家猪作为EHF传染源的研究

用ＰＣＲ扩增技术从自然感染ＥＨＦＶ的家猪肺、心、肝、脾、肾和血液、尿液、粪便中检测到ＥＨＦＶ－ＲＮＡ．并分离到ＥＨＦＶ。提示家猪不但可自然感染ＥＨＦＶ，还可能经尿液和粪便将ＥＨＦＶ排出体外。与家猪有密切接触史人群的ＥＨＦ隐性感染率显著高于无密切接触史的人群，提示家猪不但有可能作为Ｅ－ＨＦＶ的宿主动物，还可能作为人群感染ＥＨＦ的传染源。     

流行性出血热病毒在家猪中存在垂直传播

从一头孕猪体内及其所产全部乳猪均检出流行性出血热（ＥＨＦ）病毒抗原。孕猪分娩有死胎，且乳猪多在产后１周发病死亡，临床表现为食欲不振、烦躁不安、喜卧、行动缓慢。用ＥＨＦ病毒抗原阳性标本接种乳鼠，可检出特异性荧光物质。该孕猪感染发生在１０月，以发病季节可基本排除乙脑感染。血清学和流行病学调查结果表明，乳猪全部感染与发病均在ＥＨＦ最短潜伏期内；可排除水平传播的可能，故推测此孕猪系怀孕后期自然感染ＥＨＦ病毒后，经胎盘传播而导致乳猪感染发病。     

48例非甲非乙型急性肝炎的追踪调查

本文对１９８７年２月～１９８８年２月在四川监测２１１６３９人中获得的８７例非甲非乙型（ＨＮＡＮＢ）急性肝炎患者，进行追踪调查。共收集到４８份患者血清，采用ＥＬＩＳＡ法检测血清中的抗－ＨＣＶ及抗－ＨＥＶ。同时检测血清中的流行性出血热病毒的抗体（抗－ＥＨＦＶ）。结果显示：抗－ＨＣＶ检出率为４３．７５％（２１／４８），抗－ＨＥＶ为８．３３％（４／４８）两者的比为５．２５１．６。本文首次在国内报导了汉坦病毒致肝炎的可能性，文中１例病毒性肝炎血清标志全部阴性，仅抗－ＥＨＦＶ阳性，２例同时抗－ＨＣＶ及抗－ＥＨＦＶ阳性，提示肝炎可能为汉坦病毒感染及混合感染所致。     

家猪自然感染EHFV的分子流行病学调查

１９８９年以来我们用分子流行病学方法对家猪作为ＥＨＦ传染源的作用进行了研究。结果发现家猪不但可自然感染ＥＨＦＶ；感染后ＥＨＦＶ还可随血行播及多个脏器，并可随尿、粪排出感染性ＥＨＦＶ污染外环境，有作为ＥＨＦ传染源的条件，对传播ＥＨＦ和维持疫源地起了一定的作用。     

流行性出血热传播途径的研究

使用实验动物对流行性出血热（ＥＨＦ）几个可能的传播途径进行了研究。结果表明５ＩＤ＿（５０）／ｍｌ的ＥＨＦＶ悬液即可通过破损的表皮使实验鼠感染；从ＥＨＦ疫区采集的革螨和恙螨均能自然感染、叮刺传播和经卵传递ＥＨＦＶ；感染ＥＨＦＶ的实验动物排出的ＥＨＦＶ可经气溶胶的形式传播给正常实验动物；ＥＨＦＶ可经破损的消化道粘膜感染实验鼠。这些结果提示：经皮肤伤口传播是鼠间和鼠人间ＥＨＦＶ的主要传播途径；螨媒传播对鼠间ＥＨＦＶ传播和保持疫源地起了重要作用；以气溶胶的形式经呼吸道传播是特定条件下实验动物型ＥＨＦ的主要传播途径；ＥＨＦＶ在一般条件下难以通过消化道使实验鼠感染。这些研究结果为ＥＨＦ的预防提供了重要的科学依据。     

流行性出血热病毒经伤传播的研究

采用实验室和现场相结合的方法，对流行性出血热病毒经伤口传播的有关问题进行了研究。结果表明，感染鼠的ＥＨＦＶ通过尿、粪排出体外后在外界环境中（４－１５℃）可存活２４ｈ；５ＩＤ５／ｍｌ的ＥＨＦＶ悬液可通过不显性破损的表皮使正常鼠感染，家鼠型及野鼠型疫区调查结果均表明：在鼠间ＥＨＦＶ经皮肤破损传播为重要途径，鼠间密切接触和鼠体寄生昆虫叮咬亦可引起感染。     

