对禽流感H5N1灭活疫苗不同免疫方式诱导的免疫应答及异亚型保护研究

目的 观察禽流感H5N1灭活疫苗以不同方式免疫后诱导的免疫应答及抗异亚型病毒攻击的保护作用.方法 将H5N1灭活疫苗分别通过腹腔和滴鼻方式免疫BALB/c小鼠,同时以PBS作为对照;免疫后分别以PR8和H9N2病毒攻击,观察小鼠的体重变化和生存情况.采用ELISA对各组小鼠攻毒后不同时间的血清IgG及其亚类水平进行动态检测;流式细胞仪检测脾淋巴细胞亚群情况.采用t检验对各组数据进行比较.结果 PR8和H9N2病毒攻击后,各组小鼠体重均下降,但疫苗组小鼠于后期体重恢复正常,存活率分别为100%和70%-80%,而PBS组小鼠则全部死亡.无论以何种方式免疫,疫苗组的特异性IgG及其亚类水平均明显升高,其中以IgG2a水平升高更为明显.攻毒后疫苗组小鼠脾CD4+与CD8+T淋巴细胞比值出现下降(t=6.8017,P<0.01);滴鼻免疫组与腹腔免疫组相比降低更明显(t=3.9701,P<0.05).结论 H5N1疫苗免疫原性良好,可诱导较高水平的特异性抗体产生,诱导的抗体亚类以IgG2a为主.两种免疫方式均可对小鼠提供很好的异亚型保护,而滴鼻免疫能够诱导更强的CD8+T细胞应答.

Abstract：

Objective To observe immune responses and heterosubtypic protection elicited by an inactivated influenza H5N1 vaccine with different immunization routes in mice. Methods BALB/c mice were intraperitoneally injected or intranasally immunized with the inactivated H5N1 vaccine, the mice administered with PBS were used as control. Weight loss and survival in mice were observed after PR8 or a H9N2 virus challenge. Serum specific IgG antibody and its subclasses were detected by ELISA kits. Ratios of CD4+ /CD8+ lymphocytes in spleens of mice were assayed. The t-test was used in the comparison of different groups.Results After challenge, weight loss was found in all groups, but the weight of mice in vaccination groups returned to normal later. The mice in PBS groups all died. The vaccinated mice were completely protected against PR8 and partly protected against H9N2 virus. The level of IgG antibody increased significantly after vaccination, and the increase magnitude of IgG2a was higher than that of IgG1. The ratios of CD4+ /CD8+ lymphocytes in spleens of vaccinated mice decreased after challenge (t=6. 8017,P<0. 01) , especially in the intranasal group (t = 3. 9701, P < 0. 05 ). Conclusions Both intraperitoneal injection and intranasal immunization can induce a high level of specific IgG, especially the level of IgG2a, and provide protection against heterosubtypic viruses. Intranasal immunization seems to induce a higher level of CD8+ T cell response.     

禽流感H5N1灭活疫苗与不同纳米化佐剂联合免疫研究

目的 观察禽流感H5N1灭活疫苗加不同佐剂以及纳米化佐剂免疫小鼠后产生的免疫应答的差异,同时观察免疫对异亚型病毒攻击后的保护情况.   方法 用H5N1灭活疫苗分别联合佐剂氢氧化铝、纳米化氢氧化铝、MF59和纳米化MF59通过腹腔注射方式免疫雌性BALB/c小鼠,同时分别以H5N1灭活疫苗免疫小鼠以及PBS腹腔注射处理小鼠作对照.采用ELISA方法分别对各组小鼠免疫后血清特异性IgG及其亚类IgG1、IgG2a水平进行检测,以PR8病毒鼻腔攻击后观察小鼠体重变化情况和生存率.采用t检验作组间比较.    结果 与PBS处理组相比,无论以何种方式免疫H5N1疫苗,免疫后特异性IgG及其亚类水平均明显升高(t=7.4004,P<0.01),以联合MF59后诱导的特异性抗体水平最高.其中疫苗单独免疫组和联合M59免疫组IgG2a水平升高明显,联合纳米化MF59免疫小鼠后IgG2a水平有所下降,IgG1水平有所升高;联合铝佐剂组以IgG1升高为主.攻毒后各组小鼠体重均出现下降,但疫苗单独免疫小鼠以及疫苗与佐剂联合免疫小鼠于攻毒后期体重恢复接近正常或者正常.PBS处理组小鼠攻毒后全部死亡,佐剂联合免疫组小鼠存活率100%,而疫苗单独免疫小鼠存活率为70%.   结论 H5N1疫苗无论是单独免疫或是联合不同佐剂免疫均可诱导较高水平的特异性抗体产生,有非常好的免疫原性.H5N1灭活疫苗诱导的抗体亚类以IgG2a为主,MF59以及纳米化MF59也以诱导IgG2a亚类为主,但纳米化MF59可诱导更均衡的免疫应答.联合铝佐剂或纳米化铝佐剂免疫小鼠后均可诱导以IgG1亚类为主的抗体应答.联合两种佐剂均可对小鼠产生很好的异亚型保护.     

