苯唑西林诱导金黄色葡萄球菌形成L型研究

目的 用苯唑西林(青霉素类抗生素)诱导金黄色葡萄球菌形成L型.方法 用抗生素诱导法(液体法),用高渗培养进行金黄色葡萄球菌L型的诱导,用含药平板法进行细菌L型的筛选及菌落计数.对细菌L型的培养物进行革兰和细胞壁染色;对金黄色葡萄球菌原型及回复型菌进行MIC测定.结果 与结论苯唑西林在50μg·mL-1时,可诱导金黄色葡萄球菌形成L型.     

小儿金黄色葡萄球菌L型败血症32例临床分析

L型细菌所致败血症表现不典型,病程易迁延,容易漏诊。现将我院近2年所收治的32例金黄色葡萄球菌L型败血症报道如下。     

对L型金黄色葡萄球菌败血症并发心包损害的诊断及治疗体会

L型金黄色葡萄球菌败血症所致心包损害目前临床上并非多见，也很少有献报告。近几年来，我们遇有3例，现报告如下。     

金黄色葡萄球菌L型菌落细胞渗透稳定性的测定

通常认为细菌,尤其是革兰氏阳性细菌,形成L型后其渗透性敏感,故需用高渗透性的培养基培养。但已屡见细菌L型广泛存在于人体各种组织和体液中,并且可在细菌学常规增菌培养中生长繁殖的报道。我们也成功地用非高渗透性培养基培养了金黄色葡萄球菌等细菌的L型。本文用金黄色葡萄球菌L型菌落做L型细菌渗透脆性试验,现报道如下。     

葡萄球菌和白喉棒状杆菌的L型抗原研究

细菌丧失细胞壁而成为L 型,其形态、代谢、致病性及抗生素敏感性等特性均可发生改变。文献报道,L 型可部分丧失或仍保留其亲代细菌具有的表面抗原结构。本文将细菌学常规培养基传代培养的葡萄球菌CowanⅠ株和白喉棒状杆菌的L 型免疫动物制备抗血清,对其抗原结构及其与亲代细菌的相互关系进行了研究,现报道如下。     

应用VITEK2 Comoact全自动微生物测定仪对药品中金黄色葡萄球菌的鉴定

目的：通过由实验室自行选择采用先进的方法和手段对药品中的控制菌进行检查,以提高药品控制菌检查技术水平。方法采用传统的判别方法和VITEK2 Comoact全自动微生物测定仪鉴定方法对金黄色葡萄球菌进行鉴定。结果10批样品采用新旧方法结果均符合规定,阳性对照检出阳性菌。新方法和旧方法相比,对检验结果无明显影响。结论应用VITEK2 Comoact全自动微生物测定仪对药品中金黄色葡萄球菌的鉴定比传统方法更加快捷和准确。     

中药火炭母水提液的抗金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌作用及其效应物质分析

目的:分析火炭母水提液对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抗菌作用,并探究其效应物质.方法:制备火炭母水提液,采用纸片琼脂扩散法测定抑菌圈大小,采用梯度稀释法测定火炭母对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度,采用液质联用色谱技术对火炭母水提液进行分析.结果:火炭母对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌均有较好的抑菌活性,其对...     

金黄色葡萄球菌及大肠艾希菌对小鼠产生一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的　探讨革兰阳性菌及革兰阴性菌对小鼠产生一氧化氮 (NO)及一氧化氮合酶(NOS)的影响 ,以进一步研究NO及NOS在抗感染免疫中的作用。方法　将不同剂量的金黄色葡萄球菌及大肠艾希菌制剂注入小鼠腹腔 ,10d后取小鼠血清和腹腔巨噬细胞培养上清 ,用硝酸还原酶法检测其NO的含量 ,同时测定血清中NOS的水平及抗菌抗体的效价。结果　试验组小鼠血清中NO及抗S .aureus或E .coli的抗体的水平明显高于对照组 ,P <0 0 1;腹腔巨噬细胞培养上清NO的水平亦明显高于对照组 ,P <0 0 1,NO水平各试验组间无显著性差异 ,P >0 0 5。血清中NOS的水平亦明显高于对照组P <0 0 1,且各组间有显著性差异P <0 0 1。结论　金黄色葡萄球菌及大肠艾希菌均可引起小鼠血清中NO、NOS升高 ,NO、NOS可能在抗微生物感染免疫中起着重要的作用。     

