双黄连粉针剂对产ESBLs大肠埃希菌耐药性影响实验研究

目的:观察双黄连粉针剂在体内外对产ESBLs大肠埃希菌耐药性的影响。方法:取分离于临床的ESBLs阳性大肠埃希菌,用Kirby—Bauer(KB)法测定双黄连作用前后药物敏感性;另取40只SD大鼠随机分4组,分别为空白组、模型组、西药组、中西药联合组,2.5×108/mL菌液尾静脉注射造模,按照分组连续给药5天,记录一般情况,于感染后1h及5天后检测血培养、白细胞计数,用KB法测定药物敏感性。结果:经双黄连作用后,头孢哌酮及头孢哌酮舒巴坦的抑菌圈直径增大(P<0.05);体内实验中,与模型组和西药组比较,治疗后中西药联合组体温下降明显(P<0.05),白细胞下降较显著(P<0.05),中西药联用组,头孢哌酮及头孢哌酮舒巴坦抑菌圈直径较治疗前和同时模型组、西药组均有所增大(P<0.05)。结论:双黄连粉针剂可以增强产ESBLs大肠埃希菌对抗生素的敏感性,联合头孢哌酮/舒巴坦对产ESBLs大肠埃希菌有协同抗菌作用,可提高抗生素对耐药菌疗效。     

通腑抗炎汤对腹腔感染所致SIRS大鼠的病程干预及脏器保护作用研究

目的:探讨通腑抗炎汤对腹腔感染所致SIRS的作用机理。方法:36只大鼠随机分为模型组、治疗组及正常对照组。模型组、治疗组腹腔注射大肠杆菌(1ml/100g加佐剂10%BaSO41ml/100g)造成大鼠SIRS模型。观察大鼠15min～48h的行为活动、精神状态、食欲、呼吸、大小便及死亡率等一般情况,于造模后24h尾静脉取血测白细胞计数、IL-1、IL-6和IL-10的变化。48h后取动物肝、肾、肺、小肠等脏器标本进行光镜观察。结果:治疗组与模型组大鼠均出现一般情况恶化,白细胞计数、IL-1、IL-6、IL-10水平均高于正常对照组(P<0.05)。治疗组白细胞计数、IL-1、IL-6水平低于模型组,IL-10水平高于模型组。治疗组肝、肾、肺、小肠等脏器光镜下炎症性病理损害均明显轻于模型组。结论:通腑抗炎汤可抑制腹腔感染大鼠白细胞升高幅度,减轻肝、肾、肺、小肠等脏器的继发性炎症性病理损害。通过抑制促炎细胞因子、上调抗炎细胞因子的双向调节来减轻或阻断腹腔感染所致SIRS进程。     

糖尿病SD大鼠骨密度及骨组织学特点研究

目的 观察糖尿病SD大鼠模型骨密度、骨组织学及生化指标的改变,探讨血糖与骨代谢的关系.方法 采用单次大剂量链脲佐菌素的方法,用雄性SD大鼠制备糖尿病SD大鼠模型,以正常血糖雄性SD大鼠作为阴性对照,12周后,抽取大鼠心脏血测定血糖、血脂、血钙、血磷、碱性磷酸酶;采用双能X光衍射仪测定大鼠右侧胫骨和股骨离体骨的骨密度,取左侧股骨上段制作病理标本.结果 糖尿病组SD大鼠体重显著低于正常对照组,有统计学意义（P＜0.05）;注射STZ 48 h后血糖明显升高并持续存在.糖尿病组SD大鼠骨质疏松明显,股骨及胫骨BMD显著降低（P＜0.05）.糖尿病组SD大鼠的AKP、LDL-C显著升高（P＜0.05）,而血钙、HDL-C显著降低（P＜0.05）.结论 糖尿病组SD大鼠表现为骨密度减少,不仅出现血生化的异常,且出现明显的骨组织形态结构异常,提示高血糖导致骨代谢异常.     

