补肾调肝活血方对卵巢早衰模型大鼠性激素水平及颗粒细胞凋亡的影响

目的：观察补肾调肝活血方对卵巢早衰模型大鼠性激素水平以及颗粒细胞凋亡的影响。方法：以雌性大鼠为研究对象,随机分为空白组、模型组、预防组、己烯雌酚组、中药低剂量组、中药高剂量组,用胃饲雷公藤多苷建立大鼠卵巢早衰模型。预防组、己烯雌酚组、中药低剂量组分别予以临床等效剂量给药,中药高剂量组予以临床4倍量给药。预防组给药34天,其余各组给药20天后,检测各组大鼠性激素水平与卵巢颗粒细胞凋亡率。结果：除中药低剂量组外,其余各给药组均能提高雌激素水平,与模型组比较,差异有显著性或非常显著性意义（P〈0.05,P〈0.01）。中药高剂量组、预防组的卵巢颗粒细胞凋亡率与模型组比较,均有不同程度降低（P〈0.05）。结论：补肾调肝活血方能有效改善雷公藤多苷所致卵巢早衰大鼠模型的雌激素缺乏状态和对抗卵泡颗粒细胞的凋亡;且预防组的各项观测指标改善明显,提示早期治疗卵巢早衰疗效较好。     

补肾活血方对免疫性卵巢早衰小鼠卵泡凋亡调控基因（Bcl-2/Bax）蛋白的影响

目的：研究补肾活血方对卵巢早衰（POF）小鼠卵泡凋亡调控相关基因的表达,为临床中医药预防和治疗卵巢早衰提供思路。方法：以小鼠透明带3为抗原,皮下多点注射免疫BALB/c雌性小鼠建立免疫性POF模型。以补肾活血方低、中、高剂量进行治疗,设倍美力为对照,免疫组化SABC法检测卵泡凋亡调控基因（Bcl-2/Bax）蛋白表达变化。结果：Bcl-2蛋白质表达空白对照组、补肾活血方各剂量组、倍美力组明显高于模型组（P〈0.05）,Bax蛋白质表达空白对照组、补肾活血方各剂量组、倍美力组均明显低于模型组（P〈0.05）。结论：补肾活血方可能通过影响凋亡调控基因（Bcl-2/Bax）蛋白表达变化,调节免疫反应,抑制抗体聚集,阻抑卵泡异常凋亡,从而改善卵巢功能。     

补肾活血方对卵巢早衰模型大鼠性激素水平及颗粒细胞凋亡调控相关因子的影响

  目的：探讨补肾活血方对卵巢早衰大鼠性激素水平及颗粒细胞凋亡调控因子B淋巴细胞瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响  方法：将SD大鼠随机分为6组,包括空白组、模型组、生理盐水对照组(简称对照组)及补肾活血方中药低、中、高剂量组。除空白组外,其余各组均用雷公藤多苷(终浓度50 μg/g)连续灌胃14天建立卵巢早衰大鼠模型。其后各组给予相应干预。观察大鼠动情周期改变及大鼠卵巢组织形态学变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测大鼠血清雌二醇(E₂)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)水平;采用免疫组化方法检测颗粒细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Caspase-3 的表达  结果：①与空白组比较,模型组大鼠血清FSH水平明显升高(P<0.05),LH水平有一定程度升高,且E₂水平有所降低,但LH及E₂的改变差异不显著(P>0.05);中药各剂量组大鼠FSH水平较模型组显著降低(P<0.01);LH水平除中药高剂量组外,低、中剂量组明显低于模型组(P<0.01);补肾活血方组大鼠E₂水平与模型组比较,除中剂量组外均有明显升高(P<0.01)。②免疫组化染色结果显示,模型组大鼠颗粒细胞Bax、Caspase-3蛋白表达较空白组明显上升(P<0.01),Bcl-2 蛋白有所下降,但下降幅度不明显(P>0.05);中药各剂量组大鼠卵巢颗粒细胞Bax及caspase-3的表达均显著下降(P<0.01),而Bcl-2 蛋白表达仅略有增强(P>0.05)  结论：雷公藤多苷可诱发大鼠卵巢颗粒细胞凋亡致卵巢早衰;补肾活血方能降低Bax 及Caspase-3蛋白的表达,减轻颗粒细胞的凋亡,从而对雷公藤多苷所致卵巢早衰起到治疗作用。     

