褪黑激素对HeLa细胞生长的影响

目的　研究褪黑激素对体外培养的人宫颈癌 (HeLa)细胞活性的影响。方法　MTT测定褪黑激素的抗肿瘤活性 ;电镜观察药物对肿瘤细胞形态学的影响 ;流式细胞仪检测药物对肿瘤细胞周期的影响。结果　高浓度 (2mmol·L- 1 )褪黑激素可抑制HeLa细胞的生长 ,使细胞倍增时间TD 延长 ,细胞杀伤率达 6 1 0 %。用此浓度作用 3天 ,可使S期细胞的比例减少 ,细胞形态学发生非特异性改变 ,有较多的坏死细胞和少量凋亡细胞。结论　高浓度褪黑激素抑制HeLa细胞增殖 ,可能与抑制细胞的S期有关     

IL-37 对宫颈癌HeLa 细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨炎症抑制因子IL-37 对宫颈癌HeLa 细胞株增殖和凋亡的影响。方法　将携带有目的基因IL-37 的过表达载体转染入体外培养的HeLa 细胞,用MTT 法检测细胞的增殖情况,流式细胞仪测定细胞周期及凋亡率,以野生型HeLa 细胞以及转染空载体的HeLa 细胞作为阴性对照和空载体对照。结果　荧光显微镜观察结果显示IL-37 质粒成功转染HeLa 细胞。MTT 检测结果显示,转染后12 h 至96 h,转染组OD 值明显低于空载体对照组（P<0.01）,而空载体对照组和阴性对照组的OD 值无明显差异;流式细胞仪检测测结果显示,转染组细胞早期凋亡率较空载体对照组显著升高（P<0.05）,而空载体对照组和阴性对照组的早期凋亡率无显著性差异。结论　过表达IL-37 的HeLa 细胞株构建成功。IL-37 可抑制宫颈癌HeLa 的增殖并诱导其凋亡。     

褪黑激素对HeLa细胞生长的影响

目的　研究褪黑激素对体外培养的人宫颈癌(HeLa)细胞活性的影响。方法　MTT测定褪黑激素的抗肿瘤活性;电镜观察药物对肿瘤细胞形态学的影响;流式细胞仪检测药物对肿瘤细胞周期的影响。结果　褪黑激素高浓度(2mmol·L^-1 )可抑制HeLa细胞的生长,使细胞倍增时间TD 延长,细胞杀伤率达61.0 %。用此浓度作用3d ,可使S期细胞的比例减少,细胞形态学发生非特异性改变,有较多的坏死细胞和少量凋亡细胞。结论　高浓度褪黑激素抑制HeLa细胞增殖,可能与抑制细胞的S期有关。     

紫草素对人宫颈癌HeLa细胞增殖抑制与诱导凋亡的作用研究

目的:研究紫草素对人宫颈癌HeLa细胞增殖抑制与诱导凋亡的作用。方法:10μg/ml紫草素作用于人宫颈癌HeLa细胞,观察细胞的形态学变化;MTT法测定细胞活性,检测紫草素对HeLa细胞的增殖抑制作用;分别测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3、8、9的活性,探究细胞凋亡的途径;流式细胞仪测定细胞凋亡率和细胞周期。结果:10μg/ml紫草素可使HeLa细胞部分死亡;1~20μg/ml紫草素可抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖(P<0.01或P<0.05);1、5、10、15、20μg/ml紫草素可增强Caspase-3、8、9的活性(P<0.01或P<0.05);1、5、10、15、20μg/ml紫草素在诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的同时,阻断了细胞周期的进程,使S期细胞增多。结论:紫草素可抑制HeLa细胞的增殖,诱导细胞凋亡。     

螺旋藻多糖对HeLa细胞生长的影响

目的；研究螺旋藻多糖（polysaccharide from Spirulina platensis,PSP)对体外培养的HeLa细胞生长的影响。方法：MTT法测定螺旋藻多糖的抗肿瘤活性；光镜观察螺旋藻多糖对HeLa细胞形态学的影响；流式细胞术检测螺旋藻多糖对肿瘤细胞周期的影响。结果：随螺旋藻多糖浓度的增加，HeLa细胞存活率逐渐降低。抑制率逐渐增加；光镜下的观察显示，螺旋藻多糖作用24-48h后，细胞出现明显的形态学改变；流式细胞术证实螺旋藻多糖对肿瘤细胞存在周期特异性，使细胞发生G1期阻滞。结论：螺旋藻多糖抑制HeLa细胞的增殖，可能与该细胞发生G1期阻滞有关。     