不同感染途径致大鼠肺炎模型制备的比较

目的 探索铜绿假单胞菌致大鼠肺炎模型的制备方法,为后续研究奠定实验基础。方法 将Sprague-Dawley （SD）大鼠48只随机分为4组：A对照组、B气管注射组、C气管插管感染组和D滴鼻感染组。适应饲喂3 d后,分别给予不同造模干预,分别于干预后5、10和15 d动态监测各亚组大鼠体重、体温、白细胞数、肺组织病理学变化等。结果 各模型组大鼠行为学表现、体重、体温、白细胞、肺组织炎症病理学表现均与对照组差异有显著性;②各模型组均证实为铜绿假单胞菌感染,对照组则阴性。结论 经滴鼻途径以铜绿假单胞菌感染大鼠,可得到合格大鼠肺炎模型;此感染途径可避免手术创口带来的炎症反应干扰,简便易行,可推广。     

散血明目片长期口服对大鼠脏器系数及病理形态学的影响

目的：观察散血明目片长期口服对大鼠体重，脏器系数、重要组织器官病理形态学的影响及停药2周后的恢复情况。方法：将80只大白鼠随机分成4组，即空白组，药物小剂量组，药物中剂量组，药物大剂量组。药物各组散血明目片以相当成人等效剂量的2．5、10、25倍剂量给大鼠灌胃3个月及停药2周，观察其一般状况，动物体重、动物脏器系数、15个主要组织器官形态无异常改变及停药2周后改变恢复情况。结果：动物无死亡，一般状况无异常，动物体重，脏器系数等指标均无异常改变，15个主要脏器大体观察及镜检查均无中毒性病理改变。结论：散血明目片长期口服不会影响的体重及各主要组织器官的生长发育及正常的组织形态。     

清热解毒法对糖尿病足感染大鼠的影响

目的：观察清热解毒方四妙勇安汤对糖尿病足感染大鼠的影响。方法将70只大鼠随机分为正常组11只和实验组59只,正常组采用普通饲料喂养,实验组采用高脂饮食饲养加STZ、金葡菌注射的方法建立糖尿病足感染大鼠模型,将造模成功大鼠随机分为模型组、中药组、抗生素组。正常组及模型组每天灌服生理盐水,中药组给予四妙勇安汤浓缩剂灌胃,抗生素组予头孢拉定灌胃,均1次／d,给药1周后观察各组大鼠血肿瘤坏死因子－α（TNF－α）、白细胞介素－6（IL－6）、C反应蛋白（CRP）、血糖情况。结果经干预后,与正常组比较,造模成功各组大鼠血糖升高、体重下降（P＜0.05）,模型组大鼠血TNF－α、血IL－6均升高（P＜0.05）,抗生素组、中药组大鼠血TNF－α、血IL－6与正常组比较差异无统计学意义（ P＞0.05）;抗生素组血糖、血TNF－α、血IL－6均较模型组下降（P＜0.05）,中药组血糖、血IL－6较模型组下降（P＜0.05）,血TNF－α比较差异无统计学意义（P＞0.05）,中药组与抗生素组在血糖、血TNF－α、IL－6方面比较差异无统计学意义（P＞0.05）,中药组大鼠干预前后体重未见明显变化（P＞0.05）,抗生素组、模型组大鼠体重明显下降（P＜0.05）。结论清热解毒方四妙勇安汤可降低糖尿病足感染大鼠血IL－6,抑制血糖升高,控制大鼠体重下降。     

4种中药注射剂大分子富集液的重复给药毒性实验研究

目的 以清开灵、丹参、双黄连、灯盏细辛4种注射液的大分子富集液为研究对象,以发现中药注剂大分子物质的潜在毒性。方法 采用分子筛将注射剂原液制备成10K大分子富集液。家兔随机分为空白对照组、原液组、大分子富集液组,用红外耳温仪每天测量静脉给药前和给药后2h耳温,称量体重变化,连续观察5d。将动物进行取血液检测血常规、血生化、体温、体重,其中3只处死检测脏器系数并进行病理切片;余下动物停药继续观察5d。结果 给药5d,大分子富集液组动物的体重下降;白细胞、粒细胞、血小板和血生化指标（GPT和GOP）都有不同程度的升高;体温有不同程度的升高;对家兔肝肾组织均有不同程度的损害。停药5d有一定程度的恢复。结论 中药注射液中的大分子物质对家兔具有一定的肝肾毒性。     

