膀胱移行细胞癌P21,P185,p53蛋白表达及ras,p53基因突变的检测

为探讨基因的改变在膀胱移行细胞癌发生过程中的意义，应用免疫组织化学及聚合酶链反应－限制性片段长度多肽性法，检测１５０例膀胱移行细胞癌Ｐ２１、Ｐ１８５、ｐ５３蛋白表达以及５０例ｒａｓ、ｐ５３基因突变。结果表明：膀胱移行细胞癌Ｐ２１、Ｐ１８５、ｐ５３蛋白表达阳性率分别为５９．３％（８９例）、５５．３％（８３例）、２９．３％（４４例）。Ｐ２１、ｐ１８５蛋白表达阳性率与膀胱移行细胞癌分级呈负相关（Ｐ＜０．０５），ｐ５３蛋白表达与膀胱移行细胞癌分级呈正相关（Ｐ＜０．０１）。Ｐ２１、ｐ５３蛋白表达阳性率与预后呈显著相关，Ｐ２１与预后呈负相关。７３例膀胱移行细胞癌存在两种以上蛋白共同表达。膀胱移行细胞癌Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子突变１６例（３２％），ｐ５３基因突变９例（１８％），均为２４８位点突变。Ｈａ－ｒａｓ第１２位点突变随病理分级增高而增高，与膀胱移行细胞癌分级显著相关（Ｐ＜０．０５）。ｒａｓ基因、ｐ５３基因突变与预后显著相关（Ｐ＜０．０５）。ｒａｓ基因、ｐ５３基因突变患者死亡率高于无突变患者。４例膀胱移行细胞癌存在ｒａｓ基因及ｐ５３基因共同突变。     

大肠腺瘤与腺癌P21,P53,P185蛋白表达及ras,p53基因突变的检测

应用免疫组化及ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测３０例大肠腺瘤、７４例大肠腺癌及癌旁粘膜Ｐ２１、Ｐ５３、Ｐ１８５蛋白表达及ｒａｓ、ｐ５３基因突变。结果表明，大肠腺瘤Ｐ２１、Ｐ５３蛋白阳性率（５３．３％，２７．６％）高于癌旁粘膜（Ｐ＜０．０１），二者过度表达与腺瘤恶性倾向有关。大肠腺癌Ｐ２１、Ｐ５３及Ｐ１８５蛋白阳性率（７２．９％，３７．８％，４７．２％）皆高于腺瘤Ｉ级不典型增生（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５及Ｐ＜０．０５）。９例腺瘤，４０例腺癌存在两种以上蛋白表达，共同表达与腺瘤恶性倾向及腺癌预后有关。大肠腺瘤及腺癌ｒａｓ基因突变率分别为２６．７％及４１．９％，ｒａｓ基因突变与腺瘤恶性倾向有关。大肠腺瘤及腺癌ｐ５３基因２４８位点突变率分别为３．３％及１４．９％。６例腺癌存在两种基因突变，两种基因协同突变与大肠癌预后有关。提示ｒａｓ、ｐ５３及ｃ－ｅｒｂＢ－２基因改变均参与了大肠癌的发生、发展过程。     

免疫组化和PCR—SSCP检测p53基因异常的一致性探讨

目的：探讨免疫组化检测ｐ５３蛋白表达和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测ｐ５３基因突变的一致性。方法：单克隆抗体ＤＯ－７检测８５例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）的ｐ５３蛋白表达，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测其中３１例腺癌的ｐ５３基因突变。结果：８５例ＮＳＣＬＣ中ｐ５３蛋白表达阳性率为６８％（５８／８５），３１例腺癌中ｐ５３蛋白表达阳性率为６１％（１９／３１），１４例（４６％）出现ｐ５３基因５～８外显子突变，ｐ５３蛋白免疫组化和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测ｐ５３基因突变无显著相关（χ２＝０．１，Ｐ＝０．７６），其一致率为５２％。结论：ｐ５３蛋白表达并不能很好地反映ｐ５３基因突变。     

