BioAggregate和MTA对体内破骨细胞分化和功能的影响

目的研究口腔生物陶瓷材料Bio Aggregate及MTA对体内LPS诱导的炎性骨吸收的影响。方法 6周龄C57/BL6雄性小鼠随机分为四组:PBS组、LPS组、Bio Aggregate+LPS组和MTA+LPS组,每组6只。LPS干预小鼠7 d后,取出颅盖骨进行显微-CT扫描、HE染色、酶组织化学染色和组织免疫荧光染色,观察骨破坏面积、破骨细胞的形成以及组织蛋白酶K(cathepsin K)的表达。结果 Bio Aggregate和MTA浸提液明显减少LPS诱导的破骨细胞形成和小鼠颅盖骨炎性骨破坏。与破骨细胞功能密切相关的组织蛋白酶K的表达在Bio Aggregate和MTA浸提液的作用下被显著下调。结论新型口腔生物陶瓷材料Bio Aggregate和传统材料MTA能够抑制体内炎性骨吸收。     

钛颗粒对破骨细胞骨吸收功能影响的研究

目的:研究钛颗粒对破骨细胞骨吸收功能的影响。方法:分别将含有和不含有钛颗粒的培养基与诱导的破骨细胞联合培养48h后,检测破骨细胞的骨吸收陷窝,破骨细胞对钛颗粒的吞噬及钛颗粒对破骨细胞骨架的影响。结果:钛颗粒培养基组份的骨吸收陷窝面积明显大于比不含钛颗粒培养基的组份,钛颗粒可被破骨细胞吞噬,但对其细胞骨架无显著影响。结论:钛颗粒可促进破骨细胞的骨吸收功能。     

骨形成蛋白对破骨细胞的调节作用

骨形成蛋白与骨、软骨、肌腱、牙周组织、牙本质的形成有极为密切的关系,具有明确的诱导骨形成作用。但是,国外学者研究发现,骨形成蛋白对破骨细胞也具有正向作用,可以促进骨髓基质细胞和脾细胞等分化成为多核的破骨样细胞。本文就骨形成蛋白对破骨细胞调节作用的研究进展作一综述。     

破骨细胞与颌骨骨吸收研究展望

颌骨在全身骨组织中占有重要而特殊的地位，其包绕牙齿的部分——牙槽骨，由于与牙齿的密切关系，是全身骨代谢最活跃的部分。多种疾患，如颌骨的炎症、囊肿、肿瘤、骨质疏松症等均可引起颌骨与牙槽骨骨质吸收亢进，致使牙齿松动、脱落，影响咀嚼功能，甚至引起颌骨局部缺损，影响颌面部     

Avagacestat抑制破骨细胞形成及溶骨功能改善骨关节炎骨破坏

目的 探究γ-分泌酶抑制剂Avagacestat通过抑制破骨细胞的形成及溶骨功能,抑制骨关节炎的进展。方法 提取6周龄C57鼠骨髓细胞诱导为巨噬细胞扩增培养,加入M-CSF及RANKL诱导后通过CCK8测定Avagacestat对该细胞的半数抑制浓度(IC₅₀),设置0、120、240 nmol/L 3种Avagacestat浓度组,对比破骨细胞形成实验、功能实验并检测3组细胞TRAP、C-fos、Cath-K等破骨相关基因的表达。建立LPS诱导关节炎实验动物模型,通过三维骨重建检测软骨下骨溶解情况、通过HE染色及TRAP染色检测破骨细胞分布情况。结果 在24、48、96 h 3个时间点,Avagacestat对破骨细胞的IC₅₀分别为493、426、405 nmol/L。TRAP实验显示Avagacestat抑制破骨细胞形成,骨板骨吸收实验证实Avagacest抑制溶骨功能,且240 nmol/L浓度的Avagacestat对破骨细胞形成及功能的抑制显著高于120 nmol/L;RT-PCR结果提示,加药后溶骨相关基因TRAP、C-fos、...     

