银杏叶提取物对海马注射淀粉样β蛋白致阿尔茨海默病大鼠模型神经元凋亡的保护作用

目的:观察具有神经保护作用的银杏叶提取物对海马注射淀粉样β蛋白的阿尔茨海默病模型大鼠神经元凋亡的影响。方法:实验于2002-03/2003-10在河北医科大学第二医院、解放军总医院老年医学研究所、北京大学蛋白质工程国家重点实验室完成。取清洁级成年雌性SD大鼠共30只,随机分为3组,各10只。其中两组大鼠以淀粉样β蛋白25～353μL(4g/L)注射于海马齿状回,10只于当日起给予银杏叶提取物(购自德国威玛舒培博士药厂)2mL腹腔注射,连续7d,为银杏叶提取物组;10只以等量生理盐水腹腔注射7d,为淀粉样β蛋白组;另外10只动物以生理盐水3μL注射于海马齿状回,为对照组;行脱氧核苷酰转移酶法亦即脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记和免疫组化染色(Bcl-2和Bax)及双向凝胶电泳观察。结果:30只动物全部进入结果分析,无脱失。①淀粉样β蛋白组及银杏叶提取物组神经元均有凋亡发生。其细胞核被染成棕黄色。典型的凋亡细胞表现为染色质凝集,呈新月形聚集于核膜下。由于切面的不同,凝集的染色质可以不同形态散在于核切面的任意位置,有的以圆形位于核膜下,有的位于核中央,但不象坏死那样边界不清,呈絮状。细胞内有棕黄色粗颗粒分布或棕黄色细腻颗粒弥漫分布者为Bcl-2或bax阳性反应细胞。②淀粉样β蛋白组神经元凋亡率高于银杏叶提取物组(55%,21%);淀粉样β蛋白组Bcl-2反应阳性细胞率低于银杏叶提取物组(15%,47%);淀粉样β蛋白组Bax反应阳性细胞率高于银杏叶提取物组(49%,17%)。③通过分析比较得到的双向凝胶电泳图谱,淀粉样β蛋白组与对照组比较,有26个蛋白质点的体积百分含量发生显著性变化(P<0.05)。而在银杏叶提取物组上述26个发生变化的蛋白点有11个出现回调。结论:银杏叶提取物可使海马注射淀粉样β蛋白组对发生变化的蛋白点回调,对大鼠神经元凋亡有保护作用。     

银杏提取物对淀粉样β蛋白致PC12细胞凋亡的保护作用

目的:探讨银杏提取物对淀粉样β蛋白(Aβ)致PC12细胞凋亡的保护作用。方法:应用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)分析法研究细胞活性的改变,应用激光共聚焦显微镜进行线粒体膜电位测定。TUNEL法测定细胞凋亡率。结果:随着Aβ浓度的加大,PC12细胞的存活率逐渐降低。同时给予Aβ及不同剂量的银杏提取物,可明显提高PC12细胞的存活率。银杏提取物可减少Aβ所致的细胞凋亡,Aβ组细胞凋亡率为63%,高于银杏组21%(χ2=36.2069,P=0.0000)。结论:银杏提取物可抑制Aβ诱导的PC12细胞凋亡。     

β-淀粉样蛋白对阿尔茨海默病大鼠脑局部神经元超微结构的影响

目的探讨Meynert核注射β-淀粉样蛋白(Aβ)后对大鼠脑神经细胞超微结构的影响及其可能机制。方法将1μlAβ1-40(10μg/μl)在立体定向仪下注入大鼠右侧Meynert核,分别于1、4周时用透射电镜观察脑组织中神经细胞超微结构。结果Aβ注射1周后,实验组Meynert核、海马区和皮层区均可见一些神经细胞核染色质浓缩成团块并见边聚现象,神经细胞有发生凋亡的趋势;4周时可见典型的神经细胞凋亡;突触结构数量减少。正常对照组和假手术组超微结构基本正常。结论Aβ注入Meynert核能引发CNS神经细胞凋亡和突触结构减少,可能是AD记忆障碍和痴呆形成的重要机制之一。     

银杏提取物对淀粉样β蛋白致PC12细胞凋亡的保护作用

目的：探讨银杏提取物对淀粉样β蛋白(Aβ)致PC12细胞凋亡的保护作用。方法：应用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)分析法研究细胞活性的改变，应用激光共聚焦显微镜进行线粒体膜电位测定。TUNEL法测定细胞凋亡率。结果：随着Aβ浓度的加大，PC12细胞的存活率逐渐降低。同时给予Aβ及不同剂量的银杏提取物，可明显提高PC12细胞的存活率。银杏提取物可减少Aβ所致的细胞凋亡，Aβ组细胞凋亡率为63％，高于银杏组21％(x^2=36．2069，P=0．0000)。结论：银杏提取物可抑制Aβ诱导的PC12细胞凋亡。     

