人外周血IL-2活性检测两种方法的对比研究

本文采用ＭＴＴ比色分析法及３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测ＩＬ－２活性，结果显示：ＭＴＴ比色法与３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定结果一致，但是ＭＴＴ比色分析法检测ＩＬ－２活性更简便、快速、经济、实用     

白细胞介素-2检验方法的比较研究

应用白细胞介素-2(IL-2)依赖T细胞株(Cytotoxic T Lymphocyte line)检测 IL-2,~3H-TdR掺入法与四甲基偶氮唑(MTT)比色法的检测效果,两者有一定的一致性。~3H-TdR掺入法重复性较好。在IL-2活性单位的计算方法上,比较了直接作图法、直接回归分析及正概率分布法,并对这些方法进行了讨论。不论用何种方法统计分析,在检测样品 IL-2时用标化的 IL-2作对比是必需要的。     

粒细胞集落刺激因子对卵巢癌细胞株生长的影响及检测方法研究

目的 :了解粒细胞集落刺激因子 (G CSF)对人卵巢癌细胞株生长的影响 ,并对用于卵巢癌细胞活性检测的 4种方法进行比较。方法 :采用XTT比色法、MTT比色法、集落形成试验、3H TdR掺入试验分别检测G CSF对卵巢癌细胞株 3AO细胞生长的影响。结果 :4种细胞活性检测方法检测不同浓度G CSF对 3AO细胞生长的影响与对照组 (G CSF浓度为 0ng/ml)相比 ,差异均无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :G CSF对 3AO细胞生长无显著影响 ,对其可促进卵巢癌细胞增殖的顾虑也许是不必要的 ;XTT比色法可替代其他方法用于卵巢癌细胞活性检测 ,且敏感性更高、更加快速简便。     

H3N2流感病毒非结构蛋白-1真核表达载体的构建与表达及其对293T细胞增殖的影响

目的:构建甲型H3N2流感病毒非结构蛋白-1( nonstructal-1,NS1)真核表达载体并表达其编码蛋白;探讨NS1对细胞增殖的影响?方法:从江苏省甲型H3N2流感病毒毒株提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增NS1全长基因,将其克隆至pMD18-T Simple Vector中构建pMD18-T/NS1质粒,双酶切pMD18-T/NS1与pXJ40-HA后,构建真核表达载体pXJ40-HA-NS1,经酶切及测序鉴定后将质粒转染到293T细胞中,通过免疫印迹法鉴定NS1蛋白的表达?3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]法检测NS1转染细胞后对细胞增殖的影响? 结果:经双酶切?测序鉴定证实NS1基因的真核表达载体构建成功;免疫印迹法证实NS1蛋白的表达?MTT法证实转染NS1质粒后对细胞增殖有抑制作用?结论:成功克隆了NS1全长基因,构建了其真核表达载体,并初步验证了NS1蛋白过表达后能抑制细胞的增殖,该表达载体的构建为后期建立稳定表达NS1的细胞模型和NS1蛋白对细胞增殖和凋亡作用机制的进一步研究提供了基础?     

双抗体间接夹心ELISA法检测血清MUC1蛋白方法的建立及其在肺癌诊断中的应用

目的:建立双抗体间接夹心酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒,检测血清黏蛋
白1（MUC1）水平,探讨其在肺癌诊断中的应用,阐明血清MUC1蛋白检测的临床应用
价值。方法:在前期制备的MUC1蛋白和兔抗人MUC1多克隆抗体的基础上,建立以鼠抗人MUC1
单克隆抗体为包被抗体,兔抗人MUC1多克隆抗体为检测抗体的双抗体间接夹心ELISA方法,
并通过对MUC1蛋白标准品的检测,绘制出标准曲线。临床上收集48例肺癌患者、7例肺良性
疾病患者和20例健康人的血清,应用本研究建立的ELISA方法检测各组标本血清MUC1蛋白表
达水平,绘制ROC曲线,确定最佳cut-off值,得出双抗体间接夹心ELISA方法检测肺癌的敏
感度、特异度及约登指数。同时与临床应用的CA15-3试剂盒检测结果进行比较。结果:应用双抗体间接夹心ELISA法确定血清MUC1的临界值为1.98 μg?L-1,检测
肺癌的敏感度为62.5%,特异度为100%,约登指数为0.625　0。CA15-3试剂盒检测肺癌的敏感度
为18.75%,特异度为100%,约登指数为0.187 5。结论:建立的双抗体间接夹心ELISA
试剂盒检测肺癌有更高的敏感度和特异度,优于临床常用的CA15-3试剂盒。     