破骨细胞整合素的功能

整合素是一类重要的细胞表面跨膜蛋白，介导细胞粘附，并参与细胞内外的信号传递。近年来研究发现，它在破骨细胞迁移、分化、粘附、信号传导等过程中起重要作用，本文对其研究现状作一综述。     

破骨细胞分化因子诱导小鼠骨髓细胞形成破骨细胞的实验研究

目的:探讨破骨细胞分化因子(ODF)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)联合应用进行体外诱导小鼠骨髓细胞形成破骨细胞(OC)的能力。方法:收集5～6周小鼠骨髓细胞,在含M-CSF(10 ng/ml)的α-MEM全培养液中培养24h,然后将悬浮生长的细胞接种到24孔培养板,并加入不同浓度的ODF和M-CSF。,通过观察抗酒石酸盐酸性磷酸酶(TRAP)染色的阳性细胞和能否在骨磨片上形成吸收陷窝来鉴定OC形成情况。结果:在只加入ODF或M-CSF一种细胞因子时,未见有TRAP阳性或CTR阳性细胞形成,同时加入ODF和M-CSF,可形成典型的OC。TRAP阳性多核细胞的数目和培养液中钙离子浓度的增加与ODF的浓度呈正相关。结论:小鼠骨髓来源的单核细胞在ODF和M-CSF共同作用下可形成具有骨吸收功能的OC,为体外研究OC的分化发育和功能调节提供了一种新的方法。     

破骨细胞整合素的功能

整合素是一类重要的细胞表面跨膜蛋白,介导细胞粘附,并参与细胞内外的信号传递。近年来研究发现,它在破骨细胞迁移、分化、粘附、信号传导等过程中起到重要作用,本文对其研究现状作一综述。     

大鼠牙移动性根吸收组织内组织蛋白酶K及白细胞介素6 mRNA的表达

目的 检测正畸牙齿移动引起根吸收组织中组织蛋白酶K(CK)及白细胞介素6(IL-6)的分子表达水平及其分布,探讨根吸收过程的分子机制。方法 选用Wistar大鼠建立根吸收的动物模型,应用原位杂交技术观察CK和IL-6在根吸收组织中的定位表达,应用t检验对比二者在根吸收组织与正常牙周组织中表达的差异。结果 CK mRNA表达于破牙和破骨细胞内,而IL-6 mRNA主要表达于成纤维细胞、成骨细胞、骨细胞及成牙骨质细胞内。二者在牙根吸收组织中的表达均明显高于正常组织(P<0.01)。结论 CK表达于根吸收组织中的破牙细胞,作为一种最重要的蛋白质分解酶参与有机基质的降解;IL-6作为多功能细胞因子,在根吸收活动中起着重要的调控作用。     

微小RNAs在破骨细胞分化调控中的研究进展

微小RNAs（miRNAs）是一组由22~25个核苷酸构成的非编码单链RNA,具有基因转录后调控功能,广泛参与细胞增殖、分化、凋亡、组织炎症及肿瘤发生等过程。破骨细胞是体内唯一具有骨吸收功能的细胞,受成骨细胞及炎症因子的调控,在牙周炎骨吸收过程中具有重要作用。miRNAs对破骨细胞的分化、成熟及功能具有多重调控作用。本文就miRNAs调控破骨细胞分化和功能的可能机制,及其在牙周炎骨吸收过程中的作用进行综述。     

