软骨组织工程种子细胞及预防其老化的研究进展

软骨组织的修复和再生能力较弱，加之软骨种子细胞易于老化，这些因素限制着软骨组织工程在临床的应用。本就近年来有关软骨组织工程种子细胞的建立及延缓和预防软骨种子细胞老化的研究进展和前景作一综述。     

软骨组织工程种子细胞的基础和应用研究进展

软骨种子细胞的老化和缺乏是限制软骨组织工程在临床应用的瓶颈问题。本文概述了目前对软骨种子细胞研究的两个方面 :扩大种子细胞的来源及预防和延缓种子细胞功能老化 ,并展望软骨组织工程在监床的应用前景。     

软骨组织工程种子细胞及预防其老化的研究进展

软骨组织的修复和再生能力较弱,加之软骨种子细胞易于老化,这些因素限制着软骨组织工程在临床的应用.本文就近年来有关软骨组织工程种子细胞的建立及延缓和预防软骨种子细胞老化的研究进展和前景作一综述.     

组织工程软骨研究进展

组织工程学是 2 0世纪 80年代末期发展起来的一门新兴边缘学科。它是综合应用工程学和生命科学的基本原理、理论和技术 ,在体外预先构建有生命的种植体 ,然后植入体内修复组织缺损 ,替代组织器官的一部分或全部功能。软骨为单一细胞 (软骨细胞 )构成组织 ,透明软骨、弹性软骨和纤维软骨组成人体重要结构 ,具有十分重要的生理功能。组织工程软骨是第一个组织工程化组织 ,在矫形外科和整形外科领域 ,组织工程软骨研究受到高度重视 ,发展迅速。本文介绍矫形外科领域中组织工程软骨研究发展。1　种子细胞1 1　软骨细胞多数研究以软骨细胞为种子…     

软骨组织工程种子细胞的基础和应用研究进展

软骨种子细胞的老化和缺乏是限制软骨组织工程在临床应用的瓶颈问题。本概述了目前对软骨种子细胞研究的两个方面，扩大种子细胞的来源及预防和延缓种子细胞功能老化，并展望软骨组织工程在临床的应用前景。     

骨、软骨组织工程种子细胞及其免疫学相关研究进展

近年来,细胞生物与生物材料学的迅速发展加快了骨、软骨组织工程的研究.骨、软骨组织工程的系列研究中,种子细胞是骨、软骨组织工程研究的核心内容.本文就骨、软骨组织工程的种子细胞成骨细胞、软骨细胞、骨髓基质细胞、间充质干细胞、胚胎干细胞及其免疫学相关研究进展作一讨论.     

人类软骨糖蛋白39诱导关节软骨祖母细胞的成软骨分化

背景：有研究表明人类软骨糖蛋白39与骨关节软骨的退变与修复具有一定的关系,但其具体的作用机制并不十分明确。 目的：观察人类软骨糖蛋白39对成人膝关节软骨祖母细胞成软骨诱导分化的影响。 方法：取成人关节软骨,消化分离培养关节软骨祖母细胞;流式细胞仪检测传代细胞中能够表达CD105、CD166的细胞量并进行分离提纯。将分离的软骨祖母细胞采用单层培养法培养,传代培养至第2代后向分离培养所得的软骨祖母细胞中,分别经过含人类软骨糖蛋白39成软骨培养基及普通成软骨诱导培养基的诱导培养14 d后,通过免疫组织化学染色观察经诱导后细胞中Ⅱ型胶原的表达及通过大体组织学观察评估软骨的形成。 结果与结论：关节软骨组织中可以分离出能够表达CD105、CD166的关节软骨祖母细胞,软骨祖母细胞经过诱导分化后逐渐聚集并形成结节,经诱导后Ⅱ型胶原免疫细胞化学着色阳性,且经人类软骨糖蛋白39诱导细胞形成的结节更大,Ⅱ型胶原表达更多。结果表明,成人关节软骨中能够分离培养出具有成软骨分化能力的干细胞系细胞即软骨祖母细胞,且能够被定向诱导分化为软骨细胞,人类软骨糖蛋白39对其分化过程具有一定的促进作用。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

