地西他滨诱导人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡机制的研究

目的研究地西他滨诱导人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡的机制。方法常规体外培养人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株,取对数生长期的细胞传代24 h后加入不同浓度(0.5、1.0、5.0及10.0μmol/L)地西他滨处理,分别继续培养24、48、72 h后,用CCK-8法测定细胞增殖活性;倒置显微镜下观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测地西他滨作用后人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株的凋亡率;应用透射电镜观察人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞发生凋亡的形态学特征;实时荧光定量Real time-PCR法检测凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2在mRNA水平表达变化的情况。结果地西他滨可以抑制Jurkat细胞增殖,并且呈浓度和时间依赖性(P0.05)。倒置显微镜观察到地西他滨作用后细胞形态发生了显著改变;流式细胞术检测细胞凋亡的结果表明地西他滨能够诱导人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡并且呈浓度依赖性(P0.05);透射电镜观察结果证明地西他滨可以诱导人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞出现凋亡性细胞死亡,5.0μmol/L地西他滨作用Jurkat细胞72 h后出现大量凋亡小体。另外,Real time-PCR实验研究结果发现地西他滨能够上调促凋亡基因Caspase-3的表达,下调凋亡抑制基因Bcl-2的表达。结论地西他滨能通过上调促凋亡基因Caspase-3的表达和下调凋亡抑制基因Bcl-2的表达诱导细胞凋亡。     

地西他滨治疗MDS/AML1例报告

骨髓增生异常综合征(myelodysplasticsyndrome,MDS)是一组起源于造血干细胞水平的恶性造血紊乱性疾病,患者可转化为急性白血病(acute     

地西他滨联合HA方案诱导治疗老年急性髓系白血病疗效观察

目的 观察地西他滨联合HA方案(高三尖杉脂碱+阿糖胞苷)对老年急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者诱导化疗的效果及安全性.方法 回顾性分析2018年1月至2020年2月解放军总医院第七医学中心接受地西他滨联合HA方案诱导化疗的10例老年AML患者,观察其总缓解率及总生存率.结果 所...     

地西他滨联合改良CAG 方案治疗急性红白血病4 例

目的 了解地西他滨联合阿柔比星（Acla）＋ 阿糖胞苷（Ara-C）＋ 重组人粒细胞刺激因子（G-CSF） 的方案（DCAG） 治疗急性红白血病（AML-M6） 的疗效及不良反应。方法 应用地西他滨联合CAG 方案化疗,治疗4 例急性红白血病患者：地西他滨20 mg/m2,1 次/d,5 d ;重组人粒细胞刺激因子300 μg,1 次/d,使用时间为化疗前1 d 至中性粒细胞恢复;阿糖胞苷10 mg/m2,1 次/12 小时,5 d ;阿柔比星20 mg,第1、3、5 天使用。观察疗效及不良反应。结果 4 例急性红白血病患者中,2 例完全缓解（CR）,2 例部分缓解（PR）,治疗过程中不良反应轻微,病人可耐受。结论 DCAG 方案治疗急性红白血病缓解率好,不良反应轻,可以作为急性红白血病诱导化疗的备选方案。     

地西他滨抑制AML1-ETO+白血病细胞增殖和诱导凋亡的机制研究

目的研究地西他滨抑制AML1-ETO+白血病细胞增殖和诱导凋亡,并初步探讨其可能的机制。方法Kasumi-1细胞常规培养在含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中,CCK8法检测地西他滨抑制Kasumi-1细胞增殖,流式细胞术检测Kasumi-1凋亡,Western Blot检测相关蛋白的表达,RT-PCR检测AML1-ETO和mi R-193a的表达。结果地西他滨可以抑制Kasumi-1细胞增殖,具有浓度效应和时间效应;并能诱导凋亡,对照组、24 h和48 h组细胞凋亡率分别为(5.29±0.88)%、(9.83±1.71)%和(19.47±1.84)%;地西他滨能减少AML1-ETO蛋白的表达,0.1、0.5和1μmol/L地西他滨组与对照组的比值分别为(0.85±0.21)、(0.28±0.06)和(0.10±0.07),24、48 h组AML1-ETO蛋白与对照组的比值为(0.31±0.21)和(0.24±0.11),但不影响AML1-ETO m RNA表达,24和48 h组与对照组的比值分别为(0.96±0.19)和(0.84±0.11),统计分析无显著性差异(F=1.22,P0.05);地西他滨能上调mi R-193a,24和48 h分别上升(3.61±0.06)和(6.99±0.74)倍,并减少MDM2和Cyclin D1蛋白的表达,MDM2和Cyclin D1蛋白加药组与对照组的比值分别为(0.51±0.19)和(0.50±0.10)。结论地西他滨通过上调mi R-193a阻遏AML1-ETO的翻译,并减少MDM2和Cyclin D1蛋白的表达,从而抑制AML1-ETO+白血病细胞增殖和诱导凋亡。     