不同浓度脂多糖刺激下成骨细胞的增殖分化凋亡及IL-23表达

目的 研究小鼠成骨细胞在不同浓度脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)刺激下的增殖分化凋亡及白介素-23(interleukin-23,IL-23)的表达.方法 第一实验组至第五实验组分别用含0.01ug/ml、0.1ug/ml、1ug/ml、10ug/ml、100ug/ml LPS的培养基对小鼠成骨细胞MC3T3-E1进行刺激,并以不加LPS刺激的作为对照组,培养24小时后,应用MTT法、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)法检测六组细胞增殖、分化情况,流式细胞术(flowcytometry,FCM)和Western Blot检测细胞凋亡情况,并采用酶联免疫吸附剂(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测六组IL-23的蛋白表达.结果 LPS刺激下各实验组MTT和ALP检测值均低于对照组,差异有显著性(P＜0.05),且随LPS浓度增加有逐渐降低趋势;LPS促进了MC3T3-E1的凋亡.实验组IL-23蛋白的表达均高于对照组,差异有显著性(P＜0.05),且随LPS浓度增加有逐渐升高趋势.结论 LPS抑制成骨细胞增殖分化,刺激成骨细胞表达IL-23,且呈剂量依赖性.     

The effect of matrix metalloproteinase-9 on the differentiation into osteoclast cells on RAW264 cells

Matrix metalloproteinases (MMPs) break down the extracellular matrix (ECM) and are important proteins for bone remodeling. Here, to clarify relationships between MMPs and mechanisms of osteoclast differentiation, we used MMP inhibitor, GM6001, to investigate osteoclast differentiation engage to receptor activator of nuclear factor κB ligand (RANKL)/receptor activator of nuclear factor κB (RANK) stimulation using the RAW264 osteoclast precursor cell line. Also, since differentiation of RAW264 due to RANKL/RANK stimulation is dependent on p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK), we investigated expression of MMP-9 and osteocyte differentiation of RAW264 due to RANKL stimulation using SB203580, a p38 MAPK inhibitor. After confirming that GM6001 did not significantly affect cellular proliferation of the cell line, RAW264 was cultured with GM6001 and RANKL. GM6001 suppressed RANKL stimulation-induced tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP)-positive polynuclear osteoclasts in a dose-dependent manner, and RANKL increased expression of MMP-9 in a dose-dependent manner. SB203580 also suppressed differentiation into TRAP-positive multinucleated osteocytes in a dose-dependent manner and blocked expression of MMP-9. These findings suggest that differentiation of osteoclasts by RANKL stimulation involves expression of MMP-9, which in turn involves p38 MAPK.     

甘薯提取物对破骨细胞形成、分化的抑制作用

目的 探讨甘薯提取物对破骨细胞形成、分化的抑制作用.方法 采用三种不同细胞培养系(全骨髓细胞培养系;除去间质细胞的骨髓细胞培养系;RAW 264细胞D-克隆破骨前驱细胞株培养系),分别添加甘薯提取物和维生素k后行细胞培养,观察其对破骨细胞形成、分化的影响.结果 甘薯提取物水溶性部分在三种不同细胞培养系中,均显著抑制破骨细胞的形成,并呈浓度依赖关系.维生素K对破骨细胞的形成未显示出有意的抑制效果.结论 ①甘薯提取物直接作用于破骨细胞系列细胞,抑制其分化.②甘薯提取物水溶性部分中含有未知的破骨细胞分化抑制物质.     

脂多糖刺激小鼠成骨细胞表达白细胞介素-23的实验研究

目的:研究小鼠成骨细胞能否在细菌毒素产物脂多糖刺激下表达白介素-23(IL-23).方法:分别以小鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)及小鼠成骨前体细胞系MC3T3-El体外诱导为成骨细胞后,加以l0ng/ml LPS刺激,采用ELISA法检测IL-23的蛋白表达.并采用RT-PCR方法检测脂多糖刺激下小鼠BMSCs诱导成骨...     

白细胞介素-24通过Jak-Stat通路对破骨细胞影响的实验研究

目的:研究白细胞介素-24(interleukin-24,IL-24)在体外通过Jak-Stat信号通路对单核巨噬细胞向破骨细胞分化的影响。方法:使用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)确定最佳感染复数(MOI);使用ELISA检测培养基中IL-24的含量;采用Real-time PCR方法检测RAW264.7细胞中Jak-Stat信号通路相关基因Jak1、Jak2、Jak3、Stat1、Stat2、Stat3及其向破骨细胞分化过程中相关基因NFATc1、CTSK、MMP9 mRNA的表达。结果:MOI=600为最佳转染效率;转染组IL-24含量显著高于未转染组(P＜0.01);在RANKL诱导条件下转染IL-24的RAW264.7细胞与未转染组相比Jak2、Stat3 mRNA的表达增加(P＜0.05),在RANKL诱导条件下转染IL-24的RAW264.7细胞加入信号通路抑制剂后与未加入抑制剂组相比,向破骨细胞分化过程中相关基因NFATc1、CTSK、MMP9 mRNA的表达降低(P＜0.05)。结论:IL-24通过Jak-Stat信号通路调控破骨细胞的分化及功能。     

