别嘌呤醇对缺血再灌注心肌P38MAPK活化和凋亡的影响

目的:探讨别嘌呤醇对心肌再灌注时P38MAPK活化和细胞凋亡的影响及其机制。方法:36只大耳白兔分为三组:缺血再灌注组,别嘌呤醇干预组和假手术组,检测再灌注15min时三组心肌中磷酸化P38MAPK(P-P38)的表达及再灌注4h后凋亡心肌数量。结果:假手术组P-P38表达极少,无核转位。缺血再灌注组心肌P-P38多,有核转位。别嘌呤醇干预组P-P38表达较缺血再灌注组减弱,核转位不明显。别嘌呤醇干预组再灌注4h后心肌凋亡指数较缺血再灌注组明显减少。结论:别嘌呤醇能抑制心肌再灌注时P38MAPK活化,减少细胞凋亡。     

P38MAPK抑制剂FR167653对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的 探讨p38MAPK特异性活性抑制剂FR167653在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的保护作用及其机制.方法 利用封闭群SD大鼠制作缺血再灌注模型,将实验动物分为假手术组、对照组、治疗组.分别在各个时间点按照相应程序采集标本行血清肝功能检测、肝组织病理学检查、外周血细胞因子水平ELISA检测.结果 （1）再灌注后各时点大鼠外周血ALT、AST水平均明显升高,但治疗组明显低于对照组,两组间差异有统计学意义（P〈0.05）.（2）对照组肝细胞肿胀明显,可见散在坏死细胞;治疗组肝脏结构较对照组明显改善.（3）TNF-α及IL-1β在假手术组肝脏组织中表达水平较低,缺血再灌注后对照组的表达水平明显增高,治疗组的表达水平明显低于对照组,差异均有统计学意义（均P〈0.05）.结论 FR167653能对缺血再灌注肝脏起保护作用.     

P38信号通路在肝脏缺血再灌注损伤中作用的研究进展

肝脏缺血再灌注损伤（hepatic ischemia reperfusion injury, HIRI）是临床上一种较为常见的病理生理现象,也是目前肝脏外科及肝移植临床研究的难点和热点问题,p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase,MAPK）在多种疾病和应激条件下被大量激活,p38信号传导途径的激活是导致肝脏缺血再灌注损伤的重要机制之一,就近年来有关p38信号通路在肝脏缺血再灌注损伤中的作用及机制研究进行综述。     

丹参对小肠缺血再灌注后肾脏p38MAPK信号通路的影响

目的:观察丹参(Salvia miltiorrhiza)对大鼠小肠缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury,IRI)中肾脏p38丝裂素活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinases,p38MAPK)信号转导通路的影响.方法:雄性SD大鼠36只,随机分为空白组、缺血再灌注组、丹参处理组.采用钳闭大鼠肠系膜上动脉缺血再灌注模型.酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定肾组织中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素- 1β (Interleukin-1β,IL-1β)的含量,蛋白印记(Western blot)法检测肾组织中磷酸化p38丝裂素活化蛋白激酶(Phospho-p38 mitogen-activated protein kinase,P-p38MAPKs)的表达;紫外分光光度法检测血浆二胺氧化酶(Diamine oxidase,DAO)的活性;HE染色形态学方法评价肠及肾组织损伤;血清生化分析仪检测尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(Crea,Cr).结果:缺血再灌注组与空白组比较,小肠及肾组织结构损伤严重,肾脏中p38MAPK、TNF-α和IL-1β表达明显增高,血浆DAO、BUN、Cr含量升高(P＜0.01);丹参处理组与缺血再灌注组比较,肾组织中p38MAPK表达显著降低,肾组织中TNF-α和IL-1β含量减少,血浆DAO含量下降,小肠和肾组织结构损伤显著减轻.BUN、Cr明显降低(P＜0.05).结论:丹参可减轻小肠缺血再灌注肾损伤;其机制与其抑制肾组织中p38MAPK信号转导通路的活化进而减少TNF-α、IL-1β的释放有关.     

p38MAPK与缺血/再灌注心肌损伤的研究进展

缺血/再灌注损伤(IRI)是体外循环心内直视手术常见的并发症,甚至是导致死亡的主要原因,其确切机制目前尚未明了,胰岛素抵抗可能是其发生机制之一,而心肌胰岛素抵抗的产生与葡萄糖转运蛋白4的表达降低和转位异常有密切关系。p38MAPK作为分裂原激活的蛋白激酶家族的一员,在许多生物效应中发挥着重要的作用,与缺血/再灌注损伤、胰岛素抵抗、葡萄糖转运等有着密切关系,p38MAPK可能参与缺血/再灌注损伤心肌胰岛素抵抗的过程。     