NY-ESO-1/HSP65融合蛋白腹腔免疫小鼠的免疫效果

目的  观察NY-ESO-1/热休克蛋白65（heat shock protein 65,HSP65）融合蛋白（NY-H）免疫BALB/c小鼠诱导的体液和细胞免疫应答及其抗肿瘤作用。 方法  将BALB/c小鼠按简单随机方法分组,分别用 NY-H、NY-ESO-1与HSP65混合（NY+H）、NY-ESO-1、HSP65和PBS腹腔免疫4次,间隔2周。每次免疫后第14天,对小鼠尾静脉采血,检测血清抗体滴度。末次免疫后第7天,取小鼠脾细胞,检测细胞因子、淋巴细胞增殖水平、CD4+和CD8+ T细胞的百分比及对肿瘤细胞的特异性杀伤作用,采用t检验或2检验对结果进行比较。结果 NY-H组小鼠在第1次免疫后就产生了较高水平的抗体（吸光度值为0.841±0.059）,与NY+H组（0.333±0.077）和NY-ESO-1组（0.275±0.183）相比差异有统计学意义（t=12.753,P<0.01;t=7.204,P<0.01）。NY-H组小鼠的IL-2和IFN-γ分泌能力均高于其他各组,并且CD4+、CD8+ T细胞数量大幅增高,细胞增殖率（38.00%±3.84%）明显高于NY+H组（12.90%±0.65%）和NY-ESO-1组（10.90%±1.44%）（x=830.1,P<0.01;x²=994.0,P<0.01)。小鼠免疫NY-H后,脾淋巴细胞能特异性杀伤表达NY-ESO-1的小鼠B16肿瘤细胞。 结论  NY-H能诱导小鼠产生较强的体液和细胞免疫应答,且具有良好的抗肿瘤作用。     

国产四价流感病毒亚单位疫苗在小鼠体内的安全性和免疫原性

目的  评价国产四价流感病毒亚单位疫苗在小鼠中的安全性和免疫原性。方法  首先，按中国药典2015年版三部的方法对疫苗进行鉴别试验和急性毒性试验。然后，采用随机区组法将40只无特定病原体级雌性昆明小鼠分为4组，每组10只，分别腹腔注射7.5、15.0、30.0 g疫苗和PBS（对照），1.0 ml/只。注射后21 d对小鼠眼眶采血，用血凝抑制法检测小鼠血清抗体水平，并统计抗体阳转率。采用t检验对各组数据进行比较。结果  鉴别试验结果表明疫苗的抗原性与推荐病毒株一致。急性毒性试验显示，疫苗组和对照组小鼠的外观、行为、分泌物、排泄物均无异常，无小鼠死亡。在14 d观察期内，疫苗组和对照组小鼠的体重分别为22.0～33.0和21.8～33.7 g，差异无统计学意义（t=－1.90～1.03，P值均>0.05），且均较免疫前（21.4～23.6和21.2～23.4 g）有不同程度增加。小鼠心、肺、脑、肝等脏器均无明显病理改变。3个剂量疫苗均可诱导小鼠产生较高滴度的血清抗体（1:69～1:998），而对照组仅为1:6～1:25（t=3.68~4.88，P值均<0.01），其中15.0、30.0 g剂量组的抗体阳转率达到100%。结论  四价流感病毒亚单位疫苗具有较好的安全性和免疫原性。     