人参皂苷Rg1．对淀粉样β蛋白诱导大鼠海马神经元损伤的保护

目的：观察人参皂苷Rg1对淀粉样β蛋白25-35诱导的海马神经元细胞损伤是否具有保护作用，并分析其作用机制。 方法：实验于2004-03／2005-03在广州中医药大学临床药理研究所DME中心完成。①取新生24h清洁级SD大鼠，无菌环境下取出海马组织进行贴壁培养并以B27无血清培养基添加剂抑制非神经元细胞的生长。②海马神经元形态及细胞活力观察：细胞培养7d至分化成熟状态，然后被随机分为3组：人参皂苷Rg1预处理组（分为1，2,4，8，16μmol／L5个浓度组）。首先每加入各浓度的Rg1（中国药品生物制品检定所提供，批号：0703—200221）预作用24h后，再加入40μmoL／L淀粉样β蛋白25～35共孵育24h；模型组：每孔加入40μmol／L淀粉样β蛋白25-35作用24h；空白组：正常细胞培养用液；每组均为8孔。运用倒置显微镜进行海马神经元形态学观察，四甲基偶氮唑盐比色法法检澍细胞活力。即吸光度（A值），该值越高说明细胞活力越强。⑨检测核因子κB活性：调整细胞悬液密度为2&;#215;10^8L^-1，接种于6孔板（内置已用多聚赖氨酸包被的盖玻片），1mL／孔。随机分为5组（3孔／组）：正常组，模型组，2，4，8μmol／L人参皂甙Rg1预处理组。细胞培养7d后，2，4，8μmol／L人参皂甙Rg1预处理组加终浓度为2，4，8μmol／L的人参皂甙Rg1预作用24h后，与模型组一起加40μmol／L淀粉样β蛋白，作用24h。激光共聚焦显微镜检测核因子κB在细胞内的激活程度，以图像分析仪计算核区荧光与胞浆区荧光比值，比值越高说明核因子κB活性越高。④计量结果差异比较采用单因素方差分析。 结果：①神经元细胞形态：相差显微镜下可见人参皂甙Rg1预处理组细胞损伤相对较模型组轻，但较正常组严重。②海马神经元细胞活力：正常组和2，4μmol／L人参皂甙Rg1预处理组明显高于模型组（P〈0．05），以4μmol／L人参皂甙Rg1预处理组最高；1，8，16μmol／L人参皂甙Rg1预处理组虽然也高于模型组，但差异不明显（P〉0．05）。⑧神经元细胞核因子κB活性：正常组和2，4，8μmol／L人参皂甙Rg1预处理组明显高于模型组（P〈0．01），以4μmol/L人参皂甙Rg1预处理组最高；4,8μmol／L人参皂甙Rg1预处理组明显高于正常组（P〈0.01）。 结论：人参皂甙Rg1对淀粉样β蛋白25-35诱导的大鼠海马神经元损伤具有保护作用，尤以4μmol／L人参皂甙Rg1作用效果最明显。核因子κB信号通路可能是人参皂甙Rg1对抗淀粉样β蛋白25～35细胞毒性作用的重要途径之一。     

β—淀粉样蛋白对阿尔茨海默病大鼠脑局部神经元超微结构的影响

目的：探讨Meynert核注射β-淀粉样蛋白（Aβ）后对大鼠脑神经细胞超微结构的影响及其可能机制。方法：将1μ1Aβ1-40(10μg/μl)在立体定向仪下注入大鼠右侧Meynert核，分别于1、4周时用透射电镜观察脑组织中神经细胞超微结构。结果：Aβ注射1周后，实验组Meynert核、海马区和皮层区均可见一些神经细胞核染色质浓缩成团块并见边缘现象，神经细胞有发生凋亡的趋势；4周时可见典型的神经细胞凋亡；突触结构数量减少。正常对照组和假手术组超微结构基本正常。结论：Aβ注入Meynert核能引发CNS神经细胞凋亡和突触结构减少，可能是AD记忆障碍和痴呆形成的重要机制之一。     