P38MAPK在大鼠心肌缺血再灌注中HSP70的调控作用机制

目的探讨P38MAPK在缺血再灌注损伤中的作用,以及与HSP70存在的可能相关关系。方法将40只雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、IPC组、阻断剂组四组,通过结扎冠状动脉左前降支建造大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,并观察大鼠心肌P38MAPK、HSP70蛋白以及细胞凋亡率的变化。结果与假手术组比较,模型组、IPC组、阻断剂组三组心肌细胞凋亡及P38MAPK、HSP70蛋白表达均明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01,P〈0．05）;而与模型组对照比较,IPC组心肌细胞凋亡率明显下降,P38MAPK、HSPT0蛋白表达均明显升高,差异均有统计学意义（P〈0．01、P〈0．05）,模型组与阻断剂组对照心肌细胞凋亡率及P38MAPK、HSP70蛋白表达均无明显变化。结论P38MAPK信号通路的活化能有效抑制心肌细胞凋亡,改善心肌缺血再灌注损伤,其作用机制可能与热休克蛋白70的激活相关。     

白藜芦醇对肾脏缺血再灌注损伤大鼠降低炎症反应及抑制细胞凋亡的作用

目的 研究白藜芦醇（RSV）在大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）模型中降低炎症反应及抗凋亡作用。方法 将18只SD大鼠随机分成假手术组（Sham组）、IRI组和IRI+RSV组）,每组6只,后两组建立IRI组模型,治疗组于术前2天、术前1天和术后第1天给予RSV（0.23μg/kg）灌胃。各组大鼠分别于术后36小时、48小时、第5天采集血标本及肾脏标本,评价肾功能和肾组织病理学损伤,采用原位缺口末端标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡情况,采用实时定量反转录聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测肾脏组织相关炎性细胞因子水平。结果 在肾脏IRI早期,与IRI组相比,IRI+RSV组大鼠血肌酐和尿素氮的水平明显降低,病理损伤较轻,TUNEL显示肾小管细胞凋亡（阳性细胞）减少,相关炎性细胞因子的表达水平也明显降低。结论 RSV可以通过降低大鼠IRI过程中的炎性反应,并起到抗凋亡的作用,进而发挥对肾脏的保护作用。     

棉子酚通过干扰氧化应激反应、抑制JNK/p38MAPK信号通路的激活减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤

目的 研究棉子酚(Gossypol)对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用,并对其可能的机制进行初步探讨.方法 SD雄性大鼠40只,随机分成4组:空白组、心肌缺血再灌注组(MI/R组)、Gossypol高、低剂量组(40、20 mg/L).采用Langendorff法造模,检测Gossypol对血流动力学指标的影响及不同时间点各组动物心脏冠脉流出液中心肌酶谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量,检测炎性细胞因子核转录因子(NF)-κ:B、细胞间黏附分子(ICAM)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-6生成量,从氧化应激反应、JNK/p38 MAPK信号通路方面探讨Gossypol对早期MI/R的保护机制.结果 各组Gossypol均可显著改善MI/R大鼠的心功能,减少AST、LDH释放,增加超氧化物歧化酶的活性,减少丙二醛的产生,减少再灌注的心肌组织中炎性细胞因子生成量.机制研究表明其可能通过清除自由基、抗脂质过氧化、阻断JNK/p38 MAPK信号通路途径的激活缓解心脏缺血再灌注所造成的氧化应激损伤和凋亡损伤.结论 Gossypol对MI/R具有保护作用,其机制可能与干扰氧化应激反应及阻断JNK/p38 MAPK信号通路途径的激活有关.     

抑制P38MAPK对皮瓣缺血再灌注损伤过程中炎症因子、细胞凋亡的影响

目的:研究抑制P38MAPK对皮瓣缺血再灌注损伤过程中炎症因子、细胞凋亡的影响。方法:选择Wistar大鼠作为实验动物,随机分为对照组、模型组、干预组,对照组常规制作腹壁浅动静脉皮瓣,模型组制作缺血再灌注皮瓣模型,干预组制作缺血再灌注皮瓣模型并给予SB202190干预。皮瓣制作后8d时收集组织,测定炎症因子、凋亡分子的表达量以及氧化应激指标的含量。结果:模型组大鼠皮瓣组织中NF-κB、IL-6、TNF-α、Bax、Caspase-3的mRNA表达量以及蛋白表达量均显著高于对照组,ROS、MDA、AOPP、8-OHdG的含量均显著高于对照组,Bcl-2的mRNA表达量以及蛋白表达量均显著低于对照组;干预组大鼠皮瓣组织中NF-κB、IL-6、IL-8、TNF-α、Bax、Caspase-3的mRNA表达量以及蛋白表达量均显著低于模型组,ROS、MDA、AOPP、8-OHdG的含量均显著低于模型组,Bcl-2的mRNA表达量以及蛋白表达量均显著高于模型组。结论:抑制P38MAPK能够减轻炎症反应、氧化应激反应以及细胞凋亡所造成的移植皮瓣缺血再灌注损伤。     

