PCR技术及其在卫生检验中的应用

PCR技术即聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)是在体外酶促扩增特定DNA或RNA片段的技术。具有特异、快速、敏感、操作简便等优点 ,已广泛用于生命科学的各个领域 ,被誉为近半世纪以来生命科学中最伟大的发明。发明者在报道该技术 5年后 ,于 1993年因此荣获诺贝尔化学奖。本文将根据多年工作经验和卫生检验的需要 ,简要介绍PCR技术的基本原理及常用种类、基本操作及条件优化 ,及其在卫生检验中的应用举例 ,以促使该技术在我国卫生检验领域的广泛应用。1　PCR技术基本原理及常用种类1.1　PCR技术的基本原理及体系组成　PC…     

鼠疫检验技术的概况和PCR在鼠疫检验中的应用

鼠疫是一种自然疫源性烈性传染病 ,其特点是发病急、传播快、病死率高 ,主要通过跳蚤叮咬从染疫宿主动物传播到人 ,还可通过空气飞沫在人与人之间传播。目前鼠疫菌的检验方法主要是按《中华人民共和国传染病法》的四步检验法 ,此法只能从染疫的动物或鼠疫患者分离出鼠疫菌为准 ,且需要的时间较长 .而对于感染早期和恢复期病人以及与鼠疫患者密切接触者则难以做出诊断 ,因此很有必要研究一种快速、准确的检验方法。随着分子生物学的发展 ,PCR的技术逐渐在鼠疫诊断、监测中得到推广和应用。1　我国鼠疫自然疫源地及长期存在的机理　　纪树立…     

荧光定量PCR技术在乙型肝炎诊断与治疗上的应用价值

目的 评价荧光定量PCR(FQ-PCR)技术在乙型肝炎(乙肝)的诊断与治疗上的应用价值.方法 采用FQ-RCR和ELISA法,检测258份血清及100例乙肝免疫指标全阴性的对照血清的HBV DNA拷贝数和免疫学指标.结果 123份HBsAg、HBeAg和抗-HBc均阳性的样本中FQ-PCR检测HBV DNA阳性120份,阳性率为97．6％.在108份HBsAg、抗-HBe和抗-HBc均阳性的样本中,FQ-PCR阳性43份,阳性率为39．8％,高于普通PCR 19．8％的阳性率.在100例阴性对照血清中,FQ-PCR全部阴性.结论 FQ-PCR在乙肝诊断、治疗方案选择和疗效观察方面具有广泛的应用前景.     

免疫球蛋白在乙型肝炎患者中的检验分析

目的探讨免疫球蛋白检验乙型肝炎患者的临床价值。方法 80例来该院诊治的患者,分析其入院资料,随机分成两组。健康者是对照组,乙型肝炎患者是实验组,细致检查患者,有些患者不能确诊,要做辅助检查,如：心肺功能、体温等,采用免疫比浊法测定两组的免疫球蛋白M、A、G水平,并进行分析比较。结果实验组Ig G水平为（13.95±3.38）g/L、Ig A水平为（2.95±1.44）g/L、Ig M水平为（2.88±0.78）g/L高于对照组（Ig G水平为（11.27±2.05）g/L、Ig A水平为（1.84±0.72）g/L、Ig M水平为（1.54±0.58）g/L（P〈0.05）;23例治疗后好转,Ig G水平为（14.92±2.65）g/L、Ig A水平为（2.62±0.54）g/L、Ig M水平为（2.37±0.73）g/L和恶化者相比优势显著（P〈0.05）。结论免疫球蛋白在乙型肝炎患者中检测效果较好,能够准确的反应患者病情,指导患者预后,值得推广使用。     

分析血清肌红蛋白检验在急性心肌梗塞临床检验中的应用价值

目的:分析血清肌红蛋白检验在急性心肌梗塞临床检验中的应用价值.方法:样本选取时间:2018年11月-2019年8月;样本构成:我院收治的急性心肌梗塞患者23例为研究组,同期选择健康体检人员23例为对照组,比较血清肌红蛋白检验的应用价值.结果:研究组cTnI水平、Myo水平、hs-CRP水平均高于对照组(P＜0.05)....     

PCR检验在肺结核早期诊断中的应用效果

目的 针对肺结核的早期诊断,采取PCR检验,分析该种检验方式的诊断效果.方法 选取2019年1月-2020年12月本院35例肺结核患者与35例其他肺病但非肺结核患者,均接受PCR检验、结核分枝杆菌培养试验、抗酸杆菌染色试验、RNA恒温扩增实时检验.每一项检验分别采取痰液标本和肺泡灌注液标本.将临床诊断结果作为金标准,对...     