补肾活血方对小鼠实验性卵巢早衰防治作用的研究

目的：探讨补肾活血中药复方对实验性的免疫性卵巢早衰（POF）的防治作用。方法：以免疫层析分离的猪卵透明带皮下和两后脚掌多点注射免疫8－10周龄雌性BALB／c小鼠建立POF的动物模型。分别在免疫早期或3次免疫后连续灌服中药复方，分析灌服中药后阴道脱落细胞涂片，外周血雌二醇（E2）浓蔗和血清抗透明带（ZP）抗体水平变化，及受试动物脾淋巴细胞对不同浓度ZP刺激的反应和卵巢滤泡和黄体数改变。结果：预防组和治疗组小鼠体内血清E2匀比免疫组高（P＜0.01,P<0.05），而抗ZP抗体则明显下降。卵巢组织形态学分析显示，治疗组和预防组生长滤泡和黄体数均比免疫组明显增加（P＜0.05,P<0.01）。免疫组脾淋巴细胞呈现抗原特异性的增殖反应，明显高于对照组，而治疗组脾淋巴细胞对抗原的特异性反应降低。结论：补肾活血中药复方主要通过抑制特异性免疫损伤，使卵巢内残存的少数滤泡能得以复苏，恢复部分卵巢功能，而且中药的预防效果优于效果。     

补肾活血方对卵巢早衰小鼠颗粒细胞TGF-β1、TGF-βRII、Smad2/3表达的影响

目的探索补肾活血方(紫石英、补骨脂、菟丝子等)对免疫性卵巢早衰(POF)小鼠卵泡壁颗粒细胞转化生长因子(TGF)-β1、TGF-βRII、Smad2/3蛋白表达的影响。方法 Balb/c雌性小鼠皮下多点注射小鼠透明带3建立免疫性POF模型,POF小鼠分成模型组,阳性组(戊酸雌二醇)和补肾活血方低、中、高剂量组。干预30 d后,卵巢组织作苏木精-伊红(HE)染色,免疫组化法与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测卵泡壁颗粒细胞和卵巢组织TGF-β1、TGF-βRII、Smad2/3的蛋白表达。结果与模型组相比,补肾活血方各剂量组、阳性组卵巢成熟卵泡数目明显增多,闭锁卵泡数目减少。卵泡壁颗粒细胞和卵巢组织TGF-β1、TGF-βRII、Smad2/3蛋白表达在补肾活血方各剂量组、阳性组中明显高于在模型组中(P0.05)。结论补肾活血方能通过上调颗粒细胞TGF-β1、TGF-βRII、Smad2/3的蛋白表达改善卵巢功能。     

补肾活血方对离体培养卵巢颗粒细胞性激素分泌的影响

目的:比较不同浓度补肾活血方含药血清对离体培养卵巢颗粒细胞内分泌功能的影响.方法:采用针刺提取卵泡颗粒细胞、离心分离,HE染色及FSHR免疫组化鉴定细胞,分别用0ng/mL、2.5ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL FSH刺激颗粒细胞,wst-1法测定相关OD值.用ELISA法测定不同浓度补肾活血方含药血清对离体培养卵巢颗粒细胞E2、P激素分泌的影响.结果:分离培养的颗粒细胞存活率＞90％;光镜下细胞贴壁规则,形态完整,呈梭型;HE染色:核深蓝色,胞浆淡红色;免疫组化:核呈蓝紫色,浆呈棕黄色.结论:补肾活血方能明显促进卵巢颗粒细胞的分泌功能,且中剂量效果更为显著.     

