同位素稀释-超高效液相色谱-串联质谱技术检测婴幼儿配方奶粉中维生素D

目的建立婴幼儿配方奶粉中维生素D的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析方法。方法样品经过低温皂化,正己烷萃取,Silica固相萃取柱净化,氮吹后用甲醇定容,使用安捷伦BEH C_(18)柱分离,采用电喷雾电离源(ESI)、正离子扫描和多反应监测(MRM)模式检测维生素D_2和维生素D_3含量,同位素内标定量。结果维生素D_2和D_3分别在10～200μg/L和1.5～200μg/L范围内线性关系良好(r0.995),检出限分别为10μg/kg和1.5μg/kg,定量限分别为25μg/kg和4.5μg/kg。加标平均回收率分别为97%～118%和87%～102%,相对标准偏差为2.36%～7.37%。结论建立的方法简单、快速、重复性好,可同时测定不同基质婴幼儿配方奶粉中维生素D_2和D_3含量,满足日常监测要求。     

高效液相法测定强化婴儿奶粉维生素D

用高效液相法测定强化婴儿奶粉中维生素D的步骤是将样品经过抽出脂肪,皂化,抽提不皂化物及经过“毛地黄皂甙—硅藻土”和“皂土”二次柱层析,将干扰因素如脂肪、甾醇、维生素A、E及其分解物等依次除去,然后进入高效液相色谱仪,用含0.7％乙醇的异辛烷为移动相,以254nm的紫外检测器检测,样液中的维生素D可得到较好的分离,以外标法计算含量。本法回收率为81％,相对标准偏差为±3.7％,采用此法还可测定其他一些食品,如强化麦乳精,乐口福,强化夹心饼干等中的维生素D。     

HPLC-DAD同时测定食品中维生素A、D、E研究

目的:建立反相高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)同时测定食品中维生素A、维生素D和维生素E(α-生育酚)的含量。方法:取一定量食品样品加入乙醇、氢氧化钾及焦性没食子酸,80℃水浴皂化30 m in,石油醚提取后,氮气吹扫浓缩致干后用流动相溶解,进样10μl分析;色谱条件为:色谱柱Supelco C18柱(15 cm×4.6 mm,5μm),流动相甲醇∶水(93∶7),柱温40℃,DAD扫描波长范围190~370 nm,检测波长325 nm(V itam in A)、265 nm(V ita-m in D)、294 nm(V itam in E)。结果:维生素A在1.0~100.0μg/L浓度范围内线性良好,相关系数r=0.9999;维生素D2在1.0~100.0μg/L浓度范围内相关系数r=0.9997;维生素D3在1.0~100.0μg/L浓度范围内相关系数r=0.9998;维生素E在0.50~50.0 mg/L浓度范围内相关系数r=0.9999。维生素A、维生素D和维生素E的平均回收率基本在95%以上,用本法调查了119种食品中维生素A、维生素D和维生素E的含量。结论:方法快速、灵敏、准确,样品处理简便易行,可用于食品中脂溶性维生素A、D、E的同时测定。     

