丁酸梭菌对小鼠移植瘤的抑制作用

目的：为寻找疗效好毒性小的抗肿瘤药。方法：用小鼠肝癌H22株建制荷移植肝癌小鼠模型，将自行分离获得的一株丁酸梭菌(简称Cb)作抑瘤试验。设6个实验组，即试验治疗组，环磷酰胺(简称Cy)及复方中药两个阳性治疗对照组和生理盐水(简称NS)阴性对照组。Cy为皮下注入。其余均为灌胃给药，每天2次，连续12d。实验全程16d。效果观察指标是抑瘤百分率、瘤体细胞凋亡数、瘤体wBC浸润情况，以及血清SOD活性的改变。结果：Cb治疗试验组平均抑瘤率46％，明显高于两个抑瘤阳性对照组(P＜0．05)，Cb与Cy联合治疗试验组平均抑瘤率达66％，很明显地高于Cb单独治疗组(P＜0．01)。结论：Cb对小鼠移植肝癌的抑制作用是强的，Cb与Cy联合治疗时抑癌作用更强，有望成为临床上的抗肿瘤药。     

艰难梭菌在肠粘膜的定植及其对肠上皮超微结构的影响

应用细菌定量培养和电镜技术对艰难梭菌(Cd)在地鼠肠道粘膜定植及早期超微结构变化进行研究。未经抗生素处理的地鼠接种Cd后,肠粘膜中未能培养出Cd:经抗生素预处理再接种Cd的地鼠肠粘膜和盲肠内容物中均能分离到Cd;但不同菌株的定植量有明显的差别;不同肠段中Cd定植量也有较明显差别;随着时间推移,定植量逐渐减少。以上结果说明Cd的定植受多种因素的影响。扫描电镜观察发现Cd主要定植于肠粘膜粘液层和上皮细胞表面。透射电镜下观察到接种Cd毒力株12h,上皮细胞微绒毛和线粒体肿胀,继而绒毛坏死脱落,线粒体水肿、融合。     

NRAGE对肠上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨神经生长因子受体作用黑色素瘤抗原基因同源蛋白(neurotrophin receptor-interacting MAGE homolog,NRAGE)是否参与肠缺血再灌注（ischemia and reperfusion,I/R）损伤的过程及其对肠上皮细胞凋亡及occludin蛋白的影响。方法制备SD大鼠小肠I/R损伤模型,取肠组织行免疫组化染色,观察NRAGE蛋白的表达变化;体外肠上皮永生化细胞株IEC-6给予缺氧及复氧后观察细胞NRAGE的表达变化;将NRAGE过表达慢病毒（Lv-NRAGE组）、NRAGE干扰表达慢病毒（sh-NRAGE组）及对照慢病毒（Lv-control组）感染IEC-6细胞,并设置不加慢病毒的对照组(NC组),Western blot及RT-PCR观察各组细胞NRAGE蛋白及mRNA的表达变化,流式细胞术观察各组IEC-6细胞的凋亡情况,Western blot观察感染慢病毒后紧密连接蛋白occludin蛋白的表达变化。结果I/R损伤后肠黏膜上皮细胞NRAGE表达较sham组升高(P<0.01);体外IEC-6细胞缺氧6 h后NRAGE蛋白的表达增加（P<0.01）,NRAGE mRNA表达升高（P<0.01）。感染慢病毒48 h后,相比于Lv-control组,Lv-NRAGE组早期凋亡率增加（P<0.01）,occludin蛋白表达降低（P<0.01）,sh-NRAGE组早期凋亡率降低（P<0.01）,occludin蛋白表达增高（P<0.001）。结论 NRAGE参与了I/R损伤过程,并促进肠上皮细胞凋亡,降低occludin蛋白的表达。     

