莪芪抗瘤方剂诱导白血病HL-60细胞凋亡的血清药理学研究

目的研究中药复方莪芪抗瘤方剂在体外对白血病HL-60细胞凋亡的作用,并探讨凋亡发生与细胞内Ca2 、Caspase-3、Bcl-2的关系。方法通过血清药理学方法,选择10%浓度的含药血清与白血病HL-60细胞共同培育24、48、72、96h后,应用荧光显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测凋亡峰(亚二倍体峰),用Fura-2荧光负载方法测定细胞内Ca2 浓度的变化。比色法检测凋亡相关基因Caspase-3活性变化。亲和免疫组化LSAB法检测HL-60细胞Bcl-2基因表达。结果10%浓度的含药血清处理组细胞体积缩小,细胞核固缩,膜起泡,核断裂及形成凋亡小体等,以72h最为明显;可见DNA含量低于G1期的凋亡细胞群,这群细胞的凋亡百分率随时间的递增而增加。10%浓度的含药血清处理组的细胞内Ca2 浓度也明显高于对照组(P<0.01),Caspase-3浓度明显高于对照组(P<0.01),Bcl-2基因表达明显低于对照组(P<0.05)。结论莪芪抗瘤方剂含药血清诱导白血病HL-60细胞发生凋亡,这种变化可能与细胞内Ca2 、Caspase-3水平上调及Bcl-2表达下调有关。     

莪芪抗瘤方剂对白血病HL-60细胞凋亡的作用及机理研究

目的：研究中药复方莪芪抗瘤方剂在体外对白血病HL-60细胞凋亡影响，并探讨凋亡发生的可能机制。方法：通过血清药理学方法，选择10％浓度的含药血清与白血病HL-60细胞共同培育24、48、72、96h后，应用荧光显微镜观察细胞形态，流式细胞仪检测凋亡峰（亚二倍体峰），用Fura-2荧光负载方法测定细胞内Ca^2＋浓度的变化；比色法检测凋亡相关基因Caspase-3活性变化。结果：10％浓度的含药血清处理组细胞体积缩小，细胞核固缩，膜起泡，核断裂及形成凋亡小体等，以72h最为明显；可见DNA含量低于G1期的凋亡细胞群，这群细胞的凋亡百分率随时间的递增而增加。10％浓度的含药血清处理组的细胞内Ca^2＋浓度也明显高于对照组（P〈0．01），Caspase-3基因活性明显高于对照组相（P〈0．01．P〈0．05）。结论：莪芪抗瘤方剂含药血清诱导白血病HL-60细胞发生凋亡，这种变化可能与细胞内Ca^2＋水平上调，Caspase-3活性增强有关。     

莪芪抗瘤方剂(含药血清)对白血病细胞凋亡相关基因Caspase-3活性的影响

大量的研究表明,细胞内凋亡相关基因Caspase-3活性变化对凋亡的诱导起重要作用[1]。我们在以往的研究发现,中药复方莪芪抗瘤方剂(含药血清)有抑制白血病HL-60细胞增殖和诱导其凋亡的作用[2],这种作用机理何在?本实验在观察莪芪抗瘤方剂(含药血清)诱导白皿病HL-60细胞凋亡作用的     

莪芪抗瘤方剂对白血病HL-60细胞的凋亡作用及对细胞内Ca2+水平的影响

目的:研究中药复方莪芪抗瘤方剂在体外对白血病HL-60细胞凋亡作用,并探讨凋亡发生与细胞内Ca2 浓度变化的关系。方法:通过血清药理学方法,选择10%浓度的含药血清与白血病HL-60细胞共同培育24,48,72,96 h后,应用荧光显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测凋亡峰(亚二倍体峰),用Fura-2/AM荧光负载方法测定细胞内Ca2 浓度的变化。结果:10%浓度的含药血清处理组,细胞体积缩小,细胞核固缩,膜起泡,核断裂及形成凋亡小体等,以72 h最为明显;可见DNA含量低于G1期的凋亡细胞群,其凋亡百分率随时间的递增而增加;10%浓度的含药血清处理组的细胞内Ca2 浓度也明显高于对照组(P<0.01)。结论:莪芪抗瘤方剂含药血清诱导白血病HL-60细胞发生凋亡的作用可能与细胞内Ca2 水平上调有关。     

