青海脊髓灰质炎实验室2016-2017年细胞敏感性监测结果分析

目的通过对青海省脊髓灰质炎(脊灰)实验室2016-2017年两年的细胞敏感性(cell sensitivity,CS)监测结果进行分析,评估其在脊灰实验室检测质量控制中的重要作用。方法统一使用96孔微量板病毒滴定法在表达脊灰病毒受体的小鼠肺(Mouse Lung Cells that Express Receptors for Human Polioviruses,L20B)细胞和人横纹肌肉瘤(Rhabdomyosarcoma,RD)细胞上对Ⅰ型及Ⅲ型,两个型别的脊灰病毒的敏感性进行检测。结果 2016-2017年共开展8次常规CS监测并按时向国家脊灰实验室上报结果,CS监测结果显示青海省脊灰实验室的实验室质量控制(Quality control of laboratory,LQC)株滴度均在正常范围±0. 5logCCID50/0. 1 ml波动。结论青海省2016-2017年脊灰实验室所用的L20B和RD细胞对脊灰病毒敏感性处于正常范围内。CS监测作为中国脊灰实验室网络(Chinese Poliomyelitis Laboratory Network,CPLN)质量控制的重要指标,保证了实验室检测脊灰病毒的敏感性。     

RD、Hep-2、L20B细胞用于脊髓灰质炎病毒学监测的实验研究

目的：观察RD、Hep—2和L20B用于脊髓灰质炎病毒学常规监测的实验结果，提高脊髓灰质炎病毒的检出率。方法：对RD、Hep—2和L20B用于脊髓灰质炎病毒监测进行了实验研究。用细胞培养法进行病毒分离。结果：L20B细胞对脊髓灰质炎病毒具有较强的敏感性和特异性，但非脊髓灰质炎肠道病毒(NPEV)在RD细胞上呈选择性增值，可能会造成NPEV检出率下降。结论：RD、HeP—2和L20B细胞可用于脊髓灰质炎病毒学常规监测。     

三种细胞在脊髓灰质炎病毒检测中的特点观察

目的:运用RD、Hep-2及L20B细胞进行脊髓灰质炎病毒(简称脊灰)的分离鉴定.方法:使用WHO推荐的3种细胞对脊灰病毒分离鉴定.结果:L20B细胞对脊灰病毒具有良好的特异性,对非脊灰肠道病毒不敏感.在脊灰分离株和粪便悬液标本中脊灰病毒的检出率为100%,优于RD用Hep-2细胞.结论:L20B细胞对脊灰病毒有较强的特异性和敏感性.     

河北省2016年脊髓灰质炎实验室运转情况分析

目的分析河北省2016年脊髓灰质炎(脊灰)实验室运转情况,为维持河北省无脊灰状态提供实验室依据。方法对河北省各市通过急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例监测信息报告管理系统报告的AFP病例及河北省脊灰实验室监测数据进行分析,对WHO要求的各项监测指标进行评价。结果 2016年河北省AFP病例监测信息报告管理系统共报告AFP病例365例,实验室收到362例AFP病例粪便标本719份,5例分离到脊灰病毒(Poliovirus,PV),分离率为1.38%;49例分离到非脊灰肠道病毒(NPEV),分离率为13.54%。分离的PV分离成单血清型共计10株,VP1区编码区核苷酸均发生了不同程度变异,但都以低个数变异为主,均为疫苗相似株(Sabin Like,SL)。2016年接受WHO一次病毒分离和两次型内鉴定(Intra-typic differentiation,ITD)盲样标本能力考核,实验室各项监测指标均远远超过WHO的认证标准。按WHO要求,细胞支原体检测结果均为阴性,没有受到支原体污染,细胞敏感性的评价两种细胞都对PV敏感、有效。结论河北省脊灰实验室运转正常,没有发现脊灰野病毒(Wild poliovirus,WPV)和疫苗衍生脊灰病毒(Vaccine-derived poliovirus,VDPV)及VDPV病例,为河北省维持无脊灰状态提供了准确、可靠的病毒学依据。     

