纳米雄黄对MCF-7乳腺癌干细胞的体外抑制作用

目的 研究纳米雄黄对乳腺癌干细胞的体外抑制作用.方法 以人乳腺癌MCF-7亲本细胞为对象,采用无血清培养法培养获得乳腺癌干细胞.以阿霉素(1 mg/L)为阳性对照,以相同质量浓度的水飞雄黄为参照,采用CCK-8法检测纳米雄黄对MCF-7亲本细胞及干细胞增殖的影响;借助悬浮球形成及分化实验、划痕实验、Transwell侵...     

纳米雄黄抗肿瘤作用及在荷瘤小鼠组织中的分布

目的:研究纳米雄黄抗肿瘤作用和在荷瘤小鼠体内的分布情况,并与原料雄黄进行比较。方法:采用计算抑瘤率的方法研究纳米雄黄对动物移植瘤生长的影响,应用MTT法检测纳米雄黄对体外培养人肿瘤细胞株生长的抑制作用,用石墨炉原子吸收光谱法检测荷瘤小鼠组织样品砷浓度。结果:纳米雄黄对小鼠艾氏腹水癌实体型和小鼠肝癌H22均有抑制作用,且纳米雄黄50 mg·kg-1剂量组的抑瘤作用与原料雄黄100mg·kg-1剂量组的抑瘤作用相当。纳米雄黄对HL-60细胞和U937细胞的抑制作用强于原料雄黄。纳米雄黄组肝、脾、肿瘤中砷浓度显著高于同剂量原料雄黄组。结论:纳米雄黄抗肿瘤作用强于原料雄黄,并具有肝、脾和肿瘤组织靶向性。     

纳米雄黄抗B细胞非霍奇金淋巴瘤Raji细胞的体外作用研究

目的考察纳米雄黄对B细胞非霍奇金淋巴瘤Raji细胞的体外作用。方法利用激光粒度仪、TEM和AFM对纳米雄黄和水飞雄黄进行表征;利用光镜、AFM和TEM依次观察纳米雄黄和水飞雄黄作用下Raji细胞的增殖形态变化、单细胞表面细胞膜变化以及细胞内超微结构的变化;MTT法检测纳米雄黄和水飞雄黄作用下的细胞存活率;利用荧光显微镜及流式细胞术观察纳米雄黄和水飞雄黄引起Raji细胞的凋亡和细胞周期分布情况。结果纳米雄黄的粒径为(79±8)nm,水飞雄黄的粒径为(1.89±0.2)μm。光镜下,可明显观察到纳米雄黄可抑制Raji细胞的聚集生长状态,AFM下可观察到纳米雄黄作用下的Raji细胞皱缩,体积变小,膜表面的黏附物质不再向四周伸展,而水飞雄黄作用下的Raji细胞变化不明显。TEM下可观察到纳米雄黄作用下的Raji细胞胞内亚细胞器受到破坏,线粒体空泡明显增多,水飞雄黄组变化不明显。MTT结果显示,50 mg·L~(-1)纳米雄黄作用Raji细胞24 h时,细胞的存活率为(40±2)%,而相同剂量的水飞雄黄作用组为(65±3)%;50 mg·L~(-1)纳米雄黄作用Raji细胞48 h时,Raji细胞的存活率仅为10%,而相同剂量的水飞雄黄组,Raji细胞的存活率为(42±2)%。荧光显微镜下可观察到纳米雄黄作用下的Raji细胞核凋亡明显,水飞雄黄组作用不明显。流式细胞术结果显示,水飞雄黄作用下的Raji细胞总凋亡率为11.14%,而纳米雄黄处理组的Raji细胞总凋亡率为15.9%。与水飞雄黄相比,纳米雄黄作用下Raji细胞在G_1期的分布比例明显升高,S期分布比率下降。结论与水飞雄黄相比,相同剂量的纳米雄黄在相同作用时间下,可明显抑制B细胞淋巴瘤Raji细胞的增殖,破坏其亚细胞结构,进而引起其凋亡。     

雄黄抗肿瘤作用的研究进展

目的综述了近年来雄黄(As_4S_4)在体内和体外治疗各种肿瘤的应用近况及其药理作用。方法查阅相关文献43篇,对雄黄(As_4S_4)在临床上的应用以及其在体内和体外治疗各种肿瘤的应用现状和药理作用进行了归纳总结。结果雄黄(As_4S_4)在临床能够用于治疗血液疾病、关节疾病及皮肤病(外用),能够通过多种途径抑制多种肿瘤细胞的增殖和诱导凋亡。结论雄黄(As_4S_4)在多种肿瘤相关疾病的治疗方面具有广阔的应用前景。     