番泻叶提取物对人肠上皮细胞生物学特性的影响

［兰梅，王新，吴汉平，樊代明. 世界化人消化杂志，2001；9(5):555-559］ 目的研究番泻叶提取对人肠上皮细胞生物学特性的影响. 方法应用MTT法观察番泻叶提取特对体外培养人肠上皮细胞生长的影响. 用流式细胞术观察番泻叶提取物(5 g*L-1)作6 wk后细胞增殖周期的变化，并用光镜和透射电镜观察长期番泻叶提取物作用下细胞形态学的变化. 细果大剂量番泻叶提取物(>25 g*L-1)可致体外培养的人肠上皮细胞全部死亡. 中等剂量(5 g*L-1)明显抑制细胞的生长(P<0.0001)，且呈剂量依赖关系，其IC50为7 g*L-1；小剂量(0.5 g*L-1)对细胞的生长无明显影响(P>0.05). 用番泻叶提取物(5 g*L-1)持续作用细胞6 wk后，可见其S期细胞数减少G2期细胞数增加，DI增高为1.11；光镜下见细胞贴壁差，生长缓慢，胞质中中毒颗粒增多；电镜下见细胞有明显空泡变性，凋亡细胞及凋亡小体多见，偶见病理性核分裂相. 结论番泻叶提取物对人肠上皮细胞生长的影响呈剂量依赖性，大剂量可致细胞生长延缓或死亡，小剂量无明显影响. 长期使用番泻叶提取物可使细胞增殖减慢，凋亡增加，异倍体DNA含量升高，促使细胞发生恶性转化. (何扬举)     

高浓度氧对肠上皮细胞Caco-2生长的影响

目的 研究高浓度氧对肠上皮细胞生长的影响.方法 采用细胞计数、MTT和Giemsa染色方法检测不同高浓度氧对细胞生长、对细胞杀伤和对细胞分裂能力的影响;采用免疫组织化学方法检测高浓度氧对Caco-2表达E2F-1的影响.结果 细胞计数和MTT结果显示40%氧浓度有利于细胞生长;60%、90%氧浓度导致细胞迅速死亡.不同氧浓度干预细胞3d后细胞分裂指数有明显不同,分裂细胞百分数分别为正常氧浓度时的2.5%,40%浓度氧时为3.3%,60%浓度氧时为1.3%,90%浓度氧时大部分细胞死亡.与正常氧浓度时相比,氧浓度为40%、60%时E2F-1表达增强,90%氧浓度时E2F-1表达明显减弱.但60%氧浓度E2F-1表达较40%氧浓度减弱.结论 适度的氧浓度促进细胞生长,高浓度氧则抑制细胞生长,甚至对细胞有杀伤作用.     

肠上皮细胞的粘弹性生物力学研究

目的　通过建立肠上皮细胞力学模型 ,以进一步了解肠上皮细胞的生物力学特性。方法　采用微管吸吮技术研究肠上皮细胞的粘弹特性。结果　测得正常 IEC- 6细胞弹性系数 K1 为 4 36 .2 1± 89.6 4 dyn/cm2 ,弹性系数 K2 为 2 98.37± 75 .16 dyn/cm2 ,粘性系数 μ为 15 .94± 4 .93dyn/(s· cm2 )。结论　本研究结果提示 ,肠上皮细胞的弹性成分影响细胞变形 ,主要反映肠上皮细胞的初始变形程度 ;肠上皮细胞的粘性成分影响细胞变形速度 ,反映了肠上皮细胞变形对时间的依赖性     

表皮生长因子、谷氨酰胺对小肠上皮细胞生长和分化的影响

探讨了EGF、谷氨酰胺，以及两者联合使用原代培养的小肠上皮细胞增殖和分化的影响。结果显示：单独使用EGF或谷氨酰胺均能促进肠上皮细胞的生长，使ALP活性升高，CK活性下降，EGF和谷氨酰胺合用后对肠上皮细胞产生协同的营养作用。联合用药的效果远比单独用药明显，讨论了CK、ALP变化的生物学意义，MTT显色法和EGF、谷氨酰胺促进肠上皮细胞生长的作用机理。认为上述研究结果将为临床联合使用细胞生长因子和肠营养素提供理论依据。     

乳酸杆菌与肠上皮细胞黏附作用的研究

目的 研究乳酸杆菌与肠上皮细胞的黏附作用,以及乳酸杆菌的耗尽培养上清液对其黏附性的影响。方法 用光镜和电镜技术分析不同时相乳酸杆菌与肠黏膜上皮细胞的黏附指数,同时观察了乳酸杆菌的耗尽培养上清液对黏附指数的影响。结果 乳酸杆菌对肠上皮细胞具有较强的黏附性。与新鲜LBS培养液悬浮组相比,耗尽培养上清液能使乳酸杆菌对肠上皮细胞的黏附指数增加（t=3．67,P〈0．01）。结论 乳酸杆菌是具有潜在开发价值的微生态制剂。     

