自体血清培养新西兰大白兔关节软骨细胞

目的：改进与探讨新西兰大白兔软骨细胞体外培养的方法。方法：取3月龄新西兰大白兔自体血,制备自体血清备用,无菌条件下取4周龄新西兰大白兔双侧膝关节软骨,采用Ⅱ型胶原酶消化并机械吹打的方法,分离关节软骨细胞并应用新西兰大白兔自体血清进行原代、传代培养;采用形态学观察,甲苯胺蓝染色以及Ⅱ型胶原免疫组织化学方法对膝关节软骨细胞进行鉴定,MTT法检测软骨细胞的增值能力;结果：倒置显微镜下见原代软骨细胞2 h后开始贴壁,8 h可形成单层,24 h即可传代。第1~5代细胞表型稳定,增殖力良好。甲苯胺蓝染色显示培养的软骨细胞核呈深染色,细胞质呈淡蓝色;免疫组织化学显示软骨细胞Ⅱ型胶原呈黄褐色表达,MTT检测显示前5代软骨细胞增值能力强,无明显差异;结论：结果表明自体血培养的前5代新西兰大白兔节软骨细胞均可用于膝骨关节炎的研究。     

新西兰大白兔脑动脉系统的数字减影血管造影成像

目的研究新西兰大白兔脑动脉系统的特点,为建立兔脑血管疾病模型奠定基础。方法新西兰大白兔20只,采用数字减影血管造影(DSA)方法,通过新西兰大白兔股动脉将微导管导入颈内动脉近端造影,分析新西兰大白兔脑动脉系统解剖。结果颅内前后循环系统显影清楚;新西兰大白兔具有与人类相似的脑动脉系统。结论超选择性脑血管造影有利于更好地显示兔脑前后动脉系统,新西兰大白兔脑动脉系统与人类相似,为建立兔脑动脉系统血管疾病模型提供较详细的影像学基础。     

大承气汤降低心脏骤停后综合征兔血清类胰蛋白酶及炎性细胞因子的水平

目的观察大承气汤对心脏骤停后综合征(PCAS)兔血清肥大细胞类胰蛋白酶和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素8(IL-8)水平的影响。方法大耳白兔30只,随机分为假手术组、模型组、大承气汤组。采用窒息性心脏骤停制备兔PCAS模型。大承气汤组在自主循环恢复后15 min给予大承气汤每日15 g/kg灌胃(分2次使用)。分别在0、24、48、72 h观察反映器官功能的检测指标,采用ELISA测定兔血清类胰蛋白酶、MCP-1、IL-8的水平。结果大承气汤可明显减轻心、脑、肝、肾功能障碍。PCAS模型组血清类胰蛋白酶、MCP-1和IL-8含量均明显高于假手术组(P0.01)。大承气汤组血清类胰蛋白酶含量(6 h)、MCP-1含量(6、24、48 h)和IL-8含量(6、24 h)均明显低于PCAS模型组(P0.05或P0.01)。结论大承气汤可降低PCAS兔血清类胰蛋白酶、MCP-1、IL-8的水平。     

肿瘤冷热交替治疗的生物学效应初步研究

目的:在细胞水平及较大动物水平上研究冷热交替治疗方法.由于肿瘤单冷、单热治疗具有一定局限性,如肿瘤边缘温度控制、热耐受、热抑制;冷冻损伤复发等.而已有研究证明冷热交替治疗在小鼠肿瘤血管损伤及引发机体免疫响应等方面优于现有任何一种热物理治疗方法.方法:首先利用转移性乳腺癌细胞系MDA-MB-231模型,比较了不同热物理刺激对细胞的杀伤效果,其次结合病理分析和影像学方法,建立新西兰大白兔VX2乳腺癌模型.结果:发现冷热交替比单冷,单热造成更严重的细胞损伤;初步验证冷热交替治疗荷兔乳腺癌具有较好疗效,3个月内未出现转移和复发.结论:冷热交替治疗是一种有效的肿瘤治疗手段.     