人参皂苷Rg1对淀粉样β蛋白诱导大鼠海马神经元损伤的保护

目的:观察人参皂苷Rg1对淀粉样β蛋白25～35诱导的海马神经元细胞损伤是否具有保护作用,并分析其作用机制。方法:实验于2004-03/2005-03在广州中医药大学临床药理研究所DME中心完成。①取新生24h清洁级SD大鼠,无菌环境下取出海马组织进行贴壁培养并以B27无血清培养基添加剂抑制非神经元细胞的生长。②海马神经元形态及细胞活力观察:细胞培养7d至分化成熟状态,然后被随机分为3组:人参皂苷Rg1预处理组(分为1,2,4,8,16μmol/L5个浓度组),首先每加入各浓度的Rg1(中国药品生物制品检定所提供,批号:0703-200221)预作用24h后,再加入40μmol/L淀粉样β蛋白25～35共孵育24h;模型组:每孔加入40μmol/L淀粉样β蛋白25～35作用24h;空白组:正常细胞培养用液;每组均为8孔。运用倒置显微镜进行海马神经元形态学观察,四甲基偶氮唑盐比色法法检测细胞活力,即吸光度(A值),该值越高说明细胞活力越强。③检测核因子κB活性:调整细胞悬液密度为2×108L-1,接种于6孔板(内置已用多聚赖氨酸包被的盖玻片),1mL/孔。随机分为5组(3孔/组):正常组,模型组,2,4,8μmol/L人参皂甙Rg1预处理组。细胞培养7d后,2,4,8μmol/L人参皂甙Rg1预处理组加终浓度为2,4,8μmol/L的人参皂甙Rg1预作用24h后,与模型组一起加40μmol/L淀粉样β蛋白,作用24h。激光共聚焦显微镜检测核因子κB在细胞内的激活程度,以图像分析仪计算核区荧光与胞浆区荧光比值,比值越高说明核因子κB活性越高。④计量结果差异比较采用单因素方差分析。结果:①神经元细胞形态:相差显微镜下可见人参皂甙Rg1预处理组细胞损伤相对较模型组轻,但较正常组严重。②海马神经元细胞活力:正常组和2,4μmol/L人参皂甙Rg1预处理组明显高于模型组(P<0.05),以4μmol/L人参皂甙Rg1预处理组最高;1,8,16μmol/L人参皂甙Rg1预处理组虽然也高于模型组,但差异不明显(P>0.05)。③神经元细胞核因子κB活性:正常组和2,4,8μmol/L人参皂甙Rg1预处理组明显高于模型组(P<0.01),以4μmol/L人参皂甙Rg1预处理组最高;4,8μmol/L人参皂甙Rg1预处理组明显高于正常组(P<0.01)。结论:人参皂甙Rg1对淀粉样β蛋白25～35诱导的大鼠海马神经元损伤具有保护作用,尤以4μmol/L人参皂甙Rg1作用效果最明显。核因子κB信号通路可能是人参皂甙Rg1对抗淀粉样β蛋白25～35细胞毒性作用的重要途径之一。     

调心方对淀粉样β蛋白25～35杏仁核注射诱导的痴呆模型大鼠淀粉样肽前体mRNA表达的影响

目的：观察调心方对淀粉样β蛋白杏仁核注射诱导的痴呆模型大鼠脑内淀粉样肽前体mRNA表达，淀粉样β蛋白沉积及星形胶质细胞增殖作用，并与多萘哌齐比较。方法：实验于2001—01／2004—01在上海中医药大学老年医学研究所实验室完成。取SD大鼠40只，随机分为正常对照组、假手术组，模型组、调心方组、多萘哌齐组5组，每组8只。①给药：各组动物于造模前1周开始给药，调心方组给予调心方（党参、茯苓、远志、桂枝、菖蒲等组成，7．45g／mL）24．8g／kg，多萘哌齐组应用多萘哌齐组5mg／kg；其余各组用1mL双蒸水，每天灌胃1次，连续3周。②造模：正常对照组不造模；模型组、调心方组、多萘哌齐组大鼠通过单侧杏仁核注射淀粉样β蛋白25～35（5．0nmol）造成痴呆大鼠模型；假手术组切开皮肤后立即缝合。③观察指标：各组大鼠给药完毕后麻醉状态下处死取脑，采用免疫组化法观察老年斑的主要成分淀粉样β蛋白1～40沉积和星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白的表达，反转录一聚合酶链反应法观察淀粉样肽前体KPI和MPI mRNA的表达。结果：40只大鼠全部进入结果分析。①淀粉样β蛋白1～40的阳性表达：模型组可见皮质、海马大量阳性细胞表达，其吸光度显著高于正常对照组和假手术组，调心方组显著低于模型组（P〈0．01）。多萘哌齐组虽有降低但不明显（P〉0．05）。②胶质纤维酸性蛋白的表达：与正常组和假手术组相比，模型组海马、皮质内胶质阳性细胞广泛增多，吸光度值亦高（P〈0．01）；调心方组显著低于模型组（P〈0．01）。而多萘哌齐组作用不明显。③反转录-聚合酶链反应结果：调心方组KPI（1269bp），MPI（297bp）条带表达均明显减弱，抑制大脑皮质和海马淀粉样肽前体751／770mRNA的表达。结论：淀粉样β蛋白沉积能激活胶质细胞分泌多种炎性细胞因子，诱发炎症反应，进一步促使淀粉样肽前体mRNA的表达和淀粉样β蛋白的沉积，启动炎症和免疫级联反应诱导老年斑的形成。而调心方可显著减少模型大鼠脑内胶质纤维酸性蛋白和淀粉样肽前体mRNA的表达，抑制炎症反应，从而进一步减轻淀粉样β蛋白的大量沉积，其效果优于多萘哌齐。     