帕金森病MPTP模型小鼠两种行为学检测方法的比较研究

目的在帕金森病MPTP模型小鼠对爬杆法（pole test）和转棒法（rotarod test）两种行为学检测方法进行比较研究。方法C57/BL小鼠腹腔注射1-甲基-4-苯基1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）30mg/kg,每天1次,连续5天,于第1、2、3、4、5天分别用爬杆法和转棒法进行行为学检测。结果爬杆法的调头时间和爬下时间与小鼠的适应性行为有关,且其评分标准易掺杂主观因素;而转棒法是小鼠的被动运动,潜伏期和掉落次数均为客观的观察指标。结论与爬杆法相比,转棒法是更为客观的帕金森模型小鼠的行为学检测方法。     

医学免疫学理论课教学方法的探讨

为了提高医学免疫学课堂教学实效性，使学生更好地学习、理解、掌握本学科理论知识，我们在课堂教学方法上下工夫。通过对教材整体分析解读以及采用导入法、比喻法、比较法、设问法、案例法等形式多样的教学方法施教，收到了较好的教学效果。     

两种不同血清稀释方法对抗HBc-IgM检测结果影响的探讨

目的探讨直接稀释和梯度稀释对血清进行1∶1 000稀释对抗HBc-Ig M检测的影响。方法按照美国临床实验室标准委员会EP9-A2文件的要求,以梯度稀释为参考系统,以直接稀释为对比系统,每天检测8份血清,双份重复测定,共测定5 d。对结果进行相关性分析以及对3个给定值进行预期偏倚评估。结果两种方法得到的稀释血清检测结果相关性良好,在临界值,室内质控平均值以及阳性对照的S/CO的平均值作为定值,计算预期偏差均为2.3%,在可接受范围之内,但在临界值时的预期值会1,影响结果判定。结论两种稀释方法得到的血清测定抗HBc-Ig M结果具有较好的一致性,均可用于抗HBc-Ig M的检测;同时提示实验室应结合实际设置合适的灰区。     

体表常见囊肿的手术治疗方法探讨

目的总结常见体表囊肿手术切除治疗中的临床经验。方法对256例体表皮脂腺囊肿、表皮样囊肿、皮样囊肿采用外科手术方法切除,囊肿切除后创面采用原位缝合或临近皮瓣修复,已发生感染的囊肿可待感染控制后或直接扩大手术切除。结果 256例患者切除囊肿后,伤口均一期愈合,术后恢复良好,未见囊肿复发,予以局部皮瓣转移的患者能够达到较满意的美学效果。结论对于体表常见囊肿的治疗,手术切除加局部皮瓣转移可取得满意的治疗效果,可在临床推广应用。     

多元化教学方式在临床实践教学中的应用探讨

临床实践教学是医学教育中将基础知识与临床应用相结合,培养具有实际工作能力的医学人才的重要途径,是医学生进行角色转变,步入临床实践奠定基础的重要阶段。文章通过了多元化教学手段在临床教学中的应用及其教学实践,提出采用多元化教学手段在一定程度上缓解了医疗和教学的矛盾,对提高,临床教学质量非常重要。     

较困难子宫切除术术式探讨

目的探讨较困难子宫切除手术的方式及操作要点。方法对43例诊断为子宫内膜异位症、巨大子宫肌瘤、宫颈肌瘤、阔韧带肿瘤及盆腔粘连等行子宫切除手术的病历进行分析。结果本组43例全子宫切除术,无1例出现输尿管、膀胱、直肠等脏器的损伤及术后感染等并发症。结论熟练掌握解剖关系,熟悉手术步骤,操作沉稳、手法准确是手术成功的重要保证。     

