束缚应激大鼠血小板及血管内膜的L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮通路下调

目的:观察束缚应激对大鼠血管内膜及血小板L-精氨酸(L-Arg)/一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)/一氧化氮(NO)通路的影响及其相互联系,探讨血管应激损伤的发病机制.方法:大鼠束缚-浸水(water im-mersion restraint,WIR)应激7 h,以胃溃疡指数作为机体应激损伤的的标识,采用Greiss法测定离体血管内膜及血小板孵育生成的亚硝酸盐(NO2-)含量;以同位素示踪法检测其NOS活性及L-Arg转运.结果:WIR应激大鼠呈现典型应激性胃溃疡,主动脉血管内膜及血小板NO2-生成分别较对照组低46%和57%(均P＜0.01),且Person相关分析显示两者变化呈现明显的正相关(r2=0.9835,P＜0.01).与对照组比较,WIR大鼠血小板NOS酶催化效率显著降低,Km值增加18%,最大酶促反应速率(Vmax)降低44%(均P＜0.01);血管内膜NOS活性亦显著降低(-50%,P＜0.01),血小板和血管内膜NOS活性呈正相关变化(r2=0.9726,P＜0.01).WIR组大鼠血小板L-Arg的跨膜转运能力较对照组明显抑制,转运的Vmax值低32%,Km值高37%(P＜0.01).血管内膜L-Arg转运较对照组降低27%,两者呈明显正相关(r2=0.9887,P＜0.01).结论:WIR应激下调血管内膜和血小板的L-Arg/NOS/NO通路,血管内膜和血小板L-Arg/NOS/NO通路的变化呈显著正相关,提示检测血小板L-Arg/NOS/NO通路的变化可能反映应激状态下血管内皮功能的损伤.     

溶血磷脂酸激活大鼠血小板L-精氨酸/一氧化氮通路

目的:观察溶血磷脂酸(LPA)对血小板L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮(L-Arg/NOS/NO)通路的影响,并探讨其与血小板功能变化的关系.方法:LPA(10-6,10-5和5×10-5 mol/L)与大鼠血小板混悬液共孵育,采用Greiss法测定血小板孵育液中亚硝酸盐(NO-2)含量;同位素示踪法检测血小板NOS活性及L-Arg转运;荧光探针法测定血小板内游离钙浓度.结果:LPA孵育30和60 min, 血小板NO释放分别增加了35%和56%(P＜0.01),LPA(10-6,10-5和5×10-5 mol/L)呈浓度依赖性增加了血小板NO的生成,EC50为17.8 μmol/L,95%CI为13.1～24.2 μmol/L(P＜0.01).LPA浓度依赖性增加了 NOS活性和血小板L-Arg的转运(P＜0.01).LPA(5×10-5 mol/L)孵育30和60 min,显著升高血小板[Ca2 ]i水平(P＜0.01).NOS抑制剂L-NAME预处理的血小板,LPA升高[Ca2 ]i的反应分别增强20%和32%(P＜0.01);加入NO供体L-Arg预处理,则明显抑制LPA升高[Ca2 ]i,分别减少14%和18%(P＜0.01).结论:LPA通过激活血小板L-Arg转运和NOS活性,上调L-Arg/NOS/NO通路,增加血小板NO生成.     

束缚应激抑制大鼠血小板L-精氨酸转运

目的观察束缚应激7h对大鼠血小板L-精氨酸／一氧化氮（L—Arg／NO）通路的影响，并探讨其影响机制。方法制备大鼠束缚-浸水（water immersion restraint，WIR）应激7h模型，采用Greiss法测定血小板孵育液中亚硝酸盐（NO2^-）含量；同位素示踪法检测血小板一氧化氮合酶（NOS）活性及L—Arg转运。结果WIR应激组较对照组血小板NOS活性降低45％；L—Arg最大转运速率（Vmax）减少30％，Km增加38％（P〈0．01），转运效率（Vmax／Km）减少50％（P〈0．05）；孵育液N02^-含量减少53％（P〈0．01）；胃溃疡出现。结论WIR应激损伤血小板L—Arg／NO通路，抑制血小板L—Arg转运和NOS活性，减少血小板NO生成。     