阿魏酸钠对淀粉样β蛋白致神经细胞损伤的保护作用

目的：通过检测阿魏酸钠对联合培养的神经细胞和巨噬细胞中神经细胞的乳酸脱氢酶漏出量和微管相关蛋白-2的影响，观察阿魏酸钠对淀粉样B蛋白激活巨噬细胞引起神经细胞损伤的保护作用。 方法：实验于2004-05／12在锦州医学院药理实验室和解剖实验室完成。选择8～10周龄的小鼠进行巨噬细胞培养，出生两三天的大乳鼠进行神经细胞培养。单独培养的神经细胞和巨噬细胞：将加入10μmol／L淀粉样β蛋白和未加入淀粉样β蛋白的巨噬细胞上清液分别移入单独培养的神经细胞中，通过Hoechst33258染色检测神经细胞的凋亡百分比。联合培养的神经细胞和巨噬细胞：联合培养24h后，加入10μmol／L的淀粉样β蛋白，阿魏酸钠组同时加入不同浓度（10μmol／L，100μmol／L，500μmol／L）阿魏酸钠共孵育。48h后．采用免疫组织化学方法和乳酸脱氢酶检测试剂盒检测微管相关蛋白-2表达水平和乳酸脱氢酶漏出量。 结果：将淀粉样β蛋白激活的巨噬细胞上清液移入到单独培养的神经细胞48h后，可使凋亡神经细胞的百分比明显增加，从正常11.3％增加到74．0％．（P〈0．01）。在巨噬细胞和神经细胞联合培养中，淀粉样β蛋白组与空白对照组相比，乳酸脱氢酶漏出量明显增加，由375nkat／L增加到2859nkat／L，微管相关蛋白-2表达阳性的神经元数目相应减少，与淀粉样B蛋白组相比，阿魏酸钠（10μmol／L，100μmol／L，500μmol／L，1mmol／L）能显著地降低乳酸脱氢酶漏出量，使微管相关蛋白-2表达阳性的神经细胞数目明显增加，呈剂量依赖性（P〈0．05）。 结论：①淀粉样β蛋白是通过激活巨噬细胞，使其释放毒性物质，从而引起神经细胞的损伤。②阿魏酸钠对淀粉样β蛋白引起的神经细胞损伤具有保护作用.     

阿尔茨海默病发病中淀粉样β蛋白的神经毒性作用

目的：学习和掌握淀粉样β蛋白的生物学特征，认识其在阿尔茨海默病的发病中的几种可能作用以及以淀粉样β蛋白为靶点的阿尔茨海默病治疗策略的最新进展研究。资料来源：应用计算机检索“Medline1994-01／2004-01”与淀粉样β蛋白相关文献，检索词为“β-amyloid”，限定文章语言种类为English；同时计算机检索“中国期刊网”1994-01／2004-01与淀粉样蛋白相关文献，检索词为“淀粉样蛋白”，二次检索词为“阿尔茨海默病”，限定文章语言种类为汉语。资料选择：就检索到的400余篇文献进行筛选，选择以阿尔茨海默病为研究对象、以淀粉样β蛋白为主要研究内容的文献60多篇，其中研究内容相似的，以近5年且发表在较权威杂志者优先，排除综述类文献。资料提炼：将筛选到的30篇文献按结构、功能和疾病关系分类：其中2篇与淀粉样β蛋白的结构相关，13篇与淀粉样β蛋白神经毒性相关，15篇与淀粉样β蛋白在阿尔茨海默病发病中的作用以其为治疗靶点的研究有关。资料综合：32篇文献包括体内实验和体外实验研究，说明了淀粉样β蛋白的神经毒性作用，它可诱导性活氧产生自由基损伤，诱导细胞凋亡，并刺激中枢神经系统发生炎症反应，故大多数学者认为淀粉样β蛋白在脑组织中的沉积可能是阿尔茨海默病发生、发展的中心环节，因此以阻止或减少脑内淀粉样β蛋白的数量为目标的治疗策略，可能直接作用于阿尔茨海默病的病理过程。结论：淀粉样β蛋白在阿尔茨海默病发病中起关键作用，以淀粉样β蛋白为靶点的阿尔茨海默病防治策略正在被广泛研究和应用。     

