PD-L1下调对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响

目的 研究PD-L1基因对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响,初步探讨PD-L1在口腔鳞癌进展过程中发挥的作用.方法 采用脂质体2000(lipofectamine 2000)转染小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)的方法,对口腔鳞癌细胞系细胞中PD-L1基因进行敲减,real-time PCR检测敲减效果.利用MTT法比较PD-L1敲减组与对照细胞增殖能力的差异.克隆形成实验评价PD-L1对肿瘤细胞克隆形成能力的影响.划痕实验研究PD-L1对细胞迁移能力的影响.Transwell实验验证PD-L1对细胞侵袭能力的影响.提取口腔鳞癌病人组织标本RNA并通过real-time PCR的方法比较PD-L1的表达差异.结果 转染siRNA后,细胞PD-L1表达明显下降,PD-L1敲减细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力都较对照组细胞减弱.在临床标本的检测中,证实了PD-L1在口腔鳞癌组织中高表达.结论 PD-L1能对口腔鳞癌细胞的增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力都具有明显影响,可能在口腔鳞癌的进展过程中发挥一定作用.     

肿瘤相关成纤维细胞对口腔鳞癌细胞生长和迁移的影响

目的：研究肿瘤相关成纤维细胞（ cancer associated fibroblasts, CAFs）对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响,初步探讨CAFs在口腔鳞癌发生发展中的作用。方法采用原代培养的方法,培养口腔鳞癌相关成纤维细胞,光学显微镜观察其形态,免疫组化和免疫印迹实验进行鉴定,CCK-8法检测细胞的增殖能力。 transwell迁移实验检测CAFs诱导口腔鳞癌细胞迁移的能力;萤火虫荧光素酶报告系统检测CAFs对肿瘤细胞增殖能力的影响;平板克隆形成实验评价 CAFs对肿瘤细胞克隆形成能力的影响。结果成功分离培养出口腔鳞癌来源的 CAFs。CAFs能促进口腔鳞细胞的迁移、增殖和克隆形成等生物学行为。结论 CAFs能显著影响口腔鳞癌的增殖和迁移,表明其在口腔鳞癌的发生发展中发挥着一定的作用。     

口腔鳞癌细胞原代培养及其临床影响因素

目的：比较植块培养法与胰蛋白酶消化法原代培养口腔鳞状细胞癌组织,并探讨培养成功的临床影响因素.方法：分别用植块培养法和胰蛋白酶消化法,对48例人口腔鳞状细胞癌组织进行体外培养,观察癌细胞生长情况.结果：①48例样本中24例培养成功,细胞生长率50%.②植块培养法优于胰蛋白酶消化培养法,植块培养法细胞生长率38%,胰蛋白酶消化培养法细胞生长率13%（p＜0.01）.③高分化鳞癌生长率为38%,中/低分化鳞癌生长率为75%（p＜0.05）.结论：优化的植块培养法比单纯消化培养法能尽快获得口腔癌的原代细胞系,种子细胞应该尽量选用分化程度差的标本.     

口腔鳞癌细胞FasL表达对肿瘤浸润淋巴细胞及癌细胞凋亡的影响

目的 研究口腔鳞癌细胞FasL表达及其对癌细胞和肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)凋亡的影响.方法 38例口腔鳞癌为实验组,10例正常口腔黏膜为对照组.采用免疫组织化学方法和末端脱氧核糖核酸转移酶介导的原位末端标记技术,观察癌组织FasL表达,计算TIL和癌细胞的凋亡指数,观察癌细胞FasL表达与TIL及癌细胞凋亡的关系.结果 FasL在正常口腔黏膜不表达,在鳞癌组织中表达明显上调(P＜0.05),FasL表达与口腔鳞癌分化程度无关(P＞0.05).口腔鳞癌细胞FasL表达阳性组癌细胞凋亡指数明显低于FasL表达阴性组,同时TIL的凋亡指数高于FasL表达阴性组(P＜0.05),口腔鳞癌细胞凋亡指数与TIL凋亡指数呈负相关(r＝-0.72,P＜0.05).结论 口腔鳞癌细胞可能通过上调表达FasL诱导TIL的凋亡,间接地使癌细胞凋亡下调而保护了自己,是口腔鳞癌组织免疫反攻击的体现.     

