骨形成骨白质成骨基质明胶复合修复骨缺损实验研究

根据诱导成骨理论，由动物群骨提取无排斥反应、诱导成骨作用强的骨形成蛋白质，与骨基质明胶复合修复２６只家兔桡骨缺损。通过Ｘ线和组织学方法检查结果表明，术后第４周，植骨区的纤维性骨痂中有成骨细胞形成；第８周，植骨区大片新骨形成；１２周植骨区基本为新生骨填充；１６周骨缺损修复过程基本完成。     

自体外周血干细胞移植治疗周围神经损伤

背景：关于神经干细胞对周围神经损伤的治疗已有多篇报道,但外周血干细胞对周围神经损伤治疗鲜有报道。 目的：探讨自体外周血干细胞移植治疗周围神经损伤使失神经骨骼肌重获神经再支配的临床应用。 方法：应用外周血干细胞治疗周围神经损伤6例,同时与周围神经损伤单纯行神经断端吻合或神经移植10例比较。2组患者术后常规肌注鼠神经生长因子一两个疗程,同时给予针灸、理疗、经皮电刺激治疗及功能康复训练。 结果与结论：两组患者随访均超过6个月。干细胞移植组运动神经传导速度和感觉神经传导速度的恢复率要明显高于单纯神经吻合组。提示周围神经损伤后给予修复局部用外周血干细胞移植能够使远端失神经骨骼肌早期重新获得神经再支配。     

SD大鼠骨基质明胶吸附骨髓间充质干细胞修复骨缺损的实验研究

目的:探讨大鼠骨基质明胶吸附骨髓间充质干细胞修复骨缺损的可行性。方法:采用第5代(P5)SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),经Hoeschst 33344(sigma)荧光杂料标记后,调配制成的1×106个／ml细胞浓度后与骨基质明胶(BMG)共同培养6 h,然后植入SD大鼠双侧胫骨的实验性骨缺损中(A组),同时作胫骨骨缺损单纯BMG植入(B组),无植入物(C组)两组对照。术后8周处死,取骨缺损区组织进行组织学观察,其中A组行荧光染料标记测定以确认骨缺损区的骨痂是否来源于MSCS。结果:①A组:胫骨骨缺损区可见大量新生不规则骨纤维组织、软骨及纤维骨痂填充,可见骨细胞、骨组织和骨小梁,已形成骨髓腔。②B组:胫骨骨缺损区可见大量纤维组织、少量新生不规则骨纤维组织及骨骼肌组织,伴有多核巨细胞和少量炎性细胞,缺损区边缘带有骨痂组织。③C组:胫骨骨缺损区可见大量纤维组织及骨骼肌组织填充生长,伴有多核巨细胞和少量炎性细胞,缺损区边缘带有少量骨痂组织。荧光染色鉴定确认胫骨骨缺损区的骨痂来源于MSCs。结论:大鼠骨基质明胶吸附骨髓间充质干细胞修复骨缺损具有安全性、可行性及有效性。     

骨髓基质干细胞与骨基质明胶复合培养体内异位成骨的实验研究

目的：探讨骨髓基质干细胞(MSC)与骨基质明胶复合培养体内异位成骨的可行性。方法：将SD大鼠来源的MSC与同种异体的骨基质明胶复合培养后植入SD大鼠背部竖脊肌肌膜内，分别于术后不同的时间点处死大鼠，标本进行碱性磷酸酶(ALP)活性测定及组织形态学观察：结果：实验组标本自术后第3周ALP活性起就表现出阳性，第4周MSC与骨基质明胶复合体内大量成骨。结论：MSC与骨基质明胶复合培养体内异位成骨完全可行的。     