国产地西他滨联合小剂量HAA方案治疗急性髓系白血病的临床观察

目的 观察国产地西他滨联合小剂量高三尖杉酯碱＋阿克拉霉素＋阿糖胞苷（HAA方案）治疗急性髓系白血病（AML）的疗效及毒副反应.方法 9例AML患者给予地西他滨15～20mg·m^-2·d^-1静脉滴注d1～3;高三尖杉酯碱2 mg静脉滴注d1～8;阿糖胞苷25 mg皮下注射q12h,d1～8;阿克拉霉素20 mg静脉滴注d1、3、5、7治疗.结果 完全缓解6例（66.7％）,部分缓解1例（11.1％）,无效2例（22.2％）,有效率77.8％,治疗中的毒副反应主要为血液学毒性.结论 国产地西他滨联合小剂量HAA方案治疗AML是一种安全有效的治疗方案,值得推广.     

地西他滨联合小剂量化疗治疗难治性白血病的疗效分析

目的：探讨地西他滨与小剂量化疗用于难治性白血病的治疗疗效。方法整群选取2013年4月-2014年4月在该院进行治疗的27例白血病患者为研究对象,采用回顾性分析法观察分析该组患者的临床资料,所选患者均采用地西他滨联合小剂量化疗进行临床治疗,包括静脉滴注15 mg·m -2·d-1到20mg·m -2·d-1的地西他滨(治疗时间为第1天到第3天﹚和2 mg高三尖杉酯碱(第1天到第8天﹚以及20mg阿克拉霉素(第1、3、5、7天﹚,同时皮下注射25 mg阿糖胞苷q12h(第一天到第8天﹚,观察分析该组患者的治疗效果(治疗的总有效率﹚和不良反应情况。结果经过化疗治疗,该组患者中完全缓解者18例,占从体的66.7%,部分缓解者4例,占总体的14.8%,无效者5例,占总体的18.5%,化疗治疗的总有效率为81.5%,采用地西他滨联合小剂量化疗治疗的不良反应主要是血液学毒性。结论采用地西他滨与小剂量化疗治疗难治性白血病的临床效果显著,治疗后不良反应主要为血液学毒性(较为常见﹚,能够有效的改善患者的生活质量,具有临床推广的应用价值。     

小剂量地西他滨联合维奈克拉对老年复发急性髓系白血病患者的影响

目的：探究小剂量地西他滨与维奈克拉联合对老年复发急性髓系白血病患者的影响。方法：选取2021年1月—2022年1月我院收治的100例老年复发急性髓系白血病患者,采用随机数表法将患者分为对照组与研究组,每组50例。两组患者均给予维奈克拉治疗,对照组患者给予地西他滨[15mg/(m²·d)×5d],研究组患者给予地西他滨[6mg/(m²·d)×10d],比较两组患者的疗效、血液学指标[血小板、白细胞计数、中性粒细胞恢复时间、血小板恢复时间]、免疫功能、不良反应发生情况以及生存质量。结果：治疗后,两组患者总有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,与对照组患者相比,研究组患者的血小板、白细胞计数、CD4⁺和CD4⁺/CD8⁺水平更高,骨髓原始细胞比率及CD8⁺水平更低,中性粒细胞恢复时间、血小板恢复时间更短,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者治疗期间的不良反应发生率更低,生活质量评分更高,差异有统计学意义(P<0.05)。...     