小盾纤恙螨自然感染流行性出血热病毒经期传播及其体内增殖的初步观察

为探讨小盾纤恙螨在ＥＨＦＶ传播中的媒介意义，观察了在该螨中ＥＨＦＶ经期传播的直接证据和能否在螨体内增殖。方法是将螨幼虫、若虫分批进行ＥＨＦＶ分离，测定病毒的ＴＣＩＤ（５０）／ｍｌ滴度。结果在该螨幼虫期和若虫期均分离到ＥＨＦＶ，但在幼虫演变到若虫前４０天左右，ＥＨＦＶ可在其体内消失，以后再度出现；病毒滴度在幼虫期逐渐下降，随后再度上升。结果证明ＥＨＦＶ可经期传播，并在螨体内有增殖的现象。     

汉坦病毒分离、传代和应用：1987—1994年总结

１９８７年我们从广安县一例肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）患者腹膜渗出细胞分离出汉坦病毒（ＨＶ）ＧＨ７１６。这株病毒为ＨＶ属的Ｉ型病毒，即抗原型别属野鼠型。以后，我们引进了国际Ｉ型代表毒株７６－１８８和Ⅱ型毒株Ｒ２２。１９８７－１９９４年，我们用这３株病毒感染非洲绿猴肾细胞（ＶｅｒｏＥ６），制备了ＨＶ抗原（ＨＶＡｇ）片。另外，从疫区ＨＶ＋鼠制备了ＨＶＡｇ＋鼠肺抗原片。这些抗原片用于ＨＦＲＳ研究、临床患者确诊、疑似病例的鉴别诊断和人群ＨＶ感染的血清流行病学监测，提高了ＨＦＲＳ的科学研究和防治水平。     

戊型肝炎病毒核酸逆转录－套式聚合酶链反应法的建立及应用

应用戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）开放读框１（ＯＲＦ１）和开放读框２（ＯＲＦ２）区的两对寡核苷酸作为内外引物，建立了逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）检测ＨＥＶＲＮＡ的方法。用本法检测２只人工感染ＨＥＶ猕猴的１１份系列血清，发现该２只猕猴分别于感染后第六天和第九天ＨＥＶＲＮＡ阳转，并持续至感染后第十七天和第二十二天。检测４１份急性散发性戊型肝炎病人血清，ＨＥＶＲＮＡ阳性率为６８．３％（２８／４１），发病后１～１０天、１１～２０天和２１～３４天的血清ＨＥＶＲＮＡ阳性率分别为７２．７％（１６／２２）、７０．０％（７／１０）和５５．５％（５／９）。提示ＨＥＶ血症持续时间较短，随病程延长而下降     

卖淫妇女病毒性肝炎感染状况调查

１９９４年１０－１１月对青岛市妇女养所５５名１６－４４岁卖淫妇女进行了五型病毒性肝炎感染调查。共检测１１项血清学指标。卖淫妇女的ＨＡＶ感染率（８７．２７％）一（８３．３３％）相近，但卖淫妇女ＨＢＶ总感染率（５２．７３％），与对照组（２６．６７％）差异有显著与。两组均未发现ＨＤＶ感染。卖淫妇女检出ＨＣＶ与ＨＥＶ感染各两例，且均阴性，卖淫妇女的重叠感染率（６０．００％）随年龄增长而增高，与对照组的（     

家猪与流行性出血热关系的调查和实验研究

为了解家猪在流行性出血热疫区的流行病学意义，１９８６－１９９４年用反向间接血凝凝法、血凝抑制法、酶标葡萄球菌Ａ蛋白、间接免疫荧光法和反转录－多聚酶链反应对家猪与ＥＨＦ的关系进行了现场调查和实验研究。     

一起由实验大白鼠感染引起EHF暴发的流行病学调查

1990年初广州市某医科大学附属医院显微外科实验室发生3例EHF病人,经流行病学调查、病原学和血清学证实是由实验大白鼠引起的EHF暴发。从病人急性期血清及实验大白鼠肺分离获得两株EHFV,应用北京病毒所EHF病毒MCAb分型试剂检测,证实属家鼠型病毒;3例患者的恢复期血清抗体滴度有4倍或4倍以上升高;在实验大白鼠也查到EHF抗体。从病人血清及大白鼠肺分离到两株EHFV,在广东省尚属首次,为广州市EHF监测提供佐证,同时也表明EHF病毒McAb试剂对分型的鉴别诊断有实用价值。     

紫貂作为EHF宿主动物的血清流行病学研究

本文应用IFAT技术及HRP-SPA法,检测养貂区不同人群血EHFV IgG、IgM抗体及紫貂血EHF IgG抗体、肺EHFV抗原。结果表明,养貂者与非养貂者的EHFV IgG阳性率差异极显著(P<0.01),非养貂者之间无显著性差异(P>0.05);EHFV TgM的阳性率也以养貂者为高(6.12%),非养貂者仅1.56%。提示养貂者为好发EHF的危险人群。同时检测52份紫貂血,EHFV IgG阳性4份;252只紫貂肺标本,EHFV抗原阳性10只;肝脏68只,抗原阳性1只。笔者认为,紫貂不仅是EHF的宿主动物,且可能是潜在的传染源。     