银杏叶提取物保护心血管系统功能的作用

目的:回顾银杏叶提取物对心血管系统功能的保护作用研究现状,为银杏叶提取物保护心血管系统功能进一步研究提供回顾性文献资料。资料来源:应用计算机检索万方数据库,检索时间段为2000-01/2005-11,检索内容为银杏叶方面的文章,中文检索词“银杏叶”,检出文献134篇。在Pubmed检索相关文献2篇。资料选择:对资料进行初审,选取银杏叶提取物对心血管系统功能保护作用的研究文献,筛除明显不随机临床试验,对剩余的文献查找全文。资料提炼:共收集到39篇关于银杏叶提取物对心血管系统功能保护作用的研究文献,应用31篇,排除的8篇文献中,4篇系重复研究,4篇为未设立对照组的临床研究。资料综合:33篇中有31篇与银杏叶提取物预防和治疗心血管病有关,2篇与内皮型一氧化氮合酶和一氧化氮功能障碍与动脉粥样硬化关系有关。说明银杏叶提取物通过抗氧化,清除自由基,降血脂和血黏,抗血小板激活因子,防止内皮功能失调,抗缺血和缺血再灌注损伤,抗心律失常等作用达到保护心血管系统功能的作用。结论:银杏叶提取物可通过多种途径对心血管功能起到保护作用。     

银杏叶提取物保护心血管系统功能的作用

目的：回顾银杏叶提取物对心血管系统功能的保护作用研究现状，为银杏叶提取物保护心血管系统功能进一步研究提供回顾性文献资料。 资料来源：应用计算机检索万方数据库，检索时间段为2000—01／2005—11，检索内容为银杏叶方面的文章，中文检索词“银杏叶”，检出文献134篇。在Pubreed检索相关文献2篇。 资料选择：对资料进行初审，选取银杏叶提取物对心血管系统功能保护作用的研究文献，筛除明显不随机临床试验，对剩余的文献查找全文。 资料提炼：共收集到39篇关于银杏叶提取物对心血管系统功能保护作用的研究文献。应用31篇，排除的8篇文献中，4篇系重复研究，4篇为未设立对照组的临床研究。 资料综合：33篇中有31篇与银杏叶提取物预防和治疗心血管病有关，2篇与内皮型一氧化氮合酶和一氧化氯功能障碍与动脉粥样硬化关系有关。说明银杏叶提取物通过抗氧化。清除自由基。降血脂和血黏，抗血小板激活因子，防止内皮功能失调。抗缺血和缺血再灌注损伤，抗心律失常等作用达到保护心血管系统功能的作用。 结论：银杏叶提取物可通过多种途径对心血管功能起到保护作用。     

银杏叶提取物对实验性脊髓损伤的保护作用

目的:探讨银杏叶提取物(extractofleaveginkgobiloba,EGb)对脊髓继发性损伤的保护作用,并与甲基强地松龙(methylprednisolone,MP)进行对照。方法:实验于2004-06/08在武汉大学人民医院实验动物中心完成。SD大鼠54只,以改良Allen氏法制备脊髓挫伤模型,随机分为3组。测定不同药物处理后12,24h脊髓组织线粒体超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活性和丙二醛浓度以及微循环指标改变,光镜观察用药后1周EGb对病理学改变的影响。结果:EGb处理后脊髓组织丙二醛浓度明显低于各时相点对照组,SOD活性显著升高(P<0.05),与MP治疗组无明显差异(P>0.05)。微循环指标也有所改善。病理检查发现EGb治疗组空泡变性范围减小,炎症反应较轻。结论:EGb可以缓解脂质过氧化反应,防止微血栓形成,具有脊髓保护作用。     