丙戊酸钠诱导髓系白血病细胞分化、凋亡作用及其机制研究

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)诱导髓系白血病细胞体外分化和凋亡作用及其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)微量酶反应比色法增殖抑制实验和锥虫蓝拒染法检测VPA对细胞增殖的抑制,流式细胞仪检测细胞表面分化抗原的表达和细胞凋亡,Western印迹法检测组蛋白H3的9位赖氨酸残基(H3-Ac-lys9)的乙酰化水平变化。结果VPA抑制U937和K562髓系白血病细胞增殖,并呈时间-剂量依赖效应。在VPA较低浓度下(0.5～1mmol/L)作用6d后,VPA诱导U937细胞分化,其细胞表面髓系分化抗原CD11b表达明显上调,细胞形态呈终末分化改变。VPA与全反式维甲酸和(或)粒细胞集落刺激因子联合应用,诱导分化作用更为显著。在VPA较高浓度下(2mmol/L),VPA诱导U937细胞磷脂结合蛋白结合力明显上升,细胞呈现凋亡状态。而同样条件下VPA不能诱导K562细胞出现显著的分化和凋亡。U937和K562细胞在H3-Ac-lys9的乙酰化水平存在差异。VPA能够上调U937细胞H3-Ac-Lys9乙酰化,而K562细胞未观察到类似调变作用。结论VPA诱导U937细胞分化和凋亡,其作用与U937细胞的H3-Ac-lys9乙酰化水平及其对VPA处理后的上调有关。     

丙戊酸诱导耐药白血病细胞凋亡及其机理的研究

目的 观察丙戊酸(VPA)对白血病细胞尤其是耐药白血病细胞的体外抗肿瘤作用,探讨细胞内谷胱甘肽(GSH)水平及抗氧化酶系活性与VPA诱导细胞凋亡之间的关系.方法 采用体外细胞培养,通过MTT细胞活力测定,Caspase-3,8,9活性检测、细胞形态学观察、细胞周期分析及Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,观察VPA对白血病细胞的抗肿瘤作用;通过检测VPA作用前后细胞内总谷胱甘肽(tGSH)与GSH水平、谷胱甘肽还原酶(GSH-Rd)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性改变,以及GSH合成酶抑制剂丁胱亚磺酰亚胺(BSO)、GSH 前体N-乙酰-半胱氨酸(NAC)和过氧化氢酶(CAT)对VPA诱导凋亡的影响,分析谷胱甘肽-氧化还原(GSH-redox)系统在VPA诱导细胞凋亡中的作用.结果 VPA对所有受试细胞株均有增殖抑制作用,其IC50接近VPA抗癫痫有效血药浓度.VPA作用后细胞内Caspase-3,8,9活性增强,细胞出现凋亡形态学改变.VPA可使阿霉素耐药株K562/AO2及糖皮质激素(Gc)耐药株Jurkat细胞周期阻滞于Go/G1期,在VPA作用下,Jurkat和K562/AO2细胞内tGSH和GSH均降低,以GSH降低为主,GSH-Rd和GSH-Px的活性亦显著降低.NAC和CAT减弱VPA诱导的凋亡,而BSO增强VPA诱导的凋亡.结论 VPA抑制耐药白血病细胞增殖、诱导细胞周期阻滞与凋亡,这些作用与细胞内GSH-Rd、GSH-Px活性降低、GSH水平下调所导致的细胞内氧化应激反应激活有关.     

丙戊酸钠对癫痫患儿体重的影响及作用机制

目的：研究丙戊酸钠（VPA）对癫痫患儿体重的影响及其机制。方法按照纳入标准收集泸州医学院附属医院神经内科门诊2011年5月-2013年5月首次诊断癫痫后VPA单药治疗的患儿48例作为实验组,于治疗前、治疗后1、3、6个月检测患儿体质量指数（BMI）及血清瘦素水平。另选择健康儿童24例作为对照组。结果实验组治疗后1、3、6个月BMI及血清瘦素均呈现出上升趋势,且两者在各时间点均明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 VPA可增加癫痫患儿体重,其机制可能与显著上调血清瘦素水平有关。     