补肾养血方对卵巢早衰小鼠凋亡调控蛋白Bcl-2/Bax的影响

目的：探讨补肾养血方对免疫性卵巢早衰（POF）小鼠卵巢凋亡调节基因B细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达的影响。方法：以小鼠透明带3（Zp3）为抗原,皮下多点注射免疫 BALB/c雌性小鼠,14 d后强化免疫,建立免疫性卵巢早衰模型。设补肾养血方低、中、高剂量（5.1,10.2,20.4 g·kg^-1）进行治疗,以补佳乐（戊酸雌二醇0.6 mg·kg^-1）为阳性对照,于造模后15 d开始灌胃给药1次/d,连续6周（每1周休息1 d）。放射免疫法检测小鼠血清激素水平,Western法检测卵巢组织 Bcl-2,Bax蛋白的表达。结果：与空白对照组相比,模型组小鼠卵巢Bcl-2蛋白的表达减少,Bax蛋白表达增加,（P<0.05）,模型组小鼠卵巢Bcl-2/Bax下降（P<0.01）,提示模型组卵泡Bcl-2蛋白的低表达、Bax蛋白的高表达可能加速了卵泡的凋亡,导致卵巢早衰;与模型组相比,补肾养血方高、中、低剂量组及西药组小鼠卵巢Bcl-2蛋白的表达明显增加（P<0.01,P<0.05）,卵巢Bax蛋白的表达均减少（P<0.05）,Bcl-2/Bax明显降低（P<0.05）。结论：卵泡凋亡过快可能导致卵巢早衰,补肾养血方可能通过上调卵泡及卵巢间质Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,抑制卵泡的过快凋亡,从而改善卵巢功能。     

补肾活血方联合微囊化颗粒细胞移植对大鼠血清FSH、LH及E_2的影响

目的:探讨补肾活方联合微囊化细胞移植技术对大鼠生殖内分泌的影响。方法:将50只SD雌性大鼠随机分成5组:空白组(A组)、去卵巢组(B组)、微囊化GC细胞移植组(C组)、低剂量补肾中药+微囊化GC细胞移植组(D组)、高剂量补肾中药+微囊化GC细胞移植组(E组)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测治疗前后血清雌二醇(E_2)、卵泡刺激素(FSH)及黄体生成素(LH)浓度。结果:微囊化GC细胞移植后,C组大鼠血清E_2水平与B组比较显著升高(P0.05);FSH、LH水平均明显降低(P0.01);补肾活血方联合微囊化GC细胞移植后,D、E组E_2水平与C组比较显著升高(P0.05),FSH、LH水平均明显降低(P0.05)。结论:与单纯移植微囊化GC细胞相比,补肾活血方联合微囊化细胞移植技术能改善去卵巢大鼠激素分泌状态,其作为临床中医药预防和治疗卵巢早衰的一种手段具有良好的应景前景。     

补肾活血方联合雌孕激素治疗卵巢早衰的临床研究

目的 观察补肾活血方联合雌孕激素治疗卵巢早衰（POF）的疗效,探索中西医结合治疗POF的有效方法。方法 265例POF患者随机分为Ⅰ组（86例,补肾活血方治疗）、Ⅱ组（88例,结合雌激素加醋酸甲羟孕酮治疗）和Ⅲ组（91例,采用Ⅰ组和Ⅱ组药物联合治疗）,每组疗程均为6个月,于治疗结束时和结束后6个月,比较3组治疗前后主要症状（月经周期、潮热、盗汗、阴道干涩和性欲低下）、实验室检测指标［卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）和抑制素B（INH-B）］、超声检查指标（子宫内膜厚度、卵巢体积和窦卵泡数）以及不良反应情况。结果 与治疗前比较, 治疗结束时及结束后6个月3组主要症状、实验室指标及超声检查结果均显著改善（P<0.05,P<0.01）; 在改善月经周期、阴道干涩和性欲低下等症状,降低FSH、LH水平,提高E2、INH-B水平,改善子宫内膜厚度、卵巢体积和窦卵泡数等方面,Ⅲ组优于Ⅰ组或Ⅱ组（P<0.05, P<0.01）。3组均未见明显不良反应。结论 补肾活血方联合雌孕激素治疗POF疗效优于单纯补肾活血方或雌孕激素治疗,提示补肾活血方联合雌孕激素是治疗POF有效的方法。     

补肾活血方对大鼠软骨细胞凋亡增殖及MMP-13水平的影响

目的:探讨补肾活血方对大鼠体外培养软骨细胞凋亡增殖及基质金属蛋白酶-13(MMP-13)水平的影响。方法:采用SD大鼠切取关节软骨进行软骨细胞的体外培养,应用甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色进行鉴定。同步细胞后分为中药组、西药组和空白对照组分别处理。采用流式细胞仪进行细胞凋亡与增殖检测,采用放免法进行MMP-13水平检测。结果:成功进行了软骨细胞的培养及鉴定。流式细胞仪检测显示补肾活血方可减低软骨细胞的凋亡率,与空白对照组比较有显著性差异(P0.05),补肾活血方可促进细胞周期中G2与S期细胞比例,与空白组比较有非常显著性差异(P0.01)。补肾活血方还可以降低MMP-13水平,与空白组比较有显著性差异(P0.05)。结论:补肾活血方具有减少软骨细胞凋亡的作用,同时可以降低MMP-13水平。     

