内关穴位埋针心肌缺血损伤小型猪血管生长功能性基因的表达谱

背景：内关针刺可上调相关血管生长因子的表达,但血管新生相关生长因子较多,针对部分因子研究有局限性。 目的：观察心肌缺血损伤小型猪血管生长功能性基因表达谱特征及内关穴位埋针的干预效应。 方法：将32只小型猪随机分为4组,模型组采用左冠状动脉前降支结扎法建立小型猪心肌缺血模型,内关组和膈俞组分别在造模基础上进行内关、膈俞穴埋针治疗,假手术组穿线不结扎。埋针7 d后取各组小型猪的缺血心肌组织进行实验。 结果与结论：应用Q Series血管生长功能基因组表达谱芯片共检测到96个与血管生成功能密切相关的基因。与模型组比较,内关组显著上调基因17个,下调基因3个,膈俞组显著上调基因14个,下调基因2个。就其基因功能分类而言,内关组、膈俞组与模型组比较差异表达基因各有其自身特点,但特异的促进因子和抑制因子、血小板衍生生长因子及受体、成纤维细胞生长因子及受体、生长因子及受体以及其他细胞生长因子,细胞因子和化学增活素、基质蛋白酶及抑制剂以及其他相关基因是各组共有的,其中以血管生长因子及受体最多。说明心肌缺血以及穴位埋针后的干预均与血管生长因子差异表达有关,但内关埋针与膈俞埋针作用不完全相同。     

碱性成纤维细胞生长因子mRNA表达与微血管密度和胃癌的发展及预后

我们应用原位分子杂交和免疫组织化学技术检测人胃癌组织中碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)表达和微血管密度 (ＭＶＤ) ,分析ｂＦＧＦ与ＭＶＤ及其与胃癌各临床病理指标和预后的关系。一、材料与方法1.组织材料 :1986～ 1996年本院外科切除胃癌标本 12 4例 ,所有标本均经常规甲醛固定 ,石蜡包埋 ,连续切片 ,分别供ＨＥ、原位分子杂交检测和免疫组织化学染色 ,选择正常胃黏膜 2 0例作为对照。2 .临床资料 :本组 12 4例胃癌标本 ,手术前均未行放化疗。按ＷＨＯ 1997年胃癌分类标准 :乳头状腺癌 2 2例 ,管状腺癌 5 5例 ,黏液腺癌 6例 ,印戒…     

血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子在急性白血病患儿血清中的表达及意义

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子( bFGF)急性白血病(AL)患儿血清中的表达及其与临床意义.方法:采用ELISA方法检测40例初治AL患儿化疗前及治疗1疗程后37例患儿和40例健康儿童血清中VEGF和bFGF的水平.结果:治疗前,AL组以及ALL组、ANLL组血清VEGF和bFGF水平均显著高于对照组(P＜0.05),而血清VEGF和bFGF水平在AL不同类型之间差异无统计学意义(P＞0.05).治疗前,AL缓解(CR)和未缓解(NR)患儿血清VEGF和bFGF水平差异无统计学意义;治疗后,CR患儿血清VEGF和bFGF水平显著下降,与治疗前和NR患儿比较均有显著性差异(P＜0.05);而NR患儿治疗前后血清VEGF和bFGF水平差异无统计学意义.结论:VEGF和bFGF在AL患儿血清中呈高表达,血清VEGF和bFGF水平可作为AL患儿疗效观察指标,并且与患儿的预后有关.     

成纤维细胞生长因子和丹参对实验性心肌缺血再灌注损伤的预防作用

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和丹参（SM）对缺血再灌注心肌组织脂质过氧化反应的预防作用。方法采用新西兰长耳大白兔,心脏左前支冠状动脉结扎,制作心肌缺血动物模型。观察经bFGF和SM预处理的缺血再灌注2 h的心肌组织中琥珀酸脱氢酶（SDH）、脂质过氧化代谢产物MDA含量;抗脂质过氧化酶性指标超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHpx）活性和非酶性指标MDA、还原性谷胱甘肽（GSH）、一氧化氮（NO）含量。结果bFGF和SM联合预处理组心肌中SDH、SOD、GSHpx活性明显高于缺血再灌注组,抗氧化物GSH和NO的含量明显高于缺血再灌注组,心肌病理改变明显好于未用bFGF和SM组。而MDA的含量比未用SM和bFGF组低。尤其是bFGF和SM联合用药效果更为明显。结论bFGF和SM能有效地减轻心肌缺血再灌注所致的损伤,二者联合使用的抗氧化效果好于单独使用。     