骨基质明胶/煅烧骨基质重组人工骨对骨髓间充质干细胞成骨潜能的影响

背景：前期实验发现单纯骨基质明胶材料与骨髓间充质干细胞复合后具有较好的成骨能力,修复骨缺损效果较好,但单纯骨基质明胶降解速度快,硬度差,不能用来修复承重区域的骨缺损。 目的：观察骨基质明胶/煅烧骨基质重组人工骨与骨髓间充质干细胞复合培养后细胞成骨潜能的变化。 方法：利用骨基质明胶和煅烧骨基质制备重组人工骨,并与大鼠骨髓间充质干细胞复合培养48 h,用茜素红染色检测复合培养后细胞的成骨潜能。 结果与结论：细胞在复合材料上能够很好的黏附、生长以及增殖,与重组人工骨复合培养后,细胞的成骨潜能和细胞表型无明显变化。表明重组人工骨易于与骨髓间充质干细胞结合,对细胞成骨潜能无影响,生物相容性良好。     

同种与异种骨基质明胶修复颅骨缺损的实验研究

以家兔颅顶骨直径１０ｍｍ园形骨缺损作为动物模型，分别植入同种（兔）、异种（人、猪、羊）的骨基质明胶。植入后４、８、１２、１６ｗ进行ｘ线摄片和组织学检查。结果显示，同种骨基质明胶无免疫排斥反应，具有良好的骨诱导作用，术后１２ｗ骨缺损完全修复；异种骨基质明胶植入早期，存在着不同程度的排斥反应，植骨后期（１２～１６ｗ），随着排斥反应的减轻，亦出现了诱导成骨。结果说明，如能改进异种骨基质明胶的制作方法，降低其抗原性，将具有重要的临床应用价值。     

自体外周血干细胞移植治疗糖尿病足11例护理体会

糖尿病足是糖尿病严重并发症之一,患者因血糖增高导致下肢血管的病变而表现为下肢发冷、疼痛、溃疡及坏疽.药物治疗效果差,治疗非常棘手.增加下肢血管的侧枝循环是近年来国内兴起的一项新的治疗理念.我院于2008年12月-2009年8月开展了自体外周血干细胞移植治疗糖尿病足的临床应用,取得了良好的效果,现将11例治疗情况报告如下.     

自体外周血干细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化患者9例：短期效果分析

背景：目前临床报道已有关于自体骨髓有核细胞、嗅细胞、脐血源干细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化的报道。 目的：观察自体外周血干细胞移植治疗9例肌萎缩侧索硬化患者的临床疗效。 方法：采用自身前后对照研究方法,对9例肌萎缩侧索硬化患者自体外周血干细胞移植前和移植后第1,3,6个月神经功能改变(FIM、Norris、Bathel评分)及肌电图改变进行评估。 结果与结论：自体外周血干细胞移植后自我症状改善,神经功能评分显著高于移植前,短期内效果明显,肌电图呈现改善趋势。结果初步表明自体外周血干细胞移植治疗可在一定程度上改善肌萎缩侧索硬化患者神经功能障碍。关键词：肌萎缩侧索硬化;自体外周血;干细胞移植;神经功能评分;肌电图 缩略语注释：ALS：amyotrophic lateral sclerosis,肌萎缩侧索硬化 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.14.036     

骨髓间充质干细胞与新型神经导管复合材料修复周围神经缺损

背景：随着医学模式的不断发展进步,人们对于外周神经缺损的治疗以及后期康复水平提出更高的要求,这就使得以干细胞培养为基础的神经组织工程技术为神经缺损治疗提供了新策略。 目的：探讨骨髓间充质干细胞与新型神经导管复合材料修复周围神经缺损的可行性。 方法：选取清洁级纯种新西兰大白兔50只,采用随机数字表法分为实验组与对照组,每组25只,于兔前肢桡骨中段约15 mm处造成外周神经损伤,造模后1周,实验组外周神经损伤处移植骨髓间充质干细胞联合新型神经导管复合材料,对照组外周神经损伤处移植骨髓间充质干细胞。移植后4周,取神经损伤处的神经纤维长约5 mm,进行苏木精-伊红染色和扫描电镜观察,对比两组再生神经组织内神经纤维的密度和直径。 结果与结论：实验组神经纤维密度明显高于对照组,神经纤维直径明显低于对照组,组间相比差异有显著性意义(P < 0.05);实验组再生神经组织表面细胞数较多,细胞生长状态良好,体积较大,胞体发出多个突起,并且细胞之间相互连接交织成网状,其轴突较长和较粗,呈典型的神经元样细胞表现,且生长密度和状态优于对照组,可见骨髓间充质干细胞与新型神经导管复合材料可以用于修复周围神经缺损,且效果确切。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