微生物检验在尿路感染控制中的应用价值分析

目的:探析微生物检验在尿路感染控制中的应用价值.方法:本研究对象为2014年8月至2016年5月本院确诊的128例尿路感染患者,对所有患者中段尿进行细菌培养,将分离出的128株大肠埃希氏菌按随机数表法分为2组.对照组64株,未实施任何干预;试验组64株,实施微生物检验.观察并对比两组感染控制情况.结果:试验组细菌轻度感染率(65.63%)较对照组(28.13%)升高,中、重度感染率(29.69%、4.69%)较对照组(50.00%、21.88%)降低,差异显著(P<0.05).结论:将微生物检验实施于尿路感染控制中有利于减轻患者感染程度,提高病原菌监测及预测效果,降低医院感染率.     

PCR技术在快速检测沙门氏菌中的应用分析

目的分析PCR技术在快速检测沙门氏菌中的应用,发掘PCR技术的价值和作用。方法采用Taqman探针实时荧光定量PCR技术,针对沙门氏菌吸附和侵袭上皮细胞表面蛋白invA基因设计引物和Taqman探针,快速检测沙门氏菌。结果检测沙门氏菌时,PCR技术与传统的检测技术相比,不仅快速,而且准确,具有较高的实用的价值。结论采用PCR技术,有利于实现快速检测沙门氏菌。     

NLR在预测慢性乙型肝炎肝衰竭中的应用价值分析

目的 探讨中性粒细胞淋巴细胞比值（NLR）预测慢性乙型肝炎患者肝衰竭的价值。方法 86例慢性乙肝患者根据病情严重程度分为单纯乙肝组与乙肝肝衰竭组,选取健康者40例作为对照组,比较三组的NLR、肝功能指标,分析NLR、肝功能指标预测慢性乙肝患者肝衰竭的价值。结果 乙肝肝衰竭组的NLR、 ALT、 AST水平最高,单纯乙肝组次之,对照组最低（均P <0.05）。NLR预测慢性乙肝患者肝衰竭的AUC为0.931。结论 NLR在预测慢性乙肝患者肝衰竭中有较高的应用价值。     

实时PCR检验在高危型人乳头瘤病毒中的诊断价值分析

目的研究高危型人乳头瘤病毒采用实时PCR检验诊断的临床价值。方法临床纳入218例我院妇产科2013年6月至2014年6月期间收治的高危型人乳头瘤病毒患者,取样后分别给予实时PCR和第二代杂交式捕获法(HCⅡ)检验,同时结合患者的病理资料,对比分析两种检验方法的准确性和特异性。结果 76例患者有不同程度的宫颈上皮内瘤病变(CIN),73例患者有鳞状上皮病变和慢性宫颈炎。实时荧光PCR检验鳞状上皮病变和慢性宫颈炎的阳性检出率为58.9%,显著优于HCⅡ检验的35.6%,实时荧光PCR检验的HPV阳性检出率为71.6%,明显优于HCⅡ的阳性检出率62.4%(P<0.05);而二者对CINHPV各期的阳性检出率比较无统计学差异,P>0.05。结论实时PCR检验高危型人乳头瘤病毒具有较好的特异性和灵敏性,临床诊断价值明显,值得应用和推广。     

血脂检验在糖尿病检验中的临床应用价值

目的:探讨血脂水平检验在糖尿病(DM)检验中血脂水平检验的临床价值.方法:研究纳入DM患者68例,自动划分至研究组,病例收集时间在2018年1月至2020年1月;,另纳入同时间段、同等数量的健康体检人员划分至对照组,检测两组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、载脂...     

血细胞形态学检验在临床检验中的价值分析

目的:讨论血细胞形态学检验在临床检验中的价值。方法:本次研究选取样本数量为56例,样本选取时间为2017年2月-2018年5月,实验组是由于贫血、发热及血常规检验显示危急值的患者,对照组则为同期健康体检者,每组样本数均为28例。对其红细胞分布宽度的变异系数、平均红细胞体积及红细胞压积等进行对比和分析。结果:实验组28例患者红细胞分布宽度的变异系数、平均红细胞体积及红细胞压积等值均较低,而对照组却较高,且实验组患者的阳性率远远高于对照组,组间数据经统计学处理后发现(P0.05),存在统计学意义。结论:将血细胞形态学诊断使用在患者的临床诊断中,不但能使患者的病症分型得到精确,而且对于其余疾病的治疗具备较高的临床意义,值得被应用和推广。     

PCR技术在放射生物学中的应用

1 PCR仪的主要特点 PCR技术具有高效、灵敏,特异性强,应用范围广等特点.DNA序列的快速扩增使在DNA水平上进行大量的种群研究成为可能.单链扩增对几十或几百个个体进行快速测序而不经过以前所需的繁琐的克隆步骤.一旦得到了一组具代表性的庄到数据,可用更方便且简单的分析方法.来获得等位基因的序刿数据.对分析来说,传统分子技术所需的组织样品用量相对较多,尤其是许多无脊椎动物,它们对于进行分子检测所用的一般操作方法来讲太小.因此,对于小生物、共生生物或那些在培养基中不易生长的生物个体的直接分析是困难的.     