肺鳞状细胞癌中p53蛋白表达及p53基因突变的检测

目的 通过检测肺鳞状细胞癌及癌旁组织中Ｐ５３蛋白积聚及相同癌组织中Ｐ５３基因的突变，探讨Ｐ５３蛋白积聚及Ｐ５３基因突变在肺鳞癌发病中的意义。方法 采用免疫组化和银染－ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测１２０例肺鳞癌及癌旁肺组织中Ｐ５３蛋白的状况及相同鳞癌组织中，Ｐ５３基因５、６、７、８外，显子突变的情况。结果 Ｐ５３蛋白了性率为５２．５％，Ｐ５３基因突变率为５６．７％，突变便数在第５、６、７、８外显子的分布     

肺癌p53蛋白表达和基因突变与临床病理的相关研究

目的 检测肺癌中ｐ５３蛋白表达和基因突变状况及其与临床病理和预后的相关性。方法：应用免疫组织化学（ＬＳＡＢ法）和聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）二种方法。结果 检测肺鳞癌４６例，共９５例。免疫组化ｐ５３蛋白总阳性率为５０．５％（４８／９５例），肺鳞癌阳性率为５６．５％（２６／４６例）、肺腺癌为４４．７％（２２／４９例）。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测ｐ５３基因突变率为４１．１％（３９／９     

葡萄膜与结膜色素性肿瘤p53基因产物表达的定量研究

为评价ｐ５３基因突变在葡萄膜与结膜色素性肿瘤发生发展过程中的作用，运用流式细胞术对葡萄膜恶性黑色素瘤（ＵＭＭ）、结膜色素痣（ＣＮ）及恶性黑色素瘤（ＣＭＭ）的ｐ５３基因产物表达进行检测．结果表明：７例ＣＭＭ较７例ＣＮ的ｐ５３蛋白表达量明显增高（Ｐ＜０．０５）；７例ＣＭＭ及３９例ＵＭＭ的阳性表达率分别为７１．４３％，６６．６７％；ＵＭＭ的ｐ５３蛋白表达量与ＤＮＡ指数、倍体性密切相关（Ｐ＜０．０１）。提示ｐ５３基因突变是ＣＭＭ与ＵＭＭ发生过程中的一个重要事件，ｐ５３蛋白表达量可作为结膜黑色素瘤良恶性鉴别的辅助指标，为揭示ＣＭＭ与ＵＭＭ的发生发展实质提供了新的生物学信息。     

p53基因突变与食管癌生物学行为的关系

目的为了探讨ｐ５３基因突变与食管癌生物学行为及预后的关系。方法应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ结合ＤＮＡ直接银染测序，对３０例散发性食管癌组织ｐ５３基因第５～８外显子进行检测。结果检出１１例阳性，突变检出率为３６．７％。９例为点突变，其中错义突变４例、无义突变２例、同义突变３例，其余２例为碱基插入和缺失导致的移码突变。统计学分析显示：中低分化食管癌的ｐ５３突变率为５６．３％，高分化组为１４．３％，两组相比有非常显著性差异（Ｐ＝０．０２５）；癌组织浸润累及食管壁全层的ｐ５３突变率５２．６％显著高于未累及全层组９．１％（Ｐ＝０．０２４）；有淋巴结转移组与无淋巴结转移组相比，ｐ５３突变率分别为６１．５％和１７．６％也具有非常显著性差异（Ｐ＝０．０２４）。结论ｐ５３基因突变与食管癌多种生物学行为如组织分化程度、肿瘤浸润程度及淋巴结转移有明显相关性。因此检测食管癌组织中是否存在ｐ５３基因突变有助于判断食管癌的恶性程度和患者的预后。还讨论了ｐ５３基因的“显性负效应”及同义突变的遗传学效应。     