自体骨髓间充质干细胞复合富血小板纤维蛋白促进拔牙窝骨愈合

BACKGROUND: Alveolar bone deficiency will not meet aesthetic and functional requirements for dental implants.OBJECTIVE: To observe the repair effect of passage 3 autologous bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) and platelet-rich fibrin (PRF) on alveolar bone defects in rabbits.METHODS: Twenty-seven New Zealand rabbits were randomly divided into BMSCs/PRF group, PRF group and model group (n=9 per group). The left mandible incisors were extracted in all the rabbits under general anesthesia. BMSCs/PRF group was immediately implanted BMSCs/PRF composite into the alveolar socket, PRF group only implanted PRF, and model group implanted nothing.RESULTS AND CONCLUSION: In the model group, the alveolar crest and alveolar mucosa become sunken notably and narrowed. In the BMSCs/PRF and PRF groups, the thickness of alveolar bone wall, alveolar bone width, alveolar bone height difference, and bone mineral density were all increased, especially in the former group. In addition, the trabecular arrangement was better in the BMSCs/PRF groups than the model and PRF group. Our findings indicate that alveolar socket filling with composite of BMSCs and PRF can achieve preservation of alveolar bone width and height after tooth extraction in rabbits.   中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

同种异体脂肪干细胞复合纳米级胶原基骨材料修复尺骨缺损

背景：随着医学模式的不断发展进步,人们对于骨缺损的治疗以及后期康复水平提出了更高的要求,这就使得以干细胞培养为基础的骨组织工程技术成为骨缺损治疗中较为重要的组成部分。 目的：探讨同种异体脂肪干细胞复合纳米级胶原基骨材料修复兔尺骨缺损的可行性。 方法：选取成年雌性新西兰兔70只作为研究对象,其中10只用于脂肪间充质干细胞的分离培养,60只采取随机数字表法分为单纯支架组、支架材料结合自体骨组、支架材料结合异体脂肪干细胞组,每组20只,均行尺骨中段部分切除,构建12 mm的骨缺损,然后植入相应的材料。植入材料6,9,12周测量骨密度,植入材料14周后观察3组坚固融合、非坚固融合、假关节形成比例。 结果与结论：支架材料结合异体脂肪干细胞组坚固融合比例显著高于单纯支架组、支架材料结合自体骨组,非坚固融合及假关节比例显著低于单纯支架组、支架材料加自体骨组(P < 0.05)。单纯支架组坚固融合比例显著低于支架材料结合自体骨组,非坚固融合及假关节比例显著高于支架材料结合自体骨组(P < 0.05)。支架材料结合异体脂肪干细胞组植入材料后第6,9,12周骨密度明显高于单纯支架组、支架材料结合自体骨组(P < 0.05)。单纯支架组骨密度明显低于支架材料结合自体骨组(P < 0.05)。结果表明同种异体脂肪干细胞复合纳米级胶原基骨材料修复尺骨缺损效果确切,骨密度较高。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