丙戊酸钠诱导人肺癌细胞MICA表达上调增强NK细胞对其杀伤作用的研究

目的 观察丙戊酸钠(valproic acid,VPA)对人肺癌细胞A549、SP-CA-1、NCIH446中的MHCⅠ类链相关基因A(MICA)表达的影响,并比较肺癌细胞经VPA处理前后NK细胞对其杀伤作用的差异.方法 将0.75～12.0 mmol/L VPA作用于A549、SP-CA-1、NCIH446细胞,与未加VPA的对照组进行比较,观察VPA对人肺癌细胞生长的影响.选择对细胞生长无影响的1.50 mmol/L和3.00 mmol/L VPA诱导3株肺癌细胞4 d,通过RT-PCR反应和免疫荧光法分别检测MICA在mRNA和蛋白质水平的变化.LDH法检测VPA处理肺癌细胞前后其被NK细胞杀伤程度的变化.结果 ＞6.0 mmol/L VPA对3株肺癌细胞均表现出抑制其生长.用1.50mmol/L和3.00 mmol/L VPA诱导4 d后的3株肺癌细胞,与对照组比较,其MICA的mRNA转录水平和蛋白质表达提高(P＜0.05);1.50 mmol/L和3.00 mmol/L VPA诱导表达MICA后的肺癌细胞均比未经VPA处理的肺癌细胞被NK杀伤的程度高(P＜0.05).3.00 mmol/L VPA浓度组3株肺癌细胞的MICA mRNA、蛋白质表达水平及其被NK细胞杀伤的程度均高于1.50 mmol/L VPA浓度组(P＜0.05).结论 VPA通过上调MICA抗肺癌作用的新机制,为肺癌临床免疫生物治疗提供了实验依据.     

丙戊酸钠对大鼠坐骨神经损伤后脊髓运动神经元的保护作用

目的:观察丙戊酸钠对鼠坐骨神经切断后脊髓运动神经元凋亡及Bcl-2基因表达的影响。方法:采用清洁级SD大鼠30只,行右坐骨神经横形切断后即刻原位吻合术,制成周围神经损伤模型后,随机分为丙戊酸钠口服组(A组)、生理盐水对照组(B组)。分别于术后1,4,7,14,28 d取材,应用TUNEL法检测细胞凋亡数,用免疫组化技术检测脊髓运动神经元Bcl-2的表达,并对脊髓凋亡细胞以及阳性运动神经元进行计数。结果:坐骨神经切断后4,7,14 d,实验组脊髓运动神经元Bcl-2吸光度明显高于对照组(P<0.05);坐骨神经切断后7,14 d,实验组脊髓神经元凋亡率明显低于对照组(P<0.05)。结论:丙戊酸钠对鼠坐骨神经损伤后脊髓神经元具有保护作用。     

地西他滨联合全反式维甲酸对SKM-1 MDS细胞株的体外研究

目的:探讨去甲基化制剂地西他滨和全反式维甲酸对MDS-RAEB细胞株SKM-1的体外影响及其机制。方法:SKM-1细胞经药物处理后,用台酚蓝拒染法观察SKM-1细胞生长曲线的变化;用硝基四氮唑蓝还原试验和流式细胞术观察药物对SKM-1细胞的诱导分化作用;用Annexin Ⅴ-FITC标记了解细胞的早期凋亡;用RT-PCR研究细胞DNMT3A和P15INK4B基因表达的变化。结果:地西他滨和ATRA抑制SKM-1细胞生长,增强SKM-1细胞的还原能力,增加细胞表面CD14、CD11b表达,促进细胞凋亡,两药联合应用具有协同作用;地西他滨可使SKM-1细胞P15INK4B mRNA表达增加,DNMT3A mRNA表达减少。结论:地西他滨和ATRA均可以促进SKM-1细胞凋亡和分化,二者有协同作用;地西他滨的作用可能与DNMT3A和P15INK4B基因表达有关。     

维生素A酸、锌等诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的研究

目的：探讨维生素A酸、锌及大鼠损伤脊髓提取液联合诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的可能性。方法：从大鼠骨髓中分离培养间质干细胞并传至第4代，诱导前24h加10ng/ml碱性成纤维生长因子(bFGF)入培养液中以促分裂，再以含维生素A酸、锌及大鼠损伤脊髓提取液的有血清培养液作诱导剂，观察细胞形态的变化，并采用免疫组织化学法，对诱导后第12d的细胞进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的检测。结果：诱导后第12d部分细胞不仅在形态上表现为神经元样，而且呈NSE及NF阳性表达，GFAP阴性。结论：经维生素A酸、锌及大鼠损伤脊髓提取液的联合作用可以在体外诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞。     