雄黄抗癌作用的研究进展

中药雄黄在我国传统医学中应用历史悠久,近年来在肿瘤的治疗中发挥着越来越大的作用,本文介绍雄黄抗癌作用的研究与进展,包括治疗研究、作用机理、不良反应及其新剂型—纳米雄黄的研发等,并对雄黄抗癌作用的未来进行展望。     

纯化纳米雄黄制备方法探讨

目的探讨纯化纳米雄黄的制备方法,以制备高纯度、高生物利用度、低毒副作用的纯化纳米雄黄颗粒。方法①天然雄黄经去离子水和不同浓度的HCl、NaOH纯化处理后得到纯化雄黄,测定As2S2含量;②天然雄黄、纯化雄黄经高能球磨法制备得到天然纳米雄黄、纯化纳米雄黄,颗粒经扫描电镜、纳米粒度分析仪测定纳米颗粒形貌、粒径,测定As2S2含量;③天然纳米雄黄、纯化纳米雄黄经2.0 mol·L-1的HCl纯化处理得到天然纳米雄黄(纯化组)、纯化纳米雄黄(纯化组),扫描电镜、纳米粒度分析仪测定纳米颗粒形貌、粒径;测定As2S2含量。结果①去离子水;0.5、1.0、2.0、4.0 mol·L-1的HCl与NaOH纯化处理后颗粒As2S2含量均有所提高,各处理组之间差异有统计学意义(P<0.05);纯化效果:HCl组>NaOH组>去离子水组,随着HCl、NaOH浓度的提高,As2S2的含量亦随之提高;以4.0 mol·L-1 HCl组纯化效果最显著,其次为2.0 mol·L-1HCl组。②天然雄黄、纯化雄黄、天然纳米雄黄(纯化组)、纯化纳米雄黄(纯化组)经高能球磨法可制备得到纳米级雄黄颗粒,扫描电镜可见近似圆球形的纳米级颗粒,粒度分布均匀,纳米粒度分析仪测定其平均粒度分别为(135.13±9.19)、(134.39±4.57)、(135.88±2.68)、(133.73±4.36)nm;As2S2含量分别为(92.09±0.83)%、(97.07±0.47)%、(97.42±0.11)%、(98.33±0.08)%。纳米雄黄组与纳米雄黄(纯化组)粒度差异无统计学意义(P>0.05),纯度差异有统计学意义(P<0.05)。结论①去离子水、HCl、NaOH均可对雄黄进行纯化处理,以HCl纯化效果为最好;②高能球磨法可制备纳米雄黄颗粒;③球磨前后分别对雄黄颗粒进行纯化处理,可得到As2S2含量更高的纯化纳米雄黄颗粒。     

雄黄对小鼠肾脏形态学的影响

雄黄是一种含砷的化合物 ,它对人体造血组织、肝脏、肾脏等器官均可造成一定的损害 ,历史上对其一直有“有大毒”及不可久服的记载。国内对雄黄的药理作用及毒性已有初步报道 ,但对形态学方面观察研究较少。我们对雄黄影响小鼠肾脏形态学做了进一步的观察。实验中选取中药雄黄悬液给小鼠灌胃 ,给药后发现 ,小鼠肾脏出现异常变化 ,简要报道如下。1　材料与方法1 1　材料　 ( 1)雄黄 (Ｒｅａｌｇａｒ ,二硫化二砷Ａｓ2 Ｓ2 ) :购于河北医科大学中医学院门诊部。实验时用 0 .5 %羧甲苯纤维素钠配成混悬液。 ( 2 )昆明种小鼠 30只 :雄性 ,体重 1…     

纳米雄黄的粒度分析方法

目的：建立纳米雄黄的粒度分析方法。方法：利用原子力显微镜对纳米雄黄的表观形貌进行直接观察测定,用激光光散射法对纳米雄黄的粒度分布范围进行分析测定。结果：首次得到原子力显微镜下纳米雄黄形貌特征图;激光光散射颗粒度测定仪的测量显示．粒径在30nm以下的纳米雄黄约90％。结论：本研究所采用的原子力显微镜法和激光光散射法快速、简便、准确,可用于纳米雄黄的粒度检测。     