碱性成纤维细胞生长因子及其受体与中枢神经系统损伤后的修复

碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）及其受体（ｂＦＧＦ系统）在各胚层来源细胞的行为调节过程中具有重要地位。中枢神经系统（ＣＮＳ）损伤后，脑内ｂＦＧＦ系统活化，以旁分泌和自分泌的方式发挥神经营养作用，有利于ＣＮＳ损伤后修复     

雌激素和表皮生长因子对成纤维细胞活性的调节作用及机制

探讨在创面皮肤中,雌激素和表皮生长因子对表皮成纤维细胞活性的调节作用及其可能机制。方法分离培养表皮成纤维细胞,分四组,分别对细胞单独和联合应用雌激素、表皮生长因子进行共培养和预处理(10-7mol/L雌激素组、20 ng/ml表皮生长因子组、联合组和对照组),培养24 h、36 h和72 h时检测细胞的生物活性,采用p半乳糖苷酶染色法检测成纤维细胞衰老情况,并采用Western blot检测细胞周期蛋白cyclin D1和凋亡蛋白P53的表达。结果各组细胞共培养24 h后,细胞增殖活性增强,衰老减弱,并且随时间延长而变化明显,具有时间依赖性,其中联合组的变化最为明显,与其他组比较差异具有统计学意义(P<0.05);western blot显示联合组cyclin D1表达增加,P53的表达水平下降最为明显(P<0.05)。结论雌激素和表皮生长因子可调节成纤维细胞的活性,其可能通过下调P53的表达和上调细胞周期蛋白cyclin D1的表达而促进表皮纤维细胞的增殖和减少凋亡。     

乙酰肝素酶、碱性成纤维细胞生长因子在胃癌中表达及对血管新生和肿瘤进展的影响

目的：探讨乙酰肝素酶(Hpa)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在胃癌组织中表达及其对血管新生和肿瘤生物学行为的影响。方法：应用免疫组化SABC法检测60例胃癌组织中Hpa、bFGF表达及计数肿瘤微血管密度(MVD)。结果：Hpa、bFGF表达和MVD、浸润深度、TNM分期和淋巴结转移有关，且Hpa、bFGF共表达病例有更高MVD与单独一种阳性表达相比。Hpa表达和bFGF表达呈正相关。结论：Hpa、bFGF可加速肿瘤浸润和转移，促进肿瘤间质微血管生成。且Hpa、bFGF在促进肿瘤间质微血管生成方面有协同作用。     

胎儿巩膜碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β表达的研究

目的 观察不同胎龄胎儿眼球巩膜碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子β(TGF-β)的表达情况,了解bFGF和TGF-β在正常眼球发育过程中的作用及变化规律.方法 收集12～20周米非司酮配伍米索前列醇或利凡诺羊膜腔注射引产的胎儿20例,其40只眼,立即摘除眼球,取4～5mm范围巩膜,用实时定量PCR方法检测巩膜bFGF和TGF-β的表达情况.结果 各胎龄阶段巩膜bFGF均有表达,胎龄12～14周时表达最高.以后逐渐下降并保持稳定水平,各胎龄阶段巩膜均有TGF-β表达,胎龄12周时表达较低,以后逐渐升高并保持稳定水平.结论 各胎龄阶段胎儿巩膜均有bFGF和TGF-β的表达,bFGF和TGF-β的表达水平随着胎龄的变化而变化.     

巴马小型猪胎儿成纤维细胞重编程为诱导多能性细胞的研究

目的探讨巴马小型猪胎儿成纤维细胞重编程为诱导多能性细胞的方法。方法应用经典的逆转录病毒介导方法,将Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4四种人源性转录因子转导入巴马小型猪的胎儿成纤维细胞中,建立形态和特征类似猪上胚层细胞来源的猪多能性细胞(pig induced pluripotent cells,piPCs)。免疫荧光化学方法检测多能性细胞标记物,RT-PCR检测了该细胞体外三胚层相关基因表达水平。结果巴马小型猪胎儿成纤维细胞重编程的piPCs细胞呈AKP染色阳性,体外长期传代都保持正常的染色体核型,猪上胚层多潜能性细胞标记分子Oct4,Sox2,Nanog,Tra-1-60,Tra-1-81和SSEA-4呈阳性表达,并且表达小鼠胚胎干细胞(ES)多潜能性细胞标记分子SSEA-1,体外诱导分化后具有三胚层特异基因的表达,但是体内分化能力存在缺陷。结论巴马小型猪胎儿成纤维细胞重编程成功诱导成多能性细胞。     