原发性高血压病人红细胞L-精氨酸/一氧化氮系统的改变

目的 :探讨原发性高血压病人红细胞精氨酸 /一氧化氮系统的改变。方法 :通过核素标记测定红细胞3H L Arg转运的特征 ;一氧化氮合酶 (NOsynthase ,NOS)改良法测定红细胞NOS活性 ;放射免疫法测定环磷酸鸟苷(cGMP)的含量。结果 :高血压组红细胞L Arg摄入的最大转运速率 (Vmax)较正常组明显降低 ,但两组L Arg转运的亲合力 (Km)无差异。其中高血压组经过Y+通道的Vmax与正常对照组比较明显下降 ,Km与正常组无差别。经过Y+L通道的Vmax与正常对照组比较无变化 ,Km升高。高血压组红细胞NOS生成量及NOS活性均降低。高血压时红细胞中的cGMP的含量也较正常人明显减少。结论 :高血压时红细胞利用精氨酸生成一氧化氮的能力下降     

硫化氢下调大鼠血小板L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮通路

目的观察硫化氢（hydrogen sulfide，H2S）对血小板L-精氨酸／一氧化氮合酶／一氧化氮（L-Arg／NOS／NO）通路的影响以探讨H2S和NO这两种气体信号分子间的相互作用。方法离体孵育大鼠血小板，加入H2S气体溶液（10^-6～10^-3mol／L）孵育2h，采用Greiss法测定血小板孵育液亚硝酸盐（NO2^-）含量；同位素示踪法检测血小板NOS活性及L-Arg转运。结果一次性给予H2S（10^-3～10^-3mol／L）孵育2h，呈浓度依赖的抑制了L-Arg／NO通路，血小板孵育液中NO2^-含量比对照组分别降低6％、11％（均P〉0.05）、24％、36％和52％（均P〈0．01）；NOS活性分别下降1％、14％（P〉0.05）、25％、37％和42％（P〈0.01）；L-Arg转运分别减少12％（P〉0．05）到72％（P〈0.01）；IC50分别为53、02、41．63及21、53μmol／L（P〈0.01）。结论H2S通过抑制血小板L-Arg转运和NOS活性，下调L-Arg／NOS／NO通路，从而减少血小板NO生成。     

高血压疾病时血液系统L-精氨酸载体转运动力学的改变

目的 探讨原发性高血压（EH）时人体血液系统L－精氨酸（L－Arginine,L-Arg)载体转运功能的改变。方法 EH患者12例及健康成年人16例,提取血小板（Pt)和红细胞（RBC）,分别测定Pt RBC的L-Arg转运的动力学特征。结果 EH患者Pt和RBC对^3H-L-Arg转运呈高新和性载体转运方式,在不同浓度点EH患者的^3H-L-Arg转运率均比对照组明显低下（P＜0．01）。Eadie-Hofstee Plot分析,EH患才Pt L-Arg的最大转运速率（Vmax)为对照组的79％（P＜0．05）,而t^3H-L-Arg转运的米氏常数值（Km)无明显差异。RBC的L－Arg转运总能力Y^ 载体转运系统的转运能力明显低于正常组（P＜0．01）,而Y^ L载体转运系统的转运能力无明显改变。L－Arg总转运的最大速率与Y^ 载体转运系统的最大速率分别较对照组降低36．8％和42．5％（P＜0．01）,各组之间Km无明显差异。结论 EH患者Pt和RBC L－Arg载体转运系统存在明显异常。     

白藜芦醇对束缚应激大鼠血小板L-精氨酸/一氧化氮通路的影响

目的探讨白藜芦醇对急性应激大鼠血小板聚集功能和L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮通路的保护作用及机制。方法复制水浸-束缚应激（WRS）大鼠模型,分对照组,应激组,白藜芦醇低、中、高剂量组,白藜芦醇各组于应激前分别按30、601、20mg/kg灌胃;对照组和应激组灌服同等容量的生理盐水。应激8h后测定血小板最大聚集率、血小板孵育液中亚硝酸盐（NO2-）含量、血小板NOS活性和L-Arg转运。结果白藜芦醇明显抑制WRS时血小板最大聚集率的升高,缓解WRS所致的血小板L-Arg转运、NOS活性和孵育液NO2-含量下调,以白藜芦醇中剂量组作用显著（P〈0.05或P〈0.01）;person相关分析,白藜芦醇对WRS大鼠血小板最大聚集率的影响与NO释放呈显著负相关,r=-0.808 7,P〈0.01。结论白藜芦醇可抑制WRS刺激的血小板聚集,改善应激损害的L-Arg/NO通路功能,两者的改变呈负相关。     