趋化因子受体CXCR4在口腔鳞癌中的表达和临床意义

目的研究口腔鳞癌中趋化因子受体CXCR4蛋白及mRNA的表达情况,探讨其与口腔鳞癌临床病理特点及颈淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化SABC法和原位杂交法检测64例口腔鳞癌中CXCR4蛋白的表达及在CXCR4阳性表达的口腔鳞癌中CXCR4 mRNA的表达情况,并分析其与临床病理参数的关系。结果CXCR4 mRNA和CXCR4蛋白在口腔鳞癌中呈阳性表达,CXCR4蛋白的阳性表达率为62.5%。同时,CXCR4在伴有淋巴结转移病例中的表达显著高于无淋巴结转移者（P=0.014 4）。此外,CXCR4的表达与肿瘤的分化程度（P=0.004 2）、TNM分期（P=0.001 2）、侵袭程度（P=0.002 3）密切相关,而与年龄、性别和肿瘤大小无关。结论CXCR4在口腔鳞癌中有阳性表达,其表达水平与口腔鳞癌侵袭发展和淋巴结转移有关。CXCR4有可能成为口腔鳞癌治疗的新靶点。     

Garcinol对人口腔鳞癌细胞的抑制作用研究

目的 观察Garcinol对人口腔鳞癌细胞系SCC15增殖、细胞周期、凋亡和克隆形成能力的作用.方法 培养人口腔鳞癌细胞系SCC15,采用不同浓度的Garcinol处理细胞后,通过MTT法检测对细胞增殖的影响,PI单染色法流式细胞仪检测对细胞周期的影响,Annexin V-FITC/PI双染色法流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响,克隆形成实验检测对细胞克隆形成能力的影响.结果 Garcinol能显著抑制SCC15细胞增殖(P＜0.01),并呈浓度和时间依赖性.Garcinol能抑制SCC15细胞周期由G1期向S期转变(P＜0.01),并呈浓度依赖性.Garcinol还能够诱导SCC15细胞凋亡(P＜0.01),并呈浓度依赖性.同时,Garcinol能抑制SCC15细胞的克隆形成能力(P＜0.01),并呈浓度依赖性.结论 Garcinol作为一种化学预防制剂,对人口腔鳞癌细胞SCC15具有显著的抑制作用,其机制主要包括抑制SCC15细胞增殖、细胞周期和克隆形成能力,并诱导细胞凋亡.     

口腔鳞癌细胞系对葫芦素BE的敏感性研究

目的：观察具有多种生物活性的葫芦素BE对口腔鳞细胞的杀伤作用,方法：用四唑盐显色法（MTT法）检测人舌低分化鳞癌（Tca8113）和人平高分化鳞癌BcaCD885）细胞系对葫芒素BE的敏感性实验,结果：葫芦素BE对两种癌细胞系均有较高的相对抗瘤活性（RAA值分别为345、148）,结论：实验结果为葫芦素BE治疗口腔癌的进一步研究提供了重要依据。     

KLF4转染对口腔鳞癌细胞侵袭能力的影响

目的 观察KLF4转染对人口腔鳞癌细胞系SCC15侵袭能力的影响.方法 培养人口腔鳞癌细胞系SCC15,构建pReceiver-Lv105/KLF4慢病毒表达载体,包装病毒颗粒,感染SCC15后,puromycin筛选KLF4稳定表达的细胞系.荧光显微镜和免疫荧光细胞化学鉴定病毒感染成功.然后通过划痕实验检测KLF4转导对细胞体外迁移能力的影响.Transwell细胞侵袭实验检测KLF4转导对细胞侵袭能力的影响.实时荧光定量PCR检测与细胞侵袭和迁移密切相关的因子MMP-9和Twist1的表达.结果 与对照载体转导组SCC15/Lv105细胞相比,SCC15/KLF4细胞中KLF4的表达明显增强.SCC15/KLF4细胞的相对迁移率显著高于SCC15/Lv105细胞(P＜0.01).SCC15/KLF4组的侵袭穿膜细胞数明显多于SCC15/Lv105组(P＜0.05).另外,SCC15/KLF4细胞中MMP-9和Twist1 RNA的表达也高于对照组SCC15/Lv105细胞,其中MMP-9 RNA的表达升高更为显著(P＜0.01).结论 KLF4转导SCC15细胞后,可能通过增强MMP-9和Twist1的表达促进细胞的迁移和侵袭能力.     

扁塑藤素对口腔鳞癌细胞侵袭和迁移的影响

目的:探讨扁塑藤素对人口腔鳞癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其可能的作用机制.方法:体外培养人口腔鳞癌细胞系CAL-27和SCC-15,不同浓度扁塑藤素诱导两种细胞后,CCK-8实验检测扁塑藤素对两种细胞增殖能力的影响,计算扁塑藤素不同作用时间的半数抑制浓度IC50;划痕实验及Transwell小室实验分别检测扁塑藤素对口...     