碱性成纤维细胞生长因子促进血管性痴呆大鼠音猬蛋白的表达

目的:检测音猬蛋白(Shh)在血管性痴呆海马组织神经干细胞中的表达及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对其的影响.探讨bFGF影响神经干细胞增殖分化的分子调控机制.方法:采用大脑中动脉栓塞(MCAO)制作大鼠血管性痴呆模型,免疫组织化学检测海马神经干细胞BrdU、Shh的表达及bFGF的作用.结果:脑缺血再灌注第3天缺血海马神经元BrdU阳性细胞较假手术组明显增多,第7天达高峰.Shh反应产物脑缺血再灌注第3天较假手术组增多,随缺血再灌注时间的延长逐渐增多,第14天开始减少.注射bFGF后BrdU、Shh的表达较模型组明显增加.结论:bFGF促进神经干细胞的增殖及缺血脑组织Shh的表达,提示bFGF促进神经干细胞增殖作用可能由Shh信号介导.     

急性心肌梗死模型大鼠经血管内皮生长因子121基因治疗后的血管新生☆

背景：血管内皮生长因子121可能是基因治疗急性心肌梗死的合适目的基因之一。 目的：观察直接心肌注射重组腺病毒人血管内皮生长因子121基因(Ad-hVEGF121)对心肌梗死大鼠心脏结构、功能及新生血管影响。 方法：将78只SD大鼠随机分为假手术组(n=18)、心肌梗死组(n=24)、Ad-hVEGF121组(n=19)和生理盐水组(n=17),后3组大鼠经结扎左冠状动脉前降支,建立急性心肌梗死模型。Ad-hVEGF121组和生理盐水组结扎后10~15 min分别在心肌三点注射Ad-hVEGF12和生理盐水。假手术组只开胸,不结扎左冠状动脉前降支。 结果与结论：注射后2周治疗组行心脏超声检查,发现相比于假手术组,心肌梗死组、Ad-hVEGF121组和生理盐水组大鼠心肌新生毛细血管数量、体质量和左心室质量/体质量明显增加(P < 0.05或P < 0.01),且转染rAd-VEGF基因后心肌组织毛细血管密度显著高于生理盐水组和心肌梗死组。但4组大鼠的梗死面积、心脏结构和功能接近。提示直接心肌注射Ad-VEGF121能明显促进心肌内新血管形成。     

Hepatocyte growth factor gene therapy reduces ventricular arrhythmia in animal models of myocardial ischemia

It was recently reported that gene therapy using hepatocyte growth factor (HGF) has the potential to preserve cardiac function after myocardial ischemia. We speculated that this HGF gene therapy could also prevent ventricular arrhythmia. To investigate this possibility, we examined the antiarrhythmic effect of HGF gene therapy in rat acute and old myocardial infarction models. Myocardial ischemia was induced by ligation of the left descending coronary artery. Hemagglutinating virus of Japan (HVJ)-coated liposome containing HGF genes were injected directly into the myocardium fourteen days before programmed pacing. Ventricular fibrillation (VF)was induced by programmed pacing. The VF duration was reduced and the VF threshold increased after HGF gene therapy ( p< 0.01). Histological analyses revealed that the number of vessels in the ischemic border zone was greatly increased after HGF gene injection. These findings revealed that HGF gene therapy has an anti-arrhythmic effect after myocardial ischemia.     