miR-143对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响以及对Bcl-2表达的调节

目的研究miR-143对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,探讨miR-143对宫颈癌HeLa细胞系Bcl-2蛋白及mRNA表达的调节作用。方法将miR-143,anti-miR-143以及microRNA空对照高表达质粒用脂质体转染进宫颈癌He-La细胞中,MTT法检测宫颈癌HeLa细胞增殖的变化,His-tone/DNA ELISA检测细胞凋亡;Western blot和RT-PCR检测Bcl-2蛋白和mRNA的表达情况;双荧光素酶报告基因法检测miR-143的靶位点。结果 MiR-143抑制HeLa细胞的增殖,促进细胞凋亡,而anti-miR-143促进HeLa细胞增殖,抑制细胞凋亡;高表达的miR-143抑制Bcl-2蛋白的表达,anti-miR-143增加Bcl-2蛋白的表达量,而Bcl-2 mRNA的变化很小;miR-143抑制Bcl-2 3'端的荧光素酶的活性,突变miR-143与Bcl-2的预测结合位点后,荧光素酶的活性恢复。结论 MiR-143至少部分通过打靶Bcl-2抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,并且促进HeLa细胞凋亡。     

西多福韦对HeLa细胞增殖抑制作用的研究

目的 研究抗病毒药西多福韦(CDV)对HeLa细胞的增殖抑制作用.方法 采用MTT法分析CDV和阳性对照药顺铂(DDP)对HeLa细胞增殖活力的影响;利用细胞集落形成实验和Giemsa染色技术,观察CDV和DDP导致HeLa细胞凋亡情况;利用流式细胞仪观察CDV和DDP对细胞凋亡及细胞周期影响.结果 MTT法和细胞集落实验结果显示CDV能明显抑制HeLa细胞的增殖活性;流式细胞仪测定显示CDV和DDP使HeLa细胞阻滞于细胞周期的S期,并诱导HeLa细胞发生凋亡.结论 CDV对HeLa细胞具有明显的增殖抑制作用,并能诱导细胞凋亡,CDV有可能成为宫颈癌治疗的另一策略.     

miR-9对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨miR-9对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响.方法 通过构建miR-9低表达及过表达Hela细胞,并设置空白对照,以MTT法检测细胞数量、蛋白质印迹法检测PDCD4的表达以及流式细胞术检测细胞周期.结果 ①细胞数量:pre-miR-9转染的细胞培养48 h、72 h、96 h细胞的相对增殖活性均较空白对照组...     

红三叶异黄酮对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用

目的探讨红三叶异黄酮对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及其作用机制。方法以MTT法检测红三叶异黄酮20、40、80μg/m L分别在24、48、72 h对人宫颈癌HeLa细胞增殖作用的影响,并在倒置显微镜下观察HeLa细胞形态学改变。流式细胞仪检测红三叶异黄酮20、40、80μg/m L对HeLa细胞凋亡的影响。实时荧光定量PCR仪检测红三叶异黄酮20、40、80μg/m L对HeLa细胞凋亡中调节基因Bax、Bcl-2表达水平的影响。结果红三叶异黄酮对人宫颈癌HeLa细胞的增殖抑制作用,表现为时间、浓度的相关性。红三叶异黄酮对HeLa细胞的形态学改变,表现为随药物浓度增加细胞固缩变小,并出现凋亡小体。流式细胞仪检测分析显示红三叶异黄酮能引起HeLa细胞凋亡,并随药物浓度的增加而明显,当红三叶异黄酮达到一定有效浓度时,诱导其细胞凋亡。通过调节Bax mRNA与Bcl-2 mRNA的表达,促进抑制HeLa细胞增殖,能使Bax表达上升、Bcl-2表达下降,且呈剂量相关性。结论红三叶异黄酮对人宫颈癌HeLa细胞的增殖具有抑制作用,并呈一定的剂量和时间相关性,提示通过调节Bax mRNA与Bcl-2 mRNA的表达,促进抑制HeLa细胞增殖。     

