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1.
口腔鳞癌中趋化因子受体CXCR4的临床病理及细胞学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的检测CXCR4蛋白在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织和OSCC细胞系中的表达,探讨CXCR4蛋白的表达与OSCC临床病理及SDF-1/CXCR4轴与OSCC细胞增殖的关系.方法用免疫组织化学SP法检测91例OSCC中CXCR4的表达,用细胞培养、免疫组化法检测CXCR4蛋白的表达模式,流式细胞仪直接免疫荧光法测定CXCR4蛋白的表达量,MTT法检测细胞的增殖能力.结果CXCR4在OSCC组织中总阳性表达率为62.6%,与肿瘤的大小、病理分级、淋巴结转移、肿瘤增殖密切相关(P<0.05).CXCR4蛋白在OSCC细胞系中亦呈强阳性表达,OSCC细胞在SDF-l作用下增殖反应明显增强,CXCR4抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖.结论CXCR4与肿瘤的大小、病理分级、淋巴结转移及肿瘤增殖密切相关,对评估OSCC的生物学行为有意义. 相似文献
2.
目的 探讨SDF-1/CXCR4生物轴对口腔鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响.方法 采用MTT法检测细胞的增殖能力.通过趋化实验观察细胞的侵袭迁移能力.结果 口腔鳞状细胞癌细胞在SDF-1作用下增殖反应明显增强,CXCR4抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖(P<0.05).趋化实验显示SDF-1可诱导口腔鳞状细胞癌细胞发生明显迁移,经50μg/ml CXCR4抗体孵育后,SDF-1介导Tca8113细胞的这种侵袭能力明显减弱(P<0.05).结论 CXCR 4/SDF-1受体配体系统可介导口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和迁移,在癌细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用.干扰SDF-1/CXCR4的相互作用有可能成为治疗口腔鳞状细胞癌的新方法. 相似文献
3.
目的探讨CXCR4拮抗剂AMD3100对口腔鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响。方法采用MTT法检测细胞的增殖能力。通过趋化实验观察CXCR4特异性拮抗剂AMD3100在口腔鳞状细胞癌细胞的侵袭迁移中的作用。结果 1)口腔鳞状细胞癌细胞在SDF-1作用下增殖反应明显增强,AMD3100可有效抑制肿瘤细胞的增殖。2)趋化实验显示SDF-1可诱导口腔鳞状细胞癌细胞发生明显迁移,AMD3100能阻断CXCR4受体,从而抑制这种趋化和侵袭转移作用。结论 AMD3100能阻断CXCR 4/SDF-1的相互作用,其可能成为治疗口腔鳞状细胞癌的新方法。 相似文献
4.
目的 研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)受体CXCR4在人牙龈干细胞(GMSCs)上的表达及SDF-1对人GMSCs的趋化效应。方法 通过有限稀释法分离并培养人GMSCs,检测其表面干细胞标志物的表达情况,测试其克隆形成率及多向分化能力,利用免疫荧光染色法检测人GMSCs上SDF-1受体CXCR4的表达,用Transwell细胞培养室检测不同质量浓度SDF-1对人GMSCs的趋化反应,光镜下计数迁移至滤膜下侧面的不同视野的细胞数。结果 人GMSCs具有较高的自我更新能力,在体外呈克隆状生长,表达间充质干细胞表面标志物CD44、CD73、CD90、CD105和CD166,而造血干细胞表面标志物CD14、CD34和CD45的表达为阴性。体外诱导培养的人GMSCs能够向成骨细胞及成脂细胞分化,其克隆形成率为21.4%±2.8%。免疫荧光染色显示,人GMSCs表达SDF-1受体CXCR4。SDF-1的质量浓度为100、200 ng·mL-1时,Transwell细胞培养室中迁移的细胞数目(每高倍视野分别为189.3±4.4和164.6±4.9)显著多于空白对照组(每高倍视野47.8±2.5)(P<0.01);使用CXCR4中和抗体处理后,人GMSCs的迁移效应明显受到抑制(每高倍视野降低为29.0±2.4,P<0.01)。结论 人GMSCs表达趋化因子SDF-1受体CXCR4,SDF-1对人GMSCs有趋化效应,这种趋化效应可能是通过其特异性受体CXCR4介导的。 相似文献
5.