Expression of CXCR4 in oral squamous cell carcinoma: correlations with clinicopathology and pivotal role of proliferation

J Oral Pathol Med (2010) 39 : 63–68
Background:  The chemokine SDF-1 and its receptor CXCR4 play active role in the metastasis and proliferation of several malignancies.
Methods:  In this study, we used an immunohistochemical technique in 91 specimens of oral squamous cell carcinoma (SCC), and flow cytometry technique in oral SCC cell line, and then evaluated the role of proliferation of CXCR4 using MTT assay in oral SCC cell line.
Results:  The expression of CXCR4 in 91 specimens of oral SCC was 62.6% and in oral SCC cell line was 68.6%. There was a significant association between the expression of CXCR4 and lymph node metastasis ( P  = 0.012), tumor size ( P  = 0.01), UICC stage ( P  = 0.016), tumor histology grade ( P  < 0.001). SDF-1 stimulated proliferation of oral SCC cell and CXCR4 neutralization by monoclonal antibodies decreased proliferation.
Conclusions:  Our results suggest that CXCR4 might be a novel biomarker to evaluate the biological behavior of oral SCC. CXCR4 inhibitors or antagonists might be potential anticancer agents to suppress tumor proliferation.     

CXCR4、P-Akt在口腔鳞状细胞癌组织中表达的研究

目的：观察口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织中CXCR4、P-Akt的表达与分布,了解CXCR4、P-Akt与OSCC恶性表现的关系。方法：应用免疫组织化学SP法对实验组30例OSCC组织标本和对照组10例正常口腔黏膜组织标本中的CXCR4、P-Akt的表达进行检测,应用计算机辅助图像分析仪对表达结果进行图像分析,然后进行统计学分析。结果：①CXCR4、P-Akt在OSCC组织中呈强阳性表达,且CXCR4、P-Akt蛋白表达水平显著高于对照组（P〈0.01）;②OSCC分化程度高的癌组织CXCR4、P-Akt蛋白表达水平显著低于分化程度低的癌组织（P〈0.05）,CXCR4、P-Akt蛋白表达水平在淋巴结转移组较无淋巴结转移组明显升高（P〈0.05）。结论：CXCR4、P-Akt在OSCC组织中的高表达,其表达水平与OSCC的病理分化程度及淋巴结转移有关。     

口腔鳞癌中趋化因子受体CXCR4的临床病理及细胞学研究

目的检测CXCR4蛋白在口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织和OSCC细胞系中的表达,探讨CXCR4蛋白的表达与OSCC临床病理及SDF-1/CXCR4轴与OSCC细胞增殖的关系.方法用免疫组织化学SP法检测91例OSCC中CXCR4的表达,用细胞培养、免疫组化法检测CXCR4蛋白的表达模式,流式细胞仪直接免疫荧光法测定CXCR4蛋白的表达量,MTT法检测细胞的增殖能力.结果CXCR4在OSCC组织中总阳性表达率为62.6%,与肿瘤的大小、病理分级、淋巴结转移、肿瘤增殖密切相关（P＜0.05）.CXCR4蛋白在OSCC细胞系中亦呈强阳性表达,OSCC细胞在SDF-l作用下增殖反应明显增强,CXCR4抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖.结论CXCR4与肿瘤的大小、病理分级、淋巴结转移及肿瘤增殖密切相关,对评估OSCC的生物学行为有意义.     

口腔癌及癌前病变中PTEN与CXCR4的蛋白表达及相关性研究

目的通过检测抑癌基因PTEN与趋化因子CXCR4在口腔癌及癌前病变中的蛋白表达情况,并分析其相关性。方法收集口腔癌及癌前病变标本共111例,其中正常口腔黏膜15例、单纯上皮增生22例、上皮异常增生16例、口腔鳞癌58例,应用免疫组化SP法检测这些标本中PTEN与CXCR4蛋白表达水平,并对结果进行统计学分析。结果 PTEN在口腔鳞癌中阴性和弱阳性表达占74%(43/58),显著低于正常黏膜、单纯上皮增生、上皮异常增生组(P<0.05);CXCR4在单纯增生、异常增生和口腔鳞癌中阳性或强阳性表达分别占40.91%、43.75%和66.13%,显著高于正常组的表达(P<0.05)。经直线相关分析和Spearman等级相关分析,PTEN与CXCR4之间存在负相关关系(r=-1.000,P<0.001)。结论口腔鳞癌的发生和发展过程中PTEN和CXCR4均起着一定的作用;口腔癌中PTEN与CXCR4的蛋白表达存在负相关的关系。     