脂质体携载精氨酸对大鼠钙化血管精氨酸/NO途径的影响

目的:观察钙化血管精氨酸/NO途径的改变和脂质体携载精氨酸对血管钙化及精氨酸/NO途径的影响。方法:维生素D3注射制备大鼠血管钙化模型,检测血管钙含量、血浆精氨酸和亚硝酸盐含量、血管环磷酸鸟苷(cGMP)含量、血管一氧化氮合酶(NOS)活性及血管精氨酸水平。结果:钙化组大鼠血管钙含量较对照组升高7.5倍(P<0.01),血浆NO生成减少,血管cGMP水平降低,血管NOS活性增高(P<0.01),但精氨酸含量明显减少(-19.1%,P<0.01)。脂质体携载精氨酸治疗后血管钙含量较钙化组降低51.2%(P<0.01),血浆NO生成增加,血管cGMP含量增加5.1%(P均<0.05),血管精氨酸含量增加15.7%(P<0.05)。结论:给予脂质体携载精氨酸治疗可以减轻大鼠的血管钙化程度,改善钙化血管L-Arg/NOS/NO/cGMP途径紊乱,提示脂质体携载精氨酸对防治动脉粥样硬化等疾病的血管钙化可能具有潜在临床意义。     

L-精氨酸对缺血缺氧脑组织内皮素的影响

目的:观察L-精氨酸(L-Arg)和N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对缺血缺氧鼠脑组织内皮素(ET)的影响.方法:在鼠脑缺血缺氧前应用一氧化氮(NO)底物和外源性一氧化氮合酶抑制剂L-NAME,观察缺血缺氧后脑组织ET的变化.结果:L-NAME组与缺血缺氧组比较,脑组织ET含量明显增加(P＜0.05),脑水肿明显;而L-Arg用药组与缺血缺氧组比较,脑组织ET含量明显减少(P＜0.01),脑水肿减轻.结论:L-Arg对缺血缺氧脑组织有保护作用,可能与抑制缺血缺氧脑组织ET的产生有关.     

L-精氨酸治疗对胎儿宫内发育迟缓胎儿脐血流的影响

目的:探讨L-精氨酸(L-Arg)治疗对宫内发育迟缓(IUGR)胎儿脐血流的影响。方法:选择符合入选条件的IUGR患者66例,其中常规治疗组36例,予以常规治疗,L-Arg组30例,在常规治疗的基础上加用L-Arg治疗。另外,选择正常初产妇30例为正常对照组。监测治疗前后胎儿脐血流参数变化。结果:治疗后,L-Arg组搏动指数(PI)、阻力指数(RI)较常规治疗组降低(P<0.01,P<0.05),快速血流比值(FBVR)升高(P<0.05)。L-Arg组新生儿平均出生体重显著高于常规治疗组(P<0.01)。结论:L-Arg通过增加内源性NO的合成和释放,能显著改善IUGR胎儿脐血流,促进胎儿生长发育。     

静脉和侧脑室注射内吗啡肽-1对大鼠血清一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的影响

目的: 观察大鼠静脉和侧脑室注射内吗啡肽-1(EM-1)降低动脉血压中血清一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性的变化及其作用。方法: Wistar大鼠20只,随机分为外周静脉给药组14只和侧脑室给药组6只。静脉和侧脑室注射EM-1及其阻断剂Cyprodime,静脉注射NOS抑制剂L-NNA,分别测定大鼠动脉血压、血清NO含量和NOS活性的变化。结果: 大鼠静脉注射EM-1后动脉血压降低及血清NO含量和NOS活性升高(P<0.01和P<0.01),可被Cyprodime和L-NNA阻断;侧脑室注射EM-1后动脉血压降低,血清NO含量和NOS活性均无明显变化(P>0.05)。结论: 静脉注射EM-1可能通过μ阿片受体激活血管内皮NOS,促进NO释放降低动脉血压。侧脑室注射EM-1可能通过中枢μ阿片受体降低动脉血压,与NO无关。     