目的 研究体外培养人牙髓细胞(human dental pulp cells,HDPC)上CXCR4的表达情况,检测大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激后HDPC培养上清液中基质细胞衍生因子1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)的表达水平,探讨人工重组SDF-1α(recombinant human SDF-1α,rhSDF-1α)对HDPC增殖及迁移的影响.方法 采用免疫细胞化学及间接免疫荧光技术检测HDPC上CXCR4的表达.用不同浓度LPS(0.1、1、10、100 mg/L)和TNF-α(1、10、100μg/L)刺激HDPC 48 h后,ELISA法检测HDPC培养上清液中SDF-1α含量的变化.同时甲基噻唑基四唑(MTT)法及体外趋化实验观察不同浓度rhSDF-1α对HDPC增殖及迁移的影响.结果 正常HDPC胞膜表达CXCR4且其培养上清液分泌SDF-1α,浓度约为(4513.55±962.92)ng/L.在用LPS和TNF-α刺激HDPC后,SDF-1α的表达水平均显著降低(P<0.05).50、100和200μg/L的rhSDF-1α可促进HDPC的增殖(P<0.05),50和100μg/L rhSDF-1α作用9 h可显著趋化HDPC的迁移(P<0.01).结论 CXCR4在HDPC上表达且SDF-1α能促进HDPC的增殖及迁移;SDF-1-CXCR4轴可能在牙髓组织损伤修复中发挥重要作用. 相似文献
6.
张中兴 《牙体牙髓牙周病学杂志》2011,(6):315-319,339
目的:研究基质细胞衍生因子1(Stromal cell-derived factor-1,SDF-1)及其受体CXCR4在人炎性牙髓组织中的表达,探讨SDF-1/CXCR4轴在牙髓炎症发生发展中的可能作用。方法:采用免疫组织化学染色的方法检测SDF-1和CXCR4阳性细胞在健康、炎症牙髓组织中的分布情况。以实时荧光定量RT-PCR方法检测SDF-1mRNA在健康和炎症牙髓中的表达。结果:炎性牙髓中SDF-1、CXCR4主要分布于炎性细胞、成牙本质细胞和微血管内皮细胞。而正常组牙髓少见SDF-1、CXCR4阳性细胞。炎性牙髓中SDF-1mRNA的表达较健康牙髓显著增强。结论:与正常牙髓相比,炎性牙髓组织中SDF-1、CXCR4阳性细胞明显增多。炎性牙髓中SDF-1表达水平明显上调。SDF-1/CXCR4轴可能参与了牙髓炎症损伤和修复过程。 相似文献
7.
目的 检测趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在口腔鳞状细胞癌细胞中的表达及其在肿瘤细胞增殖和 迁移中的作用。方法 采用逆转录聚合酶链式反应和Western blot法检测20例口腔鳞状细胞癌组织、颈部淋巴结组织、舌鳞状细胞癌细胞株Tca8113、颊鳞状细胞癌细胞株Bca885和10例正常口腔黏膜组织中CXCR4的表达,采用逆转录聚合酶链式反应检测CXCL12的表达,通过MTT法检测细胞的增殖能力,通过趋化实验观察CXCR4特异性配体CXCL12对口腔鳞状细胞癌细胞的趋化迁移作用。结果 1)在口腔鳞状细胞癌组织、Tca8113细胞及Bca885细胞中, CXCR4 mRNA的相对表达量分别为2.31±1.13、1.89±1.20、1.67±1.10,CXCR4蛋白的相对表达量分别为1.36±0.15、1.85±0.34、1.97±0.23,正常口腔黏膜组织在mRNA及蛋白质水平均未检测到CXCR4表达。口腔癌患者颈部淋巴结组 织中,CXCL12 mRNA表达量的平均值为1.14±0.87,而口腔鳞状细胞癌组织和正常口腔黏膜组织未检测出CXCL12的 表达。2)口腔鳞状细胞癌细胞在CXCL12作用下增殖反应明显增强,CXCR4抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖。3)趋化实验显示CXCL12可诱导口腔鳞状细胞癌细胞发生明显迁移,在30~100 ng·mL-1的范围内,诱导口腔鳞状细胞癌细 胞迁移的作用呈明显量效关系。结论 CXCR4/CXCL12受体配体系统可介导口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和迁移, 在癌细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用。 相似文献
8.