大鼠在体心肌缺血再灌注损伤细胞膜钙转运通道蛋白mRNA的表达变化

目的 探讨大鼠心肌在体缺血再灌注(IR)损伤后细胞膜钙转运通道蛋白的mRNA变化对钙超载的作用。方法 12只SD大鼠按随机数字法分为IR组和对照组。IR组通过结扎（缺血20 min）后松解(再灌注60 min)前降支造成心肌IR,对照组则免除结扎松解前降支。应用生理记录仪连续监测两组大鼠缺血开始前及再灌注60 min后心率、平均动脉压等血流动力学指标。全自动生化仪检测缺血前及再灌注60 min后两组大鼠血钙及肌钙蛋白T(cTnT)的水平。荧光定量PCR检测再灌注60 min后两组大鼠左心室缺血区和右心室心肌细胞膜钙转运通道蛋白即心肌细胞膜钠钙交换器1(NCX1),L型钙通道(LVDCC)α-1C和胞膜钙转运ATP酶1(PMCA1 )mRNA的表达。结果两组大鼠缺血前的心率、平均动脉压均高于再灌注60 min后,而两组间缺血前和再灌注60 min后的心率、平均动脉压差异则无统计学意义。两组血浆Ca2+浓度在缺血前与再灌注60 min后差异无统计学意义,同时间点两组之间的差异也没有统计学意义。缺血前IR组与对照组血浆cTnT浓度水平相近,缺血60 min后IR组血浆cTnT浓度较对照组升高[(4.29±2.22) μg/L比(1.62±0.60)μg/L,P=0.031];两组血浆cTnT浓度在缺血前与再灌注60 min后差异也有统计学意义（均P＜0.05）。NCX1,LVDCCα-1C和PMCA1的mRNA表达在再灌注60 min后同心室两组间和同组内左右心室之间的差异均无统计学意义（NCX1：对照组左心室为50±4,右心室为47±9;IR组左心室为55±6,右心室为53±11;LVDCCα-1C:对照组左心室为33±7,右心室为30±7;IR组左心室为28±3,右心室为37±5;PMCA1,对照组左心室为70±10,右心室为53±11;IR组左心室为66±12,右心室为78±8;均P＞0.05）。结论 大鼠在体心肌缺血20 min再灌注60 min后,NCX1、LVDCCα-1C和PMCA1的mRNA表达水平均无显著改变,提示钙超载并非由细胞膜钙转运通道蛋白数量改变引起。     

Placental vascular endothelial growth factor receptor system mRNA expression in pigs selected for placental efficiency

Selecting Yorkshire breeding stock for increased placental efficiency (PE; piglet weight divided by its placental weight) results in larger litters (i.e. ∼3 more piglets litter⁻¹) and reduced placental sizes. Placental vessel density increases progressively after day 50 of gestation in the pig, and is positively correlated with PE and placental expression of vascular endothelial growth factor (VEGF), a potent angiogenic and permeability factor. To elicit its vascular effects, VEGF must bind to its receptors (R), VEGF-R1 and VEGF-R2. The objective of this study was to compare placental and endometrial blood vessel density and placental VEGF, VEGF-R1 and VEGF-R2 mRNA expression in day 70 and 90 conceptuses from Yorkshire females selected for high PE, low PE, and from unselected controls. A greater ( P < 0.05) PE was observed for conceptuses in the high PE selection group when compared to the low PE selection group. Placental blood vessel density increased ( P < 0.05) from day 70 to 90 (1.8 ± 0.1 versus 2.8 ± 0.2) in association with increases ( P < 0.05) in placental VEGF mRNA expression. No selection group differences were observed in expression of VEGF, VEGF-R1, or VEGF-R2 on day 70. By day 90, however, placentae of conceptuses from the high PE group expressed greater ( P < 0.05) amounts of VEGF and VEGF-R1 mRNA than the unselected controls and the low PE group. These data demonstrate that increased placental expression of the VEGF receptor system is associated with increased placental vascular density observed with the advancement of gestation in the pig. Although placental blood vessel density was not increased in the high PE selection group, elevated levels of the VEGF receptor system suggest an effect on increasing placental and endometrial blood vessel permeability and/or proximity in the high PE group.     

内源性碱性成纤维细胞生长因子是大鼠对抗心脏缺血/再灌注损伤的保护因子

目的:观察内、外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在大鼠心脏缺血/再灌注(I/R)损伤中的作用.方法:在大鼠离体心脏I/R模型上分别给以bFGF和bFGF抗血清,以生理多导仪测定心率、±LV dp/dtmax及左心室终末舒张压(LVEDP)变化,并测定冠脉流量、冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量、乳酸盐脱氢酶(LDH)活性以及心肌组织钙、丙二醛(MDA)、三磷酸腺苷(ATP)含量和蛋白激酶(PKC)、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性.结果:I/R组心功能显著低于对照组,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量、LDH活性及心肌MDA、钙含量显著升高,ATP含量显著降低(均P＜0.01).bFGF组±LV dp/dtmax较I/R组分别高42.8%和25.6%,LVEDP低40.0%,再灌末心率/预灌末心率(HRr/HRi)及冠脉流量的(B/A)分别高42.3%和20.3%,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量及LDH活性分别少28.8%、30.2%(均P＜0.01)和32.3%(P＜0.05),心肌MDA和钙含量分别少44.4%和35.6%,ATP含量高33.8%.心肌PKC、MAPK活性分别高41.3%和10.1%(均P＜0.01);bFGF抗血清组±LV dp/dtmax较I/R组分别低35.1%和38.1%,LVEDP高92.5%,HRr/HRi及冠脉流量的B/A分别少36.0%和45.4%,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白和LDH漏出分别多54.3%、96.2%和34.4%,心肌MDA和钙含量分别高23.6%和49.7%,ATP含量低27.8%,心肌PKC及MAPK活性分别低20.9%和7.7%(均P<0.01).结论:内源性bFGF是大鼠对抗心脏缺血/再灌注损伤的保护因子.     

