姜黄素对肝纤维化模型大鼠肝纤维化组织细胞因子的影响

目的 了解姜黄素对实验大鼠肝纤维化组织中的基质蛋白酶-13(MMP-13)和金属蛋白组织抑制因子-(TIMP-1)的干预. 方法将22只雄性SD大鼠随机分为正常组(n=7)、模型组(n=6)和治疗组(n=9). 模型组和治疗组用四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型,造模6周治疗组加用姜黄素,在10周末处死各组大鼠,取肝脏进行苏木精 伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色,运用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测MMP-13和TIMP-1的含量. 结果 HE染色病理分级明显,治疗组与其他两组比较,HE染色病理分级高于正常组,低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05);而MMP-13mRNA的表达组间变化不大,但TIMP-1mRNA的含量在各组间差异有统计学意义(P<0.05),模型组和治疗组TIMP-1表达水平高于正常组,治疗组的TIMP-1mRNA表达与模型组比较明显下降(P<0.05). 结论 姜黄素有抗纤维化作用,其机制可能是通过抑制大鼠肝脏中TIMP-1mRNA表达,减少胶原在肝脏内沉积,从而逆转和阻遏纤维化形成.     

大鼠肝纤维化模型肝组织及血清中基质金属蛋白酶抑制因子-1的动态变化

目的观察二甲基亚硝胺(DMN)构建大鼠肝纤维化模型过程中肝组织及血清中TIMP-1及其相关指标的动态变化。方法1%DMN按10mg/Kg腹腔注射方法建立大鼠肝纤维化模型,第1w连续注药3d,第2、3、4、5、6w各连续2d。分别于第1、2、4、6、8w随机取血及大鼠肝组织。ELISA方法测血清基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅰ型前胶原(Ⅰ-CP)、Ⅲ型前胶原(Ⅲ-CP)含量。肝组织HE、Masson染色观察肝病理变化、胶原纤维含量,原位杂交观察TIMP-1mRNA表达;免疫组化观察TIMP-1蛋白表达量。结果注药后1w,血清TIMP-1即开始升高,4w后维持高值(131.1±13.16)ng/ml,肝组织内TIMP-1mRNA及蛋白同步增高;1w时,MMP-1含量增高,2w处于高峰(79.3±8.45)ng/ml,随后缓慢降低,8w时含量最低(46.6±6.31)ng/ml,然而仍高出正常对照组(32.1±3.66)ng/ml;1w时,HA含量升幅达对照组2倍,后持续增高,至6w时处高峰(350.8±40.26)ng/ml;LN于1w、2w、4w均小幅递增,6w达高峰(132.8±15.1)ng/ml;CP-I含量注药后1w始较对照组升高,6w处高峰(27.2±3.60)ng/ml;CP-Ⅲ含量用药后小幅升高,6w处于高峰(9.06±1.22)ng/ml。肝胶原纤维百分含量4w小幅递增,4w后,肝胶原纤维显著持续增高,8w时最高。大鼠肝组织病理变化显示:1w可见肝细胞变性及小点状坏死灶,4w时,纤维间隔伴小叶结构紊乱,符合肝纤维化3级,6w小部分3级,大部4级;8w,肝硬化表现。结论DMN构建大鼠肝纤维化模型肝组织及血清相关指标呈动态递进发展,为进一步选择合适时机干预肝纤维化进程提供依据、奠定基础。     

激动素对肝纤维化大鼠肝组织TIMP1和MMP2表达的影响

目的 探讨激动素对实验性肝纤维化大鼠肝组织表达基质金属蛋白酶 2（MMP2）及金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP1）的影响,初步探讨激动素抗肝纤维化的机制.方法 60只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组及药物组各20只.模型组和药物组背部皮下注射40%四氯化碳溶液0.3 mL/(100 g),每周2次.药物组同时背部皮下注射0.1%激动素溶液0.5 mL/(100 g),qd;对照组仅给予等量0.9%氯化钠溶液背部皮下注射.12周后取大鼠肝组织,苏木精-伊红染色观察肝组织炎症和纤维化程度.采用免疫组化方法检测各组MMP2、TIMP1的表达情况.结果 模型组肝纤维化程度明显高于药物组,同时实验也表明激动素能够明显减少肝组织中MMP2及TIMP1的表达.结论 激动素具有逆转肝纤维化的作用,其机制可能是通过抑制肝组织中MMP2及TIMP1的表达,改善细胞外基质的合成与降解的失衡.     