关节软骨缺损的组织工程修复

背景：软骨组织工程主要由种子细胞、生物支架、生长因子3方面组成,如何完善软骨组织工程修复一直是科研工作者研究的重点。 目的：全面了解应用软骨组织工程修复软骨损伤的研究现状。 方法：计算机检索PubMed和CNKI数据库中2005/2010相关文献。以“Cartilage, tissue engineering, repair”或“关节软骨、组织工程、修复”为检索词进行检索。纳入与软骨组织工程密切相关的文献,排除重复性研究。 结果与结论：共检索到167篇文献,排除无关重复的文献,保留20篇文献进行综述。研究认为种子细胞是软骨组织工程最关键的方面,包括软骨细胞、骨髓间充质干细胞、胚胎干细胞和通过基因工程得到的种子细胞。目前应用最多、应用前景最好的是骨髓间充质干细胞。生物支架经历了一个漫长的过程,趋向于复合性和功能性的方向发展。各种生长因子在组织工程中必不可少。转化生长因子、胰岛素样生长因子、骨形态发生蛋白等在软骨修复中发挥了重要的功能。     

软骨组织工程研究进展

软骨组织工程技术,结合生物、工程、医学与科学,以构建有功能的组织替代损伤组织为目标。本文从支架材料、种子细胞的来源及体外培养、生长因子和生物学评价几个方面中综述了软骨组织工程的进展,并提出了一些尚待解决的问题。     

壳聚糖在软骨组织工程的应用

软骨组织工程的出现，为解决软骨修复这个临床难题提供了新的方案，然而目前软骨组织工程的热点在于寻找一种合适的生物载体材料。壳聚糖（chitosan)，一种人工合成的多聚糖材料，具有良好的生物相容性，可降解性和生物活性，可作为细胞三维生长支架，维持种子细胞新陈代谢和生长表型。本将就壳聚糖的理化特性，生物活性和在软骨组织工程方面应用的状况及前景作一综述。     

脂肪组织来源种子细胞的获取和分化潜能

背景：组织工程中种子细胞以骨髓干细胞居多,但随着其来源有限,提取创伤大等一系列问题的限制,研究人员开始寻找其他的种子细胞。脂肪组织以其丰富的来源、提取方便等优势逐渐得到重视。以脂肪组织为来源的种子细胞可能将具有广阔的应用前景。 目的：综述脂肪组织来源的种子细胞的研究进展。 方法：由第一作者应用计算机检索2000/2010 PubMed数据库及重庆维普数据库有关脂肪干细胞获取和分化能力以及去分化脂肪细胞、诱导多能干细胞等在相关组织工程中应用前景方面的文献。      结果与结论：脂肪组织因其丰富的来源,便捷的取材方法和较高的干细胞含量使其相比骨髓更适合作为组织工程中种子细胞的供体。目前研究较多的是脂肪干细胞,近年来随着“去分化”和基因转导技术的日益发展,去分化脂肪细胞和多潜能诱导干细胞的获取和生物学性能研究也有了较大的进展。作为种子细胞,3种细胞有着各自的优势和缺陷,但均可来源于脂肪组织,对其各自的获取方法和诱导分化潜能的研究比对,有助于人们在组织工程应用中对种子细胞的选择。       