脑缺血再灌注模型大鼠跑台运动后海马神经再生和血管内皮生长因子mRNA的变化

背景：研究表明跑台运动能促进健康大鼠海马的神经细胞再生。 目的：观察跑台运动对脑缺血再灌注模型大鼠海马神经再生和血管内皮生长因子mRNA表达的影响。 方法：用线栓法阻塞大脑中动脉以建立单侧脑缺血再灌注模型大鼠,将建模成功大鼠随机分为跑台运动组和安静对照组,另设假手术组。安静对照组和假手术组大鼠安静饲养,跑台运动组进行7 d跑台运动。跑台运动组和安静对照组大鼠在每天跑台运动前腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷溶液。 结果与结论：免疫组织化学染色结果显示,跑台运动组大鼠双侧海马及齿状回5-溴脱氧尿嘧啶核苷阳性表达细胞数量显著多于安静对照组(P < 0.01)。实时荧光定量PCR检测结果显示,跑台运动组大鼠海马血管内皮生长因子mRNA表达水平显著高于安静对照组和假手术组(P < 0.05)。结果证实,跑台运动能够明显促进脑缺血再灌注大鼠海马神经细胞的再生并上调海马组织血管内皮生长因子的表达。     

内源性碱性成纤维细胞生长因子是大鼠对抗心脏缺血/再灌注损伤的保护因子

目的:观察内、外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在大鼠心脏缺血/再灌注(I/R)损伤中的作用。方法:在大鼠离体心脏I/R模型上分别给以bFGF和bFGF抗血清,以生理多导仪测定心率、±LVdp/dt_max及左心室终末舒张压(LVEDP)变化,并测定冠脉流量、冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量、乳酸盐脱氢酶(LDH)活性以及心肌组织钙、丙二醛(MDA)、三磷酸腺苷(ATP)含量和蛋白激酶(PKC)、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性。结果:I/R组心功能显著低于对照组,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量、LDH活性及心肌MDA、钙含量显著升高,ATP含量显著降低(均P＜0.01)。bFGF组±LVdp/dt_max较I/R组分别高42.8％和25.6％,LVEDP低40.0％,再灌末心率/预灌末心率(HRr/HRi)及冠脉流量的(B/A)分别高42.3％和20.3％,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量及LDH活性分别少28.8％、30.2％(均P＜0.01)和32.3％(P＜0.05),心肌MDA和钙含量分别少44.4％和35.6％,ATP含量高33.8％。心肌PKC、MAPK活性分别高41.3％和10.1％(均P＜0.01);bFGF抗血清组±LVdp/dt_max较I/R组分别低35.1％和38.1％,LVEDP高92.5％,HRr/HRi及冠脉流量的B/A分别少36.0％和45.4%,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白和LDH漏出分别多54.3%、96.2%和34.4%,心肌MDA和钙含量分别高23.6%和49.7%,ATP含量低27.8%,心肌PKC及MAPK活性分别低20.9%和7.7%(均P<0.01)。结论:内源性bFGF是大鼠对抗心脏缺血/再灌注损伤的保护因子。     

电针上调脊髓损伤后大鼠c-fos mRNA及其蛋白的表达

目的:探讨电针对大鼠脊髓损伤后c-fos mRNA及蛋白表达的影响.方法:将SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,采用改良Allen氏重物坠落法制成脊髓损伤模型.分别在1、2、3、5和7d处死动物,使用实时荧光定量PCR技术检测c-fos mRNA表达;使用免疫组织化学显色结合图像定量分析方法检测c-fos蛋白表达.结果:实时荧光定量PCR结果显示,模型组c-fos mRNA表达呈现升高趋势,电针能够促进这种趋势,在术后1d和3d与模型组比较,差异具有统计学意义.免疫组织化学结合图像分析结果显示,模型组c-fos蛋白表达升高趋势较为明显,电针促进这种趋势,且在术后2d与模型组比较,差异具有统计学意义.结论:电针能够促进脊髓损伤后大鼠脊髓损伤部cfos mRNA及蛋白的表达.