同位素稀释-超快速液相色谱-串联质谱法测定血清中25-羟基维生素D

目的建立一种快速、准确测定血清中25-羟基维生素D_2、25-羟基维生素D3和3-epi-25-羟基维生素D3的同位素稀释-超快速液相色谱-串联质谱法。方法血清样品经甲醇-乙腈沉淀蛋白后,采用正己烷萃取,萃取液利用氮气吹扫浓缩并以初始流动相为溶剂进行定容,以含0.1%甲酸的水溶液(V/V)和含0.1%甲酸的甲醇溶液(V/V)为流动相,采用梯度洗脱方式在Phenomenex Kinetex F5色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm)上实现快速分离,采用多反应监测正离子模式检测,同位素内标法定量。结果差向异构体25-羟基维生素D_3和3-epi-25-羟基维生素D_3在6 min内可达基线分离,并可准确定量测定25-羟基维生素D_2、25-羟基维生素D_3和3-epi-25-羟基维生素D_3。3种目标物在0.5～50.0μg/L范围内均呈良好线性关系(相关系数r>0.9995),方法检出限为0.15μg/L,定量限为0.5μg/L。在3个加标水平(1.0、10.0和30.0μg/L)下,回收率为84.3%～109.0%(n=11),相对标准偏差(RSDs)为0.8%～6.8%。采用美国国家标准与技术研究院(NIST)的有证标准物(SRM 972a)的Level 1、Level 2、Level 3和Level 4进行方法验证,测定结果与标准参考值的相对偏差均小于5%。结论建立的方法具有简便、快速、灵敏和准确的特点,适用于血清中25-羟基维生素D_2、25-羟基维生素D_3和3-epi-25-羟基维生素D_3的同时测定。     

离子色谱在环境监测中的应用

离子色谱是以离子交换剂为固定相,以溶液(淋洗液)为流动相的色谱技术,它是液相色谱的一个分支。离子色谱(IC)的基本分析流程是:高压泵将淋洗液泵入系统中并和注入样品一起进入填有离子交换树脂的分离柱,经过多次交换层析,不同的离子以不同的时间随淋洗液流出交换柱后,再进入装有相反电荷的离子交换树脂的抑制柱,抑制柱一方面将淋洗液     

食品中苏丹红一号的检测方法研究

目的：应用高效液相色谱和固相萃取技术测定食品中的苏丹红一号。方法：用固相萃取法对样品提取液进行净化处理，利用反相高效液相色谱法分析食品中的苏丹红一号，在C18色谱柱上，95％的甲醇水溶液做流动相，流速为1．00ml／min，柱温为40℃，紫外检测波长为478nm，可以较好地检测食品中的苏丹红一号，阳性样品由液相色谱一多极串联质谱联用仪确证。结果：该方法相对标准偏差在1．00％-2．36％之间，回收率在87．2％-95．0％之间。线性相关系数r〉0．9992。结论：本方法准确可靠，可应用于食品中苏丹红一号的测定。     

高效液相色谱-串联质谱法同时检测贝类中10种脂溶性贝类毒素

目的 建立同时测定贝类食品中10种脂溶性贝类毒素(LSTs)的高效液相色谱-串联质谱方法.方法 样品中脂溶性贝类毒素采用甲醇提取、氢氧化钠溶液皂化后,通过固相萃取净化,经BEH C18色谱柱(50 mm ×2.1 mm,1.7 μm)分离,电喷雾正/负离子多反应监测(MRM)模式检测,基质匹配曲线外标法定量.结果 10...     

高效液相色谱法测定人血浆中视黄醇和生育酚

本文介绍用高效液相色谱和内标法同时测定人血浆中视黄醇(维生素A)和α-及γ+β生育酚(维生素E)。用C_(18)为分析柱,前加二预柱。流动相为甲醇和水(98:2)。紫外检测器之检测波长为300nm。色谱分析在12min内完成。用微处理机C-RIB之计算程序,内标二点法以及峰面积比值为单位计算结果。本方法回收率的均值,视黄醇为93.9％,α-生育酚为106.9％;变异系数(CV％),视黄醇为5.2％,α-生育醇为6.3％,γ-生育酚为4.8％。比较了用混合测定维生素A与E的结果与单样测定的结果,两者很一致。用混合样测定结果做为评价指标可以节省血样和大量人力、物力。在我国65个县130个农村点中取男女血样各3250份。血浆中维生素A和E的水平以平均值±SD(μg/dl)表示,我国人血浆视黄醇含量,男性为52±9.2(39～79),女性为41±6.8(30～54);α-生育酚,男性为703±108.7 (586～950),女性为735±101.1(594～1075),总生育酚,男性为750±124,女性为776±104。     