CD146阳性亚群有作为软骨组织工程种子细胞的应用潜力

文题释义：CD146：也称为MUC18,MCAM,Mel-CAM或S-Endo1,是一种跨膜糖蛋白,同时属于免疫球蛋白超级家族的一员。在人体组织中,CD146阳性细胞被认为是微血管的壁细胞,其具有较强的增殖、迁移及自我更新能力。 组织工程种子细胞：组织工程包括3个关键要素——种子细胞、支架和活性因子,其中种子细胞应具有良好的细胞活性、增殖能力、分化及合成基质等生物功能。 背景：再生医学的发展、组织工程技术的出现为软骨缺损重建提供了新的解决思路。在组织工程中,间充质干细胞是应用广泛的种子细胞,然而干细胞作为一个异质性的细胞群体其不同亚群发挥着不同的功能。因此,应用间充质干细胞关键功能亚群进行软骨修复具有广泛应用前景。 目的：从人脂肪间充质干细胞中分离出CD146阳性亚群细胞,验证其生物学特性及其作为软骨组织工程种子细胞的潜力。 方法：人脂肪间充质干细胞由浙江金时代生物技术有限公司提供,通过流式细胞术对人脂肪间充质干细胞表面标志物进行鉴定,应用免疫磁珠分选方法从人脂肪间充质干细胞中分选出CD146阳性表达的细胞亚群。通过基因芯片检测技术及生物信息学分析技术揭示2种细胞的分子特性;体外诱导2种细胞成软骨分化并进行鉴定;冻存复苏前后检测2种细胞的细胞活性及凋亡情况。 结果与结论：①人脂肪间充质干细胞表达高水平干细胞相关标志物CD73、CD90,不表达造血干细胞相关标志物CD34、CD45、HLA-DR;②生物信息分析结果表明CD146阳性亚群细胞与脂肪间充质干细胞相比在炎症通路及骨骼肌肉系统疾病有不同功能;③CD146阳性亚群细胞能够成球软骨分化,并且其成软骨分化能力要优于人脂肪间充质干细胞;④CD146阳性亚群细胞复苏后凋亡情况和活性均要优于人脂肪间充质干细胞;⑤结果表明,CD146阳性亚群细胞具有良好的成软骨分化潜力,是一种具有前景的软骨组织工程种子细胞。 ORCID: 0000-0003-4210-4708(眭翔) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

人骨髓间质干细胞作为骨、软骨组织工程种子细胞的实验研究

目的 :探讨经体外扩增、诱导分化的人骨髓间质干细胞(humanbonemarrowmesenchymalstemcells,hMSC)作为组织工程化骨、软骨种子细胞的可行性。方法 :体外分离、培养、扩增hMSC ,以流式细胞仪检测hMSC的表面抗原。诱导hMSC向成骨细胞、软骨细胞分化。以倒置显微镜和电子显微镜观察细胞的形态 ;以组织化学、免疫组织化学和RT PCR ,检测成骨细胞、软骨细胞的特异性标志物。结果 :分离得到的细胞可表达hMSC的特异抗原 ,在体外扩增 15代以上 ,其形态及表面抗原保持不变。成骨诱导培养的细胞上清液中ALP的含量高于对照组 (P <0 .0 5 )。成骨及成软骨诱导的细胞形态均由成纤维样梭形向多边形转变。透射电镜观察可见大量扩张的粗面内质网、高尔基体及线粒体。扫描电镜观察可见经成骨诱导后的细胞表面有钙盐沉积 ,成软骨诱导的细胞表面有胶原样突起。成骨诱导培养后 ,可见碱性磷酸酶 (ALP)染色、Ca结节染色、胶原 Ⅰ (COL Ⅰ )及骨钙素 (osteocalcin ,OC)免疫组化染色阳性 ,同时RT PCR检测COL Ⅰ、OCmRNA表达阳性。成软骨诱导后 ,甲苯胺蓝染色见细胞周围有大量的异染性基质 ,免疫组化和RT PCR检测COL Ⅱ表达阳性。结论 :hMSC在体外可大量扩增。在特定培养液诱导下 ,可向成骨细胞及软骨细胞转化 ,可作为骨、软骨组     

脂肪干细胞在软骨组织工程中的应用

软骨是最早应用组织工程技术成功构建的组织之一,但由于缺乏合适的软骨构建种子细胞,因此其发展相对落后。随着干细胞研究的兴起,脂肪干细胞（ASC）因其具有分布广泛、可利用细胞量大、取材容易等优点,为ASC作为种子细胞应用于组织工程研究提供了可能;但是ASC构建软骨组织的效果却不如骨髓间充质干细胞（BMSC）理想。因此ASC在软骨组织工程中的应用仍面临着诸多问题与挑战,其中最核心的问题是如何提高ASC成软骨的效率。为此从如何纯化脂肪来源细胞、尽可能保持其中干细胞的生物学特性并优化软骨诱导方案3个方面予以综述,为提高ASC成软骨的效率提供参考。     