涎腺腺样囊性癌中趋化因子4、整合素β1表达的意义

目的 检测涎腺腺样囊性癌（adenoid cystic carcinoma of salivary gland，ACCs）中趋化因子4（chemokine receptor 4，CXCR4）和整合素β1（Integrin β1）的表达水平，并分析与临床病理的关系。方法 应用免疫组化法检测78例ACCs中CXCR4、Integrin β1的表达，以肿瘤周围涎腺组织对照，分析二者与ACCs临床病理因素的关系。结果 CXCR4、Integrin β1在ACCs中的表达率分别为65．4％、70．0％，且呈高度正相关（P〈0．01）。二者均与ACCs临床分期、复发、和远处转移有关（P〈0．05），并且与预后关系密切（P〈0．05）。结论 CXCR4的表达与Integrin β1高度正相关；二者的异常高表达与远处转移关系密切，可视为影响ACCs预后的重要因素之一。     

Smad7蛋白在口腔鳞癌组织中的表达及其对口腔鳞癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的：检测Smad7蛋白在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma, OSCC）中的表达及临床意义,探讨其在口腔鳞癌细胞增殖和迁移中的作用。方法：利用免疫组织化学染色,检测31例原发性口腔鳞癌患者肿瘤组织及癌旁标本中Smad7的表达,并分析其与淋巴结转移之间的关系;利用CCK-8及细胞划痕实验检测Smad7基因沉默对肿瘤细胞增殖及迁移能力的影响;通过Smad7 siRNA干扰HN4细胞,影响Smad7蛋白的表达,利用免疫印迹及qRT-PCR检测其对上皮-间充质转化（epithelial- mesenchymal transition,EMT）相关指标蛋白及RNA表达的影响。采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果：在口腔鳞癌肿瘤组织中,Smad7蛋白在细胞核和细胞质的表达均显著高于对应的癌旁组织。Smad7的表达与患者颈淋巴结转移显著相关。Smad7 siRNA干扰HN4细胞后,细胞的增殖能力减弱,迁移能力增强。Smad7 siRNA干扰使得HN4细胞神经钙黏附素（N-cadherin）蛋白的表达量升高,而上皮钙黏蛋白（E-cadherin）的表达量下降,N-cadherin蛋白及波形蛋白（Vimentin）RNA表达量显著升高,与对照组相比有显著差异。结论：Smad7的表达与口腔鳞癌患者颈淋巴结转移相关,且Smad7在口腔鳞癌肿瘤细胞的增殖及侵袭转移中发挥重要作用。     

TEAD4与口腔鳞癌预后和细胞迁移侵袭的研究

目的:研究TEA转录因子4(TEAD4)在口腔鳞癌(OSCC)组织中的表达与临床病理参数、预后的关系。方法:免疫组化检测79例原发性OSCC标本和21例口腔正常上皮黏膜中TEAD4的表达水平,分析其与临床病理参数之间的关系。使用小干扰RNA(siRNA)转染沉默Cal27细胞内源性TEAD4,通过Western blot、qRT-PCR、划痕试验、Transwell侵袭等实验探究TEAD4沉默对OSCC细胞系Cal27迁移、侵袭的影响。结果:免疫组化结果显示TEAD4在OSCC组织中表达明显高于正常口腔黏膜(P<0.05)。TEAD4高表达与患者颈淋巴结转移、临床分期和患者总体生存率相关(P<0.05)。TEAD4沉默后Cal27细胞侵袭、迁移能力明显减弱。结论:TEAD4高表达与OSCC恶性表型及预后有关,参与OSCC细胞迁移、侵袭表型的调控。     

趋化因子受体CXCR4在口腔颌面部恶性肿瘤中表达的研究

目的:检测趋化因子受体CXCR4在口腔鳞癌和涎腺腺样囊性癌中的表达情况,探讨趋化因子受体CXCR4的表达与口腔鳞癌、涎腺腺样囊性癌的临床病理关系.方法:用免疫组织化学S-P法检测91例口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,SCC)和76例涎腺腺样囊性癌(adenoid cystic car...     

趋化因子SDF-1及其受体CXCR4对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨SDF-1/CXCR4生物轴对口腔鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响.方法 采用MTT法检测细胞的增殖能力.通过趋化实验观察细胞的侵袭迁移能力.结果 口腔鳞状细胞癌细胞在SDF-1作用下增殖反应明显增强,CXCR4抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖(P＜0.05).趋化实验显示SDF-1可诱导口腔鳞状细胞癌细胞发生明显迁移,经50μg/ml CXCR4抗体孵育后,SDF-1介导Tca8113细胞的这种侵袭能力明显减弱(P＜0.05).结论 CXCR 4/SDF-1受体配体系统可介导口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和迁移,在癌细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用.干扰SDF-1/CXCR4的相互作用有可能成为治疗口腔鳞状细胞癌的新方法.