杆状病毒系统表达的重组H7N9血凝素亚单位疫苗的免疫保护效果

目的 评价流感病毒H7N9血凝素（hemagglutinin，HA）亚单位疫苗在动物中的免疫效果。方法 利用杆状病毒表达系统表达分泌型的HA片段，单独或联合Al(OH)₃佐剂腹腔注射免疫BALB/c小鼠后，对小鼠进行H7N9毒株的攻击。分析重组H7N9 HA（rH7HA）的免疫保护效果。结果 rH7HA 加Al(OH)₃佐剂与rH7HA单独免疫相比，在血清中诱导了更高的IgG滴度。最高剂量（1.500 μg）rH7HA加佐剂组诱导IgG滴度达2¹⁵，单独诱导IgG滴度达2¹³，但两者之间差异无统计学意义，说明免疫小鼠的rH7HA量达到1.5 μg即能够对同源病毒的感染提供保护。结论 杆状病毒系统表达的分泌型HA通过腹腔注射能够保护小鼠抵抗致死性剂量的同源病毒的感染。     

脑损伤患者应用芬太尼、瑞芬太尼和舒芬太尼的脑血流动力学比较

目的:比较脑损伤患者应用芬太尼、瑞芬太尼和舒芬太尼的脑血流动力学变化情况,为临床提供参考。方法:选择于我院就诊治疗的66例颅脑损伤患者的病例,随机分为3组,在肌松与镇静药相同的基础上,F组(n=22)、RF组(n=22)和SF组(n=22)在全麻诱导期分别应用芬太尼、瑞芬太尼和舒芬太尼;于诱导前(t₀)、诱导后30 s(t₁)和1 min(t₂)、插管后5 min(t₃)和10 min(t₄)观察3组的脑血流动力学参数(包括:Qmean、Vmean、PI和RI),同时监测HR和MAP。结果:在脑血流动力学参数方面,3组患者在t₁~t₄期,Qmean和Vmean均较同组t₀期不同程度变化,其中F组和RF组显著降低(P<0.05或P<0.01),而SF组变化无统计学意义(P>0.05);3组PI和RI均较同组t₀期明显升高(P<0.05或P<0.01);RF组t₁~t₄期Qmean和Vmean较F组降低更明显、PI和RI升高也更明显(均为P<0.05);SF组t₁~t₂期各参数较F组变化幅度更小(P<0.05),t₃~t₄期无统计学差异(P>0.05)。在HR和MAP方面,F组和SF组患者在t₁~t₂期均较t₀期明显降低(P<0.05);RF组t₁~t₃期均明显降低(P<0.05),且较F组在t₁~t₃期降低更明显(P<0.05),其他组内和组间比较均无统计学意义(P>0.05)。结论:脑损伤患者应用等效浓度的芬太尼、瑞芬太尼和舒芬太尼诱导麻醉时,以瑞芬太尼对脑血流动力学参数影响最大,芬太尼次之,舒芬太尼更有利于脑血流动力学的稳定。     

人甲型H7N9禽流感全病毒灭活疫苗和裂解疫苗在小鼠中的免疫原性研究

 目的   比较人甲型H7N9禽流感全病毒灭活疫苗和裂解疫苗在小鼠中的免疫原性,为该疫苗的类型选择提供初步依据。 方法   采用相同血凝素含量（5 μg）的H7N9全病毒灭活和裂解疫苗（含或不含氢氧化铝佐剂共4种类型）,分别对BALB/c小鼠进行1针或2针免疫。免疫后,用血凝抑制（hemagglutination inhibition,HI）试验检测血清抗体滴度,比较不同类型疫苗的免疫效果。 结果   小鼠免疫1针全病毒灭活疫苗后,全部血清阳转,HI抗体几何平均滴度（geometric mean titer,GMT）为149;免疫2针后,抗体GMT为243。小鼠免疫1针裂解疫苗后无抗体阳转;免疫2针后全部抗体阳转,GMT为139。两种疫苗添加铝佐剂后,诱导的HI抗体GMT仅略有增加。 结论   H7N9全病毒灭活疫苗在小鼠中的免疫原性较强。在同样类型和剂量的情况下,裂解疫苗需要免疫两次才能达到与全病毒疫苗相同的效果。铝佐剂对免疫原性提升不明显。     