甘草酸通过线粒体膜去极化诱导HPV18阳性的人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用研究

目的 分析甘草酸对人乳头瘤病毒（human papilloma virus,HPV）18阳性的人宫颈癌HeLa细胞的抗增殖和促凋亡特性及其可能的作用方式,探讨甘草酸在预防HPV感染的作用和治疗宫颈癌的潜力。方法 MTT法检测甘草酸在caspase-8,caspase-9,caspase-3抑制剂存在的情况下对HeLa细胞增殖的抑制作用,相差显微镜观察细胞形态学,4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染色检测细胞核凝结和Hoechst 33342染色检测核形态,Annexin V-FITC/PI法分析细胞凋亡,采用caspase-8,caspase-9和caspase-3比色试剂盒测定宫颈癌细胞中caspase的活性,通过Mito Tracker Red CMX Ros染色评估线粒体膜电位（ΔΨm）。结果 与对照组相比,甘草酸可显著降低HeLa细胞活力,并伴随着核浓缩和DNA碎片的增加,呈剂量依赖性。甘草酸可通过线粒体去极化诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡,并诱导caspase-8,caspase-9和caspase-3活化。结论 甘草酸对宫颈癌细胞的抗增殖和促凋亡特性可能是通过诱导线粒体膜电位的破坏,激活细胞内和细胞外途径的caspases活性,甘草酸可作为预防和控制宫颈癌的一种辅助手段。     

MMP-2、TIMP-2与人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤生长相关性的研究

目的探讨人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤内基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)的表达与肿瘤发生、发展的关系。方法建立人胆管癌裸鼠移植瘤模型,并随机分成对照组、干预组(羟基喜树碱,2.5 g.kg-1)和实验组(羟基喜树碱,10 g.kg-1),观察裸鼠移植瘤体生长情况及瘤体病理组织学。结果所有移植瘤标本病理组织学检查符合胆管中分化腺癌;与对照组比,实验组可明显提高移植瘤内TIMP-2的含量,降低MMP-2/TIMP-2的比值;移植瘤体积与前者呈负相关,与MMP-2/TIMP-2呈正相关。结论实验组可降低移植瘤MMP-2/TIMP-2比值,抑制移植瘤的生长,对人胆管癌裸鼠移植瘤细胞外基质的降解可能具有抑制作用。     

复尔康注射液对人肝癌细胞株及裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:研究复尔康注射液对人肝癌细胞株增殖及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:采用CCK8试剂盒检测复尔康注射液对人肝癌细胞株SMMC-7721和BeL-7402增殖的抑制作用;建立SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤模型,通过比较肿瘤体积(tumor volume,TV)、相对肿瘤体积(relative tumor volume,RTV)和相对肿瘤增殖率(T/C)考察复尔康注射液对肿瘤生长的影响。结果:复尔康注射液对SMMC-7721和BeL-7402的IC50分别为(61.51±1.58),(68.39±7.16)mg·L-1;不同剂量复尔康注射液能够不同程度地抑制裸鼠移植瘤的生长,与阴性对照组比较,P<0.05。低、中、高剂量复尔康注射液组(0.065,0.130,0.260 g·kg-1)T/C分别为57.75%,39.9%和44.08%。结论:复尔康注射液体外能抑制人肝癌细胞株的增殖,体内能明显抑制SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤的生长。     

羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤MMP-2、TIMP-2的影响

目的探讨羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)的影响,分析MMP-2及TIMP-2与肿瘤发生、发展的关系.方法建立人胆管癌QBC939细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,将24只裸鼠随机分成对照组、干预组和实验组,分析移植瘤体生长情况,免疫组化法结合图像分析系统半定量检测瘤体内MMP-2、TIMP-2及MMP-2/TIMP-2的比值.结果与对照组比,实验组可使移植瘤体的MMP-2、TIMP-2含量增高,后者差异有统计学意义(P＜0.01);实验组可降低MMP-2/TIMP-2的比值和抑制移植瘤生长,差异有统计学意义(P＜0.01).结论实验组可降低移植瘤MMPV2/TIMP-2比值,对人胆管癌裸鼠移植瘤细胞外基质的降解可能具有抑制作用,进而抑制移植瘤的生长.     

General gambogic acids inhibited growth of human hepatoma SMMC-7721 cells in vitro and in nude mice

AIM: To study the inhibitory effect of general gambogic acids (GGA) on transplantation tumor SMMC-7721 in experimental animal model and SMMC-7721 cells in vitro. METHODS: Anti-tumor activity of GGA in the experimental transplantation tumor SMMC-7721 was evaluated by relative tumor growth ratio. Cell morphology was observed with inverted microscope and electron microscope. Cell proliferation was measured by MTT assay and the telomerase activity was determined by PCR. RESULTS: In vivo study indicated that GGA (2, 4, and 8 mg/kg, iv, 3 times per week for 3 weeks) displayed an inhibitory effect on the growth of transplantation tumor SMMC-7721 in nude mice compared with the normal saline group (P<0.01). At the concentrations of 0.625-5.0 mg/L, GGA remarkably inhibited the proliferation of SMMC-7721 cells in vitro. GGA 2 mg/L dramatically changed morphology of SMMC-7721 cells and inhibited the telomerase activity in SMMC-7721 cells. CONCLUSION: GGA had inhibitory effect on the growth of SMMC-7721, which might be related to its inhibition of telomerase activity.     