p38MAPK对大鼠肾缺血再灌注损伤早期MMP-9表达的调控

目的 探讨p38MAPK对大鼠肾缺血再灌注后MMP-9表达的调控情况及它们在肾缺血再灌注损伤中的作用.方法 48只健康雄性SD大鼠,分组建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,测定各组实验大鼠血清肌酐水平的变化,应用免疫组化二步法检测p38MAPK、MMP-9表达的变化.结果 与假手术组比较,缺血再灌注各组血清肌酐水平升高,缺血45min再灌注,24h达高峰(P＜0.01).MMP-9蛋白在假手术组呈少量散在表达或不表达,缺血45min再灌注6h有少量表达,再灌注12、24h及72h呈阳性表达,在24h达高峰(P＜0.01);p38MAPK蛋白在假手术组呈少量散在表达或不表达,缺血45 min,再灌注6、12h及24 h呈阳性表达,12h达高峰(P＜0.01).p38MAPK,MMP-9蛋白的表达与血清肌酐水平的变化呈显著正相关.结论 肾缺血再灌注可激活p38MAPK,活化的p38MAPK可以上调MMP-9蛋白的表达,可能促进了肾缺血再灌注损伤的发生和发展.     

骨膜素通过p38 MAPK信号通路抑制缺氧诱导的人牙周膜成纤 维细胞的氧化应激和细胞凋亡

目的 探讨骨膜素对缺氧诱导的人牙周膜成纤维细胞氧化应激与细胞凋亡的影响及其分子机制。方法 体外培养人牙周膜成纤维细胞,厌氧产气袋内缺氧处理48 h。采用不同浓度（25、50、100 ng/mL）的骨膜素处理细胞,随机分为空白组、缺氧组、骨膜素低浓度组、骨膜素中浓度组、骨膜素高浓度组。甲基噻唑基四唑（MTT）检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）测定炎症因子白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量;应用荧光酶标仪检测细胞活性氧（ROS）水平;ELISA检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测HIF-1α、P21、CyclinD1、Bax、Cleaved caspase-3、Bcl-2、P38MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达量。结果 缺氧处理后可明显降低细胞存活率（P<0.05）,提高P21、Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平（P<0.05）,促进细胞凋亡（P<0.05）,降低CyclinD1、Bcl-2蛋白水平（P<0.05）;与缺氧组相比,骨膜素不同浓度组细胞存活率升高（P<0.05）,细胞凋亡率降低（P<0.05）,P21、Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平降低（P<0.05）,CyclinD1、Bcl-2蛋白水平升高（P<0.05）。与空白组相比,缺氧组HIF-1α、p-p38 MAPK蛋白表达水平升高（P<0.05）,IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS水平升高（P<0.05）,SOD活性降低（P<0.05）;与缺氧组相比,骨膜素不同浓度组HIF-1α、p-p38 MAPK蛋白水平降低（P<0.05）,IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS水平降低（P<0.05）,SOD活性升高（P<0.05）。结论 骨膜素可促进缺氧诱导的人牙周膜成纤维细胞增殖,抑制细胞凋亡,增强细胞抗氧化能力,减轻炎症损伤,其可能通过抑制p38 MAPK信号通路的活化而发挥作用。     