2015年河北省急性弛缓性麻痹病例中脊髓灰质炎病毒监测结果分析

目的检测分析急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例及其密切接触者脊髓灰质炎(脊灰)病毒,为河北省继续维持"无脊灰野病毒状态"提供理论依据。方法收集2015年河北省15岁以下急性弛缓性麻痹(AFP)病例及其密切接触者粪便标本,采用L20B和RD细胞,按照《WHO脊髓灰质炎实验室手册第4版》操作规程进行脊灰病毒阳性检测,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法扩增VP1区基因片段并进行核苷酸序列测定和分析。结果从采集的303例AFP病例中共检出脊灰阳性7例,分离率为2.31%,分离到非脊灰肠道病毒(non-polio enterovirus,NPEV)59株,分离率为19.47%。与Sabin株相比,脊灰病毒VP1区核苷酸发生0个变异的有3株,发生1个变异的有6株;NPEV的分离以6~9月较多,占全年总数的64.41%。结论 2015年河北省脊灰实验室各项监测指标均符合WHO认证要求,脊灰病毒型别以Ⅰ型为主,VP1区核苷酸以低变异为主,均为脊灰疫苗相关株,NPEV呈夏秋季感染高峰。     

湖南省2003年急性弛缓性麻痹病例病毒学监测结果分析

目的 总结分析湖南省急性驰缓性麻痹(AFP)病例病毒学监测结果，为我省维持无脊髓灰质炎状态提供科学依据。方法 采集AFP病例双份粪便标本，接种L20B、RD两种细胞进行病毒分离；阳性毒株采用微量中和实验进行型别鉴定；脊灰(PV)阳性毒株送国家脊灰实验室进行型内鉴别。结果 湖南省2003年共报告AFP病例199例，采集粪便标本199例，病毒分离阳性45例。其中脊灰病毒21例，非脊灰肠道病毒(NPEV)24例。所有PV毒株经国家脊灰实验室鉴定，除一株为I型疫苗变异株外，其余均为疫苗相关株。     

不同细胞对脊髓灰质炎病毒敏感性的测定

目的：脊灰病毒在不同细胞株中的增殖情况和敏感性测定;方法：用微量板法测定脊灰Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ型病毒在接种RD,Hep-2,L20B细胞后不同时间的病毒滴定,绘制出增殖曲线图;结果：（1）各型脊灰病毒在3种细胞中增殖情况基本一致;（RD,Hep-2细胞对脊灰病毒敏感 性一致,L20B细胞的敏感性相对于RD,Hep-2细胞低一些,结论：在脊灰病毒分离工作中要使用多种敏感,才能提高病毒分离率,防止脊灰病毒漏检。     

河北省脊髓灰质炎疫苗免疫策略调整后急性弛缓性麻痹病例病原学监测分析

目的分析河北省脊髓灰质炎(简称脊灰)疫苗免疫策略调整后对急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例报告及病例粪便标本中脊灰病毒分离状况的影响,为制定科学合理的脊灰疫苗免疫策略提供科学依据。方法采用L20B、RD细胞对AFP病例粪便标本进行病毒分离,应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)方法对L20B阳性分离物进行型内鉴定(intratypic ifferentiation,ITD)及疫苗衍生脊灰病毒(vaccine-derived poliovirus,VDPV)筛查,脊灰病毒(PV)送国家脊灰实验室进行序列测定。结果 2017-2018年共报告488例AFP病例,采集967份粪便标本;14天内双份合格粪便标本采集率96.19%,14天内病毒分离结果及时报告率97.67%;7天内L20B阳性分离物ITD及时率100.00%。967份粪便标本中L20B阳性7份,经ITD检测均为PV,PV分离率为0.72%;967份粪便标本中非脊灰肠道病毒(non-polio enterovirus,NPEV)阳性100份,NPEV分离率10.34%。PV均进行VDPV筛查和VP1区核苷酸序列测定,均为脊灰疫苗类似株,但VP1区核苷酸序列显示均有不同程度变异。结论河北省2017-2018年脊灰疫苗策略调整后AFP病例中PV分离率有下降趋势,分离的PV以Ⅲ为主,VP1区核苷酸变异以低变异为主,均为疫苗类似株,未发现脊灰野病毒(wild poliovirus,WPV)、VDPV和Ⅱ型毒株,河北省继续维持无脊灰状态。     