椎间盘退变过程中MMP/Timp基因表达变化的研究

目的:采用新西兰大白兔的纤维环损伤制作腰椎间盘退变模型,以证实和比较在人椎间盘退变中的基因变化情况.方法:损伤L4.5、L5.6纤维环,行核磁共振及计算机扫描摄影拍片证实椎间盘退变情况,同时取椎间盘行精确定量逆转录聚合酶链式反应观测MMP/Timp系列基因的变化.结果:证实了兔腰椎纤维环损伤后腰椎逐渐退变,且与人类退变结果相似,基因表达情况MMP-1、MMP-2、MMP-3、Timp-1、Timp-2早期均上调,MMP-3、Timp-1在退变的晚期出现下调.结论:人类腰椎间盘退变中明显上调的基因在此退变模型椎间盘中被发现同样上调,从而在分子水平证实了此动物退变模型与人类的相似性.     

新西兰大白兔脑静脉系统解剖

目的探讨新西兰大白兔脑静脉系统解剖。方法新西兰大白兔20只,采用数字减影血管造影(DSA)和乳胶灌注方法,通过新西兰大白兔股动脉将微导管导入颈内动脉近端造影及经上腔静脉行乳胶灌注,分析新西兰大白兔脑静脉系统解剖。结果新西兰大白兔具有与人类相似的脑静脉解剖。结论新西兰大白兔脑静脉系统与人类相似,对脑静脉及静脉窦动物模型的制作具有重要指导意义。     

红花黄色素对兔前交叉韧带重建术后骨腱愈合影响的MicroCT研究

目的 探讨骨腱愈合过程中病灶区MicroCT的变化,以及红花黄色素对骨腱愈合的影响.方法 24只新西兰大白兔随机分为实验组和对照组,实验组于术中局部应用红花黄色素注射液,对照组局部使用生理盐水;构建前交叉韧带重建模型后,两组分别于术后4、8周各处死6只大白兔,借助苏木精-伊红(HE)染色和Mi-croCT 进行观察和评价.结果 组内比较:在不同时间点之间骨体积分数(BV/TV)差异有统计学意义(P＜0.01),其变化的时相规律为术后逐渐增强,第8周时最高;组间比较:在损伤修复不同时间点,实验组BV/TV明显高于对照组,差异统计学意义(P＜0.01).实验组在术后各时间点纤维软骨带的细胞生长、胶原纤维及腱细胞排列比对照组更为整齐.结论 红花黄色素对兔前交叉韧带重建术后的骨腱愈合有积极作用.     

硫化氢促进创面愈合的研究进展

硫化氢是继一氧化氮和一氧化碳之后所发现的第3种新型内源性气体信号分子。通过近几年对硫化氢的相关研究,证明其广泛参与了机体的各种病理生理过程。创面愈合是一个复杂的病理生理过程,也是临床上治疗急慢性创面的根本任务和最终目的,其效果关系着患者治疗的成败及后期生活质量的高低。根据影响创面愈合因素的不同,目前临床上使用的促进创面愈合的治疗方法和药物有很多。本文就硫化氢在创面愈合中所起的作用和相关机制进行简要综述,以期为相关临床治疗和研究提供一定参考。     

骨膜联合同种异体骨治疗兔骨缺损模型的实验研究

目的　通过实验动物研究观察骨膜联合同种异体骨治疗骨缺损的效果,探讨其可行性及修复机制。  方法　以新西兰大白兔为研究对象,分为3组,即实验组、对照组和空白组。通过X线、HE染色及荧光定量PCR方法,检测骨膜联合同种异体骨修复骨缺损的效果及其可能机制。  结果　X线检查显示实验组与对照组骨缺损处均已修复,空白组骨缺损处未修复;HE染色结果显示实验组新生骨小梁排列良好,仍有少量异体骨残留,对照组新生骨小梁排列整齐,空白组未见明显新生骨小梁;荧光定量PCR结果显示,术后实验组Spp-1、BMP-2基因表达高于对照组(P<0.05),ColⅠα1基因表达低于对照组(P<0.05)。  结论　骨膜联合同种异体骨能够有效地促进骨缺损的修复。     