PCR技术在致病菌检测中的应用

[目的]聚合酶链反应(PCR)技术以其具有的特异性强；灵敏度高，快速准确，自动化高的特点，被广泛的应用于医学、生命科学、农业科学、环境科学、考古学等领域。PCR技术的发展为食品病原微生物的鉴定提供了新的途径；对传染性病原菌的诊断提供了快速、灵敏的检测手段。为此，对国内应用PCR技术检测致病菌的研究成果作一综述，供同行借鉴。     

新型溶血素在血常规检验中的应用价值分析

目的:探究新型溶血素在血常规检验中的应用价值.方法:选取2020年3月至2020年7月行健康体检者105例,按照随机数字表法分为新型组与传统组,两组均采集血液标本,新型组采用新型溶血素进行血常规检验,传统组采用传统溶血素进行血常规检验,对比两组血常规指标检测结果、血细胞形态指标、检测所用时间及检测成本.结果:两组血常规...     

生化检验项目在肝硬化疾病诊断中的应用价值分析

目的：探讨生化检验项目在肝硬化疾病诊断中的应用价值。方法：纳入2020年1月至2022年1月50例肝硬化患者将其作为观察组,同期从体检中心健康体检者中随机抽取50例研究对象作为对照组,所有入组研究对象均进行生化检测,对检验结果进行综合对比、分析。结果：观察组肝硬化患者肝功能指标总胆红素、丙氨酸转氨酶、直接胆红素、天冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、r-谷氨酰转肽酶、生化检验指标数值均高于对照组健康体检者（P<0.05）;但是胆碱酯酶生化检验指标数值均低于对照组健康体检者（P<0.05）;观察组肝硬化患者纤维化指标Ⅳ型胶原、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原、血清透明质酸生化检验指标数值均高于对照组健康体检者（P<0.05）;观察组肝硬化患者蛋白指标总蛋白、白蛋白、生化检验指标数值均低于对照组健康体检者（P<0.05）。结论：生化检验项目在肝硬化疾病的诊断中,可准确反应患者的肝功能损伤程度,应用价值显著。     

血脂检验在糖尿病检验中的临床应用价值观察

目的 探究血脂检验在糖尿病检验中的临床应用价值.方法 抽调我院在2018年3月至2019年3月期间收治的糖尿病患者作为(50例)观察组,择取同期在我院进行健康体检者(50例)作为对照组,均进行血脂检验,分析两组总胆固醇水平、甘油三脂及高密度脂蛋白、低密度脂蛋白,并统计两组血脂异常总发生率.结果 观察组总胆固醇水平、甘油...     

旋转式荧光定量PCR在临床应用中的价值

目的：探讨旋转式荧光定量PCR仪在检测临床标本中的应用价值。方法：通过旋转荧光定量-PCR技术鉴定1132株临床分离株,进行结核分枝杆菌的菌种鉴定和定量分析,同时进行抗酸染色和培养法。结果：总阳性检出率为48.64%,其中菌阳检出率为96.56%（253/262）,阴性符合率为77.85%（369/474）,菌种鉴定特异性实验符合率为100%。结论：旋转氏荧光定量PCR仪改进后更加快速、敏感,与其配套使用的试剂特异性强,是在检测结核分枝杆菌复合群的同时,又能进行非结核分枝杆菌鉴定辅助诊断的好方法。     

原位杂交技术在乙型肝炎研究中的应用

原位杂交技术是目前最为有效的分子生物学方法之一。现已广泛应用于病毒性疾病的诊断和研究,其对阐明肝内病毒的传播和分布,病毒的复制机理,致癌和致病机理,以及嗜肝性与泛嗜性相互关系的研究起了十分重要的作用。本文就这一技术在病毒性乙型肝炎研究中的应用作一综述。     

巢式PCR、原位杂交、免疫组化技术在结核病诊断中的应用价值

目的 探讨巢式PCR(nPCR)、原位杂交、免疫组化技术在结核病诊断中的应用价值.方法 收集病理诊断为结核的石蜡包埋组织45例,可疑结核组织60例,非结核组织30例;通过nPCR、原位杂交、免疫组化及抗酸染色法分别检测结核分枝杆菌特有的重复序列IS6110的片段、BCG抗原和抗酸杆菌.结果 nPCR、免疫组化、原位杂交方法在结核组的阳性率分别为91.1%、88.9%、60.0%.在可疑结核组的阳性率分别为56.7%、53.3%、36.7%;在非结核组的阳性率分别为0、13.3%、0;各组检出率明显高于萋-尼抗酸染色法(P<0.05);nPCR与免疫组化法检测结果在各组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 nPCR、原位杂交及免疫组化技术在结核病诊断中敏感性明显高于抗酸染色,其中nPCR阳性率最高、其余依次为免疫组化、原位杂交,这3种方法均可用于结核病与非结核病时的辅助鉴别诊断方法,尤其是对那些常规HE染色和抗酸染色无法确诊的病例更具有意义.