褪黑素抗乳腺癌作用及其机制的研究进展

褪黑素(melatonin,MT)是主要由松果腺分泌的生物活性物质。近年来大量文献表明MT能抑制乳腺癌的发生,其中有多种作用机制参与;MT可以抑制雌激素受体基因表达,调节雌激素信号转导通路,抑制细胞增殖和侵袭等等,因此提高内源性MT的生成或给予MT治疗可能对乳腺癌病人有益。该文综述了MT抗乳腺癌的作用机制及其可能应用。     

山慈菇抗乳腺癌的作用机制研究进展

在中国乳腺癌已经成为上升幅度最快的恶性肿瘤,占女性死亡率的首位。目前化学药治疗乳腺癌存在不良反应大、耐药、容易侵袭及转移等缺点。山慈菇作为传统的中蒙医常用抗癌药,不仅能抑制肿瘤细胞的生长增殖、诱导凋亡、干扰侵袭及迁移,还能抗血管生成,目前已经广泛应用于临床。将近些年来山慈菇抗乳腺癌的作用机制进行综述,为山慈菇进一步应用于临床提供参考。     

穿心莲内酯对小鼠乳腺癌的抑制作用和机制

目的研究穿心莲内酯(andrographolide, Andro)对乳腺癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及对线粒体功能的影响并探讨其机制。方法 MTT法检测Andro对4T1的抑制作用;测量肿瘤体积,计算脏器指数,HE染色分析Andro对肿瘤的抑制作用及对免疫、代谢器官的影响。试剂盒检测血清中乳酸含量,分析Andro对糖酵解的影响;试剂盒检测肿瘤组织中ATP、乙酰辅酶A含量、Western blot检测PDH蛋白表达,分析Andro对氧化磷酸化的影响;Clark氧电极、JC-1染色检测耗氧量及线粒体膜电位,分析线粒体功能。结果 Andro可抑制4T1细胞增殖,抑制肿瘤生长,且对免疫、代谢器官无显著影响;Andro可下调乳酸含量,抑制糖酵解;上调ATP、乙酰辅酶A含量及PDH蛋白表达,恢复氧化磷酸化;升高耗氧及线粒体膜电位,改善线粒体功能。结论 Andro对乳腺癌小鼠肿瘤生长具有抑制作用,其机制可能与抑制糖酵解,恢复氧化磷酸化,改善线粒体功能有关。     

加替沙星聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒小鼠体内分布特征

目的:研究注射用加替沙星聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(GPN)的体内分布特征。方法:雄性小鼠随机分为3组,分别尾缘静脉给予小鼠加替沙星生理盐水溶液(Ⅰ)、未经修饰的加替沙星GPN(Ⅱ)以及经聚山梨酯-80修饰的GPN(T-GPN,Ⅲ),高效液相法检测血浆、肝、肾、脾及肺脏组织内的浓度,评价GPN的体内分布特征。结果:Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组小鼠肺脏组织中的平均峰浓度分别为17.33,10.13和26.99μg.g-1;平均浓度-时间曲线下面积(AUC0~t)分别为85.99,100.00和242.34 mg.kg-1.h。结论:GNP经聚山梨酯-80修饰后,加替沙星肺脏组织分布量显著增加,具有一定的肺靶向性。     

叶酸-羧甲基壳聚糖-超小超顺磁氧化铁纳米粒在大、小鼠体内的药代动力学、组织分布及磁共振响应特征

叶酸-羧甲基壳聚糖-超小超顺磁氧化铁纳米粒(folic acid-O-carboxymethyl chitosans ultrasmall super-paramagnetic iron oxide nanoparticles,FA-OCMCS-USPIO-NPs)是一种新型分子靶向的核磁共振造影剂。本文考察了其在正常大鼠和小鼠体内的药代动力学及磁共振响应特征,探讨该造影剂在动物体内的分布规律,为其肿瘤靶向造影提供依据。尾静脉给予高、低浓度的纳米粒后,采用邻二氮菲法测定大鼠血浆及小鼠组织内的铁含量并绘制药时曲线,求得两组药代动力学参数t1/2均大于7 h。组织分布结果显示只有少部分的纳米粒被肝、脾吞噬,而心、肺、肾内几乎没有分布,并且纳米粒的吞噬不随剂量的增加而增加。核磁共振结果显示,给药后4 h纳米粒开始由肾脏排泄,24 h时肝、肾的信噪比(SNR)恢复到正常水平,肺部没有纳米粒的分布。可见,部分纳米粒逃避了肝、脾的吞噬,具有低毒性和较长的半衰期,为肿瘤靶向造影奠定了基础。     