金葡菌L型感染的C57小鼠诱发肿瘤中PCNA、P^53基因的表达及意义

目的：探讨增殖细胞核抗原(PCNA)和抑癌基因P^53蛋白及mRNA在诱发小鼠肿瘤及增生组织中的表达及意义。方法：应用动物实验、免疫组化和核酸原位杂文等方法检测感染金葡菌L型后发生肿瘤和癌前病变的小鼠组织中PCNA和抑癌基因P^53蛋白及mRNA表达。结果：金葡菌L型感染C57小鼠后，11．11％(10／90只)小鼠发生肿瘤，14．44％(13／90只)小鼠发生癌前病变。小鼠肿瘤小PCNA指数90%，癌前病变组织为46．15％；小鼠肿瘤中P^53蛋白阳性表达60%，mRNA50%，癌前病变组织中P^53蛋口和mRNA表达均为38．46％。免疫组化和核酸原位杂交结果无显著差异性。结论：金葡菌L型感染，P^53基因的异常表达与小鼠肿瘤的发生发展有密切关系，PCNA可作为判断小鼠肿瘤细胞增范殖活性的可靠指标。     

伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的稳定L型染色体DNA内切酶谱

细菌细胞壁的完整性被破坏或其合成受到抑制后,在一定条件下可以 L 型生存。传统认为 L 型是表型变异,在无诱导剂存在的环境中可重新合成细胞壁而返祖,但近年来已发现有些 L 型是稳定的,在无诱导剂的培养基中生长不能自发返祖。我们用青霉素诱导伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌形成 L 型,在不含诱导剂的非高渗透性培养基或常规细菌学培养基中经一年余时间数十代培养未发生自发返祖,表明这些 L 型具有稳定的遗传性质。本文提取伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌的稳定 L 型和细菌型的染色体 DNA,用核酸内切酶消化。研究其 DNA 内切酶谱特点以及稳定 L 型变异的     

金黄色葡萄球菌肺炎的临床特点及药物敏感性分析

目的分析和总结金黄色葡萄球菌肺炎的临床特点和对抗菌药物的敏感性。方法回顾性分析50例金黄色葡萄球菌肺炎患者的临床特点。并对所有细菌均按《全国临床检验操作规程》以常规方法鉴定,合格痰标本接种血琼脂、巧克力和麦康凯培养基,可疑菌落进行革兰染色和生化反应鉴定,金黄色葡萄球菌为革兰阳性球菌,用西门子公司PC33板条进行可疑菌落鉴定,确定为金黄色葡萄球菌并做药敏试验。结果50例中发热23例（46.0%）,多为不规则发热型,体温＞38.5 ℃者15例（30.0%）;咳嗽43例（86.0%）、咳痰41例（82.0%）, 咯黄脓痰者26例（52.0%）,呼吸困难16例（32.0%）,肺部湿性啰音31例（62.0%）。末梢血白细胞升高19例（38.0%）,降低4例（8.0%）,中性粒细胞升高的32例（64.0%）。胸部X线主要表现为片状、斑片状阴影。叶段性渗出病变6例和沿支气管小片渗出病变44例。50例患者中老年科13例、神经内科9例、呼吸科9例、心内科4例、内分泌科4例、外科4例、心内科3例、急诊观察室病房2例、消化科和血液科各1例。分离的金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺、利福平及氯霉素的敏感性较高[分别为29株（100.0%）、46株（100.0%）、42株（85.7%）、11株（78.6%）],对其他抗菌药物均有耐药。50例患者中痊愈27例（54.0%）,显效16例（32.0%）,总有效率为86.0%, 7例（14.0%）死亡,死亡原因：慢性阻塞性肺疾病急性加重、Ⅱ型呼吸衰竭1例,败血症1例,重症肺炎1例,间质性肺病伴感染1例,非霍奇金淋巴瘤1例,肺癌广泛转移1例,脑梗死1例。结论金黄色葡萄球菌肺炎好发于老年、有基础疾病及免疫功能低下者,及早选择可能敏感的抗菌药物及进行细菌药敏检测将改善预后。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药表型分型与耐药基因检测分析研究