目的: 探讨柚皮素对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响,SDF-1α/CXCR4信号轴是否参与介导柚皮素促进BMSCs成骨分化。方法: 分离、培养及鉴定大鼠BMSCs,CCK8法检测不同浓度柚皮素对BMSCs增殖的影响,检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;RT-qPCR法检测各组ALP、骨钙素(osteocalcin,OCN)、趋化因子受体4(CXCL receptor 4,CXCR4)和基质细胞衍生因子1α(stromal cell derived factor-1,SDF-1α)的表达,ELISA法检测各组CXCR4和SDF-1α蛋白的表达。采用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 细胞鉴定结果表明,培养细胞为高纯度的BMSCs。第1、3天,柚皮素对BMSCs增殖无显著影响(P>0.05);第5天时,50 μg/mL柚皮素可促进BMSCs增殖;第7天时,不同浓度柚皮素均促进BMSCs增殖(P<0.05);同时,ALP活性随时间推移逐渐增强。RT-qPCR结果表明,柚皮素组和成骨诱导液组中相关基因表达均较培养基组明显增加,而AMD3100组中各基因表达均受到显著抑制(P<0.05)。ELISA检测结果显示,各组CXCR4和SDF-1α蛋白表达随诱导时间增加均逐渐上调,且两者均在100 μg/mL柚皮素组表达最高。结论: 柚皮素可促进BMSCs增殖和成骨向分化,SDF-1α/CXCR4信号轴参与柚皮素对BMSCs的成骨分化,主要在BMSCs成骨分化早期阶段。 相似文献
9.
目的 :研究Wnt信号传导通路中Wnt1蛋白在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达水平,初步探讨Wnt1在OSCC淋巴结转移中的作用。方法:采用免疫组织化学方法,检测60例OSCC中Wnt1的表达情况;采用Western blot法检测5对OSCC临床标本和配对癌周组织中Wnt1的表达;通过实时定量PCR法和Western blot法分别检测高、低转移潜能的HN-12和HN-4口腔鳞癌细胞系中Wnt1基因和蛋白的表达水平;采用生长曲线、划痕实验和Transwell法,分别检测重组蛋白Wnt1对2种细胞的生长情况、迁移能力和侵袭能力的影响。结果:24例淋巴结转移的OSCC中高表达Wnt1,16例未有淋巴结转移的OSCC中低表达Wnt1,Wnt1的表达在两组之间差异有统计学意义(P<0.01);高转移细胞系HN-12较低转移细胞系HN-4在m RNA水平和蛋白水平上Wnt1表达显著增高;重组蛋白Wnt1,能够提高肿瘤细胞的生长、迁移和侵袭能力。结论:Wnt信号通路中的关键分子Wnt1在OSCC中有表达,且与淋巴结转移相关,为进一步探讨Wnt信号通路影响肿瘤转移的分子机制奠定基础。 相似文献
10.