注射用益气复脉（冻干）联合顺铂对乳腺癌荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究

目的 观察并探讨注射用益气复脉（冻干）（YQFM）联合顺铂对乳腺癌荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法 接种4T1肿瘤细胞悬液0.1 mL （细胞总数约1×10⁷）于SPF级BALB/C小鼠第4对乳头下方的皮下脂肪垫制备乳腺癌模型。造模小鼠随机分为模型组、顺铂（1 mg/kg）组、YQFM（914 mg/kg,临床等效剂量）组、1/2顺铂（0.5 mg/kg）＋YQFM（914 mg/kg）组、顺铂（1 mg/kg）＋YQFM（914 mg/kg）组,各组小鼠均于接瘤后第7天开始给药,顺铂均ip给药,隔天给药1次,共7次;YQFM均尾iv给药,每天1次,共14 d。模型组同法给予9%氯化钠注射液。观察小鼠生活状态、体质量变化;检测实体瘤质量并计算抑瘤率;测量瘤体积变化;ELISA法检测各组小鼠血清白细胞介素-2 （IL-2）、白细胞介素-4 （IL-4）、γ-干扰素（IFN-γ）、乳酸脱氢酶（LDH）和肿瘤坏死因子-α （TNF-α）、腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）水平。结果 与模型组比较,顺铂组、顺铂＋YQFM、1/2顺铂＋YQFM组小鼠从顺铂第3次给药左右开始出现毛发稀疏、掉毛严重、发呆、行动迟缓、喜抱团等现象,1/2顺铂＋YQFM组比单纯顺铂组稍好。与模型组比较,YQFM组体质量显著增加（P<0.05、0.001）;顺铂组体质量增长显著减缓（P<0.05、0.001）; 1/2顺铂＋YQFM组和顺铂＋YQFM组2组小鼠体质量无显著性差异。与模型组比较,顺铂组、1/2顺铂＋YQFM组及顺铂＋YQFM组瘤质量均显著减轻（P<0.05）,YQFM＋顺铂组的抑瘤率最佳,1/2顺铂+YQFM组与顺铂组抑瘤效果相当。与模型组比较,顺铂＋YQFM组、顺铂组、1/2顺铂＋YQFM组分别是在给药后第7、9、11天时瘤体积出现显著降低（P<0.05）。与模型组比较,顺铂组、1/2顺铂＋YQFM组及YQFM＋顺铂均能够显著提高IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α水平和降低ATP的含量（P<0.01、0.001）;顺铂组和1/2顺铂＋YQFM组的LDH含量显著提高（P<0.05）; YQFM也能显著性提高IL-2、IFN-γ、TNF-α含量和降低ATP的含量水平（P<0.01、0.001）。与顺铂组比较,1/2顺铂＋YQFM组的TNF-α含量显著降低（P<0.01）。结论 YQFM与顺铂联合使用对乳腺癌荷瘤小鼠具有一定的增效协同作用。     

Therapeutic efficacy of folate receptor-targeted amphiphilic cyclodextrin nanoparticles as a novel vehicle for paclitaxel delivery in breast cancer

Purpose: The aim of this study is to test folate-conjugated cyclodextrin nanoparticles (FCD-1 and FCD-2) as a vehicle for reducing toxicity and increasing the antitumor efficacy of paclitaxel especially for metastatic breast cancer.

Methods: For the evaluation of PCX-loaded FCD nanoparticles, animal studies were realised in terms of survival rate, tumour size, weight change, metastazis and histopathological examination.

Results: FCD-1 displayed significant advantages such as efficient targeting of folate receptor positive breast cancer cells and having considerably lower toxicity compared to that of Cremophor^®. When loaded with paclitaxel, FCD-1 nanoparticles, which have smaller particle size, neutral zeta potential, high encapsulation efficiency and better loading capacity for controlled release, emerged as an effective formulation in terms of cytotoxicity and high cellular uptake. In an experimental breast cancer model, anticancer activity of these nanoparticles were compatible with that of paclitaxel in Cremophor^® however repeated administrations of FCD-1 nanoparticles were better tolerated by the animals. These nanoparticles were able to localise in tumour site. Both paclitaxel-loaded FCD-1 and FCD-2 significantly reduced tumour burden while FCD-1 significantly improved the survival.

Conclusions: Folate-conjugated amphiphilic cyclodextrin nanoparticles can be considered as promising Cremophor^®-free, low-toxicity and efficient active drug delivery systems for paclitaxel.     

