碱性成纤维细胞生长因子对内皮细胞在聚氨酯材料上粘附的影响

促进内皮细胞在聚氨酯材料上粘附是实现人工心和人工血管内皮细胞化的关键一环。用荧光法观察了碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）对内皮细胞在聚氨酯材料上粘附的影响。结果表明，ＦＮ实验组和Ⅳ型胶原实验组的细胞粘附率分别７１％和６８－５％，而对照组分别是６２－５％和５５－２５％，Ｐ均＜０－０５，表明ｂＦＧＦ能够促进内皮细胞在聚氨酯材料上的粘附。提示ｂＦＧＦ作为一种辅助因素加入培养基中将有助于实现人工心、血管聚氨酯材料的内皮细胞化。     

碱性成纤维细胞生长因子的生物活性分析

本文报告以人脐带内皮细胞原代培养技术,CAM及多聚物载体技术检测bFGF生物活性,结果表明bFGF是机体血管新生的强烈刺激剂。bFGF对血管、神经、结缔组织、骨与软骨细胞具有多向作用,深入研究其生物效应,对于促血管新生,动脉硬化及肿瘤防治,中枢神经创伤后修复,肢体再生,晶体再生,促创伤愈合,以及人工血管的开发应用等均具有重要的实际意义。     

碱性成纤维细胞生长因子骨诱导作用的研究进展

介绍碱性成纤维细胞生长因子对骨干细胞、成骨细胞、破骨细胞和血管形成的可能作用机理，及其与其它生长因子之间的相互作用。对碱性成纤维细胞生长因子骨诱导作用的研究进展进行综述。     

血小板源性生长因子对体外培养内皮细胞碱性成纤维细胞生长因子水平的影响

目的 :观察血小板源性生长因子 (PDGF)对于培养脐静脉内皮细胞碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)水平的影响 ,探讨PDGF促进新生血管形成的机制。方法 :通过内皮细胞的培养和免疫组织化学等方法检测PDGF对缺氧和常规培养内皮细胞bFGF水平的影响以及不同浓度PDGF促bFGF表达的作用。结果 :缺氧培养与常规培养均能增加内皮细胞胞浆bFGF水平 ,且呈剂量依赖性。结论 :PDGF可能通过直接促血管形成生长因子bFGF的介导作用间接促进新生血管的形成。     

碱性成纤维细胞生长因子骨诱导作用的研究进展

介绍碱性成纤维细胞生长因子对骨干细胞、成骨细胞、破骨细胞和血管形成的可能作用机理,及其与其它生长因子之间的相互作用。对碱性成纤维细胞生长因子骨诱导作用的研究进展进行综述。     

碱性成纤维细胞生长因子的研究进展

bFGF是一种作用广泛的细胞因子，其最显著的作用是促进细胞分裂，因此在肿瘤的发生发展、促进损伤组织修复等方面受到关注。除了通过经典的受体途径发挥作用外，高分子量bFGF还具有核转位现象，其核转位只发生在G1-S过渡期。应用酵母双杂交系统发现了能与bFGF发生相互作用的蛋白质，为研究bFGF作用的分子机制提供了有益的线索。     

双抗体夹心ELISA检测碱性成纤维细胞生长因子

碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）分布于几乎所有来源于中胚层和神经外胚层的组织中, 等电点9.6, 是相对分子质量（Mr）为18 000的单亚基多肽.bFGF在促进血管生成、创伤愈合、骨骼修复、神经营养与修复、眼晶体再生以及胚胎的发育与分化方面均显示出生物学活性[1, 2], 其生产和应用过程中需要高灵敏度的定量检测方法.1992年本室用鼠抗bFGF多克隆抗体（pAb）在国内首次建立了bFGF间接ELISA检测方法[3], 已经应用于bFGF生产过程中的质控和定量检测以及科学研究等工作.在此基础上, 用本室制备的bFGF单克隆抗体（mAb）与抗bFGF酶标pAb, 建立了bFGF双抗体夹心ELISA方法, 并对其重复性、精密度和适合性做了分析, 为bFGF的定量检测提供了有效的手段.……     

碱性成纤维细胞生长因子对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对瘢痕成纤维细胞生物学特性的影响。方法采用细胞培养、MTT、ELISA法、氯胺T和RT—PCR法检测bFGF在不同作用剂量下对瘢痕来源的成纤维细胞生长增殖和细胞外基质（ECM）合成的影响。结果（1）MTT检测bFGF对瘢痕成纤维细胞有明确的促增殖作用，并具有剂量相关性；（2）氯胺T法显示实验组和对照组HPr含量无显著性差异，RT—PCR法显示各组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达水平无明显变化；说明bFGF对瘢痕成纤维细胞胶原蛋白的合成无促进作用；（3）ELISA法表明随着bFGF作用浓度的升高，FN的表达表现为增高趋势，且以100ng／ml浓度下作用最显著。结论bFGF可以促进创面愈合，但不引起瘢痕的过度形成。     