过氧化氢对肠上皮细胞线粒体编码基因mRNA的影响

目的：观察过氧化氢处理对体外培养肠上皮细胞株SW－480线粒体编码基因mRNA的影响。方法：以400μmol/L和4mmol/L的过氧化氢处理人肠上皮细胞细胞株（SW－480)3h后，分离RNA,应用RT－PCR检测ATPase6、ATPase8、COI、COII及COIII mRNA的变化。结果：过氧化氢对肠上皮细胞线粒体编码基因mRNA的表达具有明显影响，但是这种改变不与过氧化氢的剂量呈现出一种一致的变化。结论：过氧化氢引起肠上皮细胞线粒体编码基因mRNA的明显改变。     

L-精氨酸对严重腹腔感染大鼠肠上皮细胞凋亡的影响

目的 了解L-精氨酸对严重腹腔感染大鼠肠上皮细胞凋亡的影响.方法 18只Wistar大鼠随机分为CLP组(n=6)、ARG组(n=6)和对照组(n=6),CLP组和ARG组均采用大鼠盲肠结扎加穿孔(CLP)制作严重腹腔感染模型;ARG组术后于腹腔注射L-精氨酸(300 mg/kg·d),CLP组术后注射等量生理盐水,对照组仅行剖腹术.各组均于术后24 h取小肠组织,采用原位末端标记法计数各组凋亡细胞.结果 与对照组大鼠比较,CLP组和ARG组小肠黏膜上皮细胞凋亡细胞数量显著升高(P＜0.001);与CLP组比较,ARG组小肠黏膜上皮细胞凋亡细胞数量显著降低(P=0.038).结论 严重腹腔感染可导致大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡增多,应用L-精氨酸可减少肠黏膜上皮细胞凋亡.     

肠道螺旋体对肠上皮细胞的吸附及其特性的研究

目的　研究肠道螺旋体对肠上皮细胞吸附的特性。方法　利用人工培养的肠上皮细胞系H40 7细胞建立研究肠道螺旋体与肠上皮细胞相互作用的方法 ,并用该方法研究肠道螺旋体对肠上皮细胞吸附的特性。结果　 4种不同来源的肠道螺旋体分离株均能吸附到人肠上皮细胞系H40 7细胞的表面 ,其中以人的分离株SP16的吸附率为最高 ,而非致病性的BrachyspirainnocensB2 5 6株则没有明显的吸附。人分离株SP16与H40 7细胞共同孵育 1h后的吸附率为 63 .77% ,2h则达到 89.11%。H40 7细胞经固定后肠道螺旋体仍能有效地吸附到细胞上 ,显示受体是稳定表达在肠上皮细胞的表面。结论　利用人工培养的肠上皮细胞系H40 7细胞建立了研究肠道螺旋体与肠上皮细胞相互作用的体外模型。     

烧伤大鼠血清对肠上皮细胞E-钙粘附蛋白表达的影响

目的　探讨烧伤血清对肠上皮细胞 E-钙粘附蛋白 (ECD)表达的影响及其意义。方法　培养大鼠肠上皮细胞株 IEC- 6 ;采用激光共聚焦及流式细胞术定量分析等技术 ,动态观察烧伤血清刺激培养的 IEC- 6细胞ECD的变化。结果　肠上皮细胞经烧伤血清作用后早期 ECD表达呈进行性下降 ,细胞通透性增加。结论　烧伤后肠上皮细胞细胞 ECD表达降低 ,细胞粘附连接损伤     

烧伤大鼠血清对肠上皮细胞E—钙粘附蛋白表达的影响

目的：探讨烧伤血清对肠上皮细胞E－钙粘附蛋白（ECD）表达的影响及其意义。方法：培养大鼠肠上皮细胞株IEC－6；采用激光共聚焦及流式细胞术定量分析等技术，动态观察烧伤血清刺激培养的IEC－6细胞ECD的变化。结果：肠上皮细胞经烧伤血清作用后早期ECD表达呈进行性下降，细胞通透性增加。结论：烧伤后肠上皮细胞细胞ECD表达降低，细胞粘附连接损伤。     