高效液相色谱测定食品中苯甲酸、山梨酸含量

目的　测定食品中山梨酸、苯甲酸的含量。方法　样品用乙醚—石油醚萃取 ,在 6 0℃水浴上蒸馏除去乙醚—石油醚 ,再在酸性介质中酯化 ,用高效液相色谱分离与测定。结果　标准回收率 :苯甲酸 (10 0 .0 2± 3.2 8) % ,山梨酸 (96 .3± 4 .85) %。最小检出限分别为 :苯甲酸 0 .0 2 2 μg ,山梨酸 0 .0 13μg ,线性关系与回收率较好 ,(r >0 .98)。结论　HPLC法测定食品中苯甲酸与山梨醇防腐剂具有简便、快速、准确的优点 ,值得推广应用     

舟山海岛母乳中维生素A测定结果分析

通过建立母乳中维生素A的高效液相色谱测定方法 ,对舟山海岛各县 (区 )乳母的乳汁中维生素A含量进行了抽样检测。结果表明 ,母乳中维生素A的皂化提取 ,反相高效液相色谱荧光检测 ,用苯并 (a)芘做内标 ,样品维生素A峰面积与内标峰面积比值做回归法计算 ,方法重现性CV <10 % ,回收率在 87 2 %～94 4% ,可以满足母乳中低含量维生素A的准确测定。用本法对 36 5份母乳维生素A测定 ,其均值为0 15 7μg ml。经统计学处理 ,哺乳期妇女母乳中维生素A含量与乳母年龄和母乳喂养期无关 ,与乳母的孕期生活环境密切相关。提示在舟山海岛哺乳期妇女的孕期保健及合理营养知识缺乏 ,易造成孕期维生素A摄入不足 ,导致产后母乳中维生素A偏低。     

Simplified assay of vitamin D2 in fortified dried milk by using two steps of high-performance liquid chromatography

A simplified method for the determination of vitamin D2 in fortified dried milk was established by using two steps of high-performance liquid chromatography (HPLC). About 1 g of fortified dried milk was accurately weighed and directly saponified. The extracted unsaponifiable matter was first subjected to preparative HPLC using a Nucleosil 5C18 column (reversed-phase type) with acetonitrile-methanol (1:1) as a mobile phase and a fraction containing vitamin D2 was separated. The separated fraction was subsequently subjected to analytical HPLC using a Zorbax SIL column (straight-phase type) with 0.4% isopropanol in n-hexane as a mobile phase. Since the peak corresponding to vitamin D2 was clearly observed with separation from other concomitants on the chromatogram of the analytical HPLC, the vitamin was assayed by estimating the peak height. The overall recovery of vitamin D2 by the proposed method was 94.3 +/- 2.3% (mean +/- SD). Naturally occurring vitamin D3 derived from cow's milk was negligible in commercial fortified dried milk sold in Japan. When the proposed method was applied to 5 kinds of commercial fortified dried milk, satisfactory results were obtained.     

High-performance liquid chromatographic determination of vitamin D3 in bovine colostrum, early and later milk

A simplified and accurate method for determination of naturally occurring vitamin D3 in bovine milk was established by high-performance liquid chromatography (HPLC) using successively reversed-phase and straight-phase columns. Exactly 25.0 ml of a sample of bovine milk was taken and the lipid was extracted with a solvent mixture of petroleum ether and ethyl ether (1:1) with small amounts of ethanol and Triton X-100, present. The extracted lipid was subjected to the first preparative HPLC using a Nucleosil 5C18 column (reversed-phase type) with acetonitrile-methanol (1:1) as the mobile phase, and a fraction containing vitamin D3 was isolated. The fraction was subsequently subjected to the second analytical HPLC using a Zorbax SIL column (straight-phase type) with 0.4% isopropanol in n-hexane as the mobile phase. Vitamin D3 was assayed by estimating the peak height on the chromatogram. The overall recovery and CV values were 92.1 +/- 8.7% and 9.4%, respectively, which were satisfactory. The proposed method was applied to several kinds of colostrum, early and later bovine milk in pairs. The assayed values in the colostrum of the group with large amounts of vitamin D3 administered before delivery to prevent parturient paresis were higher than those in the group with no administration. However, the values of the former group generally decreased in the respective early and later milk in step and there were few differences among those in the later milk of the two groups. The assayed values in later milk were 30-80 IU/liter.     