柔肝化纤颗粒对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶1及其抑制因子的影响

目的 探讨柔肝化纤颗粒对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶1（MMP-1）和金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）的影响.方法 建立四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠模型,健康清洁SPF级大鼠85只,雌雄各半,随机数字表法分为正常对照组（15只）、病理模型组（16只）、柔肝化纤颗粒组（16只）、大黄座虫丸组（16只）及秋水仙碱对照组（16只）.正常对照组不做其他处理,常规饲养;肝纤维化造模成功后,正常对照组、病理模型组4周后灌胃0.9％氯化钠注射液,柔肝化纤颗粒组、大黄廑虫丸组、秋水仙碱对照组造模成功4周后分别给予柔肝化纤颗粒、大黄=虫丸（0.2 g/kg）、秋水仙碱（100 μg/kg）灌胃,各组灌胃液体量为10 ml/kg体重,每日1次.各组于用药治疗后5、10周,免疫组织化学染色及计算机图像分析技术检测Ⅳ胶原.利用半定量反转录-聚合酶链反应检测MMP-1和TIMP-1 mRNA的表达.结果 用药治疗后5、10周,病理模型组肝组织炎症活动度计分、肝纤维化程度计分均明显高于正常对照组[用药后5周：（4.93±2.56）分比（1.08 ±0.29）分,（15.57±6.12）分比0分,用药后10周：（5.03±2.66）分比（1.10±0.22）分,（16.27 ±6.21）分比0分],差异均有统计学意义（均P＜0.05）;经柔肝化纤颗粒和秋水仙碱、大黄廑虫丸治疗后,大鼠肝组织炎症活动度、肝纤维化程度计分及Ⅳ胶原蛋白水平均明显降低（P＜0.05）.用药治疗后10周,病理模型组MMP-1 mRNA和TIMP-1 mRNA表达分别为（1.30±0.15）和（20.62 ±4.56）,均明显高于正常对照组[分别为（0.94±0.44）、（10.52±3.20）],差异均有统计学意义（均P ＜0.05）;柔肝化纤颗粒组MMP-1 mRNA表达为（1.58±0.34）,明显高于病理模型组、大黄廑虫丸组（1.39±0.35）和秋水仙碱对照组（1.41±0.41）;柔肝化纤颗粒组TIMP-1 mRNA为（13.6±3.3）,明显低于病理模型组、大黄廑虫丸组（18.3±4.4）和秋水仙碱对照组（17.3±4.47）（P＜0.05）;柔肝化纤颗粒组TIMP-1/MMP-1 mRNA为（8.9±2.0）,明显低于病理模型组、大黄廑虫丸组（11.1±1.9）和秋水仙碱对照组（10.4±2.4）（P＜0.05）.结论 柔肝化纤颗粒能通过调节TIMP-1/MMP-1比例来促进细胞外基质降解,从而发挥对肝纤维化的防治作用.     

柴芪益肝方对肝纤维化小鼠的保护作用机制研究

目的 探讨柴芪益肝方抗肝纤维化的作用机制.方法 选取50只无特定病原体级C57BL/6雄性小鼠通过随机数字表法分成空白对照组、模型组、柴芪益肝方低、高剂量组、水飞蓟素阳性对照组,各10只.除空白对照组外,各组小鼠腹腔注射15％的四氯化碳橄榄油诱导肝纤维化模型.从造模第1天起,空白对照组和模型组以等体积的0.5％羧甲基纤...     