青海省2013-2017年脊髓灰质炎病原学监测结果分析

目的通过对青海省2013-2017年急性驰缓性麻痹(Acllte flaccid paralysis,AFP)病例与健康人群的病原学进行监测,为维持无脊灰状态提供准确、可靠的科学依据。方法采用RD、L20B细胞对AFP病例及健康人群的粪便标本进行病毒分离,分离到的脊髓灰质炎毒株送至国家脊髓灰质炎实验室进行鉴定。结果 2013-2017年共接收AFP病例粪便标本106份,分离到脊髓灰质炎病毒(Poliovirus,PV) 1株,分离率为0. 94%,分离到非脊灰肠道病毒(NonPolio Enterovirus,NPEV) 11株,分离率为10. 38%。共接收全省健康人群粪便标本790份,分离到PV 6株,分离率为0. 76%,分离到NPEV 143株,分离率为18. 10%。AFP病例及健康人群标本中分离到的所有PV毒株中,PVⅠ型5株,PVⅢ型1株,PVⅠ+PVⅢ混合型1株,均为脊灰疫苗相关株,无脊灰野病毒株。结论青海省2013-2017年无本地脊灰野毒株病例流行,阻断了脊灰本地野病毒的传播,保持了无脊灰状态。     

河北省2001年脊髓灰质炎病原学监测分析

河北省自１９９４年以来未发现脊髓灰质炎 (脊灰 )野病毒引起的病例 ,为巩固和维持无脊灰状态 ,２００１年河北省疾病预防控制中心脊灰实验室继续按照世界卫生组织(ＷＨＯ)确定的合格实验室要求 ,完成了常规的急性驰缓性麻痹 (ＡＦＰ)病例及部分接触者的脊灰病原学监测工作 ,现将监测结果分析如下。１材料与方法１ １粪便标本来源河北省各市、县 (区 )卫生防疫站采集的ＡＦＰ病倒粪便标本 ,冷藏送至河北省疾病预防控制中心脊灰实验室 ,-２０℃保存备检。１ ２细胞和标准血清所用Ｌ２０Ｂ、ＨＥＰ -２、ＲＤ细胞及脊灰标准诊断血清均由中国疾…     

甘肃省2003年脊灰病毒学检测结果分析

我国自2000年已进入无脊髓灰质炎(脊灰)状态。但与我国接壤的临近国家还有大量脊灰野病毒流行。所以要求实验室要有很高的检测数量和敏感性。我省脊灰实验室自1992年加入国家脊灰实验室网络后，各项监测数据和质量都不断提高，各年度均较好的完成了卫生部及国家脊灰病毒室下达的各项监测指标。至目前，我省已连续12年未检测出脊灰野病毒病     

宁夏回族自治区2000-2005年急性弛缓性麻痹病例病原学监测结果分析

目的了解宁夏2000-2005年急性弛缓性麻痹(AFP)病例及其他健康人群肠道病毒病原学监测结果。方法对采集的粪便标本利用L20B及RD细胞进行病毒分离,阳性标本用脊灰标准诊断血清定型。结果AFP病例及其他健康人群脊灰病毒(PV)分离率分别为8.33%和1.61%,非脊灰肠道病毒(NPEV)分离率分别为13.33%和15.20%。结论我区AFP病例的病原学监测结果运行良好。在所有人群中分离到的23例PV株经国家脊灰实验室进行型内鉴定均为疫苗株,表明我区未发现脊灰野毒株和疫苗衍生株病例。     