目的 探讨诱导后ATDC5软骨细胞在20%形变的周期性牵张力及基质细胞衍生因子-1(SDF-1)刺激下,趋化因子受体4(CXCR4)、白介素(IL)-6及胶原X的表达变化,以期深入研究SDF-1/CXCR4信号轴在软骨细胞分化中的作用机制。方法 ATDC5细胞系经胰岛素铁硒传递蛋白(ITS)诱导3周后,分为加力和不加力两大组,每大组又分为对照组和SDF-1组。对加力组施以20%形变的拉伸力12 h。加力结束后,对各组细胞提取总蛋白,对CXCR4、IL-6及胶原X的蛋白表达进行Western blot检测。结果在不加力状态下,给予SDF-1刺激后,软骨细胞CXCR4、IL-6及胶原X的表达都出现了不同程度的增强;而在20%形变力和SDF-1的双重刺激下,此3种因子的表达出现进一步增强。结论 在异常应力作用下,SDF-1可通过上调其特异性受体CXCR4的表达进而增大与其结合的效率,最终促使SDF-1/CXCR4信号轴的激活,促进IL-6等炎症因子的表达增强,以及直接促进软骨细胞的肥大向分化,进而胶原X的表达量增高。 相似文献
11.
J Oral Pathol Med (2010) 39 : 63–68
Background: The chemokine SDF-1 and its receptor CXCR4 play active role in the metastasis and proliferation of several malignancies.
Methods: In this study, we used an immunohistochemical technique in 91 specimens of oral squamous cell carcinoma (SCC), and flow cytometry technique in oral SCC cell line, and then evaluated the role of proliferation of CXCR4 using MTT assay in oral SCC cell line.
Results: The expression of CXCR4 in 91 specimens of oral SCC was 62.6% and in oral SCC cell line was 68.6%. There was a significant association between the expression of CXCR4 and lymph node metastasis ( P = 0.012), tumor size ( P = 0.01), UICC stage ( P = 0.016), tumor histology grade ( P < 0.001). SDF-1 stimulated proliferation of oral SCC cell and CXCR4 neutralization by monoclonal antibodies decreased proliferation.
Conclusions: Our results suggest that CXCR4 might be a novel biomarker to evaluate the biological behavior of oral SCC. CXCR4 inhibitors or antagonists might be potential anticancer agents to suppress tumor proliferation. 相似文献
Background: The chemokine SDF-1 and its receptor CXCR4 play active role in the metastasis and proliferation of several malignancies.
Methods: In this study, we used an immunohistochemical technique in 91 specimens of oral squamous cell carcinoma (SCC), and flow cytometry technique in oral SCC cell line, and then evaluated the role of proliferation of CXCR4 using MTT assay in oral SCC cell line.
Results: The expression of CXCR4 in 91 specimens of oral SCC was 62.6% and in oral SCC cell line was 68.6%. There was a significant association between the expression of CXCR4 and lymph node metastasis ( P = 0.012), tumor size ( P = 0.01), UICC stage ( P = 0.016), tumor histology grade ( P < 0.001). SDF-1 stimulated proliferation of oral SCC cell and CXCR4 neutralization by monoclonal antibodies decreased proliferation.
Conclusions: Our results suggest that CXCR4 might be a novel biomarker to evaluate the biological behavior of oral SCC. CXCR4 inhibitors or antagonists might be potential anticancer agents to suppress tumor proliferation. 相似文献
12.