补肾活血方对免疫性卵巢早衰小鼠的影响

目的:探讨补肾活血方对免疫性卵巢早衰(POF)小鼠的治疗作用。方法:以重组猪卵透明带(pZP4)蛋白两后脚掌和皮下多点注射免疫雌性BALB/c小鼠建立POF动物模型。小鼠随机分为正常组、模型组、雌二醇组和补肾活血方高、中、低剂量组(按生药量计分别为15.0,7.5,3.75 g.kg-1),分析ig 20 d后阴道脱落细胞涂片、外周血雌二醇(E2)浓度、血清抗透明带(pZP4)抗体变化及卵巢组织炎形态学观察。结果:补肾活血方高剂量组小鼠阴道涂片显示动情周期基本规则为6～7 d;高剂量组可明显升高小鼠血清E2浓度(P<0.01);高剂量组小鼠的血清抗pZP4抗体滴度显著下降(P<0.05);高剂量组小鼠初级卵泡和次级卵泡的数量显著增加(P<0.05)。结论:补肾活血方能改善卵巢的生殖内分泌功能和卵巢内各期卵泡和黄体的发育状况,并可在一定程度上抑制自身免疫早衰作用。     

补肾活血汤治疗卵巢早衰临床研究

目的:观察补肾活血汤治疗卵巢早衰的临床疗效。方法:将200例卵巢早衰患者随机分为对照组和治疗组各100例,对照组采用人工周期疗法,治疗组采用补肾活血汤治疗,两组均连续治疗3月为1个疗程。结果:对照组100例中治愈48例,占48.0%;好转52例,占52.0%。治疗组100例中治愈62例,占62%;好转38例,占38%。治疗组治愈率明显优于对照组(P<0.05)。结论:补肾活血汤治疗卵巢早衰临床疗效确切,值得推广。     

补肾活血方对糖尿病小鼠学习记忆功能的影响

目的本实验拟观察高血糖状态下实验小鼠脑组织中单胺类神经递质是否产生变化及其影响研究。方法采用四氧嘧啶静脉注射造模,时间8周。结果长期高血糖可引起小鼠脑组织中相关单胺类神经递质的变化,使其morris值升高,中药干预后,受试药组小鼠morris值显著下降。结论补肾活血方对改善高血糖状态小鼠学习记忆障碍有显著作用。     

基于AMH与microRNA-23a相关性探讨朱氏补肾活血方对卵巢早衰的影响

目的 观察朱氏补肾活血方治疗卵巢早衰(POF)肾虚血瘀证患者的临床疗效,探讨POF患者抗米勒管激素(AMH)与微RNA (miR)-23a的相关性,为POF的治疗寻求更安全有效的方法.方法 纳入73例POF肾虚血瘀证患者,随机分为中药组35例和西药组38例.中药组患者给予补肾活血方口服,西药组患者给予雌二醇片/雌二醇地...     

补肾活血方对糖尿病小鼠学习记忆功能及中枢神经递质的影响

目的 观察补肾活血方对糖尿病小鼠学习记忆功能及中枢神经递质的影响.方法 40只ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、尼膜同组和中药组,每组10只.采用四氧嘧啶尾静脉注射复制糖尿病模型,造模4周后灌胃,中药组给予补肾活血方,尼膜同组给予尼膜同,其余两组给予等量蒸馏水,共8周.观察各组小鼠血糖的变化;Morris水迷宫法测定小鼠学习记忆功能;测定大脑皮质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量.结果 造模后小鼠血糖升高,与正常对照组比较有统计学差异(P<0.05或P<0.01);尼膜同组和中药组小鼠Morris潜伏期均较模型组明显缩短(P<0.01);中药组小鼠大脑皮质NE含量较模型组升高(P<0.01).结果 补肾活血方能够改善糖尿病小鼠学习记忆功能,其作用机制可能与大脑皮质NE含量变化有关.     

