人脑胶质瘤细胞株SHG-44放射敏感性的测定方法探讨

目的 探讨MTT法、细咆计数Kit-8(CCK-8)法在进行人脑胶质瘤细胞株SHG-44细胞放射敏感性测定时能否替代集落形成试验法。方法 运用3种方法分别在0、1、2、3、4、6、8、10(3y8个不同剂量点照射后检测其存活分数，采用统计学检查分析3种方法所得存活分数的相关性。结果 在一定照射剂量内(照射剂量≤3Gy时)，MTT法、CCK-8法与克隆形成法相关性较好，而超出该剂量范围时的相关性差。经直线回归分析，3种方法均不存在高度线性相关。CCK-8和MTT法相比无更好的相关性。结论 集落形成法仍然是测定放射敏感性的“金标准”，MTT法等其他方法可以提供参考，但无法替代集落形成法。     

线粒体DNA4977bp缺失检测肿瘤细胞辐射敏感性的初步研究

目的:探讨mtDNA4977bp缺失用于肿瘤细胞辐射敏感性检测的可行性。方法:分别采用MTT法和巢式PCR法测定人肿瘤细胞株—肝癌细胞(HepG2)、食管癌细胞(EC-9706)和乳腺癌细胞(MCF-7)不同剂量γ射线照射后的存活分数(SF)和mtDNA4977bp缺失率。结果:MTT法:2Gy、4Gy和8Gy照射后,HepG2和EC-9706的SF显著低于MCF-7,表明HepG2和EC-9706细胞具有更高的辐射敏感性,HepG2细胞照射后的SF略低于EC-9706细胞,但统计学差异不显著。PCR法:1Gy和4Gy照射后3种肿瘤细胞mtDNA4977bp缺失率无显著性差异。8Gy照射后HepG2和EC-9706 mtDNA4977bp缺失进一步增加,而MCF-7的缺失率下降,显著低于HepG2与EC-9706细胞的缺失率,但HepG2和EC-9706细胞的缺失率无统计学差异,提示HepG2和EC-9706细胞的辐射敏感性高于MCF-7细胞,这与MTT法测定结果相符。结论:测定mtDNA4977bp缺失作为快速、简便的检测方法,有望用于肿瘤细胞辐射敏感性预测。     

60Co γ射线辐照对人前列腺癌PC-3细胞MMP家族基因表达的影响

目的:通过用不同剂量60Co γ射线照射人前列腺癌细胞系PC-3细胞后, 观察MMP2, MMP9的变化,阐明γ射线对前列腺癌PC-3细胞转移侵袭能力的影响. 方法:采用1, 3和5 Gy不同剂量的60Co γ射线,分别照射体外培养的人前列腺癌PC-3细胞系,用MTT方法观察细胞生长,软琼脂克隆集落形成试验观察细胞的克隆形成率;Western Blot检测其蛋白含量变化. 结果:① 1, 3和5 Gy组均可明显抑制细胞的生长;②细胞的克隆形成率随着照射剂量的增加而逐渐降低;③ Western Blot检测其蛋白含量,显示在各实验组中MMP2总体上出现降低趋势;MMP9表达在1, 3和5 Gy组均高于对照组. 结论:亚致死剂量的60Co γ射线照射前列腺癌PC-3细胞后,MMP9表达增高,提示存活肿瘤细胞的浸润性也同时增高.     

蟾毒灵对人前列腺癌PC3细胞增殖及放疗敏感性影响的研究

目的探讨蟾毒灵(Bufalin)对人前列腺癌PC3细胞增殖及放射治疗敏感性的影响。方法以不同浓度的蟾毒灵处理人前列腺癌PC3细胞,检测处理后PC3细胞的增殖情况;通过蛋白免疫印迹和克隆形成存活分数测定以评估蟾毒灵对PC3细胞放射敏感性的影响。结果蟾毒灵可显著降低PC3细胞增殖,并呈剂量依赖性;克隆形成存活分数测定和蛋白免疫印迹实验表明,蟾毒灵会增加PC3细胞对电离辐射(IR)的敏感性,蟾毒灵对PC3细胞的放疗增敏比(SER)=1.444。结论蟾毒灵会抑制PC3细胞增殖,增强前列腺癌PC3细胞株的辐射敏感性。     

不同照射模式对人鼻咽低分化鳞癌细胞株CNE-2放射敏感性的影响研究

目的:探索不同照射模式对人鼻咽低分化鳞癌细胞株(CNE-2)放射敏感性的影响。方法:运用克隆形成实验(courtenay assay),检测不同照射模式下CNE-2细胞的存活分数(SF),拟合细胞存活曲线。并运用四氮唑蓝法(MTT)进一步验证克隆形成实验的结果。结果:分别给予CNE-2细胞0、1、2、4、6、8 Gy的照射后,CNE-2细胞的SF值随照射剂量增加逐渐下降,并且在相同的剂量点,模拟调强照射(IMRT)组的SF均高于常规照射组;根据线性二次方程拟合CNE-2细胞存活曲线,α常规>αIMRT,β常规>βIMRT,N常规相似文献   

三种方法检测鼻咽癌细胞株SF2的结果分析

目的：比较三种不同方法检测鼻咽癌细胞株2Gy照射后细胞的存活分数(survival fraction at two grey,SF2)的优劣和结果的相关性。方法：选用4种鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2、SUNE、SUNE1,分别用平板克隆形成试验、MTT比色法和微量细胞克隆形成法测定其SF2的值。结果：三种方法测得的SF2值之间有明显的相关性,相关系数分别为0．993、0．994和0．973(P＜0．01)。结论：MTT比色法和微量细胞克隆形成法可以代替传统的克隆形成试验来测定细胞株的SF2,且具有微量、快速、简便、经济等优点。     

RNAi沉默clusterin基因对卵巢癌SKOV3细胞放射敏感性的影响

目的:研究clusterin(CLU)基因沉默对卵巢癌SKOV3细胞放射敏感性的影响.方法:靶向CLU基因的siRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,Western blot法测定CLU基因蛋白表达水平.给予不同放射剂量(2、4、6Gy)处理后,通过MTT法及克隆形成实验检测卵巢癌SKOV3细胞的存活率及克隆形成率,流式细胞...     