产前血清微量元素含量与产后出血、MAPK信号分子和PGs表达、氧化应激的关系

目的:研究产前血清微量元素含量与产后出血、MAPK信号分子和PGs表达、氧化应激的关系。方法:选择在我院产科接受自然分娩的135例足月产妇,根据产后出血量分为出血量>500mL的研究组和出血量≤500mL的对照组。收集产前血清标本并测定微量元素、PGs的含量,产后采集胎盘组织并测定MAPK信号分子和PGs的表达、氧化应激分子的含量。结果:研究组产妇产前血清中钙、锌、铁的含量均显著低于对照组,铜、镁的含量与对照组比较无显著性差异;研究组产妇胎盘组织中p-EKR1、p-ERK2、p-JNK1、p-JNK2、p-P38MAPK、PGE_2、PGF_(2α)的蛋白表达量以及血清中PGE_2、PGF_(2α)的含量均显著低于对照组且与产前血清中钙、锌、铁的含量呈正相关,胎盘组织中p-EKR1、p-ERK2、p-JNK1、p-JNK2、p-P38MAPK的蛋白表达量与胎盘组织中PGE_2、PGF_(2α)表达量以及血清中PGE_2、PGF_(2α)含量呈正相关关系;研究组产妇胎盘组织中ROS、OONO﹣、NO、MDA的含量均显著高于对照组且与产前血清中钙、锌、铁的含量呈负相关。结论:产妇产前血清微量元素钙、锌、铁含量减少与产后出血有关;钙、锌、铁含量减少能够抑制MAPK信号通路所介导的PGE_2和PGF_(2α)分泌、加重氧化应激反应。     

贝前列腺素钠对2型糖尿病大鼠肾P38丝裂原蛋白激酶信号通路的影响

目的糖尿病肾病是糖尿病常见的慢性并发症之一,是导致终末期肾病的主要原因。观察贝前列腺素钠(商品名:德纳)对2型糖尿病大鼠肾P38丝裂原蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响。方法将30只SD大鼠随机分为正常对照(normal control,NC)组,2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)组,贝前列腺素钠治疗组,T2DM组和治疗组大鼠给予高脂饮食合并小剂量链脲菌素(STZ)腹腔注射,建模成功后,治疗组给予0.6 mg/kg/d贝前列腺素钠灌胃,其余饲养条件3组相同,最终纳入实验各组6只。用药8周后检测各组大鼠体重、血糖、24 h尿量、肾重体重比(KW/BW)、24 h尿蛋白(UAlb/24 h),血肌酐(creatinine,Cr),尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)。Western blot检测肾皮质组织中p-P38 MAPK、t-P38 MAPK以及TNF-α、TGF-β1、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9,环氧化酶-2(cycloxygenase,COX-2)的表达。结果用药8周后,T2DM组血糖、尿量、KW/BW、UAlb/24 h、Cr、BUN水平以及p-P38 MAPK、TNF-α、MMP-9、COX-2蛋白表达均较NC组显著升高;体重较NC组显著降低(P<0.01)。BPS组较T2DM组血糖、UAlb/24 h水平以及p-P38 MAPK、TNF-α、MMP-9、COX-2蛋白表达显著降低(P<0.01),尿量、KW/BW、Cr水平以及TGF-β1蛋白表达有所降低(P<0.05),体重有所升高(P<0.05)。结论贝前列素钠可抑制肾P38MAPK信号通路以及相关炎性因子(TNF-α、COX-2等)的表达水平,对T2DM大鼠肾具有明显的保护作用。     

补阳还五汤对大鼠脑缺血/再灌注后p38MAPK磷酸化、COX2表达的影响

目的 探讨补阳还五汤对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的作用及机制.方法 大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型.原位缺口末端标记法(TUNEL)检测大鼠脑缺血/再灌注区神经细胞的凋亡,免疫组织化学和Westem Blot法检测p38MAPK和COX2蛋白表达,术后2、4及7 d对大鼠综合运动能力评分.结果 模型组TUNEL阳性细胞数量、p38MAPK和COX2蛋白表达水平明显升高,神经功能损害严重;补阳还五汤能够明显减少TUNEL阳性细胞数量,降低p38MAPK和COX2蛋白表达水平,改善神经功能状态.结论 补阳还五汤能减少脑缺血再灌注后神经细胞凋亡,其机制与抑制p38MAPK磷酸化、COX2蛋白表达有关.     

Mechanism of the neuronal apoptosis induced by NOS,p38 MAPK and Caspase-3 after hypoxia injury

Objective To study the mechanism of the neuronal apoptosis induced by NOS, p38 MAPK and Caspase-3 after hypoxia injury. Methods The apoptosis of PC12 cells intoxicated by hypoxia was determined by using MTT assay,fluorescent staining, and FCM. RT-PCR was used to detect the pro-portion of nNOS, iNOS, p38 MAPK and Caspase-3 mRMA expression. Results MTT assay indicated that hypoxia-induced suppression of growth of PC12 cells was negatively related to hypoxia time.[第一段]     