NO参与AngⅡ诱导心肌成纤维细胞胶原含量的变化

目的：探讨NO前体L-Arg和NOS抑制剂L-NAME在血管紧张素Ⅱ诱导CFs胶原合成中的作用。方法：用胰酶消化法分离、纯化、培养新生SD大鼠CFs,采用CFs羟脯氨酸含量测定、以羟脯氨酸标准曲线求出样本中羟脯氨酸含量,胶原含量以羟脯氨酸含量×7.4表示。结果：（1）在培养液中加入AngⅡ10-9～10-5mol/L,CFs胶原含量呈明显的剂量依赖性;（2）分别给予Saralasin和PTX对CFs胶原含量均无明显影响,但可明显抑制AngⅡ增强CFs胶原含量的作用;（3）预先给予NO前体L-Arg,再加入AngⅡ,AngⅡ增加CFs胶原含量的效应明显减弱;（4）加入NOS抑制剂L-NAME后,再加入L-Arg和AngⅡ,明显减弱L-Arg对AngⅡ的抑制作用;（5）在用L-NAME抑制NOS的基础上,再加入AngⅡ,其AngⅡ促心脏CFs的作用进一步增强,而单纯应用L-NAME对基础状态CFs胶原含量无明显影响。结论：AngⅡ能剂量依赖性增加CFs胶原含量,此效应是通过AngⅡ受体实现的,可能部分依赖于PTX敏感的G蛋白;NO明显抑制AngⅡ增加CFs胶原含量的作用,CFs内可能存在L-Arg-NO通路,该通路在调控AngⅡ增加CFs胶原含量中有重要作用。     

NO含量与NOS活力对ALT与AST活力影响的研究

目的 研究一氧化氮（Ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ;ＮＯ）与一氧化氮合酶（ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ;ＮＯＳ）活力对丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）与天冬氨酸氨酶（ＡＳＴ）活力的影响并探讨其机制。方法 对大鼠腹腔注射Ｌ－Ａｒｇ,４ｈ后采血取肝检测ＮＯ含量,ＮＯＳ活力、ＡＬＴ及ＡＳＴ活力并与对照组大鼠对比,ＮＯ定量用硝酸还原酶法、ＮＯＳ测定用分光光度法、ＡＬＴ与ＡＳＴ测定用改良赖氏法（２,４－二硝基苯     

L-精氨酸对急性冠脉综合征患者的治疗作用

目的 通过观察L-精氨酸（L-Arg）对急性冠脉综合征（ACS）患者血管内皮功能和心律失常的影响,来评价L-Arg对ACS患者的治疗作用。方法67例ACS患者被随机分到对照组和L-Arg治疗组。所有患者于入院时及用药7d后取静脉血,测定一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）、C-反应蛋白（CRP）浓度。每天心电监护记录各种类型的心律失常。结果治疗7d后,L-Arg治疗组NO高于对照组（P〈0．05）,ET-1、CRP低于对照组（P〈0．01）,心律失常发生率明显减少（P〈0．05）。结论 L-Arg能够改善ACS患者血管内皮功能,降低心律失常的发生率。L-Arg对ACS患者有治疗作用。     

Nitric oxide synthase/nitric oxide pathway mediates intussusception pathogenesis in rats

OBJECTIVE: To study the role of nitric oxide synthase/nitric oxide pathway in the pathophysiological process of intussusception (IN). METHODS: The IN model of rat was induced by lipopolysaccharide (LPS). The content of NOx in plasma and the NOS activity in colic smooth muscle tissues were measured. The content of cGMP was determined by radioimmunoassay. RESULTS: LPS (10 mg/kg, i.p.) induced IN in up to 40% of the rats 6 hours after treatment with LPS. The incidence of IN was significantly increased by 58.3% (P < 0.05) and by 66.8% (P < 0.01) in L-arginine (L-Arg)-treated rats (2% in drinking water) and in sodium nitroprusside (NSP)-treated rats (1 mg/kg, i.p.), respectively, but it is significantly decreased by 66.8% (P < 0.01) after administration of M-omega-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME, 15 mg/kg, i.p.), an inhibitor of nitric oxide synthase (NOS) activity. Furthermore, LPS increased total NOS activity, NOx production and cGMP levels in plasma or in colic smooth muscle tissues. These parameters in LPS-IN rats were significantly elevated by 38.8%, 50.7%, and 48.7% respectively (P < 0.01) compared with LPS-non-IN rats. CONCLUSION: NOS/NO pathway plays an important role in the process of IN, and inhibition of NO production may serve as a possible approach to prevent IN.     

中脑导水管周围灰质微量注射L—NNA和SNP对大鼠血压的影响

目的：研究中脑导水管周围灰质（PAG）内NO对血压的作用。方法：采用PAG微量注射法,观察大鼠血压的变化。结果：PAG微量注射N-硝基左旋精氨酸（L-NNA）后,平均动脉压（MAP）显著升高,此疚可被预先注射L-Arg逆转。PAG微量注射硝普钠（SNP）后,MAP显著降低,此效应可被预先注射荷包牡丹碱（Bic)逆转。结论：PAG内L-Arg-NO通路对动物血压有紧张性抑制作用,可能是通过GABA受体介导。