High-performance liquid chromatographic determination of vitamin D in foods, feeds and pharmaceuticals by successive use of reversed-phase and straight-phase columns

A simplified and accurate method for the determination of vitamin D in foods, feeds and pharmaceuticals was established by high-performance liquid chromatography (HPLC) using successively reversed-phase and straight-phase columns. About 1-2 g of a sample was accurately weighed and directly saponified. The extracted unsaponifiable matter was subjected to preparative HPLC using a reversed-phase column and a vitamin D fraction was collected. The fraction was subsequently subjected to analytical HPLC using a straight-phase column and vitamin D was assayed by estimating the peak height. The proposed method was applied to various kinds of samples, e.g., fishery products, fish meals, mixed feeds for fish farming and chicken farming, egg yolk, milk products, cattle liver, Shiitake, fortified foods and multivitamin preparations. The results showed that the proposed method was useful for the determination of vitamin D in such samples, because the peak of vitamin D in the profile of the second HPLC was always clearly separated from other concomitants and good recovery was obtained. Therefore, we think that the method is useful as a routine one for the determination of vitamin D in foods, feeds and pharmaceuticals.     

LC-MS法测定减肥类保健食品中非法添加的西布曲明及其衍生物

目的:建立液相离子阱质谱联用仪快速、准确测定减肥类保健品中非法添加的西布曲明及其2个活性衍生物的方法。方法:采用甲醇超声提取方法制备供试品溶液,以C18为固定相,以甲醇-0.5%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,进入离子阱质谱进行自动全扫描,通过与标准谱库中保留时间和多级质谱图的双重对比,对样品中非法掺加的化学药品进行定性鉴别。结果:在100批供试品中,检出西布曲明及其2个活性衍生物56批。结论:该方法准确、快速,成功应用于减肥类保健品中非法添加药物检测,并为其他非常规添加化合物的检测提供了思路。     

反相液相色谱法同时测定食物中维生素K_1和K_2

方法：食物中ＶＫ１、ＶＫ２用己烷提取，以石油醚乙醚（８５１５）为展开剂，于ＧＦ２５４ｎｍ硅胶薄板上纯化，正己烷萃取，离心，８０℃水浴蒸干。用甲醇溶解残留物，经ＯＤＳ－Ｃ１８反相柱，以甲醇为流动相。结果：在１．５ｍｌ／ｍｉｎ的流速下，选择２５４ｎｍ检测，ＶＫ１、ＶＫ２能很好地分离，ＶＫ１和ＶＫ２两者的回收率分别为８８．３％～９０．８％和８９．８％～９１．５％，变异系数为４．８２％～５．４９％。结论：反相液相色谱法简单、准确、适合于食物中ＶＫ１、ＶＫ２的分析。     

HPLC法同时测定保健食品中番泻苷A和番泻苷B的含量

目的建立高效液相色谱法测定保健食品中番泻苷A和番泻苷B含量的方法。方法样品经超声提取后,采用高效液相色谱-紫外检测技术进行检测,以Synergi Hydro-RP(250mm×4.6mm,4μm)为色谱柱,乙腈∶1.0%冰乙酸水溶液(17∶83)为流动相,检测波长270nm,外标法计算含量。结果番泻苷A和番泻苷B分别在1.40～28.0μg/ml和1.45～29.0μg/ml浓度范围内具有良好线性关系;番泻苷A和番泻苷B的平均加标回收率分别为85.2%～97.2%和86.1%～96.2%;相对标准偏差分别为7.5%和6.8%;检出限分别为0.8和0.6mg/kg;定量限分别为2.1和2.0 mg/kg。结论该方法简单、准确,可用于含有番泻苷的保健食品的质量控制。     