提高人肺腺癌裸鼠皮下移植瘤成瘤率的方法学研究

目的：提高人肺腺癌裸鼠皮下移植瘤的成瘤率。方法：人肺腺癌SPC-A-1、GLC-82培养细胞或相应的瘤组织匀浆接种于裸鼠皮下之前,先用富含生长因子的小鼠肉瘤S180腹水上清液按比例稀释,然后在裸鼠背部或腋窝皮下接种。观察人肿瘤细胞或肿瘤组织在加入小鼠肉瘤S180腹水上清液后,对移植瘤生长速度及成瘤率的影响。结果：加入小鼠肉瘤S180腹水上清液后,人肺腺癌SPC-A-1和GLC-82成瘤率明显提高,而且移植后的人肿瘤生长速度较未加小鼠肉瘤S180腹水上清液的人肺腺癌细胞明显加快。结论：小鼠肉瘤S180腹水上清液能明显提高人肺腺癌SPC-A-1和GLC-82裸鼠皮下移植瘤的成瘤率,促进肿瘤生长。     

酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:观察酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402的抑制作用,并分析其可能机制。方法:制备裸鼠移植瘤模型,随机分为生理盐水、氨基酸混合物、环磷酰胺、酪丝亮肽高低剂量等5组,每组12只,观察酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402肿瘤组织坏死和凋亡的影响;电镜观察其对肿瘤细胞超微结构改变;流式细胞技术分析其对细胞周期及细胞凋亡率的影响。结果:酪丝亮肽能够诱导肿瘤细胞坏死和凋亡、细胞周期阻抑、显著抑制肿瘤的生长,给药剂量为80μg.kg-1.d-1和160μg.kg-1.d-1时,肿瘤抑制率分别为42%与58%。结论:酪丝亮肽可以显著抑制人肝癌BEL-7402的生长,作用机制与促进肿瘤细胞的凋亡和坏死有关。     

树突状细胞介导的CTL在裸鼠体内外抑制白血病细胞生长的研究

目的研究白血病细胞可溶性蛋白抗原（SPA）致敏树突状细胞（DC）介导的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应在裸鼠体内、外抑制白血病细胞生长的效应,为白血病DC免疫治疗提供理论依据。方法利用人骨髓单个核细胞（MNC）体外培养DC,经形态、表型及功能综合鉴定。用纳米粒包裹白血病细胞SPA并致敏DC,在体外诱导出特异性CTL,用MTT法测定其活性。另分别将HL-60细胞与淋巴细胞（LC）或与CTL同时注入裸鼠体内,通过肿瘤体积、成瘤时间、肿瘤抑制率等对比各组抑制肿瘤生长的效果。结果（1）培养的DC具有DC的形态特征并高表达CD1a、CD83。（2）MTT法测定各组CTL活性,发现A1组较A2组和A3组、B1组较B2组和B3组有明显差异（均P〈0.05）。A3组及B3组CTL活性最高,A2组及B2组活性次之。（3）在裸鼠体内实验中,1组与2组、3组的肿瘤体积及成瘤天数比较均有明显统计学差异（P〈0.05）,而2组与3组比较却无显著性差异（P〉0.05）;2组与3组肿瘤抑制率分别为（50.70±13.74）%和（52.29±13.68）%。结论在体外实验用白血病细胞SPA及纳米粒包裹的SPA致敏DC,均能可介导较强的CTL作用,且纳米粒包裹SPA组的CTL活性更高。用白血病细胞SPA及纳米粒包裹的SPA致敏的DC在裸鼠体内同样可诱导出较强的CTL作用,表现为肿瘤体积明显小于对照组,成瘤天数也明显晚于对照组,但纳米粒包裹SPA致敏DC组在体内试验中未显示出更强的抑瘤活性。通过DC介导特异性的CTL可有效的抑制白血病细胞,是一种有良好临床应用前景的细胞免疫治疗方法。