515抗瘤方剂诱导白血病HL60细胞凋亡的研究

目的：观察中药５１５抗瘤方剂对白血病ＨＬ－６０细胞的影响。方法：采用光镜、透射电镜观察形态及结构，流式细胞术测量凋亡率，原位末端标记检测ＤＮＡ断裂。结果：细胞与药物共同孵育一定时间后出现固缩、核 碎裂等典型的凋亡形态学变化，药物浓度在０．０１３～０．０４g/ml之间，药物组与对照组凋亡率有显著性差异（Ｐ〈０．０１）。结论：５１５抗瘤方剂能诱导ＨＬ－６０细胞发生凋亡，细胞凋亡率随时间延长增加，且呈现剂量     

六神丸含药血清诱导HL-60细胞凋亡实验研究

目的:观察六神丸含药血清诱导白血病细胞凋亡,探讨六神丸治疗急性白血病的部分机制。方法:制备含药血清,用MTT法、胎盘蓝染色法观察六神丸对HL-60细胞的增殖抑制作用。用吉姆萨染色法观察细胞凋亡的形态学变化,流式细胞仪、原位末端标记法(TUNEL)定量检测细胞凋亡程度。结果:六神丸含药血清对白血病细胞有明显的抑制,且随药物血清浓度和培养时间的延长而增加,吉姆萨染色、流式细胞仪检测、原位末端标记检测均证明六神丸含药血清能诱导HL-60白血病细胞凋亡。结论:六神丸含药血清能诱导细胞凋亡,这可能是六神丸治疗白血病的机制之一。     

扶正消症方（含药血清）诱导SGC-7901细胞凋亡的实验研究

探讨中药复方扶正消症方(含药血清)在体外对胃癌SGC-790l细胞凋亡影响。方法：通过血清药理学方法，选择不同浓度的含药血清与胃癌细胞共同培育12、24、36、48h后，应用荧光显位镜观察细胞形态，流式细胞仪检测凋亡峰(亚二倍体峰)。结果：扶正消症方含药血清可诱导胃癌细胞SGC-790l凋亡，这种作用呈时间，剂量依赖性，随含药血清浓度的增加细胞凋亡率增高。结论：中药复方扶正消症方通过血清药理学方法可诱导胃癌细胞SGC-790l发生凋亡，这将为胃癌治疗提供有用的实验室依据。     

华蟾素诱导白血病细胞株HL-60凋亡的实验研究

华蟾素 (Cinobufacini)是中华大蟾蜍皮水溶性成分制成的注射液。经实验研究及临床实验表明有一定的抗肿瘤作用 ,且毒副作用小 ,使用安全可靠 [1 ,2 ]。目前已试用于某些消化系统肿瘤如肝癌、胃癌等的治疗。华蟾素是以蟾皮为主要原料制成的一种水溶性制剂 ,临床和实验研究都表明其具有一定的抗肿瘤作用。但尚未有文献报道其有诱导白血病细胞株 HL-6 0凋亡的作用。笔者观察了华蟾素对白血病细胞增殖和凋亡的影响 ,并对其机制作了初步的探讨 ,为应用华蟾素治疗白血病提供一定的实验依据。1　材料和方法1.1　主要试剂及药品 :小牛血清 :杭州四…     

含益髓灵兔血清诱导HL-60细胞凋亡与对Bcl-2抑制研究

目的：探讨中药复方益髓灵治疗白血病作用机理：方法：在已知益髓灵具有诱导HL-60细胞凋亡的基础上,通过血清药理学方法,选择含不同浓度益髓灵初提物的兔药血清,与人急性早幼粒白血病HL-60细胞共同孵育不同时间后,观察兔药血清对HL-60细胞凋亡的影响,并对其发生凋亡机制进行初步探讨。结果：益髓灵兔药血清有较强的诱导HL-60细胞凋亡作用,以10％兔药血清作用48h效果最好,并发现其诱导凋亡机制与抑制Bcl-2基因表达相关。结论：益髓灵进入动物体内也有诱导白血病细胞凋亡作用,其诱导白血病细胞凋亡是治疗白血病的关键机制之一。     