Plumbagin attenuates cancer cell growth and osteoclast formation in the bone microenvironment of mice

Aim： To investigate the effects of plumbagin, a naphthoquinone derived from the medicinal plant Plumbago zeylanica, on human breast cancer cell growth and the cancer cell-induced osteolysis in the bone microenvironment of mice.
Methods： Human breast cancer cell subline MDA-MB-231SA with the ability to spread and grow in the bone was tested. The cell proliferation was determined using the CCK-8 assay. Apoptosis was detected with Annexin V/PI double-labeled flow cytometry. Red fluorescent protein-labeled MDA-MB-231SArfp cells were injected into the right tibia of female BALB/c-nu/nu mice. Three days after the inoculation, the mice were injected with plumbagin （2, 4, or 6 mg/kg, ip） 5 times per week for 7 weeks. The growth of the tumor cells was monitored using an in vivo imaging system. After the mice were sacrificed, the hind limbs were removed for radiographic and histological analyses.

Results： Plumbagin （2.5–20 μmol/L） concentration-dependently inhibited the cell viability and induced apoptosis of MDA-MB-231SA cells in vitro （the IC50 value of inhibition of cell viability was 14.7 μmol/L）. Administration of plumbagin to breast cancer bearing mice delayed the tumor growth by 2–3 weeks and reduced the tumor volume by 44%–74%. The in vivo imaging study showed that plumbagin dose-dependently inhibited MDA-MB-231SArfp cell growth in bone microenvironment. Furthermore, X-ray images and micro-CT study demonstrated that plumbagin reduced bone erosion area and prevented a decrease in bone tissue volume. Histological studies showed that plumbagin dose-dependently inhibited the breast cancer cell growth, enhanced the cell apoptosis and reduced the number of TRAcP-positive osteoclasts.

Conclusion： Plumbagin inhibits the cell growth and induces apoptosis in human breast cancer cells in mice bone microenvironment, leading to significant reduction in osteolytic lesions caused by the tumor cells.     

三氧化二砷及顺铂对乳腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 了解三氧化二砷(As2O3)、顺铂(DDP)单独及联合应用对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用. 方法 建立裸鼠人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤动物模型,成瘤后动物随机分为4组,每组4只:(1)阴性对照组,(2)As2O3组,(3)DDP组,(4)As2O3 DDP组.疗程结束后,观察3 d,处死裸鼠.治疗期间观察并记录各组裸鼠移植瘤的生长情况及肿瘤体积和裸鼠体重的变化,计算肿瘤生长抑制率,用流式细胞仪法、透射电镜观察体内瘤体的细胞凋亡情况. 结果 As2O3组、DDP组和As2O3 DDP组治疗后肿瘤体积减少,与对照组相比,差异均有显著性(P＜0.01);与As2O3及DDP组单独用药组比较,As2O3 DDP联合用药组肿瘤体积明显减少(P＜0.01),抑瘤率明显增高(P＜0.01);而阴性对照组肿瘤体积增加.各组裸鼠体重无明显变化.As2O3 DDP联合用药组细胞凋亡率为36.9%,明显高于其他2组,差异有显著性(P＜0.01). 结论 As2O3与DDP联合用药比2药单独应用抑制肿瘤生长的作用更强,二者具有协同抗癌作用.     

表没食子儿茶素没食子酸酯抗乳腺癌作用机制的研究进展

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，其发病率呈逐年上升趋势。表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是茶叶中的主要活性成分之一，具有抗氧化、抗炎症、保护心血管、预防糖尿病及抗肿瘤等功效。近年来，多项体内和体外研究表明EGCG通过抑制细胞增殖、血管生成、干性、侵袭转移及促进凋亡等方式抑制乳腺癌的发生发展。主要对EGCG抑制乳腺癌的分子机制进行综述，为乳腺癌的防治提供新的线索。     

唑来膦酸在乳腺癌中抗肿瘤差别化效应的研究进展

乳腺癌是女性发病率和死亡率较高的恶性肿瘤。 肿瘤复发和远处转移是导致死亡的主要原因。 唑来膦酸（ZOL）具有潜在抑制破骨细胞介导的骨吸收的特性, 既可抑制肿瘤细胞增殖和启动肿瘤细胞凋亡, 又可干扰肿瘤细胞与骨基质的黏附, 从而抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭。 一些临床前研究已经证实 ZOL 具有直接抗肿瘤作用, 且在对绝经前和绝经后乳腺癌患者的治疗效果上有差异。 本文就 ZOL 在乳腺癌中抗肿瘤差别化效应的基础及临床研究进展作一综述。