电离辐射致线粒体DNA 4977bp缺失与肿瘤细胞放射敏感性关系的初步研究

目的探讨肿瘤细胞经X线照射后线粒体DNA 4 977bp缺失率与存活分数的潜在关系。方法选用人宫颈癌细胞系(Hela细胞)、人肝癌细胞系(HepG2细胞)、人食管癌细胞系(EC-9706细胞)和人前列腺癌细胞系(PC-3细胞)4种肿瘤细胞系,经0Gy到8Gy X线照射后,采用克隆形成法测得存活分数,巢式PCR法检测线粒体DNA 4 977bp缺失率。结果肿瘤细胞放射敏感性由高到低依次是Hela细胞、HepG2细胞、EC-9706细胞和PC-3细胞。Hela细胞经1Gy X线照射后,HepG2细胞、EC-9706细胞和PC-3细胞经2Gy X线照射后均检测到线粒体DNA 4 977bp缺失。1Gy X线照射后,4种细胞线粒体DNA 4977bp缺失率比较,差异无统计学意义(P>0.05);2Gy X线照射后,Hela细胞线粒体DNA 4 977bp缺失率高于其余3种细胞(P<0.01);4Gy和8Gy X线照射后,Hela细胞线粒体DNA 4 977bp缺失率高于其余3种细胞(P<0.05),HepG2细胞和EC-9706细胞线粒体DNA 4 977bp缺失率高于PC-3细胞(P<0.01)。Hela细胞、HepG2细胞和EC-9706细胞的存活分数和缺失率之间呈负相关(r=―0.951,P<0.05;r=―0.976,P<0.01;r=―0.986,P<0.01)。结论线粒体DNA 4 977bp缺失可能是一个反映肿瘤细胞放射敏感性的生物标记。     

c-erbB2反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响

目的 :探讨癌基因c -erbB2的反义寡苷酸对人卵巢癌细胞放射敏感性的影响。方法 :设立c -erbB2正义寡核苷酸组和非处理组作对照 ,用RT -PCR检测卵巢癌细胞处理前后c -erbB2表达水平的变化。用MTT法及平板克隆形成试验检测人卵巢癌细胞株SKOV3在脂质体c-erbB2反义寡核苷酸作用前后受60 Coγ射线不同剂量照射后的细胞存活分数和集落形成率。结果 :c -erbB2反义寡核苷酸能抑制c-erbB2癌基因的表达 ,经脂质体介导的c-erbB2反义寡核苷酸作用的卵巢癌细胞经γ射线照射后其存活分数和集落形成率较转染正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下降 (P <0 .0 1) ,而转染c -erbB2正义寡核苷酸组的存活分数和集落形成率与单纯照射组相比无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :c -erbB2反义寡核苷酸通过抑制c -erbB2的表达降低人卵巢癌细胞株SKOV3放射抗拒性。该作用可能与c-erbB2反义寡核苷酸抑制了引起细胞辐射抗拒的细胞信号转导途径有关。     

^12C^6＋离子辐射对细胞存活增殖及模拟失重和辐射对家蚕卵发育的影响

目的:观察重离子辐射后人骨肉瘤细胞MG-63、人胚胎皮肤成纤维细胞ESF-1和人胚胎肝正常细胞HEL-1的生存和增殖情况,及重离子辐射和模拟失重环境处理后家蚕卵的孵化和发育情况,初步探讨重离子辐射对细胞及复合环境对家蚕卵的一些生物学效应.方法:利用超导磁体模拟失重环境,利用重离子加速器产生12C6 离子,用不同剂量辐射细胞和家蚕卵,检测在重离子辐射后细胞的存活和克隆形成能力及复合条件下家蚕卵的发育情况.结果:HEL-1细胞在0.1Gy时存活率已经开始降低,且随辐射剂量的增大这种影响也增加,到1.5 Gy时存活率降低50%.ESF-1细胞在1.5 Gy时存活率下降约20%,但辐射对骨肉瘤MG-63细胞的存活率影响不大.HEL-1和ESF-1细胞受到0.1 Gy的辐射后克隆形成能力就明显降低90.2%和79.1%,而MG-63细胞一直保持较高的克隆形成率,直到1.5 Gy时迅速降低75%.家蚕的出蚁率随辐射剂量的增大而降低,到30 Gy时出蚁率降到2.22%.当辐射剂量为0～10 Gy时,家蚕卵在两种不同重力条件下的孵化率没有明显差异.但当辐射剂量增加到15,20和30 Gy时,失重环境明显促进了家蚕卵的孵化.另外,失重环境下家蚕卵的孵化时间比正常条件下缩短约3 d左右.同时,高剂量的辐射处理会延迟家蚕幼虫的生长.结论:重离子辐射降低了细胞的存活和增殖能力,同时影响了家蚕从受精卵到幼虫的发育,降低了出蚁率.失重环境可以缩短家蚕卵的孵化时间.