广西肝癌高低发区p53基因突变热点的对比研究

目的：研究广西不同地区肝细胞癌（ＨＣＣ）ｐ５３基因２４９密码子（ｃｄ２４９）的突变热点与黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）污染及ＨＢＶ感染的关系。方法：用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测６２例石蜡包埋ＨＣＣ组织中上述基因突变，免疫组化染色Ｓ－Ｐ法检测癌旁肝组织ＨＢｓＡｇ表达。结果：广西ＨＣＣ高发区及低发区病例ｐ５３基因ｃｄ２４９的突变频率分别为６９．２％及２０％（Ｐ＜０．０１）。癌旁肝组织ＨＢｓＡｇ的阳性率为８１％及１００％（Ｐ＞０．０５）。ｐ５３基因突变热点与ＡＦＢ１严重污染及ＨＣＣ高发有密切关系，而与ＨＢＶ感染无关。结论：ｐ５３基因突变热点的出现具有分子流行病学意义。ｐ５３热点高频率出现表明了当地ＡＦＢ１的严重污染及ＨＣＣ发生的主要地区性因素。     

p53蛋白表达与上颌窦鳞状细胞癌发生的关系

用免疫组化技术对８例上颌窦正常粘膜、１６例乳头状瘤及癌变、５０例鳞状细胞癌及１４例癌旁粘膜（包括癌旁正常粘膜、单纯增生及不典型增生）ｐ５３蛋白的表达进行了检测。结果显示，上颌窦癌ｐ５３阳性率为６２％（３１／５０）。ｐ５３表达与患者性别、年龄及肿瘤分化程度无关。上颌窦正常粘膜、单纯增生及乳头状瘤ｐ５３表达阴性。不典型增生ｐ５３表达为４／６，其表达与相应鳞癌存在一致性，不典型增生ｐ５３阳性者，相应癌组织亦为阳性，反之亦然。４例乳头状瘤癌变中，３例ｐ５３阳性。研究结果表明，ｐ５３表达是人上颌窦癌发生的早期事件，而与其恶性程度无关，ｐ５３表达发生于不典型增生或乳头状瘤癌变阶段，显示ｐ５３基因突变与上颌窦癌的发生密切相关。研究结果还表明，检测ｐ５３蛋白有助于上颌窦良，恶性病变的鉴别及早期发现上颌窦癌。     

c－myc基因和p53蛋白在肝细胞癌中的表达

应用光敏生物素标记ｃ－ｍｙｃ基因探针在石蜡切片上进行原位杂交，ｐ５３蛋白用免疫组织化学ＡＢＣ法对肝癌高发区４２例人原发性肝细胞癌（ＰＨＣ）作定位和定量研究。结果表明ｃ－ｍｙｃ基因和ｐ５３蛋白的表达均位于细胞核内，在ＰＨＣ中异常表达阳性检出率ｃ－ｍｙｃ为７６％、ｐ５３为５５％。而ＰＨＣ中异常表达的分布和强度与癌组织分化程度有关。癌周肝组织中阳性检出率及其强度均低于癌组织。     

c—myc基因和p53蛋白在肝细胞癌中的表达

应用光敏生物素标记ｃ－ｍｙｃ基因探针在石蜡切片上进行原位杂交，ｐ５３蛋白用免疫组织化学ＡＢＣ法对肝癌高发区４２例原发性肝细胞癌（ＰＨＣ）作定位和定量研究。结果表明ｃ－ｍｙｃ基因和ｐ５３蛋白的表达均位于细胞核内，在ＰＨＣ中异常表达阳性检出率ｃ－ｍｙｃ为７６％，ｐ５３为５５％。而ＰＨＣ中异常表达的分布和强度与癌组织分化程度有关。癌周肝组织中阳性检出率及其强度均低于癌组织。     