姜黄素衍生物对四氯化碳诱导肝纤维化的治疗作用

目的:探讨姜黄素衍生物(Curc-OEG)对四氯化碳诱导肝纤维化的治疗效果。方法:以四氯化碳诱导形成大鼠肝实质损伤性肝纤维化模型。大鼠分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、低剂量组(C组)、中剂量组(D组)、高剂量组(E组)、秋水仙碱组(F组)。除A组外,各组给予四氯化碳和橄榄油混合液皮下注射,2次/周,4周后B组给予生理盐水尾静脉注射,C、D、E组分别给予25、50、100mg.kg-1.d-1的Curc-OEG尾静脉注射,F组给予0.1mg.kg-1.d-1秋水仙碱灌胃。10周后测定肝功能及肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;做肝脏HE和天狼星红染色;定量PCR法测金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、金属蛋白酶-13(MMP-13)基因的表达,Western Blot法测CollagenⅠ蛋白的表达。结果:与模型组比较,中、高剂量组ALT、AST明显降低(P<0.05),羟脯氨酸及CollagenⅠ蛋白表达明显降低(P<0.05),MMP-13 mRNA明显上调(P<0.05),以及TIMP-1 mRNA明显下调(P<0.05),并且HE及天狼星红染色结果也观察到肝脏炎症及纤维化程度明显减轻。结论:Curc-OEG能减轻四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化。     

基质金属蛋白酶抑制因子－1在肝纤维化过程中的表达及动态变化

为探讨基质金属蛋白酶抑制因子－1（TIMP－1）在肝纤维发生发展过程中的表达及动态变化,用皮下注射四氯化碳方法复制大鼠化学性肝纤维化模型,用免疫组织化学方法在4、8、12周分别检测肝组织中TIMP－1的表达,结果表明,随造模时间延长,肝纤维化面积逐渐增加,TIMP－1表达量进行性升高,明显高于对照组（P＜0．05）。结论：TIMP－1参与了肝纤维化的进展,可能起促进作用。     

芍芪多苷抗大鼠免疫性肝纤维化作用及部分机制

目的探讨芍芪多苷(SQDG)抗大鼠免疫性肝纤维化的作用并对其机制作初步研究。方法建立人白蛋白致免疫性肝纤维化大鼠模型,设立正常对照组、模型组、SQDG给药组(42.5、85、170mg.kg-1)和阳性对照秋水仙碱组(Col0.1mg·kg-1)。HE染色对肝脏组织作病理检查。分光光度法检测血清中转氨酶活性和肝匀浆中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、羟脯氨酸(Hyp)含量;放免法检测血清中透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)水平;3H-Pro参入法检测SQDG对转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激的肝星状细胞(HSC-T6)胶原合成的影响。结果SQDG对升高的血清转氨酶有降低趋势,但差异无显著性;病理组织学检查发现,SQDG可降低免疫性肝纤维化大鼠的纤维化程度,与模型组相比,纤维沉积、肝小叶的破坏等均有所减轻。SQDG还可降低肝纤维化大鼠肝组织Hyp含量,降低血清中HA和PCⅢ含量。进一步研究发现,SQDG降低肝纤维化大鼠肝匀浆中MDA的含量,升高抗氧化酶SOD、GSH-Px活性,改善肝脏氧化状态。SQDG(20～160mg·L-1)体外给药还可明显降低HSC-T6的3H-Pro参入量。结论SQDG具有明显的抗肝纤维化作用,其机制可能与其清除自由基、提高抗氧化物酶的活性和抑制HSC的胶原合成有关。     

三七皂苷抗肝纤维化作用的现状

肝纤维化是各种慢性肝病共同的病理基础，是慢性肝病发展到肝硬化、肝癌的必经途径。寻找有效的抗肝纤维化药物是近年研究的热点，其中对三七的研究也取得了很大进展。现综述近几年三七皂苷在保护肝细胞、抑制肝星状细胞活化、促进肝星状细胞凋亡、抑制细胞外基质的合成及促使其降解等方面的作用及可能机制，同时也阐述了三七皂苷在抗肝纤维化中的重要意义及应用前景。     

红花对实验性大鼠肝纤维化的抑制作用

目的：观察红花对实验性大鼠肝纤维化的影响,并探讨其作用机制。方法：在CCl4诱导实验性大鼠肝纤维化3周后．给予红花5.0g/kg,每天1次腹腔注射．同时设正常对照及CCl4对照组。分别用放免法检测血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、3型前肢原(PCⅢ)。HE及VG法染色观察组织的病理变化。免疫组织化学法检测肝组织Desmin的表达。结果：红花治疗组大鼠肝组织纤维化程度计分、血清HA、LN、PCⅢ浓度、肝组织中Desmin染色阳性细胞面积低于CCl4对照组,差异显著。结论：红花抑制肝星状细胞的激活和转化．具有一定的抗肝纤维化作用。     