目的:检测Smad7蛋白在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)中的表达及临床意义,探讨其在口腔鳞癌细胞增殖和迁移中的作用。方法:利用免疫组织化学染色,检测31例原发性口腔鳞癌患者肿瘤组织及癌旁标本中Smad7的表达,并分析其与淋巴结转移之间的关系;利用CCK-8及细胞划痕实验检测Smad7基因沉默对肿瘤细胞增殖及迁移能力的影响;通过Smad7 siRNA干扰HN4细胞,影响Smad7蛋白的表达,利用免疫印迹及qRT-PCR检测其对上皮-间充质转化(epithelial- mesenchymal transition,EMT)相关指标蛋白及RNA表达的影响。采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:在口腔鳞癌肿瘤组织中,Smad7蛋白在细胞核和细胞质的表达均显著高于对应的癌旁组织。Smad7的表达与患者颈淋巴结转移显著相关。Smad7 siRNA干扰HN4细胞后,细胞的增殖能力减弱,迁移能力增强。Smad7 siRNA干扰使得HN4细胞神经钙黏附素(N-cadherin)蛋白的表达量升高,而上皮钙黏蛋白(E-cadherin)的表达量下降,N-cadherin蛋白及波形蛋白(Vimentin)RNA表达量显著升高,与对照组相比有显著差异。结论:Smad7的表达与口腔鳞癌患者颈淋巴结转移相关,且Smad7在口腔鳞癌肿瘤细胞的增殖及侵袭转移中发挥重要作用。 相似文献
13.
目的:研究Toll样受体4(TOLL-like receptor 4,TLR4)分子高表达与口腔鳞状细胞癌预后的关系,探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通过TLR4信号通路间接调控口腔鳞状细胞癌增殖转移的潜在机制。方法:采用免疫组织化学法检测50例口腔鳞状细胞癌患者病理切片中TLR4的表达;使用mTOR抑制剂(雷帕霉素)作用于口腔鳞状细胞癌细胞系CAL27后,再用LPS激活TLR4信号通路,通过MTT法检测CAL27细胞的增殖能力,Transwell法检测CAL27细胞的迁移能力, Western 免疫印迹检测其对肿瘤细胞中NF-κB 及MAPK信号通路的影响。采用SPSS 16.0软件包对数据进行统计学分析。结果:TLR4分子高表达与口腔鳞状细胞癌预后差显著相关(P<0.05);雷帕霉素能够显著抑制TLR4激活后的CAL27细胞的增殖和迁移能力(P<0.01),显著抑制TLR4下游的NF-κB 及MAPK信号通路(P<0.01)。结论: mTOR通过TLR4信号通路调控口腔鳞状细胞癌的增殖与转移,有望成为治疗口腔鳞状细胞癌的新靶点。 相似文献
14.
目的:探讨人源DNA聚合酶 δ 催化亚基(POLD1)的表达对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期的影响及其相关机制.方法:使用生物信息数据分析POLD1在头颈部鳞癌及癌旁组织中的表达,利用免疫组织化学染色检测POLD1在40对口腔鳞癌及癌旁... 相似文献
15.
目的 探讨环状RNA hsa_circ_0002203对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞系恶性生物学行为的影响。方法 纳入OSCC患者40例,使用实时荧光聚合酶链反应检测环状RNA hsa_circ_0002203在OSCC组织、癌旁组织、OSCC细胞系和人口腔黏膜角质形成细胞(HOK)中的表达水平。慢病毒感染SCC15和CAL27细胞,实时荧光聚合酶链反应检测环状RNA hsa_circ_0002203的表达,细胞计数(CCK-8)实验检测细胞增殖能力,划痕实验和Transwell迁移及侵袭实验检测细胞迁移侵袭能力,流式细胞凋亡实验检测细胞凋亡水平,蛋白质印迹法检测细胞增殖凋亡侵袭相关蛋白的表达。通过裸鼠成瘤实验观察hsa_circ_0002203对SCC15细胞体外成瘤能力的影响。结果 环状RNA hsa_ circ_0002203在OSCC组织的表达低于癌旁组织(P<0.01),在OSCC细胞系中的表达低于人类角质形成细胞(P< 0.001)。慢病毒感染SCC15和CAL27细胞后hsa_circ_0002203的表达增加;SCC15和CAL27细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降,凋亡水平增加;裸鼠肿瘤体积、质量减小,生长速度降低。结论 环状RNA hsa_circ_ 0002203在口腔鳞状细胞癌中的低表达可以增强肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制肿瘤细胞凋亡。 相似文献
16.