白藜芦醇通过保护线粒体和减少氧化应激改善失血性休克大鼠肠损伤

目的：探讨白藜芦醇是否能够减轻失血性休克大鼠肠损伤及其作用机制。方法：24只无特定病原体级 Sprague-Dawley 大鼠随机分为正常对照组(n=8)、白藜芦醇治疗组(SR组,n=8)和溶剂组(SS组,n=8),记录平均动脉 压。失血性休克2 h后分别给予15 mg/kg的白藜芦醇或0.3 mL等体积的溶剂(70%乙醇)并回输自体血。治疗2 h后采集小 肠标本行HE染色后,再行肠黏膜的病理学观察和评分,免疫组织化学法检测超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase 2,SOD2)表达,Western印迹测定SOD2和细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)蛋白含量。取部分肠组织匀浆检查ATP、 谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GXH-px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、总SOD活性。结果：自体血回输 2 h后,SR组平均动脉血压高于SS组,两组间差异有统计学意义(P<0.01);SR组较SS组病理损伤减轻,且病理学评分 明显下降(P<0.05);SR组小肠组织匀浆GXH-px,CAT和SOD活性以及ATP水平均高于SS组(均P<0.01);SR组SOD2蛋白 水平高于SS组,胞质Cyt C水平明显低于SS组,组间比较差异有统计学意义(均P<0.01)。结论：白藜芦醇减轻了失血性 休克大鼠的肠损伤,其机制可能与减少氧化应激和保护线粒体有关。     

Influence of SB203580 on Cell Apoptosis and P38MAPK in Renal Ischemia/Reperfusion Injury

Renal failure caused by hypotension and hypo-volemia is more common and serious than the fail-ure of heart,brain and liver.Extracellular signalsare transmittedinward cells to cause correspondingresponses,which is the basis of cells exerting itsvarious functions.At present many cellular signaltransduction pathways had been found,amongwhich P38MAPK was mostly noticeable.The rela-tionship between P38MAPKand apoptosis of renaltubular epithelia in renal ischemia/reperfusion in-juryis heatedly k…     

脓毒症患者休克指数与炎症反应、氧化应激反应、靶器官损伤的相关性研究

目的:探讨脓毒症患者休克指数与炎症反应、氧化应激反应、靶器官损伤的相关性。方法:收集2013年3月~2016年5月间本院收治的脓毒症患者70例,根据休克指数(SI)分为无休克组(SI<0.5)11例、一般休克组(0.5≤SI≤2)42例、严重休克组(SI>2.0)17例。入院后即刻,检测血清炎症因子、氧化应激指标、肝功能指标的含量。结果:严重休克组、一般休克组患者的血清白介素-1β(IL-1β)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、晚期蛋白氧化产物(AOPPs)、总胆红素(TB)、γ-转肽酶(GGT)、丙氨酸转氨酶(ALT)含量高于无休克组患者,抗炎因子白介素-10(IL-10)、白介素-13(IL-13)、可溶性肿瘤坏死因子Ⅰ型受体(sTNF-RI)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)含量低于无休克组患者;严重休克组患者的血清IL-1β、IL-8、TNF-α、AOPPs、TB、GGT、ALT含量高于一般休克组患者,IL-10、IL-13、sTNF-RI、CAT、GSH-Px、SOD含量低于一般休克组患者。结论:脓毒症患者休克指数越高,炎症反应、氧化应激反应、靶器官损伤越严重,两者呈正相关关系。     

p38 MAPK在大鼠急性肺损伤模型中的表达及抗氧化剂NAC的影响

目的:观察磷酸化的分裂原激活的蛋白激酶(p38 MAPK)在脂多糖(LPS)引起的大鼠急性肺损伤中在体原位的表达. 方法:采用免疫组织化学ABC法和Western-blot技术,检测磷酸化的p38 MAPK在大鼠急性肺损伤模型气道和肺组织的表达,并同时观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对其表达的影响. 结果:对照组气道和肺组织无或偶见反应极弱的p38 MAPK阳性细胞,散在分布于气道上皮细胞和肺泡上皮细胞. LPS致伤组p38 MAPK阳性细胞较对照组明显增多(P<0.01),主要分布于浸润的炎症细胞、气道上皮细胞、肺泡上皮细胞、胸膜间皮细胞和血管内皮细胞. NAC治疗组气道和肺组织中阳性细胞数较LPS致伤组明显减少(P<0.01),Western-blot结果验证了上述结果. 结论:LPS诱发的大鼠急性肺损伤模型中,磷酸化p38 MAPK在气道和肺组织内表达增加,p38 MAPK的激活见于肺组织内多数细胞,提示肺内炎性和非炎性细胞均有p38 MAPK信号分子的激活. NAC是有效的抗氧化剂,其对急性肺损伤的炎症抑制可能是通过抑制p38 MAPK的激活起作用.