Developing strategies for liver fibrosis treatment

Liver fibrosis represents a major worldwide healthcare burden. Current therapy is limited to removing the causal agent. This approach is successful in some diseases; particularly haemochromatosis and chronic viral hepatitis. However, for many patients treatment is not possible, while other patients present to medical attention at an advanced stage of fibrosis. There is therefore a great need for novel therapies for liver fibrosis. The hepatic stellate cell has been recognised to be responsible for most of the excess extracellular matrix observed in chronic liver fibrosis. The detailed understanding of hepatic stellate cell biology has allowed the rational design of novel antifibrotic therapies. This review describes for the general reader the novel emerging therapies for liver fibrosis.     

Kupffer细胞在肝纤维化形成与转归中的作用

肝纤维化是由于反复肝损伤引起持续性炎症反应、瘢痕组织形成，导致正常组织结构破坏甚至器官衰竭的一类疾病。临床研究和动物实验均证实，肝脏内慢性长期炎症是导致过量瘢痕形成的主要诱因。在肝损伤期，Kupffer细胞快速激活并释放大量可溶性调节因子(包括过氧化物、细胞因子和蛋白酶等)，刺激肝星状细胞增殖、迁移和活化。另一方面，有研究显示，Kupffer细胞还参与肝纤维化转归，其功能可能与调节星状细胞的生物学活性及促进细胞外基质的降解有关。因此，深入研究Kupffer细胞的生物学特性以及在细胞因子环境下与星状细胞间的相互作用，对于理解肝纤维形成的病理学过程和肝纤维化转归的生理学机制具有重要的指导意义。     

生长抑素治疗肝纤维化研究进展

生长抑素是人体内广泛分布的环肽激素,近期有研究表明生长抑素能够减少星状细胞分泌细胞因子及细胞外基质,抑制其增殖及收缩,并促进其凋亡;同时调节枯否细胞分泌功能,介导肝干细胞归巢,对于各种病因肝纤维化尤其对于血吸虫性肝纤维化具有治疗作用。     

以DJ-1蛋白为靶点治疗肝纤维化的研究进展

肝纤维化是肝硬化演变过程中的一个重要阶段,其病理学特征主要是细胞外基质在肝内过量沉积,活化的肝星状细胞是肝纤维化的病理中心环节。许多细胞因子和信号通路已被证实参与肝纤维化或肝星状细胞的激活过程,但其中很多靶点在肝纤维化中的作用尚没有完全定论。近年来,已有研究提出DJ-1蛋白将成为治疗肝纤维化潜在的分子靶点,DJ-1可通过调控肝细胞内氧自由基水平、肝Kupffer细胞氧自由基水平、炎症细胞和吞噬细胞浸润等延缓肝纤维化的进程。该文从肝纤维化与氧化应激的关系、DJ-1蛋白的概述、DJ-1在治疗肝纤维化中的作用机制等方面综述了DJ-1蛋白在治疗肝纤维化中的作用及研究进展,并分析其作为治疗肝纤维化新靶点的利弊及应用前景。     

Chronic moderate alcohol consumption relieves high‐fat high‐cholesterol diet‐induced liver fibrosis in a rat model

Nonalcoholic fatty liver disease is a worldwide health issue and chronic alcohol consumption may have different effects on this disease. This study explored the role of chronic moderate alcohol consumption on high‐fat high‐cholesterol (HFHC) diet‐induced liver fibrosis in a rodent model. Male Sprague–Dawley rats were divided into five groups: standard chow group, standard chow plus Er Guo Tou (EGT, a Chinese spirit made from fermented cereals) group, HFHC group, HFHC plus EGT group, and HFHC plus pure ethanol (EtOH) group. Rats were fed standard chow or HFHC chow for 12 weeks. EGT or pure ethanol was administrated at a daily dose of 4 g/kg body weight via intra‐gastric gavage from week 4. At the end of week 12, hematoxylin and eosin staining, Sirius red and immunohistochemistry of liver sections were examined. The hepatic expression of F4/80, TNF‐α, IL‐1β, IL‐6, CXCL1, CXCL2, α‐SMA, Collagen, TGF‐β, MMP2, MMP9, and TIMP1 was calculated. Both moderate EGT and pure ethanol did not increase plasma endotoxin in the portal vein comparing with the FHFC group. EGT and pure ethanol did not improve hepatic inflammation, but ameliorated liver fibrosis in histology. Moderate EGT and pure ethanol ameliorated HFHC diet‐induced activation of Kupffer cells and hepatic stellate cells. In conclusion, chronic moderate EGT and pure ethanol could ameliorate HFHC diet‐induced liver fibrosis.     