CCl4致SD大鼠急性肝损伤模型制作的改进

目的本文筛选CCl4致SD大鼠急性肝损伤模型的最佳给药浓度和剂量,追踪观察模型大鼠肝损伤后修复过程。方法本文采用随机对照分组的研究方法,对不同的SD大鼠模型组给予不同剂量的CCl4一次性腹腔注射。给药后48 h检测大鼠血清ALT, AST。各组随机处死一只SD大鼠,取肝组织制成病理切片镜下观察。追踪观察筛选后的CCl4模型大鼠肝组织病理变化恢复情况。结果本实验发现3A-7A组的ALT,AST较对照组明显升高(P<0.05或P<0.01),随着CCl4的剂量的增加,大鼠肝组织的病理损伤加重,6A和7A组可见自然死亡大鼠。结论本试验筛选了CCl4致SD大鼠急性肝损伤模型的较好CCl4的剂量。该模型肝损伤明显,死亡率低,对其他重要脏器影响小,可作为急性肝损伤研究的较好模型。     

大鼠Walker-256移植性肺癌模型的建立

目的 建立大鼠Walker-256移植性肺癌模型,探讨应用Walker-256癌细胞建立大鼠移植性肺癌模型的可行性.方法 SD大鼠经尾静脉注射高、中、低三种不同细胞浓度的大鼠Walker-256细胞悬液,观察大鼠的生存时间、体重变化、移植性肺癌模型的成模率,其他脏器转移情况及病理形态学变化情况.结果 注射癌细胞后14 d,模型组大鼠均出现体重下降、摄食减少等体征,与正常对照组比较体重明显降低(P＜0.05);注射癌细胞后21d,高浓度组大鼠开始出现死亡;高、中、低三组不同细胞浓度的移植性肺癌成模率分别为100％、80％、30％,模型组大鼠肝脏系数和肺脏系数均高于正常对照组.病理结果显示,模型组大鼠肺部可见明显的癌症病灶,而其他脏器未发现明显异常.结论 注射高浓度Walker256癌细胞(3×105个细胞/只)能成功复制移植性肺癌模型,为移植性肺癌模型的建立和应用提供实验依据.     

过量使用含汞中药外用制剂引起的肾功能指标改变与肾脏病理形态学的关系

目的研究经大鼠溃疡皮肤反复给予含汞中药制剂引起的肾功能指标改变与肾脏病理形态的关系,为临床监测含汞制剂的安全性及明确诊断肾脏损害阶段提供依据。方法将80只SD大鼠随机分8组:皮肤破损组,溃疡模型组,基质组(凡士林)及5个中药剂量A、B、C、D、E组(1.219、0.609、0.305、0.152、0.076 g/kg)。连续给药14 d,采用酶联免疫法检测大鼠尿视黄醇结合蛋白(RBP),脲酶法检测血清尿素氮(BUN),除蛋白法检测血肌酐(SCr);通过称量大鼠空腹体重及脏器湿重,计算肾脏系数;福尔马林溶液固定肾脏,HE染色观察肾组织形态。结果与溃疡模型组比较,各组BUN及SCr未见异常;中药A、B、C、D组RBP水平均明显升高(P<0.01);各中药组肾脏系数均不同程度升高。肾组织形态观察,可见大面积创伤、细菌感染及炎症等病理因素可以造成溃疡模型大鼠肾脏病变,以肾间质出血及炎细胞浸润为主,而这种病理损害在各中药组中均有所减轻,但基质组未见改善;剂量较高的中药组肾脏病变以肾小管及肾小管上皮细胞损伤为主,其中,RBP水平升高的A、B、C、D 4个中药组肾小管上皮细胞肿胀明显,并有不同程度的脱落;A、B、C 3组肾小管扩张明显。结论常用肾功能检测指标不能较好的反映含汞中药外用制剂引起的早期肾脏病理损害,RBP可以在肾小管上皮细胞形态出现改变时较早地反映肾脏靶器官毒性。     