黄曲霉毒素高污染区肝细胞癌p（53）蛋白与乙肝病毒感染的相关性研究

应用免疫组化ＳＰ法，检查桂西南黄曲霉毒素（ＡＦＢ１）高污染区１０９例肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中突变型ｐ５３蛋白的表达，并与相应病例中乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）的表达进行相关性研究。结果发现：ＨＣＣ中ｐ５３蛋白阳性率高达６８．８％（７５／１０９），ｐ５３蛋白表达与病人性别、肿瘤大小及有无乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染无关（Ｐ＞０．０５）。说明在ＡＦＢ１高污染区，ｐ５３基因突变是ＨＣＣ中非常普遍的现象。在ＨＣＣ病例中，ＨＢｓＡｇ阳性率为８４．２％（８５／１０１），其中同一病例ｐ５３蛋白及ＨＢｓＡｇ均为阳性者占５７．０％（５８／１０１），而ＨＢｓＡｇ阳性、突变型ｐ５３蛋白阴性者为２６．０％（２７／１０１）。表明ＨＢＶ仍然是肝细胞癌发生的主要原因，但ＨＢＶ的致癌机制具有多样性，并非均引起ｐ５３基因的改变。     

喉癌发生中人乳头瘤病毒感染与Langerhans细胞、p53表达的关系

目的：探讨喉癌的发生机理。方法：应用免疫组化ＬＳＡＢ法对３０例喉鳞状细胞癌人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染、Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ细胞（ＬＣ）及ｐ５３蛋白表达进行了研究。结果：２６．７％的病例可以检测到ＨＰＶ抗原成分。ＨＰＶ感染的癌旁粘膜内ＬＣ数量明显少于无感染者，且形态也发生改变。ｐ５３蛋白表达阳性率在ＨＰＶ感染组（３７．５％）明显低于ＨＰＶ检测阴性组（８３．３３％）。结论：提示ＨＰＶ、ＬＣ、ｐ５３在喉癌发生发展过程中起一定作用，且相互影响，ＨＰＶ感染引起ＬＣ数量减少，局部免疫功能降低，ＨＰＶ感染还可能通过表达的肿瘤蛋白或其他机制使抑癌基因ｐ５３失活，进而导致肿瘤的发生。     

垂体腺瘤p53蛋白表达及其意义

目的：研究突变型ｐ５３癌基因在垂体腺瘤中的表达。方法：应用免疫组化ＡＢＣ法检测６４例垂体腺瘤（复发组３１例，非复发组３３例），６例正常垂体、２例垂体瘤中ｐ５３蛋白表达阳性，非复发组中有２例ｐ５３蛋白表达阳性，两组差异有显著性。２例垂体癌ｐ５３蛋白强阳性表达，６例正常垂体无阳性表达。ｐ５３蛋白在不同激素类型垂体腺癌中的阳性表达率差异无显著性。结论：ｐ５３蛋白高表达与少数垂体腺癌在潜在恶性及复发有关，     

p53基因突变及其蛋白表达与脑胶质瘤

ｐ５３基因突变是人类肿瘤中最常见的突发之一，胶质瘤约有１／３发生ｐ５３基因突变。通过对胶质瘤ｐ５３基因突变和蛋白表达的研究，提出了多形性胶质母细胞瘤的三种不同起源方式，发现ｐ５３蛋白表达在脑胶质瘤与反应性胶质增生的鉴别诊断中有一定的作用，但多数资料的研究结果提示ｐ５３蛋白表达对脑胶质瘤患者的预后判断无意义。     

30例胃癌p53,雌孕激素受体测定分析

应用免疫组织化学方法（Ｓ－Ｐ法）检测３０例胃癌组织中突变型基因ｐ５３、雌激素受体（ＥＲ）、孕激素受体（ＰＲ）表达。结果表明：胃癌组织ｐ５３总阳性率为２７．６％，ＥＲ、ＰＲ总阳性率为３６．０％；ｐ５３、ＥＲ、ＰＲ在低分化癌中表达率高；ｐ５３与ＥＲ，ＰＲ阳性一致率达６０％。提示ｐ５３、ＥＲ、ＰＲ阳性者胃癌细胞脑分化、预后差。     