骨髓间充质干细胞于软骨组织工程的应用

关节软骨缺损在骨科临床十分常见,目前临床修复软骨缺损的方法很多,但是由于各自固有的缺陷难以达到满意的临床效果,因此探索软骨缺损的修复方法一直是人们不断深入研究的课题。软骨组织工程的发展为软骨缺损的修复提供了新的途径。种子细胞和支架材料是软骨组织的两个基本要素,根据近年来软骨组织工程的研究进展和方向,从骨髓间充质干细胞的诱导方式、诱导机制及研究进展方面进行探讨,证明骨髓间充质干细胞作为种子细胞构建组织工程软骨的优越性。     

体外诱导脂肪源性干细胞向类肝细胞的定向分化

背景：用脂肪源性干细胞治疗肝脏疾病之前,如何建立有效稳定的肝细胞分化诱导方案,纯化并快速扩增性能稳定的类肝细胞等问题亟待解决。 目的：建立大鼠脂肪源性干细胞转化为类肝细胞的程序化诱导体系。 方法：分离纯化Lewis大鼠脂肪源性干细胞,流式细胞仪鉴定其表面标志,分3个阶段加入含有肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子4、酸性成纤维细胞生长因子、制瘤素M细胞因子的诱导培养体系,使脂肪源性干细胞向肝细胞转化。 结果与结论：大鼠脂肪源性干细胞诱导7,14,21 d后,细胞阳性表达 ALB、AFP、CK18mRNA,表达量随诱导时间延长而增强,类肝细胞具有白蛋白合成功能。氨代谢和尿素的合成功能在9~12 d出现并持续存在。结果表明脂肪源性干细胞体外分段诱导可成功转化为类肝细胞。     

自体骨髓间充质干细胞和同种异体软骨细胞共培养优化软骨组织工程种子的细胞源

背景：至今尚无一种细胞能完全满足组织工程对种子细胞的要求。 目的：探讨自体骨髓间充质干细胞和同种异体软骨细胞共培养的可行性。 方法：酶消化分离法获得兔软骨细胞,使用密度梯度离心和贴壁筛选的方法获得骨髓间充质干细胞。取细胞浓度为3×108 L-1的第2代骨髓间充质干细胞和软骨细胞,随机分为3组,共培养组：将骨髓间充质干细胞和软骨细胞按2∶1比例混匀;实验组：取同代同浓度的软骨细胞(浓度与共培养细胞的终浓度相同);对照组：取低浓度软骨细胞1×108 L-1(与共培养组中软骨细胞终浓度相同)。 结果与结论：共培养组、实验组及对照组细胞平均群体倍增时间分别为3,7,8 d;共培养组共培养细胞增殖比其他2组明显增快(P < 0.05);糖胺多糖水平明显多于其他2组(P < 0.05);自体骨髓间充质干细胞与同种异体软骨细胞共培养未见明显排异反应,提示自体骨髓间充质干细胞与同种异体软骨细胞为种子细胞共培养,骨髓间充质干细胞能促进软骨细胞的增殖和细胞外基质合成,缩短软骨细胞培养时间和减少传代次数,同时软骨细胞可促进骨髓间充质干细胞向软骨细胞的定向转化,节省大量软骨细胞。关键词：软骨细胞;共培养;骨髓间充质干细胞;组织工程;种子细胞 缩略语注释：BMSCs：bone marrow-derived mesenchymal stem cells,骨髓间充质干细胞 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.14.008     

骨髓基质干细胞和软骨组织工程

关节软骨是透明软骨 ,它是一种特殊的结缔组织 ,由单一的软骨细胞、纤维和基质构成。软骨组织具有自身独特的生理学特点 ,无血管 ,无神经 ,无淋巴引流 ,在关节腔内仅靠滑液来获取营养 ,其代谢主要以无氧酵解为主等决定了它极其有限的再生能力。临床上由于创伤、炎症肿瘤等原因导致的关节软骨损伤、缺失极为常见 ,且常继发骨关节炎 ,严重影响关节的功能。目前临床上多通过自体或异体移植成形的软骨或具有成软骨潜能的组织如骨膜、软骨膜等来治疗关节软骨的缺损 ,这些组织移植后能生成透明软骨样组织 ,但其生物学性能、耐磨性、韧性均欠佳 ,易…