补肾调肝活血方治疗卵巢早衰30例临床观察

目的：观察补肾调肝活血方治疗卵巢早衰的临床疗效。方法：将本病60例采用随机数字表法按1：1的比例分为治疗组和对照组各30例,治疗组采用补肾调肝活血方治疗,对照组采用己烯雌酚和安宫黄体酮治疗。结果：治疗组在改善头晕耳鸣、腰膝酸软、心烦易怒、性欲低下以及FSH、LH、E2等症状方面均优于对照组。结论：补肾调肝活血方治疗卵巢早衰疗效明显。     

补肾活血方治疗卵巢早衰18例临床观察

目的:探讨补肾活血方结合芬吗通治疗卵巢早衰(POF)的临床疗效。方法:将36例POF患者随机分为治疗组和对照组,对照组予芬吗通治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加服补肾活血方治疗,观察并比较两组患者围绝经期症状、血清促卵泡激素(FSH)与雌二醇(E_2)水平及临床疗效。结果:痊愈率治疗组为38.9%,优于对照组的16.7%(P0.05)。两组Kupperman评分、血清FSH、E_2水平治疗3个月后、停药3个月后与治疗前组内比较及治疗后组间比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:补肾活血方结合芬吗通治疗POF,能进一步改善雌激素水平,改善临床症状,提高治疗效果。     

补肾调肝活血方治疗卵巢早衰117例临床观察

目的:观察补肾调肝活血方治疗卵巢早衰的临床疗效.方法:治疗组117例采用补肾调肝活血方配合小剂量西药人工周期治疗,对照组58例采用常规剂量西药人工周期治疗.结果:治疗组总有效率为85.47％,优于对照组的81.03％ (P＜0.05);且治疗组改善中医症状方面明显优于对照组(P＜0.05).结论:补肾调肝活血方治疗卵巢早衰有较好疗效.     

补肾活血方治疗卵巢早衰的临床观察及其对ANA-ACA-AOA通路的影响

目的观察补肾活血方治疗卵巢早衰患者的临床疗效,并探讨其对患者相关免疫抗体的影响。方法纳入82例卵巢早衰患者,随机分为中药组和西药组,每组41例。中药组给予补肾活血方口服,西药组给予口服戊酸雌二醇片结合醋酸甲羟孕酮片序贯疗法治疗,两组治疗周期均为6个月。治疗前后,比较两组患者的中医证候评分;检测患者的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)、催乳素(PRL)、孕酮(P)、睾酮(T)、抗苗勒氏管激素(AMH)、抗核抗体(ANA)、抗心磷脂抗体(ACA)、抗卵巢抗体(AOA)水平;采用超声检查,比较两组患者的子宫体积、卵巢体积及两侧卵巢基质内血流的收缩期峰值流速(PSV)和阻力指数(RI)。结果治疗过程中,中药组剔除或脱落4例、西药组剔除2例,最终中药组37例、西药组39例纳入统计分析。①治疗后,两组患者的中医证候评分均显著降低(P0.01),且中药组患者的评分低于西药组(P0.01)。②治疗后,中药组患者的FSH水平及FSH/LH比值明显降低(P0.05),西药组患者的FSH水平亦降低(P0.05);两组患者的各项性激素水平比较,差异均无统计学意义(P0.05)。③治疗后,两组患者的AMH水平均升高(P0.05),ANA、AOA水平均降低(P0.05),且中药组患者的AMH水平高于西药组、ANA水平低于西药组(P0.05)。④治疗后,两组患者的卵巢体积及卵巢血流PSV较治疗前均升高(P0.05),中药组患者的RI较治疗前降低(P0.05),且中药组患者的RI低于西药组(P0.05)。结论补肾活血方能有效改善卵巢早衰患者的中医证候,下调患者的FSH水平及FSH/LH比值,上调AMH水平,调节ANA-ACA-AOA通路,从而平衡患者的生殖内分泌轴,减缓卵巢颗粒细胞及卵泡的损伤,缓解卵巢早衰。     

补肾活血法防治免疫性卵巢早衰的研究进展

卵巢早衰的发病机制与免疫密切相关,深入认识并早期发现免疫性卵巢早衰是防治此病的关键,目前西医激素治疗存在一系列的弊端,本文拟从中医“心-肾-子宫轴”整体性理论、“辨证论治”体系、“治未病”思想等角度,阐述补肾活血法防治免疫性卵巢早衰的进展情况。