、正常皮肤之间HIF-1α、VEGF、Ki-67、MVD均有显著性差异(P<0.05).血管瘤中HIF-1α表达分别与VEGF、Ki-67、MVD表达呈正相关;而血管畸形HIF-1α与VEGF表达不存在相关关系.结论 缺氧是不同时期血管瘤的普遍现象.HIF-1α能促进血管瘤血管生成.而在血管畸形中可能不存在缺氧的微环境,是"血管内皮细胞生长正常的血管形态异常",因此在血管畸形中不会发生内皮细胞的增殖,也不存在类似血管瘤那样出现增生期和消退期.     

糖皮质激素受体在血管瘤和血管畸形中的表达及意义

目的：检测血管瘤和血管畸形组织中是否存在糖皮质激素受体，并探讨其在血管瘤和血管畸形中的意义。方法：手术切除25例血管瘤、18例血管畸形标本及12例正常皮下组织标本，用免疫组织化学方法检测其组织中糖皮质激素受体、血管内皮生长因子、Ki-67的表达，做图像分析测定，并对3项指标作相关性分析。结果：在血管瘤增生期，皮质激素受体、血管内皮生长因子、Ki-67均有较高表达；在血管瘤退化期、血管畸形和正常皮肤中，糖皮质激素受体、血管内皮生长因子、Ki-67表达极弱或无表达。并且糖皮质激素受体与血管内皮生长因子、Ki-67在血管瘤中的表达呈正相关。结论：糖皮质激素受体、血管内皮生长因子可能在血管瘤的病理发生过程发挥作用，外源性糖皮质激素与糖皮质激素受体结合，可能使血管内皮生长因子分泌减少，而促进血管瘤消退。而糖皮质激素受体、血管内皮生长因子在血管畸形的发生中则无明显作用。     

婴幼儿血管瘤组织中bcl-2和bax与细胞凋亡的研究

目的　研究凋亡调控基因bcl- 2和bax与婴幼儿血管瘤细胞增生、凋亡的关系,探讨其在血管瘤增生、消退中的作用机制。方法　采用免疫组化SP法检测血管瘤及血管畸形组织中增殖细胞核抗原(PCNA)及凋亡调控基因bcl -2和bax的表达;用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的d UTP生物素缺口末端标记技术 (TUNEL)检测凋亡细胞。结果　bcl 2阳性表达率在增生期和消退期分别是82.14%和46.67%,两者之间差异存在显著性意义(P<0.01),消退期与血管畸形表达差异无显著性意义(P>0.05)。Bax在血管瘤增生期和消退期均为 100%表达,与血管畸形中的表达差异有显著性意义(P<0.01)。bcl 2和bax在血管畸形组织中均不表达。婴幼儿血管瘤增生期和消退期凋亡指数(apop tosisindex,AI)为30.52±10.25和80.22±6.82;增殖指数 (proliferativeindex,PI)分别为11.40±8.90和4.79±3.63,两者之间差异均存在显著性意义(P<0.01)。AI与bcl 2的表达呈负相关 (r=-0.318,P<0.05),AI与bax的表达无明显相关性 (r=-0.077,P>0.05),AI与bcl 2/bax比值呈负相关 (r=-0.307,P<0.05)。结论　在血管瘤增生消退中存在着逐渐活跃的凋亡现象,细胞凋亡是血管瘤的典型生物学特征,是血管瘤的自然消退的关键因素。bcl -2和bax参与了血管瘤中细胞凋亡的调节。     

血管内皮生长因子mRNA在血管瘤中的表达

目的 检测不同时期血管瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平,探讨VEGF对血管瘤生长的影响,研究血管瘤增生退化的机制.方法 取不同时期手术切除血管瘤组织及其临近组织标本.其中增生期20例,退化期12例,正常皮肤组织8例作为对照.根据美国国立生物技术信息中心(NCBI)基因库中VEGF的cDNA序列设计引物,以β-actin作为内参照,应用半定量RT-PCR方法 测定血管瘤组织中VEGF mRNA表达水平.应用SPSS 12.0软件进行统计学分析.结果 琼脂糖凝胶电泳显示增生期血管瘤、退化期血管瘤、正常组织中VEGF mRNA电泳条带亮度依次降低;组织中表达的相对量分别为增生期血管瘤1.442 8±0.084 6、退化期血管瘤0.956 9±0.061 7、正常对照组皮肤组织0.487 2±0.035 6,两两比较均有显著性差异(Pa<0.05).结论 VEGF在增生期血管瘤组织中高水平表达,在退化期中表达减弱,在正常组织中几乎无表达,提示VEGF参与调控血管瘤的发展过程,可作为区分增生期与退化期的标志之一.     