海南省2005～2009年急性弛缓性麻痹病例病原学监测分析

目的分析海南省2005—2009年急性弛缓性麻痹（AcuteFlaccidParalysis,FP）病例及其密切接触者病原学监测结果,为维持无脊髓灰质炎（脊灰）状态提供病原学依据。方法按照世界卫生组织（WHO）规定的方法,用RDa和L20B细胞对AFP病例及其密切接触者的粪便进行病毒分离和鉴定。结果2005～2009年从AFP病例及其密切接触者966份粪便标本中分离到33株脊髓灰质炎病毒（PV）毒株,非脊灰肠道病毒（NPEV）196株;33株PV毒株中PVI型8株、PVⅡ型6株、PVⅢ型5株、PV混合型（Pmix）13株、PV＋NPEV混合株1株。所有PV毒株经中国疾病预防控制中心国家脊灰实验室进行型内鉴定,均为脊灰疫苗相关株。结论海南省2005～2009年AFP病例及其密切接触者中未发现脊灰疫苗衍生毒株（VDPV）,且脊灰实验室监测系统各项监测指标都达到WHO的标准,表明海南省AFP病例的病原学监测敏感、高效。     

L20B细胞吸附法用于环境水中病毒的分离培养

目的：建立一种用于检测外环境水中脊髓灰质炎病毒的方法。方法：细胞吸附浓集法：将自然沉清的水样抗菌、等渗处理后，加入适量的L20B细胞，混匀，充分吸收水中的脊髓灰质炎病毒，然后收集细胞培养、分离病毒。同时用AlCl3-NaCl沉淀法浓集病毒，接种L20B细胞分离病毒，作为对照。结果：40份水样，用L20B细胞吸附法检出10株脊髓灰质炎病毒，用AlCl3-NaCl沉淀法未检出脊髓灰质炎病毒。结论：新建立的细胞吸附浓集法可用于外环境水中的脊髓灰质炎病毒的检测，且检测的敏感性明显高于AlCl3-NaCl沉淀法。     

青海省1996年—1999年健康人群脊髓灰质炎病毒监测结果

本文报道了青海省 1 996年— 1 999年 2 4个市、县 4岁以下健康人群脊髓灰质炎病毒检测结果。 1 996年— 1 999年间全省共采集 4岁以下健康儿童粪便标本 5 99份 ,病毒分离阳性 84份 ,阳性率为 1 4.0 2 %。检出脊髓灰质炎病毒1 9株 ,其中Ⅰ型病毒 3株、Ⅱ型病毒 4株、Ⅲ型病毒 3株、混合型病毒 9株 ,经ＰＣＲ -ＲＦＬＰ分析均为疫苗相关株。　　我国已进入消灭脊髓灰质炎 (脊灰 )的后期关键阶段 ,脊灰病毒学监测工作显得更为重要 ,它不仅为急性弛缓性麻痹 (ＡＦＰ)病例的诊断和分类提供病原学依据 ,而且可以通过对外环境及人群脊灰病毒监测来…     

甘肃省2000~2009年急性弛缓性麻痹病例中脊髓灰质炎病毒阳性病例分析

目的 探讨我省2000～2009年急性弛缓性麻痹（AFP）病例脊髓灰质炎（脊灰）阳性病毒分离情况,了解分析脊灰（PV）病毒阳性分离率与患者年龄、免疫史的关系.方法 选择2000～2009年AFP病例脊灰病毒分离阳性的病例进行分析.结果 从1 192例AFP病例粪便标本检出脊灰疫苗类似株病毒（PV）54例,其中PVⅠ型14例,PV Ⅱ型10例,PV Ⅲ型18例,PV 混合型11例,PV＋非脊灰肠道病毒（NPEV）1例.经国家脊灰实验室鉴定均为疫苗类似株病毒.结论 实验室监测质量在保证AFP病例监测系统的敏感性上有不可替代的作用,脊灰实验室要提高病毒检出的敏感性,为维持无脊灰提供实验室数据.     