革螨自然感染 叮刺传播和经卵传递流行性出血热病毒的实验研究

1984~1985年,我们经实验研究证明格氏血厉螨和厩真厉螨有EHFV的自然感染,可通过叮刺传播和经卵传递EHFV。这两种螨可作为野鼠型EHF鼠间的传播媒介,并可能兼有储存宿主的作用,对在野鼠间传播EHF和维持疫源地方面起了重要的作用,还可能是鼠-人间EHF传播途径之一。     

小盾纤羔螨自然感染流行性出血热病毒的调查研究

Leptotrombidium (L.) scutellare was considered to be the suspected vector of epidemic haemorrhagic fever (EHF). In order to clarify the relationship between this mite and EHF, from Oct to Nov 1988 and Oct of 1989, the larvae of this mite were collected from rats in areas with constantly high incidence of EHF in Shanxi Province and larvae with only small quantity of meal were selected and for more than 15 days before isolation of EHFV. Six strains of virus were isolated. The viruses isolated were identified to be EHFV by serum test, immunofluorescent blocking test as well as neutralization test. The above results further demonstrate this mite can naturally be infected by EHFV and therefore serve as vector of EHF.     

江汉平原鼠间流行性出血热感染研究

为了解湖北省江汉平原流行性出血热（ＥＨＦ）疫区鼠间感染状况，采用挖洞法捕鼠，鉴定鼠种、性别和年龄，检查有无皮肤破伤，检测ＥＨＦＶ抗原抗体。结果，黑线姬鼠和褐家鼠占所捕鼠的６９．７％和２３．６％，其ＥＨＦＶ感染率分别为２１．８％和３０．９％。鼠间ＥＨＦＶ感染，成年鼠显著高于亚成年鼠和幼年鼠，感染率分别为４０．８％、１７．０％和１２．４％；皮肤破伤鼠感染率４５．９％，显著高于非皮肤破伤鼠的１３．９％。感染鼠以窝为单位具有明显的窝聚集性，而感染鼠窝在地理空间上则随机分布。感染鼠血清分型，黑线姬鼠以野鼠型为主，少数为未定型；褐家鼠以家鼠型为主，亦有少数未定型。这表明，江汉平原ＥＨＦ疫区是以黑线姬鼠和褐家鼠为主要宿主动物的家野混合型疫区；年龄、皮肤破伤和密切接触是该疫区鼠间ＥＨＦＶ传播的重要因素。     

家鼠型出血热监测的研究

1984年春末夏初,我们随机检测了新安县家鼠型疫区274名正常人的EHFV抗体,3月IgG检出率为11.3%,IgM为0;7月IgG检出率为16.4%,IgM为0.7%。其间GMT无明显变化,抗体阳转者未见EHF感染症状。同时同地对褐家鼠鼠群EHFV带病毒率、抗体阳性率、GMT及其分布变化的逐月监测表明,鼠群在此期间发生了EHFV感染和播散的自限性变化。鼠群EHFV感染的季节性突增,可能与其交配繁殖中广泛、密切的接触有关,这与当地人群EHF流行的季节性变化有一定关系。发现疫区附近家兔和猪的EHFV抗体阳性率分别为5.65%和6.13%,从2只家兔脾中检出了EHFV抗原。     

小盾纤恙螨自然感染、叮刺传播和经卵传递流行性出血热病毒的研究

为查明小盾纤恙螨在传播流行性出血热(EHF)上的媒介意义,我们于1988年10~11月,在陕西EHF疫区捕鼠,取459份鼠肺用IFAT检测EHFV抗原,阳性26份,阳性率为5.7%,并从鼠体采集的小盾纤恙螨分离到EHFV6株。1989年10月,将捕自非疫区的黑线姬鼠28只置放于疫区草地上,所有的鼠均诱集到游离的小盾纤恙螨幼虫,并从鼠分离到EHFV3株。以上结果证明小盾纤恙螨能自然感染和叮刺传播EHFV,并提示有经卵传递EHFV的能力,表明小盾纤恙螨具有作为EHF传播媒介的条件。     

革螨与流行性出血热关系的调查研究

为探索EHF的传播途径,我所对革螨与EHF的关系进行了一系列调查研究。结果证明,格氏血厉螨和厩真厉螨是黑线姬鼠(EHF的主要储存宿主)鼠窝中的优势螨种,其季节消长与发病相关,可通过鼠和人的正常皮肤叮刺吸血,有EHFV的自然感染,能通过叮刺在鼠间传播和在螨体内经卵传递EHFV。且与从鼠和螨所分离EHFV的抗原性一致。表明这两种螨可作为野鼠型EHF鼠间的传播媒介,并可能兼有储存宿主的作用。