齐墩果酸诱导Jurkat细胞凋亡及对ROS和细胞内Ca2+含量的影响

目的 探讨齐墩果酸对白血病Jurkat细胞株增殖抑制和诱导凋亡作用,分析凋亡发生与细胞内活性氧(ROS)及钙离子浓度([Ca2+]i)变化的关系.方法 应用MTT法检测细胞增殖抑制;流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期;DCFH-DA荧光定量法检测ROS含量;Fluo-3AM荧光负载方法测定[Ca2+]i的变化.结果 齐墩果酸对Jurkat细胞的增殖具有浓度依赖性和时间依赖性抑制作用,0,40,80,160 μmol/L齐墩果酸作用24 h细胞凋亡率分别为(7.36±0.40)％、(19.80±1.59)％、(29.39±0.64)％、(34.72±0.94)％,G0/G1期细胞比例分别为(54.26±1.43)％、(85.83±0.91)％、(91.18±1.32)％、(92.90±1.19)％.80 μmol/L和160μmol/L齐墩果酸处理24 h,细胞中ROS和[Ca2+]i水平均明显高于对照组(P＜0.05),ROS和[Ca2+]i水平均与细胞凋亡率呈正相关(r分别为0.95、0.97).结论 细胞中ROS和Ca2+可能参与了齐墩果酸对Jurkat细胞的抑制增殖和诱导凋亡作用.     

消痔灵体外诱导肝癌细胞HepG_2凋亡及其对P_(53)、nm_(23)-H_1表达影响的研究

目的:观察消痔灵注射液(XZL)体外诱导肝癌细胞HepG2凋亡情况,并初步探讨作用机制。方法:用不同浓度(0.5、1、2、4、8、16g/L)XZL体外培养HepG2细胞。采用MTT法检测HepG2细胞抑制率,Western blotting检测相关凋亡蛋白P53和nm23-H1表达变化。结果:(1)XZL能明显抑制HepG2细胞生长,且呈时间和浓度依赖性,(2)XZL组与空白对照组相比,P53蛋白表达增强,差异性显著(P<0.05);XZL组与5-Fu组相比,P53蛋白表达无显著性差异(P>0.05);与共同作用组相比,P53蛋白表达减弱,差异性显著(P<0.05);但nm23-H1蛋白表达均无显著性差异(P>0.05)。结论:XZL可抑制HepG2细胞增殖,并通过增强P53蛋白表达诱导HepG2细胞凋亡。     

丙戊酸钠对癫痫患儿体重、瘦素及神经肽Y的影响

目的:探讨丙戊酸钠(VPA)对癫痫患儿体重、血清瘦素及神经肽Y(NPY)的影响。方法:按纳入标准收集首次诊断癫痫后VPA单药治疗的患儿48例作为试验组,于治疗前、治疗后1、3、6个月测定患儿体质量指数(BMI),检测血清瘦素、NPY水平。另选择24例健康儿童作为对照组。结果:试验组治疗后1个月、3个月、6个月BMI指数分别为(18.4±1.05)kg/m2、(19.4±1.01)kg/m2和(21.3±1.04)kg/m2,呈上升趋势,明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。试验组治疗后1个、3个、6个月血清瘦素分别为(4.59±0.37)ng/ml、(5.94±0.29)ng/ml和(7.32±0.21)ng/ml,NPY分别为(132.21±13.47)pg/ml、(150.29±17.34)pg/ml和(172.28±20.76)pg/ml,两者均呈现出上升趋势,且两者均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:VPA能够使癫痫患儿的瘦素、NPY水平升高,导致患儿体重增加。     

2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的：探讨2-甲氧雌二醇（2-ME）对HL60白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法：用MTT法和流式细胞术检测2-ME对HL60的增殖抑制及促凋亡作用,用流式细胞技术检测Bcl-2蛋白的表达。结果：随着2-ME浓度升高及作用时间延长,HL60细胞增殖明显受抑制（P〈0.05）,细胞凋亡率明显增加（P〈0.05）,当2-ME浓度为50μmol/L时,细胞凋亡率达65.8%;2-ME（30μmol/L）作用72h后,Bcl-2的表达较对照组显著减少（P〈0.05）。结论：2-ME对HL60细胞增殖有抑制及促凋亡作用,Bcl-2表达下调在此过程中可能发挥重要作用。