吲哚-3-原醇对复合因素所致肝纤维化大鼠的治疗作用及部分机制研究

目的观察吲哚-3-原醇(I3C)对复合因素诱导肝纤维化大鼠的治疗作用并探讨其可能机制。方法采用复合因素(CCl4、酒精、高脂低蛋白饲料)制备大鼠肝纤维化模型,用I3C治疗10 d后,检测大鼠肝组织的羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量;通过HE及Mas-son三色染色,观察肝脏病理学改变及胶原含量改变;免疫组化法观察肝脏中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;West-ern blot检测肝组织中基质金属蛋白-2(MMP-2)的表达。结果与模型对照组比较,I3C治疗组肝组织Hyp含量降低,SOD活性升高,以大剂量(12 mg.kg-1)组明显(P<0.01),MMP-2蛋白表达升高;病理学改变尤其是胶原纤维的沉积明显减轻(P<0.05),α-SMA表达也降低。结论 I3C可促进复合因素所致大鼠肝纤维化模型的恢复,其机制与降低肝组织氧化应激、减少活化HSC数量以及促进基质胶原降解有关。     

肝星状细胞激活与增殖相关信号转导通路在肝纤维化中的作用及机制

肝星状细胞激活和增殖在肝纤维化的发生过程中占有重要的地位。控制肝星状细胞的激活和增殖并逆肝纤维化的进程是抗肝纤维化研究的重点之一。本综述以肝星状细胞激活与增殖相关信号转导通路为中心,探讨其在肝纤维化发病作用方面的作用机制。通过干预细胞外信号传导通路,为研究肝纤维化的发病机制和药物治疗提供新的途径。     

褪黑素对大鼠肝纤维化的影响及部分机制研究

目的探讨褪黑素(melatonin,MEL)对大鼠肝纤维化的影响及部分机制。方法 111只雄性SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型对照组、N-乙酰-L-半胱氨酸组(N-ac-etyl-L-cysteine,NAC)组、褪黑素低、中、高剂量组(剂量分别为2.5、5、10 mg.kg-1)。采用四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)制备大鼠肝纤维化模型,同时腹腔注射褪黑素,HE染色和VG胶原纤维染色观察肝脏病理改变;生化法测定肝脏丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)、超氧化物歧化酶(superox-ide dismutase,SOD)活性;RT-PCR法测定肝组织中α1(I)前胶原(α1(I)procollagen)mRNA表达;原位灌注加密度梯度离心法分离正常SD大鼠肝脏星状细胞,在培养的肝星状细胞中加入脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)进行刺激,用MTT法测定不同浓度的MEL对肝星状细胞增殖的抑制作用。结果和模型组比较,MEL(10 mg.kg-1)组肝纤维化评分较低(P<0.05),MEL能明显降低肝匀浆MDA含量,升高SOD、GPx活性,MEL(10 mg.kg-1)组、NAC组大鼠肝组织α1(I)型前胶原mRNA表达明显减少(P<0.05);培养的肝星状细胞经LPS刺激后A值增大,与LPS组相比,LPS+NAC组和LPS+MEL(0.1 mmol·L-1)组A值明显减小(P<0.05)。结论 MEL对大鼠肝纤维化具有改善作用,其机理可能与抗氧化、抑制前胶原基因转录和抑制肝星状细胞增殖有关。     

以肝星状细胞为靶标的抗肝纤维化治疗进展

任何病因导致的慢性肝损伤,均可发展为肝纤维化。损伤肝脏的纤维化形成过程中,活化肝星状细胞(HSC)是主要细胞类型,并有重要细胞因子参与。目前治疗都以阻止活化HSC在损伤部位聚集和细胞外基质沉积为目标。该文就以HSC为靶标的抗肝纤维化最新治疗方案作一综述。