p53、p16、nm23基因蛋白在肺癌中的表达及意义

目的：研究肺癌组织中ｐ５３,ｐ１６,ｎｍ２３基因蛋白的表达：方法：应用免疫组化ＬＳＡＢ方法检测１２９例肺癌标本中;ｐ５３,ｐ１６,ｎｍ２３基因蛋白的表达。结果：ｐ５３,ｐ１６,ｎｍ２３蛋白在肺癌中的阳性表达率分别为５２．７％,４５．７％,５５．８％;３种蛋白阳性表达率与组织学分型无明显相关;肺腺癌淋巴结转移阳性组ｐ５３蛋白阳性表达率显著高于淋巴结无转移组;     

肝癌组织中N—ras基因突变和p53蛋白表达

目的：研究Ｎ－ｒａｓ和ｐ５３基因与肝癌发生，发展的关系。方法：应用多聚酶链反应－单链构象多态性分析法（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）和免疫组化法，检测２９例肝癌中的Ｎ－ｒａｓ基因突变和ｐ５３蛋白的表达。结果，１３例肝癌ｐ５３蛋白阳性（４４．８％），表明广西地区肝癌中曾普遍存在ｐ５３基因的突变，肝癌及癌旁组织中Ｎ－ｒａｓ基因在第２～３７密码子间的突变率分别为７９．３１％和８０．７７％，２２例有２个以上突变位点（     

p53、p21、p185蛋白表达与横纹肌肉瘤分化及预后的关系

目的研究ｐ５３、ｒａｓ和ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因蛋白产物ｐ２１、ｐ１８５在横纹肌肉瘤（ＲＭＳ）中的表达及其与ＲＭＳ的分型、分级和预后的关系。方法对确诊的５０例中的４１例有随访的ＲＭＳ用免疫组化ＡＢＣ法标记ｐ５３、ｐ２１、ｐ１８５蛋白，结果发现ｐ５３、ｐ２１、ｐ１８５在ＲＭＳ的阳性率分别为７２％、６８％、６０％，其阳性表达与年龄、性别和ＲＭＳ的组织类型差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；但与分化程度有关，其中ｐ５３、ｐ２１在低分化ＲＭＳ的阳性率分别为８５％和８０％，显著高于高分化ＲＭＳ的４２．９％和２８．６％（Ｐ＜０．０５）；ｐ５３蛋白在有转移组ＲＭＳ的阳性率为８６．４％，显著高于无转移组６０．７％（Ｐ＜０．０５）；有随访的４１例病例中。存活１年的ｐ５３蛋白阳性率为８６．７％，显著高于３年的４１．７％（Ｐ＜０．０５）。结论ｐ５３、ｐ２１蛋白表达可作为肿瘤分化及恶性程度的评价指标，而ｐ５３更能反映肿瘤预后，是肿瘤预后差的重要指标之一。     

胃癌组织17p13.3杂合性丢失及p53蛋白异常表达的研究

目的了解染色体１７ｐ１３．３丢失及ｐ５３蛋白异常表达在胃癌发生发展中的作用。方法应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法及免疫组化技术检测了５１例胃癌手术标本中１７ｐ１３．３杂合性丢失及ｐ５３蛋白异常表达。结果发现在３１例信息个体中１７ｐ１３．３杂合丢失１６例，占５１．６％（１６／３１）。ｐ５３蛋白染色阳性１９例，占３７．３％（１９／５１）。１７ｐ１３．３杂合丢失与ｐ５３蛋白表达间无显著相关。１７ｐ１３．３杂合丢失率和ｐ５３蛋白阳性率在肠型及胃型胃癌差异无显著性（Ｐ＞０．０５），与临床病理参数无显著相关。１例早期胃癌检出１７ｐ１３．３杂合丢失。结论染色体１７ｐ１３．３杂合丢失、ｐ５３蛋白异常表达是胃癌的常见改变；１７ｐ１３．３杂合丢失可出现在胃癌的早期。