复方苦参注射液治疗乳腺癌术后化疗患者的临床疗效及其对外周血T细胞亚群的影响研究

目的:探讨复方苦参注射液治疗乳腺癌术后化疗患者的临床疗效及其对外周血T细胞亚群的影响。方法:将80例术后乳腺癌患者按照治疗方式随机分为对照组(n=37)与观察组(n=43),对照组单纯采用化疗治疗,观察组在此基础上联合复方苦参注射液治疗。比较2组临床缓解率、治疗前后免疫功能指标水平、治疗前后生存质量评分、治疗前后血象指标及细胞因子水平、治疗前后外周T细胞亚群水平。结果:(1)对照组临床缓解率(RR)为45.95%,显著低于观察组(74.42%)(P< 0.05);(2)对照组治疗后免疫功能指标(IgG、IgA、IgM)水平均显著低于治疗前(P< 0.05),但观察组治疗后上述指标水平均显著高于治疗前及对照组治疗后(P< 0.05);(3)2组治疗后Karnofsky功能状态评分标准(KPS)评分均显著高于治疗前(P< 0.05),且观察组治疗后KPS评分显著高于对照组治疗后(P< 0.05);(4)观察组治疗后WBC、PLT及IL-2水平均显著高于对照组治疗后(P< 0.05),观察组治疗后IL-6水平显著低于对照组治疗后(P< 0.05);(5)观察组治疗后外周血T细胞亚群(CD4⁺、CD8⁺及CD69)水平均显著高于治疗前及对照组治疗后(P< 0.05)。结论:复方苦参注射液治疗乳腺癌术后化疗患者的临床疗效显著,可提高外周血T细胞亚群(CD4⁺、CD8⁺及CD69)水平,应将此方法加以推广、使用。     

重组痘苗病毒艾滋病疫苗细胞免疫评价方法的优化

目的  优化酶联免疫斑点试验（enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT）方法,提高其在重组天坛株痘苗病毒艾滋病疫苗细胞免疫评价中的灵敏度。方法  将疫苗或对照痘苗病毒皮内免疫BALB/c小鼠,50 μl/只,6周后无菌采集小鼠脾脏。用ELISPOT对分泌IFN-γ的脾淋巴细胞〔斑点形成细胞（spot-forming cell,SFC）〕进行检测。比较不同脾淋巴细胞密度（2×10⁵、1×10⁶、2×10⁶个/孔）和不同刺激肽质量浓度（2、4 μg/ml）对SFC的影响。分别采用单因素方差分析和t检验进行多组间和两组间数据比较。结果  3个细胞密度组（F=0.023,P>0.05）和2个刺激肽浓度组（t=-1.762~-0.110,P值均>0.05）间的SFC数差异均无统计学意义。当细胞密度为2×10⁵个/孔、刺激肽质量浓度为4 μg/ml时,疫苗组的SFC数达到（107.00±42.01）个/106细胞,高于原实验条件（细胞密度为1×10⁶个/孔、刺激肽质量浓度为2 μg/ml）的SFC数〔（76.55±64.45）个/10⁶细胞〕,但两者间的差异无统计学意义（t=1.252,P>0.05）。前者的SFC阳性率达到100%,而后者仅为50%。结论  通过优化ELISPOT方法中的细胞密度和刺激肽浓度,进一步提升了该法在重组痘苗病毒艾滋病疫苗细胞免疫评价中的灵敏度。     

无小鼠神经毒力的乙型脑炎病毒/登革病毒1型嵌合病毒的筛选与序列分析

目的  采用蚀斑纯化法筛选对小鼠无神经毒力的乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）/登革病毒（dengue virus,DENV）1型嵌合病毒（JD1）纯化株,分析影响JD1小鼠神经毒力的相关位点。方法  将JD1在乳地鼠肾细胞中进行3轮蚀斑纯化,检测JD1纯化株对小鼠的脑内神经毒力。然后提取无神经毒力纯化株的基因组RNA,用逆转录PCR分段扩增全基因组序列并进行序列测定。将测序结果分别与原DENV-1 的前膜-包膜蛋白和JEV骨架病毒株SA-14-14-2的基因序列进行比对。选取2个无神经毒力纯化株进行小鼠免疫保护实验。采用单侧t检验对结果进行比较。结果  经过3轮蚀斑纯化后,获得大、中、小3种蚀斑形态的6个JD1纯化株。3个纯化株对小鼠无神经毒力,小鼠脑内注射后全部存活;1株神经毒力较弱,70%以上小鼠存活;2株具有强神经毒力,小鼠全部死亡。测序结果显示,对小鼠无神经毒力的3个纯化株存在2处相同的氨基酸突变。将其中2个纯化株JD1-PP-61和JD1-PP-31腹腔免疫小鼠后,再用1 000半数致死量DENV-1鼠脑适应株进行脑内攻击。JD1-PP-61能较好地保护小鼠抵抗病毒攻击,仅20.0%小鼠死亡（t=7.237,P<0.001）;JD1-PP-31保护效果稍弱,41.9 %小鼠死亡（t=4.752,P<0.01）。结论  通过蚀斑纯化筛选出对小鼠无神经毒力的JD1纯化株,并发现了可能与神经毒力减弱相关的位点。     