空肠弯曲菌对离体肠上皮细胞的粘附试验

本文报导64株人源空肠弯曲菌与40株鸡源空肠弯曲菌对人胚肠上皮细胞和小鸡肠上皮细胞粘附试验结果,证明两种细胞都可做粘附试验的研究,无显著性差异(P>0.05),但人株与鸡株对人胚肠上皮细胞的粘附率,则人株显著高于鸡株,有非常显著性差异(P<0.01),提示空肠弯曲菌存在致病菌和非致病菌的差别,与上海医大卫生微生物教研室报告结果相似,这对研究空肠弯曲菌的流行病学,疾病防治有重要价值。本试验方法具有简便,快速,可靠的优点,目前国内未见报告。     

白色念珠菌粘附肠上皮细胞及IgA及其作用的体外观察

目的：观察特异ＩｇＡ抑制白色念珠菌（白念菌）粘附的作用：方法：首先建立肠上皮细胞ＩＥＣ－６在玻片表面生长西式，将特异ＩｇＡ阳性肠粘液、阴性肠粘液以及抗ＩｇＡ血清中和后的肠粘液分别作用白念菌，收集菌并与上述细胞共同孵育。计数粘粘数，并换算出抑制率。结果：含有特异抗白念菌ＩｇＡ的肠粘液抑制白念菌优于其它肠粘液。结论：持异ＩｇＡ在肠粘液中起重要的抗粘附作用。     

小檗碱对溃疡性结肠炎小鼠肠上皮细胞凋亡的影响

目的：观察小檗碱（BBR）对溃疡性结肠炎（UC）小鼠肠上皮细胞（IECs）凋亡和Caspase-12、Caspase-3蛋白表达的影响,探讨其治疗UC的可能作用机制。方法：BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型对照组和BBR低、中、高剂量组。采用右旋葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导建立UC小鼠模型,同时BBR混悬液灌胃给药7天。观察小鼠一般情况并评估疾病活动指数（DAI）,末次给药后结肠组织切片、HE染色并观察组织的病理学变化;TUNEL法检测结肠组织IECs的凋亡情况;免疫组化法测定结肠组织中Caspase-12和Caspase-3蛋白的表达。结果：与模型对照组比较,BBR治疗组小鼠结肠炎的临床症状和组织病理损伤均有较好的改善;模型对照组结肠凋亡细胞显著增多,Caspase-12和Caspase-3蛋白表达显著降低,而BBR治疗后能不同程度地减少细胞凋亡,高剂量BBR治疗能明显下调组织中Caspase-12和Caspase-3的表达水平。结论：BBR能有效缓解UC小鼠的结肠炎症,其机制可能为抑制Caspase-12/Caspase-3凋亡信号通路激活,从而抑制IECs的过度凋亡。     

白色念珠菌对人肺上皮细胞的黏附作用及其影响因素

目的　在体外研究白色念珠菌临床分离株对人肺上皮细胞的黏附作用及其影响因素。方法　将不同浓度的白色念珠菌和人肺上皮细胞在体外作用不同的时间 ,固定后经革兰染色 ,在倒置显微镜下计数白色念珠菌黏附人肺上皮细胞的黏附数。观察胰酶、白色念珠菌培养上清液、加热等处理因素对白色念珠菌黏附人肺上皮细胞的影响。结果　白色念珠菌的黏附与浓度、时间有关 ,在 5× 10 3～ 5× 10 7CFU/ml范围内 ,黏附数随浓度的增加而增加。该黏附作用 15min后趋于饱和。在 15min内 ,白色念珠菌对肺上皮细胞的黏附随时间的延长而增强。白色念珠菌经胰酶或 10 0℃ 30min处理后黏附数降低 ,培养上清液及上清液经加热或胰酶处理后都能抑制白色念珠菌的黏附作用。结论　白色念珠菌对人肺上皮细胞的黏附作用与浓度和时间有依赖的关系 ,是特异性黏附过程。不同因素处理白色念珠菌和肺上皮细胞 ,其黏附数发生改变 ,说明黏附作用与白色念珠菌表面黏附因子和人肺上皮细胞表面的黏附受体的数量和结构有关。