银花泌炎灵片乙醇提取物对大肠埃希菌超微结构的影响及其抑菌作用机制

目的：研究银花泌炎灵片95%乙醇提取物对大肠埃希菌标准菌株和临床耐药菌株的
体外抑菌活性,阐明其抑菌机制。方法：采用管碟法分别测定银花泌炎灵片95%乙醇提取物对大肠埃希菌标准菌株ATCC25922和18株泌尿系感染
产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌临床分离株的体外抑菌活性,测定其最小杀菌
浓度（MBC）。扫描和透射电子显微镜观察药物作用后菌体超微结构改变。结果：银花泌炎灵
片95%乙醇提取物对大肠埃希菌标准菌株ATCC25922和产ESBLs大肠埃希菌的MBC50和MB
C90分别为100 g/L^-1和150～300 g/L^-1。扫描电子显微镜下观察,经银花泌炎灵片95%乙醇提取物作用后大肠埃希菌菌体表面出现塌陷,两端可见凹陷和刺状突起,有的细菌严重变形;负染透射电
子显微镜下观察,药物作用后菌体折光性明显变差,菌体变形出现褶皱,且部分细胞壁出现
凹陷;超薄切片透射电子显微镜下观察,药物作用后菌体固缩膨大,细胞壁模糊不清甚至缺失,细胞质固缩解体,形成小空泡。结论：银花泌炎灵片95%乙醇提取物对大肠埃希菌标准菌株
ATCC25922和产ESBLs大肠埃希菌均有一定程度的抑制作用,其抑菌机制可能是药物干扰或破
坏大肠埃希菌细胞壁合成或破坏菌体内大分子量蛋白,以致菌体超微结构出现改变。
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泌尿系统分离的超广谱β酶菌及其耐药性分析

目的:了解泌尿系统分离的产超广谱β内酰胺酶细菌(ESBLs)泌尿系统分离的状况,并对其作耐药性分析。方法:对121株革兰阴性杆菌用复合纸片法做表型确证试验及双纸片协同法进行对照监测。结果:泌尿系统分离的革兰阴性杆菌中,ESBLs菌分离率为23.1%,其中大肠埃希菌占16.5%,肺炎型肺炎克雷伯菌占6.6%,对产ESBLs菌耐药率较低的药物有:阿米卡星(20.0%),阿莫西林、克拉维酸(37.6%),头孢噻肟/克拉维酸(14.1%),头孢吡肟(18.1%),亚胺培南(8.7%),而氨苄西林,头孢唑林等均超过50%。结论:泌尿系统分离ESBLs菌主要为大肠埃希氏菌和肺炎型肺炎克雷伯菌为主,对头孢类等药有较高的耐药性,提示对泌尿系统分离ESBLs菌的治疗根据药敏结果有重要意义。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的检测及感染，耐药特性

目的：了解医院内产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs)细菌的种类,分布,耐药特性及产生原因。方法：以头孢噻肟、头孢三嗪、头孢他啶和氨曲南作指示底物,用双纸片协同试验检测ESBLs。结果：716株G^-阴性菌检出12种产ESBLs114株,主要由使用过三代头孢史的患者检出。以阴沟肠杆菌、肺炎克类伯菌和大肠埃杀菌为主,检出率分别为34．66％（26／75）、19．37％（25／129）和14．75（36／244）。氨曲南和头孢噻肟是检测ESBLs的最佳指示物。产ESBLs菌对头孢菌素、氨曲南的耐药性高于非产酶株,所有产ESBLs菌对泰能敏感（嗜麦芽窄食单胞菌除外）。结论：产ESBLs菌以阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌为主,产生与使用三代头孢有关,并可通过质粒在细菌中相互传播。应根据药敏报告选择对ESBLs敏感的药物。     

新西兰兔金黄色葡萄球菌感染性发热模型的制备

目的用金黄色葡萄球菌感染新西兰兔制备动物细菌感染发热模型。方法将6×10^7金黄色葡萄球菌皮内注射健康幼龄新西兰兔,观察体温、发热时相、症状、白细胞总数及分类、重要脏器病理变化。结果发热时相明显,白细胞总数、CRP升高,脏器粘连、充血、炎细胞浸润等。结论该模型能够复制出细菌感染发生、发展、转归过程,反应疾病特点与急性重症感染模型一致。     