冻干皮内注射用卡介苗的临床观察

目的  对两个工作种子批菌种D2-甲12制备的两批冻干卡介苗接种人体后的安全性和效果进行临床考核。 方法  对100名结核杆菌纯化蛋白衍生物（PPD）皮肤试验阴性的3月龄~50岁健康对象和205名新生儿分别接种上述两个批次的观察疫苗和一个对照疫苗。观察接种后的局部和全身反应,测量卡痕,并对新生儿进行PPD皮肤试验。采用χ²检验和t检验对新生儿各组间的卡痕和PPD试验结果进行比较。结果  所有对象接种后均未发现接种部位和全身不良反应。新生儿卡痕均值≥4.6 mm,PPD硬结均值≥6.8 mm。卡痕和PPD试验阳性率均超过90%,两者在新生儿各组间的差异均无统计学意义（χ² =0.001~1.713,P=0.191~1.000）。卡痕均值和PPD硬结均值在两个观察疫苗组间的差异无统计学意义（t=0.773,P=0.441;t=0.226,P=0.822）,而对照疫苗组与两个观察疫苗组间的差异均有统计学意义（t=2.645~3.361,P=0.001~0.010）。  结论  两个工作种子批菌种D2-甲12制备的卡介苗接种人体是安全的,并具有良好的接种效果。     

幽门螺杆菌黏附素基因（hpaA）的表达及重组蛋白的免疫原性检测

 目的   研究幽门螺杆菌黏附素 A（adhesin A of Helicobacter pylori,HpaA）基因在大肠杆菌中的表达和检测纯化 HpaA 的免疫原性。方法   将hpaA/pET28a表达质粒转入大肠杆菌BL21（RP）株并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达,通过Ni²⁺亲和层析和分子筛层析纯化表达蛋白。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表达蛋白的相对分子质量,用蛋白质印迹法对表达蛋白进行特性确认。将纯化HpaA腹腔注射Balb/c小鼠,并检测小鼠的抗体水平。结果   表达蛋白的相对分子质量约为30 000,与HpaA相符。纯化的表达蛋白可与抗HpaA抗体发生特异性反应。腹腔注射HpaA的小鼠与对照小鼠间的血清抗HpaA IgG抗体水平差异存在统计学意义（t=8.367,P<0.01）。结论   HpaA在大肠杆菌BL21（RP）株中得到成功表达,且纯化HpaA具有较好的免疫原性。     

Long-lasting protective immunity against H7N9 infection is induced by intramuscular or CpG-adjuvanted intranasal immunization with the split H7N9 vaccine

There is an urgent need for efficient vaccines against the highly pathogenic avian influenza A viral strain H7N9. The duration and intensity of the immune response to H7N9 critically impacts the epidemiology of influenza viral infection at the population level. However, the insufficient immunogenicity of H7N9 raises concerns about vaccine efficacy. In this study, we evaluated the impact of immunization routes and the adjuvant CpG on the immune response to a split H7N9 vaccine in mice. Determination of humoral and cellular responses to the vaccine revealed that after four vaccine doses, high titers of H7N9-specific serum IgG, determined by the influenza hemagglutination inhibition (HI) assay, were induced through the intramuscular (i.m.) route and lasted for at least 40 weeks. CpG-adjuvanted immunization increased the levels of long-lived IFN-γ⁺ T cells and raised the Th1-biased IgG2a/IgG1 response ratio. In addition, aside from mucosal IgA, CpG-adjuvanted intranasal (i.n.) immunization elicited serum IgG and cellular responses of a similar duration and intensity to CpG-adjuvanted i.m. immunization. Mouse challenge assays demonstrated that 24 weeks following i.m. immunization without CpG or CpG-adjuvanted immunization through the i.m. or i.n. routes, both offered a high level of protection against H7N9 infection. These results indicate that efficient long-term protection against H7N9 can be achieved via the optimization of vaccination strategies, such as immunization doses, routes, and adjuvants.     