疮灵液载入胶原促进慢性创面的愈合

背景：前期研究表明,疮灵液具有较好的抗炎作用,可抑制血小板聚集及血栓形成,促进伤口愈合。目的：观察将疮灵液载入胶原后对慢性创面愈合的影响。方法：在40只大鼠背部制作慢性创面模型,造模后3 d随机均分为4组,对照组以载0.2 mL生理盐水纱布外敷创面,疮灵液组以载0.2 mL疮灵液纱布外敷创面,胶原组以胶原海绵覆盖创面,疮灵液载入胶原组以载0.2 mL疮灵液胶原覆盖创面。造模时及造模后第3,7,15天测定创面面积,创面分泌物中白细胞总数、白细胞介素6与肿瘤坏死因子α水平,创面肉芽中羟脯氨酸、基质金属蛋白酶1,2,9的水平。结果与结论：疮灵液载入胶原组、疮灵液组造模后第3,7,15天肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶1,2,9水平均低于对照组、胶原组(P < 0.01,P < 0.05),造模后第3,7,15天白细胞总数显著低于对照组、胶原组(P < 0.01,P < 0.05),前两组间各指标比较差异无显著性意义;疮灵液载入胶原组造模后第3,7,15天羟脯氨酸水平高于其余3组(P < 0.05);疮灵液载入胶原组造模后15 d创面面积显著低于其余3组(P < 0.01);造模后15 d,4组间白细胞介素6水平比较差异无显著性意义。表明疮灵液载入胶原能显著抑制慢性创面炎症细胞增殖与浸润,抑制创面炎症因子与基质金属蛋白酶分泌,促进慢性创面愈合。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

碱性成纤维细胞生长因子与小儿烧伤创面的愈合

背景：皮肤创面愈合是一个复杂的病理过程,对于创伤和创伤后感染等引起皮肤难愈合的研究一直是临床创面修复的难题,对于碱性成纤维细胞生长因子促进皮肤创面愈合的基础研究相对较多,临床应用研究较少。 目的：对碱性成纤维细胞生长因子促进皮肤创面愈合研究的文献资料趋势进行多层次分析,探讨在小儿烧伤创面愈合中的应用疗效。 方法：以电子检索方式对CNKI数据库学术期刊2002-01/2011-12收录有关碱性成纤维细胞生长因子促进皮肤创面愈合研究的文献进行分析,采用检索词为“碱性成纤维细胞生长因子;创面愈合”,运用数据库的分析功能和Excel软件图表的功能分析数据特征。 结果与结论：CNKI数据库学术期刊2002/2011收录碱性成纤维细胞生长因子促进皮肤创面愈合研究的文献共228篇,文献数量处于平稳发展趋势。《中国组织工程研究与临床康复》杂志收录的文献数量最多为26篇。解放军第304医院产出的文献最多。碱性成纤维细胞生长因子促进皮肤创面愈合研究文献的基金资助项目有16项,基金资助项目的文献共76篇,以国家重点基础研究发展计划(973)项目和国家自然科学基金资助项目的文献最多。碱性成纤维细胞生长因子在小儿烧伤创面愈合中应用的文献虽然较少,但实验结果均显示治疗效果较好,有促进小儿Ⅱ度烧伤创面愈合的作用,而且无不良反应出现。     