银杏叶提取物对急性失血性休克家兔肺损伤的保护作用

目的:探讨以黄酮类和内酯类化合物为主要成分的具有拮抗血小板活化因子、清除氧自由基、减少炎性介质生成和保护脑缺血再灌注损伤等多种药理作用的银杏叶提取物对急性失血性休克家兔肺损伤模型的保护作用。方法:实验于2004-10/2005-06在潍坊医学院麻醉学研究室进行,选取健康家兔36只,随机分为对照组、模型组、银杏叶提取物干预组,每组12只。除对照组外,其余动物以“Wiggers改良法”制备家兔急性失血性休克肺损伤模型:模型组,低血压60min后,经静脉回输失血和等量乳酸林格氏液,在30min内进行复苏;银杏叶提取物组,建立休克模型后,由静脉回输失血和等量林格氏液(内含银杏叶提取物25mg/kg,银杏叶提取物由潍坊医学院应用药理学实验室提取,加生理盐水配制成25g/L的乳剂)进行复苏;对照组,仅分离股动静脉,静脉输入等量乳酸林格氏液。分别于休克前、复苏成功时、治疗1h、2h取动脉血1.0mL,放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子α含量。复苏2h末,迅速处死各组动物取肺组织,计算肺组织的含水率[(湿质量-干质量)/湿质量×100%]。免疫组化法检测缺血肺组织核因子κB阳性细胞率并进行光镜病理观察。结果:实验动物健康家兔36只全部进入结果分析。①模型组、银杏叶提取物组急性失血性休克复苏成功率分别为66.7%(8/12只)、75.0%(9/12只),无明显差异(P>0.05)。对照组无死亡病例。②复苏后,模型组与银杏叶提取物组肺组织的含水率均较对照组升高,且模型组升高程度明显高于银杏叶提取物组[(83.59±3.09),(76.37±3.45),(72.26±3.14);F=31.52,P<0.01]。③在休克复苏时、复苏1h、复苏2h模型组和银杏叶提取物组家兔血清肿瘤坏死因子α的含量均较对照组升高,且同一时间模型组升高程度较银杏叶提取物组明显[(162.38±22.33),(163.46±21.83),(74.64±14.29);(280.63±23.29),(259.72±17.22),(75.41±14.46);(512.44±23.56),(338.99±20.26),(75.98±14.26)μg/L;q=3.538～69.923,P<0.01]。④复苏2h末,组与银杏叶提取物组家兔肺组织中核因子κB阳性细胞率均升高(F=3615.20,P<0.01),模型组升高的程度尤为明显(q=62.721,P<0.01)。⑤苏木精-伊红染色和免疫组化光镜病理检查显示肺组织、肺间质水肿、肺泡隔增宽、中性粒细胞浸润。应用银杏叶提取物组家兔肺组织损伤和炎性细胞浸润较轻。结论:银杏叶提取物对家兔失血性休克肺损伤具有一定的保护作用,机制可能与减少肿瘤坏死因子α的生成,抑制缺血肺组织核因子κB活性有关。     

银杏叶提取物对急性失血性休克家兔肺损伤的保护作用

目的：探讨以黄酮类和内酯类化合物为主要成分的具有拮抗血小板活化因子、清除氧自由基、减少炎性介质生成和保护脑缺血再灌注损伤等多种药理作用的银杏叶提取物对急性失血性休克家兔肺损伤模型的保护作用。 方法：实验于2004-10／2005-06在潍坊医学院麻醉学研究室进行，选取健康家兔36只，随机分为对照组、模型组、银杏叶提取物干预组，每组12只。除对照组外，其余动物以“Wiggers改良法”制备家兔急性失血性休克肺损伤模型：模型组，低血压60min后，经静脉回输失血和等量乳酸林格氏液，在30min内进行复苏；银杏叶提取物组，建立休克模型后，由静脉回输失血和等量林格氏液（内含银杏叶提取物25mg／kg，银杏叶提取物由潍坊医学院应用药理学实验室提取，加生理盐水配制成25g/L的乳剂）进行复苏；对照组，仅分离股动静脉，静脉输入等量乳酸林格氏液。分别于休克前、复苏成功时、治疗1h、2h取动脉血1．0mL，放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子α含量。复苏2h末，迅速处死各组动物取肺组织，计算肺组织的含水率[（湿质量-干质量）／湿质量&;#215;100％]。免疫组化法检测缺血肺组织核因子κB阳性细胞率并进行光镜病理观察。 结果：实验动物健康家兔36只全部进入结果分析。①模型组、银杏叶提取物组急性失血性休克复苏成功率分别为66．7％（8／12只）、75．0％（9／12只），无明显差异（P〉0．05）。对照组无死亡病例。②复苏后，模型组与银杏叶提取物组肺组织的含水率均较对照组升高，且模型组升高程度明显高于银杏叶提取物组[（83．59&;#177;3．09），（76．37&;#177;3．45），（72．26&;#177;3．14）；F=31.52，P〈0．01]。③在休克复苏时、复苏1h、复苏2h模型组和银杏叶提取物组家兔血清肿瘤坏死因子α的含量均较对照组升高，且同一时间模型组升高程度较银杏叶提取物组明显[（162．38&;#177;22．33），（163．46&;#177;21．83），（74．64&;#177;14．29）；（280．63&;#177;23．29），（259.1&;#177;7．22），（75．41&;#177;14．46）；（512．44&;#177;23．56），（338．99&;#177;20．26），（75．98&;#177;14．26）m；q=3．538-69．923，P〈0．01]。④复苏2h末，组与银杏叶提取物组家兔肺组织中核因子κB阳性细胞率均升高（F=3615．20，P〈0．01），模型组升高的程度尤为明显（q=62．721，P〈0．01）。⑤苏木精-伊红染色和免疫组化光镜病理检查显示肺组织、肺间质水肿、肺泡隔增宽、中性粒细胞浸润。应用银杏叶提取物组家兔肺组织损伤和炎性细胞浸润较轻。 结论：银杏叶提取物对家兔失血性休克肺损伤具有一定的保护作用，机制可能与减少肿瘤坏死因子α的生成，抑制缺血肺组织核因子κB活性有关。     