黑龙江省2000年急性弛缓性麻痹病例监测系统状况评价

快速、敏感的急性弛缓性麻痹 (ＡＦＰ)病例监测系统是实现消灭脊髓灰质炎的重要保证之一。黑龙江省自 1991年建立急性弛缓性麻痹 (ＡＦＰ)病例监测系统以来 ,监测系统的敏感性和及时性不断提高 ,已连续 7年达到 15岁以下儿童非脊髓灰质炎ＡＦＰ病例发病率 1/ 10万的指标 ,连续 8年未分离到脊灰病毒。为进一步巩固消灭脊灰成果 ,及时发现脊灰监测工作中存在的薄弱环节 ,提高监测工作质量 ,现将黑龙江省2 0 0 0年ＡＦＰ病例监测系统的系统情况 ,分析如下。1　材料与方法1 1　流行病学状况黑龙江省 2 0 0 0年ＡＦＰ监测系统共报告ＡＦＰ病例 12…     

云南省应对缅甸输入疫苗衍生脊髓灰质炎病毒病例实验室监测作用分析

目的分析云南省临沧市1例缅甸输入疫苗衍生脊髓灰质炎（脊灰）病毒（vaccine-derived poliovirus,VDPV）病例调查中实验室的监测情况,为云南省应对缅甸输入VDPV提供实验室依据。方法对与缅甸接壤地区入境就诊的急性弛缓性麻痹（AFP）病例标本进行脊灰病毒（PV）特异性引物逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）快速检测,现场采集病例密切接触者及边境地区健康儿童粪便标本开展脊灰病毒监测和肠道病毒型别特征分析;在病例所到过的临翔区和与缅甸接壤的镇康县连续6个月采集环境污水标本开展PV检测分析;采集境内外健康儿童血标本开展脊灰中和抗体水平分析,对输入风险进行评估。结果经实验室分析证实在中国消灭和维持无脊灰工作进程中监测到首例缅甸输入VDPV病例,病毒型别为Ⅰ型VDPV,有21个核苷酸变异,变异率2.3%。在病例密切接触者、健康儿童及外环境中未检测到同类病毒。在健康儿童中检测到NPEV 13株,在环境标本中检测到NPEV 5株,PVⅢ1株,境内儿童脊灰中和抗体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型阳性率分别是100.00%、100.00%、98.00%;境外儿童三型阳性率分别是94.34%、100.00%、84.91%。结论云南省脊灰监测系统敏感性高,具备及时发现输入疫情的能力,病例输入后开展人际监测和环境监测,证实边境地区有较好的免疫屏障,未在云南省境内引起二代病例,但云南省面临再次输入的风险较大,应充分发挥实验室监测作用,严防病例或病毒输入后引起本地传播流行。     

山东省菏泽市一例确诊脊髓灰质炎疫苗相关病例的监测、诊断分析

目的通过对菏泽市一例确诊脊髓灰质炎(脊灰)疫苗相关病例的监测、诊断进行分析,探讨脊灰疫苗相关病例的诊断标准及减少脊灰疫苗相关病例发生的策略。方法根据病例的急性驰缓性麻痹(AFP)专病管理系统资料、个案调查资料、预防接种相关资料、临床诊断治疗资料和脊灰实验室病毒检测结果等进行分析研究。结果依据WS294-2016《脊髓灰质炎诊断标准》,以及山东省处置类似病例的意见,菏泽市李××的最终诊断为确诊脊灰疫苗相关病例。结论现行的脊灰诊断标准仍需完善,应严格把握I+Ⅲ型脊灰减毒活疫苗接种禁忌症,进一步完善消灭脊灰免疫策略,减少脊灰疫苗相关病例的发生。