紫草素诱导白血病HL-60细胞凋亡及其机制研究

目的：研究紫草素在体外对人早幼粒白血病细胞株HL-60增殖的抑制和诱导凋亡作用。方法：MTT比色法检测紫草素对HL-60细胞增殖的抑制作用;AnnexinV／PI双标记流式细胞术检测紫草素对HL-60细胞凋亡率。结果：MTT测定显示紫草素能够对HL-60细胞起到明显的增殖抑制作用,且呈现剂量一效应依赖关系。AnnexinV／PI显示紫草素能够诱导HL-60细胞凋亡,凋亡率呈剂量依赖性。结论：紫草素能抑制人白血病HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡。     

三七总皂甙注射液体外诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的观察三七总皂甙诱导人白血病细胞株HL-60细胞凋亡作用及机制。方法在体外细胞培养的基础上用200～1600μg/ml三七总皂甙处理HL-60细胞,光镜下观察细胞形态；用MTT法测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测凋亡峰,免疫组化法检测p53和bcl-2凋亡相关基因的表达,采用真彩色图像分析仪定量分析。结果200～1600μg/ml三七总皂甙可抑制HL-60细胞生长,抑制率有剂量依赖性。细胞凋亡峰随药物浓度增大而增加。三七总皂甙800、1600μg/ml可使p53表达上调,bcl-2表达明显下降,表达改变有浓度依赖性。结论三七总皂甙在体外可抑制HL-60细胞生长,诱导其凋亡,其诱导凋亡的作用与凋亡相关基因p53表达上调、而抗凋亡基因bcl-2表达下调有关。     

蟾酥胶囊含药血清诱导人肝癌细胞凋亡的实验研究

目的:观察蟾酥胶囊含药血清对人肝癌BEL-7402细胞凋亡的诱导作用。方法:采用中药血清药理学方法,选择不同浓度含药血清作为实验组,分别与人肝癌BEL-7402细胞共同孵育24 h、48 h,显微镜下观察细胞形态学变化;锥虫蓝染色检测细胞蓝染率;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期变化及APO 2.7蛋白的阳性表达率;均与10%无药血清组做对照。结果:实验组部分细胞变小、变圆,贴壁能力明显下降,呈漂浮状态,集落性明显降低,呈单个生长状态;锥虫蓝染色显示,细胞蓝染率无明显变化;流式细胞仪检测,可见明显的凋亡峰,细胞周期中G1、S期下降,G2/M期升高,APO 2.7蛋白表达的阳性峰明显增高,细胞凋亡率与作用时间、含药血清浓度呈一定的时效和量效关系。结论:蟾酥胶囊可以诱导人肝癌细胞BEL-7402凋亡。     

右旋柠烯诱导人白血病HL-60细胞凋亡及其机制的研究

目的:探讨右旋柠烯诱导人髓性白血病HL60细胞凋亡的作用及其相关机理。方法:采用碘化丙啶染色法、流式细胞仪技术、荧光染色以及免疫细胞化学技术,观察右旋柠烯对白血病细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。结果:不同浓度的右旋柠烯(0.5、0.6、0.7、0.8、0.9mmol/L)均对白血病细胞增殖有抑制作用,呈时间及剂量依赖关系。右旋柠烯可诱导白血病细胞凋亡,浓度在0.5、0.75、1.0mmol/L时的凋亡率(%)分别为7.31±1.17,30.07±2.17,25.06±1.78。荧光染色可见细胞凋亡的形态学改变,随右旋柠烯浓度的增高,细胞内Bcl2蛋白的表达逐渐减少,细胞内的突变型P53及bcl2基因蛋白表达没有变化。结论:右旋柠烯可以抑制HL60细胞增殖并可以诱导其凋亡,其作用机理与下调细胞内的Bcl2蛋白的表达有关。     

三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的：探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）治疗白血病的疗效机理。该当以ＨＬ－６０细胞株为体外模型，终浓度为０．２０μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３作用２４、４８ｈ后，用ＰＩ／ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ双标记，流式细胞术观察Ａｓ２Ｏ３对ＨＬ－６０细胞凋亡及其对细胞株端粒酶活性的影响。结果：Ａｓ２Ｏ３作用于ＨＬ－６０细胞后ＰＩ阴性／ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ细胞性细胞增多，提示细胞发生凋亡，ＤＮＡ周期分析显示主要作用在     