急性冠脉综合征患者低分子肝素诱导血小板减少症的危险因素分析

目的：分析急性冠脉综合征（ACS）患者发生低分子肝素诱导血小板减少症（HIT）的相关危险因素。方法：收集某院2011年1月-2017年11月出院的ACS且使用低分子肝素抗凝治疗的患者资料,调查血小板减少的发生情况,并通过单因素和多因素Logistic回归分析,得出肝素诱导的HIT的独立危险因素。结果：共纳入190例患者（HIT组48例,对照组142例）。年龄≥ 70岁（t=4.274,P=0.042）、血小板基础值（t=6.442,P=0.000）、肾功能肌酐水平（t=-4.080,P=0.000）、血红蛋白水平（t=3.337,P=0.001）、肝功能谷丙转氨酶（t=-2.253,P=0.025）、联合使用抗菌药物（t=27.023,P=0.000）以及联合使用替罗非班（t=4.656,P=0.031）在HIT组与对照组之间差异有显著性。对以上指标进一步进行多因素Logistic回归分析,得到高龄（OR=0.183,P=0.008）、血小板基础值低（OR=0.960,P=0.000）、肾功能肌酐水平高（OR=1.023,P=0.005）、联合使用抗菌药物（OR=0.191,P=0.003）、联合使用替罗非班（OR=3.500,P=0.041）是HIT发生的独立危险因素。结论：ACS患者在使用低分子肝素时应警惕HIT的发生,尤其年龄≥ 70岁、血小板基础值低、肾功能肌酐值高、联合使用抗菌药物及联合使用替罗非班的患者。     

Sabin株脊髓灰质炎病毒纯化的离子交换层析条件研究

目的  研究Sabin株脊髓灰质炎病毒（Sabin strain polio virus,sPV）纯化的离子交换层析（ion exchange chromatography,IEC）条件。 方法  在不同层析条件下对sPV凝胶层析粗纯液进行IEC,设定的层析参数分别为介质Q Sepharose FF或Eshmuno Q、上样量30%或40%柱体积、流速（150±5）或（240±8） cm/h。分别检测各型sPV纯化液的D抗原含量、蛋白浓度、病毒滴度、宿主细胞蛋白残留量和Vero细胞DNA残留量,计算D抗原回收率和比活。结果  Eshmuno Q IEC纯化的各型sPV纯化液的D抗原回收率均明显高于Q Sepharose FF IEC。在上样量40% 柱体积、流速（150±5） cm/h条件下,Eshmuno Q IEC纯化的各型sPV纯化液的D抗原比活均高于Q Sepharose FF IEC,差异均有统计学意义（Ⅰ型：t=4.23,Ⅱ型：t=5.73,Ⅲ型：t=4.18,P值均<0.05）,而且前者的宿主细胞蛋白残留量（Ⅰ型：t=8.29,Ⅱ型：t=7.89,Ⅲ型：t=8.18,P值均<0.05）和Vero细胞DNA残留量（Ⅰ型：t=4.23,Ⅱ型：t=4.56,Ⅲ型：t=4.78,P值均<0.05）均低于后者,差异均有统计学意义。结论  用IEC纯化sPV进行纯化时,以Eshmuno Q代替Q Sepharose FF可增加上样量和流速,从而缩短IEC时间,提高纯化效率。     

疫苗生产中使用的酸性和碱性苯酚对MRC-5细胞生长的影响

 目的   观察疫苗生产中使用的消毒剂酸性苯酚和碱性苯酚对MRC-5细胞生长的影响。 方法   将酸性苯酚（0.37%）和碱性苯酚（0.74%）分别加入MRC-5细胞培养瓶中,观察细胞生长形态,绘制细胞生长曲线,测定细胞贴壁率。分别采用t检验和x²检验对结果进行比较。 结果  加入酸性和碱性苯酚后,第7天的细胞数分别为6.65×10⁵和7.12×10⁵,与对照组（6.93×10⁵）相比,差异无统计学意义（t=0.476,P=0.654;t=0.334,P=0.752）;第8小时的细胞贴壁率分别为88.3%和96.0%,与对照组（90.3%）相比,差异亦无统计学意义（x²=0.765,P=0.659;x²=0.376,P=0.585）。 结论  微量酸性和碱性苯酚对MRC-5细胞的生长没有显著影响。