蔬菜中维生素K_1的测定——HPLC法

目的：　为了检测蔬菜中维生素Ｋ１（ＶＫ１）的含量,需建立一个特异性强分离效果好的检测方法。方法：　蔬菜样品经丙酮、石油醚提取后,再用失活磷酸盐处理过的氧化铝进行柱色谱净化处理,分别用极性不同的洗脱液将样品中ＶＫ１ 从干扰物中分离出来,收集石油醚∶乙醚（９７∶３）洗脱组分,浓缩定容。然后用Ｃ１８色谱柱对ＶＫ１ 进行定性定量分析,流动相为甲醇：正己烷（９８∶２）,紫外检测波长为２４８ｎｍ 。结果：　在流速为１．５ｍ ｌ／ｍ ｉｎ 的条件下,ＶＫ１ 的保留时间为１５．６ｍ ｉｎ,方法批内、批间ＲＳＤ％ 分别为１．４％ ～６．１％ 和１．３％ ～７．１％ ,回收率范围为９０．９％ ～１０９．３％ 。结论：　采用失活的磷酸盐处理过的氧化铝色谱柱对样品进行净化处理,可以提高分离效果。     

高效液相色谱法同时测定饮料中的7种食品添加剂

目的建立用高效液相色谱法同时测定饮料中的7种食品添加剂的方法。方法采用C18色谱柱,以甲醇─乙酸铵为流动相进行梯度洗脱,以0.02 mol/L流速下,采用紫外检测器,一次直接进样,同时测定7种食品添加剂。结果该方法在10.0~50.0μg/L范围内具有良好线性,相关系数均达到0.999。结论该方法一次分离7种食品添加剂,简便、快捷,适合批量样品同时几种添加剂的测定。     

高效液相色谱法同时测定保健食品中6种脂溶性维生素

目的建立不同剂型保健食品中维生素A、维生素A乙酸酯、维生素A棕榈酸酯、维生素E、维生素E乙酸酯和β-胡萝卜素的液相色谱检测方法。方法油状试样经乙酸乙酯提取,片剂和颗粒状样品试样经酶解后石油醚I提取,经高效液相色谱C18柱分离,甲醇-乙腈-水作为流动相,梯度洗脱,柱温箱为35℃,二极管阵列检测器检测,外标法定量。结果方法的线性关系良好,相关系数(r)均>0.999;检出限为0.05 mg/kg^2.00 mg/kg,定量限为2.5 mg/kg^100 mg/kg。相对标准偏差在1.2%~8.3%,回收率在83.7%~103%,稳定性满足实验要求。结论本方法通过改变样品的前处理方法,实现不同保健食品中6种脂溶性维生素的提取和净化,只测定维生素原形,无需皂化。该法适用于保健食品中脂溶性维生素的快速检测,方法简便、准确、重现性好。     

高效阴离子色谱法快速分析保健食品中的左旋肉碱

目的建立一种测定保健食品中左旋肉碱的脉冲安培检测-高效阴离子色谱新方法。方法样品经乙醚溶解分散,用1.0mmol/L盐酸萃取其中的左旋肉碱后,上清液进离子色谱仪测定。以200mmmol/LNaOH为流动相,采用Amino PAC PA10氨基酸分离柱分离,Au为工作电极的脉冲安培检测器检测。结果左旋肉碱在0.08～1.00mg/ml浓度范围内线性关系良好,标准溶液测定的峰面积和保留时间的RSD为3.97%和0.62%,日间RSD为5.66%和0.69%。将此法用于保健食品样品分析,样品平均加标回收率为95.6%～113.5%,样品测定结果的RSD为7.34%。结论该方法简便准确,重现性好,15min可完成一次分析,适于保健品中左旋肉碱的定量快速检测。