银杏叶提取物对神经细胞凋亡的影响

随着世界人口老龄化的发展及神经系统疾病发病率的升高,对神经系统具有保护作用的临床药物的研究正日益受到人们的重视,银杏叶提取物便是其中之一。因其具有多种药理作用且不良反应少而引起了医学研究人员的重视且在临床得到广泛的应用。文章主要就近年来对银杏叶提取物影响神经细胞凋亡的各方面研究简要做一综述。     

银杏提取物对2型糖尿病大鼠胰腺移植的保护作用

背景：银杏提取物具有抗氧化、清除自由基和抗血小板激活因子的药理作用，并且可以减轻多种器官的缺血再灌注损伤。 目的：观察银杏叶提取物能否减轻2型糖尿病大鼠接受的移植胰的缺血再灌注损伤。 设计：完全随机分组设计，对照实验。 单位：解放军第四军医大学西京医院胃肠外科和麻醉科。 材料：选用SD雄性大鼠128只，3-6月龄，体质量250～320g。银杏叶提取物（德国威玛舒培大药厂，5mL／支，含有银杏提取物17．5mg，其中银杏黄酮苷4．2mg，生产批号：1511102）。 方法：实验于2001—09／2004-04在胃肠外科实验室完成。①取80只大鼠自阴茎静脉注射链脲佐菌素65mg／kg，其中60只空腹血糖持续2周超过17．4mmol／L者视为2型糖尿病大鼠。其余48只正常大鼠为供体。②将60只糖尿病大鼠随机分为2组：缺血再灌注组和银杏叶提取物组，每组30只。2组均行胰腺移植。缺血再灌注组于获取供胰前以4℃肝素冰平衡盐液（1．5&;#215;10^5U／L）灌洗20min；银杏叶提取物组于移植前1d及术前30min经静脉分别予受体注射银杏叶提取物1．5mL／kg，缺血再灌注组经静脉注射同等容积生理盐水。供胰均置入4℃肝素冰平衡盐液（1．5&;#215;10^5U／L）中保存，各组控制冷缺血时间为180min，热缺血时间为15min。③两组移植前2d，移植后3和7d随机各处死6只大鼠，取血查空腹血糖，并按由南京建成生物工程研究所提供的相应试剂盒说明检测血淀粉酶活性；同时取胰腺组织行苏木精-伊红染色；6只大鼠用于观测各种代谢指标。其余6只大鼠用来观察大鼠移植术后1个月内存活率。④计量资料差异比较采用配对t检验。 主要观察指标：①两组受体大鼠移植胰腺前后空腹血糖水平、代谢指标、血淀粉酶活性变化。②两组受体大鼠移植术后3和7d移植胰腺的病理形态。 结果：受体大鼠60只均完成血糖、饮水量、进食量、排尿量、血淀粉酶测定。①银杏叶提取物组移植术后1个月内存活率明显高于缺血再灌注组（83％，33％，P〈0．01）。②缺血再灌注组和银杏叶提取物组大鼠移植术后3和7d空腹血糖、饮水量、进食量、排尿量均明显较移植前2d下降（P〈0．05～0．01），银杏叶提取物组大鼠移植术后3和7d明显低于缺血再灌注组（P〈0．05-0．01）。③缺血再灌注组和银杏叶提取物组大鼠移植后3d血淀粉酶活性较移植前明显升高（P〈0．01，0．05）；缺血再灌注组移植后7d血淀粉酶活性仍明显高于移植前2d（P〈0．01），银杏叶提取物组已基本恢复正常；移植后3和7d银杏叶提取物组血淀粉酶活性均明显低于缺血再灌注组（P〈0．01）。④病理观察结果显示，胰腺移植术后，缺血再灌注组胰腺的损伤程度大于银杏叶提取物组。 结论：银杏叶提取物预处理可增加大鼠胰腺移植的存活率，降低血淀粉酶活性，改善代谢，减轻了胰腺的再灌注损伤程度，对大鼠的胰腺移植具有保护作用。     