川崎病患儿血清对脐静脉内皮细胞血栓调节蛋白表达的影响

目的观察川崎病(KD)患儿血清对脐静脉内皮细胞血栓调节蛋白(TM)表达影响,探讨TM蛋白在冠状动脉损伤中的作用。方法采集KD患儿急性期外周血制备血清,人脐静脉内皮细胞株置于不同条件下培养。用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测TM水平,用逆转录定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测TM mRNA表达情况。结果KD患儿血清组TM mRNA表达明显下降,丙种球蛋白干预后内皮细胞TM mRNA表达明显上升。而KD患儿血清组细胞培养上清TM蛋白水平升高,丙种球蛋白干预后TM水平下降。结论KD急性期血管内皮细胞可能在受到循环多种炎性介质刺激后损伤,TM表达减少。丙种球蛋白能显著抑制KD血清炎性介质对内皮细胞的损伤作用。     

一氧化碳下调高血压大鼠血管平滑肌细胞硫化氢体系

目的研究一氧化碳(CO)对自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMC)中硫化氢(H2S)/胱硫醚γ裂解酶(CSE)的影响。方法SHRVSMC分为氯化血红素(hemin)实验组和hemin对照组,硫电极法测定培养上清中H2S含量,竞争性RTPCR法检测细胞中CSEmRNA水平。结果实验组较对照组培养上清中H2S含量显著降低[(16.03±2.15)μmol/Lvs(13.31±1.74)μmol/L],CSEmRNA水平较对照组降低[(0.17±0.04)vs(0.13±0.03)]。结论CO可下调SHR的VSMC中H2S/CSE体系。     

GATA-6基因在内源性一氧化碳抑制肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

目的探讨GATA-6基因在内源性一氧化碳（CO）抑制肺动脉平滑肌细胞（PVSMCs）增殖中作用。方法体外培养雄性SD大鼠的PVSMCs，用血小板衍生生长因子（PDGF）诱导其增殖，用不同浓度氯血红素（Hemin）诱导血红素加氧酶（HO-1）．促进CO生成，用四唑盐（MTT）法测定不同条件下PVSMCs的细胞增殖，氚掺入法测定DNA合成，RT-PCR测定GATA-6基因mRNA的表达。结果CO可抑制PDGF诱导的PVSMCs增殖，此抑制作用呈剂量和时间依赖关系，高浓度Hemin可明显抑制PVSMCs增殖和DNA合成，在PDGF刺激后2h，PVSMCs的GATA-6表达明显下调，6h开始恢复，而CO可阻止GATA-6这种下调。结论CO可抑制PDGF诱导的PVSMCs增殖，PDGF可引起GATA-6基因表达下调，这种下调可被CO阻止；提示在抑制PVSMCs异常增殖过程中，CO可能通过调节GATA-6表达发挥作用。     

Vascular Rings: Presentation,Imaging Strategies,Treatment, and Outcome

This study aimed to evaluate the presenting symptoms, the effectiveness of imaging methods, and the surgical treatment of vascular rings. Data for 44 patients (32 enrolled prospectively, 12 reviewed retrospectively) over a 10-year period in a tertiary referral center were analyzed. These patients comprised 25 patients with a left aortic arch and an aberrant right subclavian artery, 13 patients with a right aortic arch and a left subclavian artery originating from Kommerell’s diverticulum, 1 patient with a right aortic arch and an aberrant left subclavian artery, 3 patients with a double aortic arch, and 2 patients with a pulmonary sling. Respiratory symptoms were found in 25 patients and dysphagia in 6 patients. Atypical symptoms such as reflex apnea, cyanosis, syncope episodes, and exercise-induced wheezing were noted in five patients. Associated congenital heart defects were detected in 41% of the patients. The diagnostic yield was 95.23% for barium esophagography, 54.54% for echocardiography, and 66.66% for computed tomography. The anatomy could be correctly identified by magnetic resonance imaging (MRI) in 97.43% and by angiography in 90.5% of the patients. Of the 30 patients who underwent surgery, 80% were completely relieved of symptoms during a mean follow-up period of 25 ± 33.5 months. Vascular rings should not be overlooked in infants with atypical symptoms. The authors’ diagnostic procedure of choice is MRI because it is superior to angiography for delineating the relationship between abnormal vascular structures, trachea, and esophagus.     