烤瓷牙修复对龈沟液内IL-23表达水平的影响

目的:探讨IL-23在牙周炎发病机制中的作用及烤瓷牙修复对牙周组织中IL-23表达水平的影响.方法:选取正常组10例,牙龈炎组14例,烤瓷熔附金属全冠(PFM)牙龈炎组14例和PFM牙周炎组14例病例,采用Florida牙周探针探查各受试牙,记录临床指标(GI、SBI、AL、PD)后采集龈沟液,用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测龈沟液中IL-23的表达水平,采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:正常组龈沟液中IL-23表达水平(227.047±29.880)pg/mL低于炎性组,PFM牙周炎组(511.327±138.846)pg/mL高于PFM牙龈炎组(347.359±218.260)pg/mL(P＜0.05),较牙龈炎组(330.353± 196.266) pg/mL差异显著(P＜0.01);IL-23的表达水平与临床指标(GI、SBI、AL、PD)间呈正相关关系(Peaaron相关系数r＞0.4,P＜0.05),PFM牙龈炎组牙周破坏程度重于牙龈炎组,AL有显著差异(P＜0.05),PD差异显著(P＜0.01),且PD与IL-23表达水平变化关系最为密切,差异最为显著(Pearson相关系数r＞0.5,P＜0.01).结论:IL-23在牙周炎发病机制中发挥重要作用,烤瓷牙修复加重牙周组织破坏并影响IL-23表达水平.     

The osteoclast and periodontitis

Abstract. The osteoclast may play an important rô le in the variable rate of osseous destruction seen in periodontitis. Current understanding of various aspects of the osteoclast may help explain this fact. This review paper will first look at two theories of cell origin of the osteoclast: the multipotential osteoprogenitor cell theory and the hemopoietic stem cell theory. Next, ultrastructural features characteristic to the cell such as the ruffled border, clear zone, and lysosomal system, will be discussed. Thirdly, current and proposed theories on the actual mechanism of bone degradation are considered. This includes the one-cell theory and the two-cell theory. Finally, elements which activate the osteoclast are enumerated and their delicate interplay is outlined. In the context of this information, pathways found in the periodontal lesion (microbial agents, inflammatory cells and their products) which attract and activate elements of the osteoclastic system are discussed.     

不同牙周状态正畸力诱导IL-23在牙周组织表达的实验研究

目的 研究不同牙周状态正畸力作用下IL-23在牙周组织的表达变化,为牙周病正畸治疗提供参考.方法 建立大鼠牙周炎静止期、牙周炎活动期模型,以50克力移动牙周正常组、牙周炎静止期组、牙周炎活动期组的上颌磨牙.分别于牙齿移动的第3和7天处死大鼠.采用免疫组化和实时荧光定量PCR定性定量分析各组IL-23在牙周组织的表达.结果 正常牙周移动组IL-23mRNA的表达较正常对照组差异无显著性（P＞0.05）.静止期牙齿移动组IL-23mRNA在牙周组织的表达较正常牙周移动组增高,差异有显著性（P＜0.05）;较活动期移动组显著减小（P＜0.01）.牙周炎活动期牙齿移动组IL-23mRNA的表达较其他各组均高,且差异有高度显著性（P＜0.01）.结论 IL-23参与调节牙周炎正畸牙齿移动.牙周炎静止期正畸治疗不会导致IL-23的过度高表达,但要密切控制牙周易感因素.