目的分析研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)的耐药表型及耐药基因,探索治疗MRSA感染的有效手段。方法对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌株,依据美国临床实验室标准化研究所(CLSI)标准操作规程进行万古霉素、利奈唑胺和苯唑西林等药物的药物敏感性试验和耐药基因检测,分别采用微量肉汤稀释法和多重聚合酶链反应(PCR)扩增法。结果 MRSA耐药表型分为Ⅰ~Ⅶ型,MRSA对抗生素产生多重耐药,万古霉素、利奈唑胺、氯霉素、复方新诺明、利福平耐药率分别为0、7.0%、40.8%、47.9%、60.6%,β-内酰胺类药物耐药率高达100%;实验菌株mecA、ermA、ermC、tetK、tetM、ratA基因检出率分别为98.6%、60.6%、18.3%、100%、7.0%和0。结论 MRSA对万古霉素、利奈唑胺敏感,其他药物呈多重耐药,需加强MRSA对万古霉素、利奈唑胺、氯霉素、复方磺胺、利福平等常用药物最小抑菌浓度(MIC)监测和临床报告,关注万古霉素对MRSA治疗不佳患者。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌染色体mec盒基因分型及耐药性分析

目的了解我院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的现状及耐药特征,为临床合理选用抗生素提供理论依据。方法收集我院2009年9月至2010年9月住院患者标本中分离到的临床资料完整的18株MRSA菌株作为研究对象,采用Kerby-Bauer纸片扩散法检测了18株MRSA对9种抗菌药物的敏感性水平;应用多重聚合酶链反应(PCR)方法对上述菌株进行了葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)分型。结果 18株MRSA对青霉素、苯唑西林、头孢西丁、环丙沙星和庆大霉素的耐药率均为100%,对克林霉素和红霉素的耐药率为89%,对利福平耐药率为56%、中敏率11%,无万古霉素耐药菌株;全部呈多重耐药,多重耐药主要表现为同时耐5种(22%)、6种(33%)及7种(44%)抗菌药物;18株MRSA的mecA基因阳性,其中9株(50%)携带有3种新的SCCmec型/亚型(New1～3)、6株(33%)携带ⅢB型SCCmec、3株(17%)为未定型菌株。结论 18株MRSA的SCCmec型别具有高度多态性,ⅢBSCCmec型是优势型别,未发现万古霉素耐药株。     

147株金黄色葡萄球菌临床分离及耐药分析

目的监测本地区儿童感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)情况,掌握儿童感染金黄色葡萄球菌(SAU)耐药情况,指导临床合理应用抗生素,为提高治疗效果提供依据。方法对各类感染标本分离的147株金黄色葡萄球菌应用VITEK-32微生物全自动分析系统进行鉴定,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验;采用头孢西丁纸片扩散法筛选MRSA菌株,同时进行D-试验研究红霉素诱导克林霉素耐药情况。使用WHONET5.4软件对原始数据进行分析和统计学处理。结果小儿金黄色葡萄球菌感染标本主要来自于痰液,共分离到金黄色葡萄球菌121株,占阳性菌株的82.3%(121/147),其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)42株。头孢西丁纸片扩散法结果显示147株金黄色葡萄球菌检出MRSA 47株(31.9%)。药物敏感试验结果显示147株金黄色葡萄球菌对青霉素全部耐药,而对万古霉素全部敏感,对苯唑西林、头孢唑啉、红霉素、克林霉素敏感率分别为64.6%、98.0%、44.2%、52.4%。药敏结果显示SAU存在多重耐药情况,有10株对红霉素和克林霉素同时耐药;D-试验结果显示诱导试验阳性率为54.5%。结论本文多数分离出金黄色葡萄球菌(SAU)菌株标本取自于呼吸道感染的痰液。通过药敏分析发现SAU对青霉素耐药率为100%,提示该种药物已不适合应用本地区SAU感染患儿的治疗。147株金黄色葡萄球菌中存在多重耐药情况并检出MRSA 47株(31.9%),提示本地区儿童感染SAU,特别是MRSA耐药形势不容乐观,仍需加强对MRSA的日常监测工作。     