碱性成纤维细胞生长因子抗体的研究进展

碱性成纤维细胞生长因子 (ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ)是一种重要的多肽生长因子 ,也是ＦＧＦ家族中原型成员之一。从 1 974年Ｇｏｓｐｏ ｄａｒｏｗｉｃｚ等[1 ] 从牛脑中分离出ＦＧＦ以来 ,近二十多年研究表明 ,ｂＦＧＦ在促进血管生成[2 ] 、创伤愈合[3] 、骨骼修复[4] 、神经营养与修复[5] 、眼晶体再生[6] 以及胚胎的发育与分化[7] 方面均显示出生物学活性。近年研究发现ｂＦＧＦ在恶性肿瘤组织中有强烈表达 ,并与肿瘤病理分级、分期呈正相关 ,同时血清中ｂＦＧＦ水平亦明显增高 ,这提示ｂＦＧ…     

生物可降解聚合物结合碱性成纤维细胞生长因子与内皮细胞的黏附

背景：可降解材料的应用是体外构建小口径组织工程血管的重要研究部分。如何对可降解材料进行改性,以利于材料本身体外抗凝与促进内皮细胞黏附,是目前血管组织工程研究的热点之一。 目的：利用可降解聚己内酯接枝肝素材料体外负载碱性成纤维细胞生长因子,观察其对于内皮细胞黏附的影响。 方法：应用聚己内酯可降解材料,将肝素活化后并与聚己内酯的端羟基发生酯化反应从而被锚定在聚己内酯两端。经过电纺丝技术,制备血管支架。同时利用肝素和生长因子间的静电吸附作用,使支架负载碱性成纤维细胞生长因子。采用低密度内皮细胞短期静态种植,观察负载细胞生长因子的可降解聚己内酯材料对内皮细胞生长黏附情况的影响。 结果与结论：成功地制备了负载成纤维细胞生长因子的可降解聚己内酯接枝肝素支架。内皮黏附实验证实,该支架利于内皮细胞黏附。提示可降解聚己内酯接枝肝素材料负荷碱性细胞生长因子支架对内皮细胞有很好的体外黏附性。     

力学刺激对角膜成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

目的研究在体及离体条件下不同力学环境对碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bF-GF)表达的影响,探索力学因素在准分子激光原位角膜磨镶术(laser assisted in situ keratomileusis,LASIK)术后角膜损伤修复中的作用。方法建立不同切削量的LASIK手术动物模型,使在体角膜处于不同力学环境中,并于LASIK术后1周和1月处死实验动物提取组织蛋白。此外,采用Flexcell 4 000细胞力学加载系统对原代提取的兔角膜成纤维细胞施加频率为0.1 Hz、拉伸幅度分别为5%、10%和15%的周期性机械拉伸,并于拉伸后6 h和24 h后取细胞培养液上清。采用ELISA方法检测bFGF含量。结果 LASIK术后1周,角膜基质床残余30%组与对照组相比,bFGF含量显著增高(P<0.05);术后1月回落至正常水平,各组之间无显著性差异。不同时间点同一手术方式之间比较发现,仅30%组1周和1月有显著差异(P<0.05)。体外周期性拉伸实验表明拉伸6 h后1,5%拉伸组bFGF含量较对照组显著增高(P<0.05)2,4 h后显著性降低(P<0.05)。结论力学因素参与了早期角膜组织及角膜成纤维细胞bFGF表达的调节,bFGF在LASIK术后角膜组织修复中发挥了一定作用。     

Proliferation of endothelial cells on surface-immobilized albumin-heparin conjugate loaded with basic fibroblast growth factor.

Seeding of endothelial cells (ECs) on the luminal surface of small-diameter vascular grafts is a promising method to avoid occlusion of these prostheses. Immobilization of basic fibroblast growth factor (bFGF) to substrates used to coat or fill porous prostheses may enhance the formation of a confluent monolayer of ECs. Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were grown on bFGF-loaded albumin-heparin conjugate bound to CO2 gas-plasma-treated polystyrene. In the order of 2-3 ng/cm2 bFGF had to be immobilized to form a confluent monolayer of HUVECs. The most prominent effect of surface-immobilized bFGF was stimulation of the proliferation shortly after seeding, resulting within 3 days in confluent cell monolayers with high density. In contrast, in cultures with 0.3 ng/mL bFGF in the medium instead of bFGF bound to the surface, it took almost a week before the cell layers reached confluency. Binding of bFGF to heparin and the biological activity of bFGF towards ECs were not influenced by the (radio-)labeling of bFGF with iodine. However, only a minor part of the bFGF used in this study displayed heparin affinity. Furthermore, degradation and multimerization of labeled bFGF in time occurred when the growth factor was stored at 20 degrees -37 degrees C. This limits the use of labeled bFGF to short-term (hours) experiments. In conclusion, bFGF loading of vascular graft surfaces through complexation of bFGF with a heparin-containing matrix probably will lead to more rapid formation of a confluent monolayer of ECs on graft surfaces upon seeding of the cells.     