马桑提取物促进大鼠烧伤创面愈合的作用和机制

 目的：探讨马桑提取物(CSME)对大鼠烧伤创面愈合的影响及机制。方法：随机将40只SD雄性大鼠分成生理盐水（NS）组、白凡士林（WPJ）组、磺胺嘧啶银（SSD）组和CSME组,每组10只。将大鼠麻醉后,制备背部深Ⅱ度皮肤烧伤创面。而后分别用NS敷料、WPJ敷料、SSD敷料和CSME敷料覆盖治疗21 d。在第1 d、3 d、7 d、14 d和21 d,观察动物的临床症状和创面状况（上皮化速率、结痂及被毛等）后,分别取出创面组织,用于组织学观察,检测丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性,检测表皮生长因子（EGF）和碱性成纤维细胞因子（bFGF）蛋白水平及胶原mRNA表达。结果：CSME组新生上皮生长高度活跃,有大量新生被毛生长,创面上皮化速率明显高于其它各组 (P<0.05)。SSD组创面中央新生被毛稀疏而细小,而CSME组创面中央被毛密集,大部分被毛接近正常。CSME组镜下可见全部被多层上皮细胞覆盖,新生胶原纤维充分分化,排列整齐,组织结构明朗,皮脂腺和毛囊增生极其活跃等,显著优于其它各组。本研究显示,烧伤后从第1 d到21 d,CSME组早期EGF和bFGF水平显著高于其它各组,后期迅速下降,低于其它组（P<0.05或P<0.01）。SSD组Ⅰ型与Ⅲ型胶原mRNA表达的比值显著高于其它各组和正常组织,CSME治疗组显著低于其它各组和正常组织(P<0. 05)。结论：本研究表明,CSME可诱导烧伤创面无瘢痕愈合。CSME的这种作用与其早期增强EGF和bFGF蛋白水平,后期抑制两者的水平有关,也可能与其抑制烧伤创面Ⅰ型胶原而增强Ⅲ型胶原mRNA表达密切相关。     

Platelet-rich plasma gel promotes differentiation and regeneration during equine wound healing

Nonhealing wounds of the lower equine limb represent a challenging model. The platelet is a natural source of a myriad of growth factors and cytokines that promote wound healing. This study evaluates the potential of platelet derived factors to enhance wound healing in the lower equine limb. Platelets were isolated from horse blood and activated with thrombin, a process known to induce growth factor release. This produced a platelet gel composed of platelet-rich plasma (PRP). To test this all-natural wound healant, 2.5-cm(2) full thickness cutaneous wounds were created below the knee and hock of a thoroughbred horse. Wounds were treated with PRP gel or left untreated. Sequential wound biopsies collected at Days 7, 36, and 79 postwounding permitted comparison of the temporal expression of differentiation markers and wound repair. To test the hypothesis that wounds treated with PRP gel exhibit more rapid epithelial differentiation and enhanced organization of dermal collagen compared to controls, tissues were stained for cytokeratin 10, a suprabasal differentiation marker, and the reestablishment of collagen was evaluated by trichrome staining. PRP gel-treated wounds at Day 7 expressed intense cytokeratin 10 staining near the wound junction in suprabasal epidermal layers, while staining in control tissues was less intense and restricted to apical epidermal layers distal to the wound junction. By Day 79, the staining was equal in both groups. However, PRP gel-treated wounds at Day 79 contained abundant, dense collagen bundles oriented parallel to each other and to the overlying epithelium, whereas control tissues contained fewer collagen fibers that were oriented randomly. Thus, treatment of wounds with PRP gel induced accelerated epithelial differentiation and produced tissue with organized, interlocking collagen bundles. This study reveals that this novel all-natural wound healant induced wound repair in injuries previously deemed untreatable.     

Subcutaneous low molecular weight heparin administration promotes wound healing in rats.

The influence of subcutaneous low molecular weight heparin (LMWH) compared with physiologic saline on the healing of abdominal wounds with and without prolene mesh was studied in rats. The collagen concentration was determined in the wound tissue and in prolene mesh 14, 21, 28 and 42 days after the skin incision in controls and in two groups of rats treated either with LMWH for 7 (I group) or 14 (II group) days after skin incision and prolene insertion. LMWH administration resulted in a significant increase of collagen content both in wound and in prolene mesh in total dose-dependent manner.     

Thymosin beta4 promotes angiogenesis, wound healing, and hair follicle development

New blood vessel formation is important in many physiological process, including development, wound repair, and tumor growth. In aged animals, angiogenesis is reduced resulting in poor wound healing. We have identified a novel small molecule, thymosin beta(4), that promotes angiogenesis and wound repair in both normal and aged rodents. It also promotes hair growth in normal and aged rodents. It acts by increasing angiogenesis and cell migration and is currently in clinical trials for wound repair.