鸦胆子油乳诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的 :研究鸦胆子油乳诱导HL-60细胞凋亡的作用。方法 :鸦胆子油乳 1∶100 ,1∶40 ,1∶20(V/V)分别处理HL-60细胞 6h ,琼脂糖凝胶电泳法 ,流式细胞仪法 ,荧光显微镜法 ,电镜分别观察药物诱导HL 60细胞凋亡的作用。结果 :鸦胆子油乳 1∶40组产生明显DNA梯状条带 ;流式细胞仪检测药物浓度为 1∶40 ,1∶20组的凋亡细胞百分率分别为 86.8%和97% ;鸦胆子油乳 1∶40组在荧光显微镜呈现明显凋亡细胞特征 ;药物浓度为 1∶40 ,1∶20组的细胞经电镜观察呈现明显凋亡细胞特征。结论 :鸦胆子油乳 1∶20和 1∶40组有明显的诱导HL-60细胞凋亡的作用。     

熊果酸诱导HL-60细胞凋亡机制的探讨

目的：本实验拟用熊果酸干预处理人急性早幼粒白血病HL-60细胞,体外培养实验,证实其对HL-60细胞的增殖抑制和促进诱导凋亡作用,并通过免疫细胞化学方法检测bcl-2,survivin在熊果酸与该细胞株作用后表达,探讨熊果酸诱导HL-60细胞调亡可能的分子机制。方法：荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞周期相分布及细胞凋亡率：琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA;免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Survivin蛋白。结果：荧光显微镜下观察,80gmol／LUA作用24h的HL一60细胞可看到典型的细胞凋亡形态学变化;40umol／L、80umol／LuA可使G0／G1期细胞增多,出现G0／G1期阻滞,S期和G2／M期细胞数减少,凋亡细胞峰（sub-G1）及凋亡率逐渐增高,Bcl-2、Survivin蛋白表达降低,当UA浓度为40gmol／L时,P〈0．01,有显著性差异。结论：UA呈浓度和时间依赖性抑制HL．60细胞增殖,诱导其凋亡机制可能与下调Bcl-2、Survivin蛋白表达有关。     

六神丸诱导白血病细胞株HL-60细胞凋亡的实验研究

目的从诱导细胞凋亡角度探讨六神丸治疗白血病的机理.方法选择HL-60细胞为实验对象,以六神丸及其主要成分之一的蟾酥进行该实验.以台盼蓝染色作为细胞的活力指标,采用显微镜和流氏细胞仪检测方法来观察细胞凋亡.结果显示六神丸、蟾酥在较高的浓度时表现为细胞毒作用,在较低浓度时则有诱导细胞凋亡作用.其效果与药物浓度及作用时间密切相关.结论这可能是六神丸治疗白血病的机制之一.     

六神丸诱导白血病细胞株HL—60细胞凋亡的实验研究

目的：从诱导细胞凋亡角度探讨六神丸治疗白血病的机理。方法：选择HL－60细胞为实验对象，以六神丸及其主要成分之一的蟾酥进行该实验。以台盼蓝染色作为细胞的活力指标，采用显微镜和流氏细胞仪检测方法来观察细胞凋亡。结果：显示六神丸、蟾酥在较高的浓度时表现为细胞毒作用，在较低浓度时则有诱导细胞凋亡作用。其效果与药物 度及作用时间密切相关。结论：这可能是六神丸治疗白血病的机制之一。     

六神丸诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的:观察六神丸诱导HL-60白血病细胞凋亡的作用.方法:应用TUNEL法和Annexin V/PI双染法检测不同浓度和不同时间段六神丸诱导HL-60细胞的凋亡率.结果:TUNEL法表明凋亡率与剂量呈正相关性,100μg/mL六神丸凋亡率最高;Annexin V/PI双染法表明50μg/mL六神丸作用32h凋亡率最高.结论:六神丸可诱导白血病细胞凋亡.     

益髓灵诱导HL-60及脐带血单个核细胞凋亡比较研究

为了探讨益髓灵治疗恶性血液病作用机理,本实验重点进行了益髓灵初提物和含益髓灵初提物的兔药血清诱导HL-60细胞凋亡效应的研究,并与其诱导脐带血单个核细胞凋亡作用进行了比较。结果显示,益髓灵初提物和含益髓灵初提物的兔药血清均有较强诱导HL-60细胞凋亡作用,而对脐带血单个核细胞的凋亡诱导作用较弱,同浓度、同时间两种细胞凋亡作用比较,有显著性差异。结论:益髓灵具有选择性诱导白血病细胞凋亡作用,其诱导白血病细胞凋亡是治疗恶性血液病的关键机制之一。