基因重组碱性成纤维细胞生长因子对大鼠视网膜神经节细胞的影响

目的:研究基因重组碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)对大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)的影响。方法:大鼠在视神经部分损伤后,球后注射生理盐水、维生素B₁₂、rbFGF,伤后4周进行轴突定量、视网膜神经节细胞定量以及RGCs凋亡的检测,观察视神经损伤修复情况。结果:伤后4周时,生理盐水和维生素B₁₂对RGCs无挽救作用,800U、1600U和2400U的rbFGF对RGCs挽救率分别为24.5%、27.3%、28.5%,800UrbFGF组、1600UrbFGF组和2400UrbFGF组未发生溃变的轴突数分别是损伤未治疗组的2.03、2.43、2.31倍。流式细胞仪检测结果显示:rbFGF治疗7d后,RGCs凋亡率显著减少。结论:rbFGF可提高视网膜神经节细胞的存活率,减少轴突溃变,有抗凋亡作用,对视神经损伤有显著的促功能修复作用。     

人脐带血内皮祖细胞与血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子共培养及其增殖和迁移能力

背景：目前组织工程心脏瓣膜再内皮化种子细胞主要来源于成熟内皮细胞,内皮祖细胞作为内皮细胞的前体细胞越来越受到人们的关注。 目的：分离和扩增人脐带血内皮祖细胞,观测其体外生物学特性。 方法：密度梯度离心法分离新鲜的脐血中单个核细胞,在含血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的培养液中培养扩增,通过形态学、免疫荧光和流式细胞仪等对贴壁细胞进行鉴定;并与脐静脉内皮细胞进行增殖和迁移能力比较。 结果与结论：随着培养和诱导时间延长,贴壁细胞形态发生明显的改变,从小圆形变成梭形,逐渐分化成典型成熟内皮细胞的鹅卵石样形态,并可形成特征性的克隆;体外诱导7 d后90%以上贴壁细胞呈Dil-ac-LDL和FITC-UEA-I双阳性;贴壁细胞流式细胞仪分析显示：培养7 d的细胞VEGFR-2、CD34和CD133表达分别占(77.4±4.9)%、(52.4±6.6)%和(19.4±2.1)%,培养28 d的细胞VEGFR-2和CD34表达分别占(81.1±7.4)%和(7.6±3.1)%,而未检测到CD133表达;人内皮祖细胞增殖和迁移能力明显高于人脐静脉内皮细胞(P < 0.05),并且细胞数量可扩增达10⁹ L^-1。结果显示用密度梯度离心法和贴壁筛选法,可从人脐带血分离、纯化内皮祖细胞;内皮祖细胞可诱导分化为内皮细胞,增殖和迁移能力都很强。     

Plasma concentrations of vascular endothelial growth factor and basic fibroblast growth factor in lymphoproliferative disorders

Angiogenesis plays a major role in the development and progression of haematological malignancies. In our study we measured plasma concentrations of key angiogenic activators vascular endothelial growth factor (VEGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF) using comercially available sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in 37 patients with lymphoid malignancies and 20 healthy donors. We found a statistically significant increase in bFGF concentrations in patients with B-cell chronic lymphocytic leukemia (B-CLL, n=18) compared to the control group (median 118.8 vs. 9.3 pg/ml, p<0.001). However, we didn't find any significant difference in VEGF concentrations between B-CLL patients and the control group. There was also no significant increase in bFGF or VEGF in patients with multiple myeloma (n=7) and non-Hodgkin's lymphoma (n=12). Our pilot study shows that measurement of angiogenic activators in plasma is a feasible and reproducible method of angiogenesis assessment. Larger studies are needed for correlation between serum and plasma concentrations and detailed statistical evaluation including the impact on patients' survival.     

Expression of vascular endothelial growth factor and basic fibroblast growth factor in extramammary Paget disease

Extramammary Paget’s disease (EMPD) is a special type of cancers. The etiology of the disease is still unclear. We aimed to study the expression differences of vascular endothelial growth factor (VEGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF) in EMPD tissues and corresponding adjacent normal tissues. The mRNA expression was detected by RT-PCR and the protein expression was explored by immunohistochemistry. Higher immunostaining signal scores of bFGF and VEGF in EMPD tissues had been found (z = -3.827, P < 0.001, z = -3.729, P < 0.001, respectively). In addition, the mRNA expression of bFGF and VEGF was higher in EMPD tissues, which had been validated by RT-PCR (t = 5.771, P < 0.001, t = 3.304, P = 0.004, respectively). The VEGF and bFGF might be the key signaling proteins in angiogenesis of EMPD. How to block the VEGF and bFGF in EMPD and to destroy the blood supply of the tumor cells becomes the focus of our future research.     

碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子联合诱导骨髓基质细胞分化形成神经球

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)联合诱导骨髓基质细胞(MSCs)能否分化形成神经球。方法采用全骨髓法培养MSCs,bFGF和EGF联合诱导MSCs,倒置显微镜下观察分化细胞的形态,免疫荧光法和免疫印迹法鉴定分化细胞。结果 bFGF和EGF联合应用,可有效地诱导MSCs形成神经球。此神经球能传代并分化成神经元样细胞。免疫荧光和免疫印迹法均证实神经球表达nestin蛋白,神经球分化的细胞表达神经元、胶质细胞和少突胶质细胞标志性蛋白。结论 bFGF和EGF联合应用,可有效地诱导MSCs形成神经球。此神经球能自我更新并分化为神经元、胶质细胞和少突胶质细胞。     

Endothelial cells synthesize basic fibroblast growth factor and transforming growth factor beta

Endothelial cells, including human umbilical vein endothelial cells (HUVEC), bovine aortic endothelial cells (BAEC), and bovine capillary endothelial cells (BCEC) in culture synthesize basic fibroblast growth factor (bFGF) and transforming growth factor type beta (TGF-beta). Basic FGF was cell-associated and synthesis was demonstrated by (i) the presence of bFGF mRNA species, (ii) binding to heparin-Sepharose and elution at 1.5 M NaCl, (iii) cross-reactivity with anti-bFGF antibodies when analyzed by electrophoretic blotting, and (iv) biological activity. Basic FGF was found in cell lysates at 2.3 ng/10(6) cells in HUVEC, 2.0 ng/10(6) cells in BCEC, and 13 ng/10(6) cells in BAEC. TGF-beta was secreted into media, and synthesis was demonstrated by (i) presence of TGF-beta mRNA species, (ii) cross-reactivity with anti-TGF-beta antibodies when analyzed by immunoprecipitation, (iii) competitive binding with authentic human platelet-derived TGF-beta that was blocked by TGF-beta specific blocking antibodies, and (iv) inhibition of [3H]TdR incorporation in CCl-64 cells. TGF-beta was secreted in an inactive form and required acid activation for detection. HUVEC synthesized 2.0 ng TGF-beta/10(6) cells per 12 hr; BCEC, 3.5 ng; and BAEC, 3.5 ng. HUVEC proliferation was not affected by treatment with exogenous TGF-beta, while BCEC proliferation was decreased by treatment with TGF-beta. Vascular endothelium is thus a source for these two potent multifunctional regulatory molecules, both of which may affect the growth of endothelium and neighboring fibroblasts, smooth muscle cells and white blood cells. The activation or release of these factors by endothelium may be a precipitating event in important cellular processes such as wound healing, organogenesis, and angiogenesis.     

重组人骨形态发生蛋白2与碱性成纤维细胞生长因子联合促进兔骨髓基质细胞血管内皮细胞生长因子表达及其成骨潜能

背景：了解在体外或体内环境下,应用重组人骨形态发生蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子,能否达到既加强成骨又促进血管内皮细胞生长因子表达的双重作用。 目的：观察兔骨髓基质细胞经重组人骨形态发生蛋白2与碱性成纤维细胞生长因子刺激后,其血管内皮细胞生长因子表达及成骨潜能的变化。 方法：取兔双侧股骨骨髓基质细胞,采用骨髓基质细胞体外培养技术,单独或联合以重组人骨形态发生蛋白2、碱性成纤维细胞生长因子刺激细胞。细胞培养5 d后,进行细胞形态、增殖情况、碱性磷酸酶活性、成骨结节、血管内皮细胞生长因子阳性细胞率等项目的检测。 结果与结论：联合先后应用重组人骨形态发生蛋白2、碱性成纤维细胞生长因子在细胞计数、碱性磷酸酶活性、矿化面积百分率、血管内皮细胞生长因子阳性细胞率4个检测项目上优于同时应用重组人骨形态发生蛋白2或碱性成纤维细胞生长因子以及单独应用重组人骨形态发生蛋白2或碱性成纤维细胞生长因子。结果表明合理的联合使用重组人骨形态发生蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子,不仅可促进骨髓基质细胞的快速增殖及向成骨细胞转化,还可促进促血管内皮细胞增生的重要介质血管内皮细胞生长因子的表达。