利福霉素等6种抗菌药物对金葡球菌体外抗菌作用比较研究

目的 比较利福霉素、甲氧西林、氟氧头孢、美洛培南、奈替米星、万古霉素对mecA基因阳性和mecA基因阴性的金葡球菌的体外抗菌活性。方法 采用多重PCR方法检测金葡球菌的mecA基因携带情况,采用平皿二倍稀释法进行6种抗菌药物的最低抑菌浓度的测定。结果 6种抗菌药物对mecA 基因阴性的金葡球菌的MIC50和MIC90分别为甲氧西林（2、4mg/L), 利福霉素（0．125、0．25mg/L）,氟氧头孢（0．5、2mg/L）,美洛培南（0．25、0．25mg/L）,奈替米星（2、2mg/L）,万古霉素（2．2mg/L）。对mecA基因阳性的金葡球菌的MIC50和MIC90分别为甲氧西林（＞256、＞256mg/L),利福霉素（0．031、0．031mg/L）,氟氧头隐(32、64mg/L）,美洛培南（64、128mg/L）、奈替米星（32、64mg/L）,万古霉素（4、4mg/L）。结论 6种抗菌药物对mecA基因阴性的金葡球菌均有很强的体外抗菌活性,但对mecA基因阳性且对甲氧西林耐药的金葡球菌,氟氧头孢、美洛培南和奈替米星的体外抗菌活性差,万古霉素和利福霉素具有很强的体外抗菌活性,特别是利福霉素对于MRSS的抗菌活性明显强于MSSA。     

Interactions of pyrrolobenzodiazepine dimers and duplex DNA from methicillin-resistant Staphylococcus aureus

Binding of two bactericidal pyrrolobenzodiazepine (PBD) dimers, SJG-136 and ELB-21, to genomic DNA from Staphylococcus aureus EMRSA-16 was investigated. Both agents cross-linked purified EMRSA-16 DNA. The more potent agent, ELB-21, had a greater capacity to cross-link DNA after incubation with intact cells than SJG-136. Extensive interstrand cross-linking at multiple sites on the EMRSA-16 genome was demonstrated by probing EcoRI-restricted DNA with mecA and 16S rDNA. Cross-linking was again greater in DNA extracted from ELB-21-treated cells and was compatible with frequency analysis of preferred binding sequences in EMRSA-16 DNA. These studies support the premise that the potency of ELB-21 is due to efficient cell penetration and provide evidence that the antibacterial activity of PBD dimers results from cross-linking at specific genomic sites.     

金黄色葡萄球菌的API-STAPH生化鉴定及核糖体分型分析

食源性致病金黄色葡萄球菌的筛查和检测备受关注,传统的生化鉴定方法存在耗时长和灵敏度低等缺陷,本文以原核生物核糖体小亚基为主要研究对象,利用16S核糖体RNA测序和核糖体基因分型技术对46株金黄色葡萄球菌进行了鉴定和分型,结果表明:API-STAPH生化方法鉴定的准确率为93％,而分子生物学鉴定的准确率≥99％;全自动微生物核糖体基因分型系统将46株金黄色葡萄球菌分为22个Ribogroup.上述研究将食源性金黄色葡萄球菌的鉴定上升到“亚型”的高度,16S核糖体RNA测序和核糖体分型技术可为食源性致病菌的风险监测提供有力的技术支持.     