食管癌细胞株热休克蛋白70肽复合物的提纯及抗肿瘤活性观察

目的:利用抗体亲和层析法从食管癌细胞内提纯热休克蛋白70肽复合物(heat shock protein70 peptidecomplexes,HSP70-PCs),观察其诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对食管癌细胞的杀伤作用.方法:常规方法造成EC-109细胞热休克,偶联HSP70抗体的CNBr-Sepharose 4B亲和层析柱分离纯化蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳、Western blot检测获得的蛋白;混合淋巴细胞反应检测纯化过程中收集的蛋白粗提液、PBS洗脱蛋白及解吸附剂洗脱蛋白对食管癌细胞的杀伤活性.结果:细胞经热休克作用,裂解后获蛋白粗提液,经亲和层析柱过柱、洗脱后得到的蛋白经电泳鉴定为相对分子质量在70 000左右的单一条带,且经Western blot鉴定可与HSP70单克隆抗体结合,证实为HSP70;MTT法检测解吸附剂洗脱蛋白诱导的CTL对食管癌细胞的杀伤率为(38.10±2.78)%,明显高于蛋白粗提液(22.22±2.54)%和PBS洗脱蛋白(17.46±3.89)%,P均＜0.05.结论:利用抗体亲和层析法,能够简便地从热休克处理过的食管癌细胞株中分离纯化HSP70-PCs,且所获得的HSP70-PCs具有较强的激活CTL杀伤食管癌细胞的生物学活性.     

幽门螺杆菌空泡毒素活性检测方法的比较

目的　分别采用细胞计数法及中性红摄入法 (NRU)检测幽门螺杆菌 (Hp)空泡毒素活性 ,探讨NRU检测空泡毒素活性的应用价值。方法　采用Hp液体培养上清浓缩液作为粗制VacA毒素 ,经倍比稀释(1∶16 0～ 1∶2 )后与胃癌SGC 790 1细胞共同孵育 2 4h。用细胞计数法及NRU同时评价VacA的空泡毒素活性 ,比较两种方法检测VacA空泡毒素活性的差异。结果　经中性红染色后 ,胃癌细胞吸收大量染料 ,空泡更加明显。NRU对空泡毒素活性的判断结果与细胞计数法基本符合 ,细胞计数法显示 1∶2 0～ 1∶2滴度样本均呈阳性结果 ,NRU于 1∶2 0～ 1∶5滴度亦得到阳性结果 ,1∶2滴度组因细胞大量死亡得到“假阴性”结果 (A550 =0 .0 6±0 .0 4 )。 1∶4 0滴度组细胞计数法判断为阴性 ,但NRU检测阳性 (A550 =0 .12± 0 .0 4 ,P <0 .0 5 )。结论　NRU检测空泡毒素活性具有简便、快速的特点 ,有助于对空泡毒素活性的定量评价 ,敏感性高于细胞计数法 ,可广泛用于空泡毒素活性的体外检测     

NOV在嗅鞘细胞中的表达及活性检测

目的检测肾母细胞瘤过度表达基因(nephroblastoma overexpressed gene,nov)所编码产物(NOV蛋白)转染嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)后在OECs中的表达以及活性.方法本研究用nov转染原代培养大鼠OECs,用G418筛选,经过Western blot检测c-myc-NOV的表达以及通过背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)与NOV转染后OECs联合培养来对表达的nov活性进行鉴定.结果①Western-blot结果显示,转染了NOVcDNA的OECs总蛋白c-Myc抗体检测可见约28×103条带,即c-myc-NOV融合蛋白.未转染质粒的OECs总蛋白做对照,结果为阴性,无条带出现.②与nov修饰的OECs联合培养DRG有许多DRG细胞向外迁移,细胞折光性强,突起较长而纤细,并形成复杂的网络.未修饰的OECs组只有少量的细胞迁移和突起生长,细胞迁移和突起生长都很局限.空白对照组DRG仅有细胞迁移.结论nov转染OECs后,并能促进与OECs联合培养的DRG细胞的迁移生长,表明产生了具有促神经细胞生长活性的蛋白.     

三种方法检测乙肝表面抗原的结果分析

目的 探讨三种方法对乙肝表面抗原的定性和定量检测的结果并进行对比分析.方法 采用临床上常用的胶体金方法、酶联免疫吸附实验法(ELISA 法)、化学发光微粒子免疫分析法(CMIA 法)对400例标本进行乙肝表面抗原检测,分别计算ELISA 法、CMIA 法、胶体金法检测结果的阳性率、灵敏度和特异度.结果 CMIA方法检测乙肝表面抗原的阳性率、灵敏度和特异度高于ELISA法和胶体金法.结论 CMIA 法检测乙肝病毒标志物特异性强、灵敏度高,具有很高的临床应用价值.     

三聚氰胺检测方法的国内外研究进展

近年来频频发生的三聚氰胺违法添加到食品和饲料中导致的中毒事件引起了广泛关注.本文以国内外大量有代表性的论文为依据进行分析、整理和归纳,介绍三聚氰胺检测方法的国内外研究进展.