基因转染骨髓间充质干细胞复合同种异体骨修复绵羊极限骨缺损

背景：多项体内外实验表明外源性植入碱性成纤维细胞生长因子能明显促进骨形成过程,但外源性碱性成纤维细胞生长因子在体内易降解,影响疗效。 目的：利用分子生物学技术将碱性成纤维细胞生长因子转染至骨髓间充质干细胞中,观察同种异体骨复合基因转染骨髓间充质干细胞修复绵羊极限骨缺损的效果。 方法：将同种异体骨复合碱性成纤维细胞生长因子转染骨髓间充质干细胞组织工程骨、骨髓间充质干细胞复合同种异体支架骨材料、同种异体支架骨材料、β-磷酸三钙材料分别植入羊髂骨极限缺损处,植入后4,8,12周行组织学、免疫组织化学染色观察。 结果与结论：同种异体骨复合碱性成纤维细胞生长因子转染骨髓间充质干细胞组织工程骨植入后12周,手术结合区成软骨样结构较多,术区中央可见大量成骨样细胞,整个术区的支架材料降解较其他组多,支架材料孔洞内爬满纤维结缔组织,材料周围常见破骨样细胞;骨涎蛋白与Ⅰ型胶原呈强阳性表达。其他3组手术结合区虽有成软骨样结构及成骨样细胞出现,但中央区为死骨结构,且骨涎蛋白与Ⅰ型胶原呈弱表达。表明碱性成纤维细胞生长因子转染的骨髓间充质干细胞复合同种异体骨可基本修复绵羊极限骨缺损。     

Osteochondral defect repair with autologous bone marrow-derived mesenchymal stem cells in an injectable, in situ, cross-linked synthetic extracellular matrix

A co-cross-linked synthetic extracellular matrix (sECM) composed of chemically modified hyaluronic acid and gelatin was used as a cell delivery vehicle for osteochondral defect repair in a rabbit model. A full-thickness defect was created in the patellar groove of the femoral articular cartilage in each of 2 rabbit joints, and 4 experimental groups were assigned (12 rabbits/group): untreated control, autologous mesenchymal stem cells (MSCs) only, sECM only, and MSCs + sECM. The sECM hydrogels were allowed to cross-link in the defect in situ. Rabbits were sacrificed at 4, 8, and 12 weeks post-surgery, and cartilage repair was evaluated and scored. In the controls, defects were filled with fibrous tissue. In the MSC-only group, hyaline-like cartilage filled the peripheral area of the defect, but the center was filled with fibrous tissue. In the sECM-only group, hyaline cartilage with zonal architecture filled the defect at 12 weeks, but an interface between repaired and adjacent host cartilage was evident. In the MSCs + sECM group, defects were completely filled with elastic, firm, translucent cartilage at 12 weeks and showed superior integration of the repair tissue with the normal cartilage. The sECM delivers and retains MSCs, and the injectable cell-seeded sECM could be delivered arthroscopically in the clinic.     

骨髓间充质干细胞与同种异体骨复合修复犬下颌骨缺损：成骨能力检测

 背景：同种异体骨与自体骨有相似解剖外形和生物学特性,是较佳的生物支架材料。自体骨髓来源的间充质干细胞具有多分化潜能,能向成骨、成软骨细胞分化,加速骨组织及软骨组织的形成。目的：探讨同种异体骨支架复合自体骨髓间充质干细胞促进犬下颌骨半侧缺损的新骨成骨能力。方法：拔出24只比格犬左侧下颌牙,伤口愈合后2个月,人为造成犬下颌骨缺损,对照组用单纯冻干同种异体骨修复,实验组用同种异体冻干骨加自体骨髓间充质干细胞修复。术后4,12,24周对下颌骨体部进行骨密度扫描以及Micro-CT检查。结果与结论：实验组移植后12周开始,下颌骨的骨密度显著高于对照组(P < 0.05),随着时间推移,实验组和对照组骨密度均增高,但实验组增高明显高于对照组。随时间推移,实验组骨结构参数成阶梯式递增或递减,对照组虽也有递增或递减,但不明显。术后24周实验组感兴趣区骨小梁分离度大于对照组(P < 0.05),骨体积分数、骨小梁数量、骨小梁厚度小于对照组(P < 0.05)。结果表明骨髓间充质干细胞能加速同种异体骨的骨改建速度。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

High white blood cell concentration in the peripheral blood stem cell product can induce seizures during infusion of autologous peripheral blood stem cells