某医院2009-2012年金黄色葡萄球菌的分离及耐药性变迁分析

目的 回顾性分析金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性变迁情况,为预防控制措施的制定提供依据.方法 对2009-2012年临床分离的576株金黄色葡萄球菌进行分析,细菌鉴定和药敏试验采用VITEK 2 Compact全自动细菌培养鉴定仪.结果 2009-2012年MRSA的分离率为59.5％,但每年的分离率呈逐年递减趋势.MRSA对万古霉素、利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀、替考拉宁、呋喃妥因的抗菌活性较好(耐药率＜2.4％);对替加环素的耐药率和敏感率均为0.0％,中介率为100.0％;对庆大霉素、环丙沙星、莫西沙星、克林霉素、四环素和红霉素的耐药性呈逐年递减趋势.2010-2012年对复方磺胺甲噁唑耐药性明显降低,由2010年的65.3％降至2011年和2012年的28.2％和4.7％(P＜0.05).结论 MRSA的分离和耐药性逐年递减,应继续加强抗菌药物管理,合理科学使用抗菌药物,降低多重耐药细菌的发生率和耐药性.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌ftsZ基因高效反义肽核酸序列筛选#br#及其体外抗菌活性观察

目的 筛选出能与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌ftsZ基因紧密结合的反义肽核酸序列,评价其体外抗菌活性。方法选用两种计算机软件(Mfold、RNA Structure 5.2)和斑点杂交筛选出最佳反义序列PNA,并连接穿膜肽(cell penetrating peptide,CCPs)形成肽-PNA(peptide-PNA, PPNA),另设一条与最好序列有3个错配碱基的肽核酸序列作为对照,连接穿肽形成错配的肽肽核酸(scrambled peptide-PNA, Scr PPNA)。将不同浓度的肽肽核酸处理MRSA后,间隔1h测定A600值同时做平板菌落计数,观测其对细菌生长的抑制作用。结果 斑点杂交实验结果表明,计算机辅助软件设计的11条反义寡核苷酸序列中,有4条序列显示强弱不同的杂交信号,第3号探针杂交信号最强,而1条正义序列没显示任何信号,PPNA在30和40μmol/L分别具有抑菌作用和杀菌作用,并具有浓度依赖性,而Scr PPNA在高浓度时对细菌也无生长抑制作用,验证了肽核酸的特异性。结论 成功的筛选出一条在体外对MRSA的生长有显著的影响的反义肽核酸序列,有望为抗MRSA感染患者提供新的治疗方案。     

3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2(5氢)-呋喃酮对L-02细胞DNA损伤与ras基因表达的影响

目的　研究饮水氯化消毒副产物 3 氯 4 二氯甲基 5 羟基 2 (5氢 ) 呋喃酮 (MX)对人胚肝细胞 (L 0 2 )DNA损伤与ras基因表达的诱导 ,初步探讨MX致癌的分子机制。方法　以L 0 2细胞作为靶细胞 ,应用彗星试验 (SCGE)和原位杂交试验 (ISH)研究MX诱导L 0 2细胞DNA损伤与ras基因表达。MX设 10、3 0、10 0和 3 0 0 μmol L 4个剂量 ,二甲基亚砜 (DMSO ,10mL L)为溶剂对照 ,H2 O2 (3 0 0 μmol L)和B(a)P(2 0 0 μmol L)分别为SCGE和ISH的阳性对照。 结果　与溶剂对照相比 ,3 0、10 0和 3 0 0 μmol L的MX能明显增加L 0 2细胞的DNA迁移度 (P <0 0 5 ,P <0 0 1,P <0 0 0 1) ;同时也明显增加ras基因表达水平 (P <0 0 0 1,P <0 0 0 1,P <0 0 1)。MX在 10～ 10 0 μmol L的浓度范围内 ,诱导的ras基因表达水平和DNA迁移度呈正相关 (r =0 79)。结论　饮水氯化消毒副产物MX可诱导L 0 2细胞DNA损伤与ras基因表达 ,ras基因表达水平可能与DNA损伤程度有关。