雄性SD大鼠各泌尿生殖器官感染解脲支原体阳性率及病理改变的比较研究

目的了解解脲支原体（Uu）对雄性SD大鼠各泌尿生殖器官感染情况,为预防及治疗Uu感染提供理论依据。方法取性成熟雄性SD大鼠40只,晨尿离心,沉渣作Uu液体培养,随机取Uu培养阴性30只随机分为两组,A组为模型组共22只;B组为对照组共8只。A组每只动物经膀胱注入血清8型Uu菌株0.5 ml,浓度为5×106CCU/ml;B组每只动物膀胱注入等量生理盐水。第40天再次取晨尿离心,沉渣作Uu液体培养,阳性者做固体培养,再次培养阳性者,定为造模成功。再分别取造模成功的大鼠各泌尿生殖系统器官组织作组织培养及病理检查。结果模型组19只（死亡3只）大鼠组织培养阳性,各泌尿生殖系统器官Uu阳性感染率比较差异均有统计学意义（均P〈0.05）,以尿道组织培养阳性率最高（84.2%）,其次依序为前列腺与睾丸均为63.2%,附睾、精囊、输精管均为47.4%,膀胱42.5%。前列腺与睾丸病理有明显改变,其余组织无明显改变。对照组8只培养均为阴性。结论 Uu感染可广泛并不同程度浸润雄性大鼠泌尿生殖器官,同时提示Uu最易侵犯的器官为尿道、前列腺及睾丸,其次为附睾、精囊、输精管、膀胱,但组织病理改变仅少数器官有变化,且均无明显炎症细胞浸润。     

烧伤病区产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性菌分离率及耐药性分析

目的了解我院特别是烧伤病区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌的流行情况,检测其对常用抗生素的耐药性,为临床治疗和控制ESBLs菌感染及流行提供重要依据.方法通过中心化验室收集我院2000年3月～2001年2月住院患者送检标本中大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌共计258株,应用VITEK自动检测系统(GNS-506药敏分析卡)及双纸片扩散法筛选产ESBLs菌.根据VITEK自动检测系统药敏检测结果分析比较产ESBLs菌和非产ESBLs菌对15种抗生素的敏感性,并对其中38株产ESBLs阳性菌进行12种临床常用抗生素MIC检测.结果 258株入选菌株中产ESBLs阳性率分别为:大肠杆菌18.8%(29/154);肺炎克雷伯杆菌12.5%(13/104).按标本种类分析,分泌物标本培养产ESBLs阳性率最高,为25.5%,与其他标本培养的总阳性率间的差别有显著性意义;按病区分析,烧伤病区产ESBLs阳性率(大肠杆菌38.5%;肺炎克雷伯杆菌25.0%)与其他病区产ESBLs阳性率间差别有显著性意义.药敏结果:产ESBLs的大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南、美洛培南及头孢西丁的敏感率较高,其次是氨基糖苷类抗生素,产ESBLs的肺炎克雷伯杆菌对哌拉西林/三唑巴坦敏感,对其他抗生素的敏感性下降.结论烧伤病区是产ESBLs菌的高发病区,产ESBLs菌对亚胺培南的敏感率最高,其次是美洛培南、头孢西丁和丁胺卡那.     

大肠埃希菌超广谱-β内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的:了解我院大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率及耐药情况,为临床治疗提供依据。方法:对我院2002年1月~2004年12月住院病人分离的大肠埃希菌311株,采用NCCL推荐的纸片扩散表型确证试验进行ESBLs检测,用K-B法做药敏试验。结果:检出ESBLs菌78株,检出率33.48%。产ESBLs菌的耐药率显著高于不产ESBLs菌(P<0.005)。产ESBLs菌对亚胺培南的耐药率低。结论:应对ESBLs菌进行检测和监测,以指导临床用药。亚胺培南可作为ESBLs菌治疗的首选药。     

产超广谱β-内酰胺酶菌株及其耐药性监测分析

目的探讨产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）在大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中的检出率及耐药特点，指导临床用药。方法采用双纸片协同试验检测产ESBLs菌株，用K—B琼脂扩散法作药敏试验。结果ESBLs总检出率为39．8％。其中大肠埃希菌的检出率为37．7％，肺炎克雷伯菌的检出率为43．4％，产ESBLs菌对亚胺培南100％敏感，对头孢哌酮＼舒巳坦的耐药率较低。结论加强对ESBLs菌株及其耐药率监测，能指导临床合理用药，是预防和控制ESBLs细菌感染的重要措施。     

常见革兰阴性杆菌AmpC酶的检测分析

目的了解常见革兰阴性杆菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞AmpCs发生率及表型构成,以及产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌AmpC酶的发生率及表型构成。方法采用底物协同-拮抗法(MSSAT)检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、阴沟肠杆菌产AmpCs情况及表型构成。结果产ESBLs的大肠埃希菌和产ESBLs的肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、阴沟肠杆菌AmpC酶检出率分别40%、56%、100%、100%、100%。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时存在AmpC酶的机制,应引起临床和实验室工作者的重视。AmpC酶的耐药表型与菌株的耐药程度相关。