目的 探讨环状RNA hsa_circ_0002203对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞系恶性生物学行为的影响。方法 纳入OSCC患者40例,使用实时荧光聚合酶链反应检测环状RNA hsa_circ_0002203在OSCC组织、癌旁组织、OSCC细胞系和人口腔黏膜角质形成细胞(HOK)中的表达水平。慢病毒感染SCC15和CAL27细胞,实时荧光聚合酶链反应检测环状RNA hsa_circ_0002203的表达,细胞计数(CCK-8)实验检测细胞增殖能力,划痕实验和Transwell迁移及侵袭实验检测细胞迁移侵袭能力,流式细胞凋亡实验检测细胞凋亡水平,蛋白质印迹法检测细胞增殖凋亡侵袭相关蛋白的表达。通过裸鼠成瘤实验观察hsa_circ_0002203对SCC15细胞体外成瘤能力的影响。结果 环状RNA hsa_ circ_0002203在OSCC组织的表达低于癌旁组织(P<0.01),在OSCC细胞系中的表达低于人类角质形成细胞(P< 0.001)。慢病毒感染SCC15和CAL27细胞后hsa_circ_0002203的表达增加;SCC15和CAL27细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降,凋亡水平增加;裸鼠肿瘤体积、质量减小,生长速度降低。结论 环状RNA hsa_circ_ 0002203在口腔鳞状细胞癌中的低表达可以增强肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制肿瘤细胞凋亡。 相似文献
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Expression and significance of stromal cell-derived factor-1alpha and its receptor CXCR4 in human dental pulp cells 总被引:1,自引:0,他引:1
OBJECTIVE: To investigate the expression of CXCR4 in cultured human dental pulp cells (HDPC) in vitro and the corresponding ligand SDF-1alpha level of HDPC supenatants stimulated by lipopolysaccharide (LPS) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), and to explore the role of SDF-1alpha on the proliferation and the migration of HDPC. METHODS: The expression of CXCR4 in HDPC was detected by immunocytochemistry technique and indirect immunofluorescence technique. The culture supernatants of HDPC were collected after HDPC had been simulated by LPS and TNF-alpha of different concentrations for 48h and then the SDF-1alpha level was assayed by quantitative sandwich ELISA. Meanwhile, the effects of recombinant human SDF-1alpha (rhSDF-1alpha) on the proliferation and the migration of HDPC at different concentrations were observed by MTT and Boyden Chamber Assay. RESULTS: CXCR4 was expressed in cytomembrane of HDPC and SDF-1alpha was secreted into their normal cell supernatants with a concentration of (4513.55 +/- 962.92) ng/L. The secretion of SDF-1alpha was both significantly decreased by stimulation with LPS and TNF-alpha (P < 0.05). In addition, rhSDF-1alpha stimulated the HDPC proliferation at the concentrations of 50, 100, 200 microg/L (P < 0.01) and increased the chemotactic migration of HDPC significantly after 9h's incubation with the concentrations of 50, 100 microg/L (P < 0.05). CONCLUSIONS: SDF-1alpha accelerated the proliferation and the migration of HDPC which expressed CXCR4. SDF-1-CXCR4 axis may play a role in repair of pulp injury. 相似文献
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目的 初步探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)与口腔鳞状细胞癌(鳞癌)细胞生物学特性关系。方法 体外培养口腔鳞癌细胞株KB和FaDu细胞,MTT法比较2种细胞的增殖活性,基质胶侵袭实验和划痕实验检测比较2种口腔癌细胞的侵袭和迁移能力的差异,免疫组化SP法检测细胞中OPN的表达。结果 KB细胞的增殖、侵袭和迁移能力均高于FaDu细胞,两种细胞中均有OPN的表达,KB的表达量高于FaDu。结论 口腔鳞癌细胞株KB和FaDu细胞生物学特性的差异可能与其OPN表达差异有关,高表达OPN的KB细胞株可以作为体外研究口腔鳞癌中OPN基因作用的实用细胞株。 相似文献