Vascular malformations

Vascular malformations are rare but important skin disorders in children, which often require multidisciplinary care. The goal of this article is to orient pediatricians to the various types of vascular malformations. We discuss the clinical characteristics, diagnostic criteria, and management of capillary, venous, arteriovenous, and lymphatic malformations. Associated findings and syndromes are also discussed briefly.     

Vascular rings

Vascular rings are congenital aortic arch anomalies that lead to compression of the trachea or esophagus. The goal of this review is to summarize our current recommendations for the management of patients with a diagnosis of a vascular ring. We review the history, classification methods, and epidemiology of the various types of vascular rings. We then propose a management strategy for the relatively new paradigm of fetal diagnosis, including the management of asymptomatic vascular rings. Finally, we finish with a review of the operative techniques and outcomes for the four main categories of vascular rings.     

Vascular tumors

Vascular tumors are a rare subset of vascular anomalies. These are classified based on their malignant potential or local destruction potential. Classification has been historically difficult and treatment recommendations are based on case series. The purpose of this chapter is to review the presentation, pathologic and imaging characteristics. Treatment recommendations are summarized based on the current literature. Congenital and infantile hemangiomas are covered separately in a separate chapter in this issue.     

骨髓间充质干细胞移植对肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对野百合碱诱导的肺动脉高压(PAH)大鼠肺血管重构的影响.方法 体外分离、培养并纯化SD大鼠骨髓MSCs.健康雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组(n＝15)、PAH组(n＝20)和MSCs移植组(n＝20).PAH组和MSCs移植组大鼠一次性项背部皮下注射野百合碱(50 mg·kg -1),复制PAH肺血管重建动物模型.3组大鼠在同等条件下饲养.3周后,MSCs移植组大鼠经舌下静脉注射5×109 L-1的经Hoechst 33342标记的MSCs细胞悬液1 mL,PAH组大鼠予等量低糖-Dulbecco改良Eagle's培养液(L-DMEM)注射,正常对照组不做任何处理.移植28 d,观察3组大鼠肺小动脉的显微结构及超微结构的改变.结果 PAH大鼠用MSCs移植28 d后,肺小动脉管壁厚度指标(WD/TD％、VA％)、放射性肺泡计数、肺非肌性小动脉肌化程度均较PAH组显著改善(P＜0.01);其肺小动脉的重构及超微结构的血气屏障、线粒体、板层小体等改变均有明显改善.荧光显微镜观察到Hoechst 33342标记的MSCs在肺内定植,且分化成大量新生血管并形成侧支循环,肺动脉重构得到有效逆转.结论 MSCs移植可有效减轻并逆转肺动脉重构的进程,其作用机制是MSCs分化形成新生血管,建立了侧支循环,从而修复野百合碱诱导的肺损伤.     

过敏性紫癜患儿可溶性血管细胞黏附分子-1、免疫球蛋白A抗内皮细胞抗体检测的意义

目的探讨可溶性血管细胞黏附分子-1(SVCAM-1)、IgA抗内皮细胞抗体(IgAAECA)在过敏性紫癜(HSP)诊断中的价值及两者的关系。方法采用ELISA检测55例HSP患儿(其中急性期40例,恢复期15例),20例健康儿血清SVCAM-1水平,应用荧光免疫印片法检测IgAAECA阳性率。结果HSP肾炎组SVCAM-1较非肾炎组明显升高,且急性期高于恢复期,差异均有显著意义(P均<0.01)。HSP肾炎组IgAAECA阳性率明显高于无肾炎组,IgAAECA阳性组SVCAM-1高于阴性组,差异均有显著意义(P均<0.01)。结论SVCAM-1、IgAAECA参与HSP的发病过程,可反映疾病进展程度。