Seizures as a complication of the infusion of autologous peripheral blood stem cells (PBSC) are rare. Seizures during infusion of autologous PBSC in 3 of our patients prompted us to review our cell therapy and cytapheresis protocols and procedures. We retrospectively analyzed 159 adult patients collected between January 2006 and July 2009. Patients were collected on either the COBE Spectra (Caridian BCT, Lakewood, CO) cell separator (n = 85) or Fresenius AS (Fresenius Kabi AG, Bad Homburg, Germany) 104 cell separator (n = 74) and mobilized with granulocyte-colony stimulating factor (G-CSF) alone (n = 47), G-CSF and Plerixafor (n = 36), or G-CSF and chemotherapy (n = 76). Patient characteristics (including age, weight, number of collections, volume processed, disease type, and mobilization strategy) did not differ significantly between the COBE and Fresenius cohorts, and adverse effects from infusion were similar except for 3 of 159 patients who experienced seizures upon infusion of PBSC; all 3 were collected on the COBE and had PBSC product white blood cell (WBC) counts of 590 × 10(3)/μL or above. We prospectively correlated WBC counts midcollection, with final WBC counts to identify products with high WBC concentration during cytapheresis. Fifty-one patients had 66 cytapheresis procedures using the COBE, with WBC counts midway and at the end of collection of 287 × 10(3) ± 150/μL and 273 × 10(3) ± 144/μL, respectively. Mid-WBC therefore correlated with WBC at the end of the collection. Finally, we prospectively collected mid-WBC from 65 patients who underwent 80 PBSC collections between June 2009 and January 2010 to identify products with midcollection WBC concentration >450 × 10(3)/μL. In those cases, additional autologous plasma was collected at the time of collection to dilute the final product before cryopreservation. Patients who received diluted products experienced no delays in engraftment and no additional seizure episodes occurred.     

生物蛋白胶复合骨髓间充质干细胞修复兔多层软组织缺损

背景：符合软组织生理结构的生物蛋白胶适合作为修复软组织缺损的载体材料。 目的：观察生物蛋白胶复合骨髓间充质干细胞修复软组织缺损的可行性。 方法：在新西兰大白兔大腿处造成深达肌肉层,直径大于3 cm的软组织缺损。将24只新西兰大白兔随机分为3组,实验组将同种异体来源的骨髓间充质干细胞复合生物蛋白胶注射到软组织缺损处,对照组将生物蛋白胶注射到软组织缺损处,模型组造模后不注射。 结果与结论：术后14,21 d创面收缩率,实验组>对照组>模型组(P < 0.01);愈合时间,实验组<对照组<模型组(P < 0.01)。结果显示以生物蛋白胶为载体复合骨髓间充质干细胞能快速的修复多层软组织缺损。     

异种去蛋白松质骨复合骨髓间充质干细胞修复骨缺损的组织学变化

背景：目前应用各种人造支架复合细胞修复骨缺损研究很多,但是各种人造支架都没有骨的天然结构,所以修复效果不够理想。 目的：将大鼠骨髓间充质干细胞接种到异种去蛋白松质骨上,移植修复大鼠股骨节段性缺损,以体内修复效果来评价复合体应用前景。 方法：分离培养大鼠骨髓间充质干细胞并进行扩增,用BrdU体外进行标记。同时制备牛去蛋白松质骨,在体外与标记后的细胞复合。制备大鼠双侧股骨中段5 mm缺损模型,实验分成3组,缺损处分别移植骨髓间充质干细胞/去蛋白松质骨复合体、单纯去蛋白松质骨及单纯骨髓间充质干细胞。 结果与结论：BrdU免疫染色结果显示,在各组细胞均呈阳性表达,但随着移植时间的延长而减弱。X射线放射学评分及苏木精-伊红染色组织学评分结果显示,各时间段复合体组成骨效果均好于其他组。复合体组Ⅰ型胶原蛋白表达随着时间的延长有明显增强,强于其他组。提示骨髓间充质干细胞复合异种去蛋白松质骨的成骨能力明显强于单纯的支架修复能力,单纯的骨髓间充质干细胞虽然有成骨能力,但不能修复节段性骨缺损。