银杏提取物对2型糖尿病大鼠胰腺移植的保护作用

背景:银杏提取物具有抗氧化、清除自由基和抗血小板激活因子的药理作用,并且可以减轻多种器官的缺血再灌注损伤。目的:观察银杏叶提取物能否减轻2型糖尿病大鼠接受的移植胰的缺血再灌注损伤。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:解放军第四军医大学西京医院胃肠外科和麻醉科。材料:选用SD雄性大鼠128只,3～6月龄,体质量250～320g。银杏叶提取物(德国威玛舒培大药厂,5mL/支,含有银杏提取物17.5mg,其中银杏黄酮苷4.2mg,生产批号:1511102)。方法:实验于2001-09/2004-04在胃肠外科实验室完成。①取80只大鼠自阴茎静脉注射链脲佐菌素65mg/kg,其中60只空腹血糖持续2周超过17.4mmol/L者视为2型糖尿病大鼠。其余48只正常大鼠为供体。②将60只糖尿病大鼠随机分为2组:缺血再灌注组和银杏叶提取物组,每组30只。2组均行胰腺移植。缺血再灌注组于获取供胰前以4℃肝素冰平衡盐液(1.5×105U/L)灌洗20min;银杏叶提取物组于移植前1d及术前30min经静脉分别予受体注射银杏叶提取物1.5mL/kg,缺血再灌注组经静脉注射同等容积生理盐水。供胰均置入4℃肝素冰平衡盐液(1.5×105U/L)中保存,各组控制冷缺血时间为180min,热缺血时间为15min。③两组移植前2d,移植后3和7d随机各处死6只大鼠,取血查空腹血糖,并按由南京建成生物工程研究所提供的相应试剂盒说明检测血淀粉酶活性;同时取胰腺组织行苏木精-伊红染色;6只大鼠用于观测各种代谢指标。其余6只大鼠用来观察大鼠移植术后1个月内存活率。④计量资料差异比较采用配对t检验。主要观察指标:①两组受体大鼠移植胰腺前后空腹血糖水平、代谢指标、血淀粉酶活性变化。②两组受体大鼠移植术后3和7d移植胰腺的病理形态。结果:受体大鼠60只均完成血糖、饮水量、进食量、排尿量、血淀粉酶测定。①银杏叶提取物组移植术后1个月内存活率明显高于缺血再灌注组(83%,33%,P<0.01)。②缺血再灌注组和银杏叶提取物组大鼠移植术后3和7d空腹血糖、饮水量、进食量、排尿量均明显较移植前2d下降(P<0.05～0.01),银杏叶提取物组大鼠移植术后3和7d明显低于缺血再灌注组(P<0.05～0.01)。③缺血再灌注组和银杏叶提取物组大鼠移植后3d血淀粉酶活性较移植前明显升高(P<0.01,0.05);缺血再灌注组移植后7d血淀粉酶活性仍明显高于移植前2d(P<0.01),银杏叶提取物组已基本恢复正常;移植后3和7d银杏叶提取物组血淀粉酶活性均明显低于缺血再灌注组(P<0.01)。④病理观察结果显示,胰腺移植术后,缺血再灌注组胰腺的损伤程度大于银杏叶提取物组。结论:银杏叶提取物预处理可增加大鼠胰腺移植的存活率,降低血淀粉酶活性,改善代谢,减轻了胰腺的再灌注损伤程度,对大鼠的胰腺移植具有保护作用。     

银杏叶提取物对非酒精性脂肪性肝炎肝损伤的保护作用

目的:研究银杏叶提取物对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝损伤的保护作用.方法:Wistar大鼠随机分成3组,正常组予正常饮食喂养,模型组予高脂饮食喂养,治疗组予高脂饮食同时给予6 mg/kg的银杏叶提取物喂养,每天1次.于12周末处死大鼠,测血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原肽(PCⅢ)和Ⅳ型胶原(C-Ⅳ);取肝组织作HE染色,病理分级,同时检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量.结果:与模型组比较,治疗组肝细胞损害较轻,肝功明显改善,肝组织中MDA含量下降,SOD含量上升,且反映肝纤维化的指标HA、LN、PCⅢ和C-Ⅳ均显著降低(P＜0.01).结论:银杏叶提取物具有抑制非酒精性脂肪性肝炎肝损伤的作用.