正交试验优选白术的土炒炮制工艺

摘 要 目的：优选土炒白术的最佳炮制工艺条件。方法: 以白术水提取物、醇提取物和白术内酯Ⅲ含量为指标,选择锅内空间温度、炮制时间、伏龙肝用量3个因素,采用L₉(3⁴)正交试验法对白术炮制工艺进行优选。 结果: 土炒白术的最佳炮制工艺为：锅内空间温度220℃～250℃,炮制时间6 min,伏龙肝用量30%。结论:用正交试验法优选出的白术土炒炮制工艺稳定性好,可更好保证炮制品的质量。     

正交试验优选麸炒白芍的炮制工艺

目的优化麸炒白芍的最佳炮制工艺。方法以芍药苷含量为指标,用正交设计试验对麸炒白芍炮制工艺进行研究。结果取生白芍片在190℃、炒制10 m in、用麸量10%为最佳炮制工艺。结论采用优选的炮制工艺能有效保证麸炒白芍中芍药苷含量,为制定其饮片的质量标准以及临床使用提供依据。     

苍术麸炒前后吡咯里西啶生物碱含量变化研究

目的：建立苍术中吡咯里西啶生物碱(PAs)的含量测定方法,考察麸炒前后5个PAs的变化规律。方法：采用UPLC-MS/MS法进行含量测定,采用ACQUITY UPLC HSS T3(150 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液(体积比为11∶89),恒流洗脱,流速0.30 mL·min^-1,进样体积1μL;电喷雾离子源,正离子多反应监测模式,以标准曲线法计算含量。结果：3批苍术经过麸炒后,PAs总量从188.74～254.64μg·kg^-1下降到101.74～135.36μg·kg^-1;野百合碱从25.35～52.18μg·kg^-1下降到23.25～37.41μg·kg^-1;氮氧化野百合碱从25.12～40.22μg·kg^-1下降到6.98～18.23μg·kg^-1;克氏千里光碱从11.64～36.25μg·kg^-1下降到3.64～12.85μg·kg^-1;...     

高效液相色谱法测定白术饮片及其炮制品中白术内酯Ⅰ含量

目的建立白术饮片和炮制品中白术内酯Ⅰ的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱：Kromssil C18反相柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相：甲醇 水（70：30）;流速：0.8 mL•min 1;检测波长：220 nm。结果白术内酯Ⅰ在5～50 μg•mL 1范围内线性关系良好,回归方程为Y＝11 002X+8 043,r＝0.990 9;平均加样回收率99.25%,RSD＝0.90%。结论该方法简单、灵敏、准确,结果可靠,可作为白术饮片和炮制品中白术内酯Ⅰ的定量方法。     

黄芪-当归药对配伍前后HPLC指纹图谱及主要化学成分变化

目的建立黄芪-当归(芪归)药对配伍前后HPLC指纹图谱及多指标成分同时测定的方法,探讨芪归药对配伍的物质基础。方法采用水煎煮-喷雾干燥法制备芪归药对及黄芪、当归提取物;采用Shim-Pack VP-ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,以水-甲醇溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长280 nm,建立芪归药对配伍前后HPLC指纹图谱及毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、阿魏酸、Z-藁本内酯等多指标成分同时测定的方法;求取指纹图谱共有模式,标定共有峰并分析相对峰面积变化,进行色谱峰归属,分析药对配伍前后指标性成分含量变化。结果所建HPLC指纹图谱及多指标成分同时测定方法精密度良好,溶液中各待测成分在3d内稳定,各色谱峰RSD值均<3.0%,5种指标成分在各自线性范围内均有良好的线性关系,回收率均符合相关规定,各样品指纹图谱相似度均>0.9;芪归药对配伍后共标定出26个共有峰,其中9个来自黄芪,6个来自当归,7个同时来自黄芪和当归,4个色谱峰是新生成物质;芪归药对配伍共煎后,黄芪中毛蕊异黄酮及芒柄花素含量均显著降低(P<0.05),当归中阿魏酸及Z-藁本内酯含量均显著降低(P<0.01)。结论芪归药对配伍后HPLC指纹图谱变化显著,总体表现为多数化学成分含量减少、个别成分含量增加并有新化合物生成。     

50批不同来源白术药材及饮片中白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ含量的HPLC法测定

目的:采用HPLC法测定不同来源白术药材及饮片中白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ的含量。方法:采用Tigerkin C18(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相为甲醇-水(67∶33);流速为0.8 mL.min-1;检测波长为220 nm;柱温30℃。结果:10批市售白术药材和40批市售白术片及麸炒白术片中白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ含量差别均较大。结论:不同来源市售白术药材及其饮片质量差别较大。     

白芍与柴胡不同比例配伍芍药苷水煎出量的比较

目的考察白芍与柴胡不同比例配伍共煎芍药苷的煎出量,以探讨传统“药对”白芍配伍柴胡对有效成分煎出的影响。方法单味白芍、白芍与柴胡(1+2,1+1,2+1)配伍,水煎提取,分离,采用HPLC法,以ODSC18(4.6mm×250mm)为色谱柱,乙腈水=17∶83为流动相,流速:1.0mL/min,检测波长:230mm,柱温:室温。结果白芍配伍柴胡,芍药苷煎出量均比白芍单煎高,平均提高12.68%,其中白芍与柴胡2∶1配伍比例芍药苷煎出量最大。结论说明白芍配伍柴胡有利于芍药苷煎出,从而使芍药苷煎出量增加。     

不同产地白术药材中白术内酯Ⅱ和Ⅲ的含量测定

目的建立一种同时测定白术内酯Ⅱ和Ⅲ的高效液相色谱检测方法,并分析不同产地白术药材中白术内酯Ⅱ和Ⅲ的含量。方法样品采用液-液萃取,以乙腈-水(50∶50)为流动相,流速1.0mL.min-1,采用SHIMADZU ODS柱分离(150mm×4.6mm;i.d.,5μm);检测波长220nm。结果标准曲线线性范围为0.5~50.0μg.mL-1,线性关系良好(r>0.99),定量限为0.5μg.mL-1,回收率98%以上,方法的稳定性、重复性和精密度均较好(RSD<3%)。结果显示杭州产白术药材中两种有效成分含量较高,河南产白术药材含量较低。结论该法操作简便、快速、灵敏、准确,已经成功地用于产地白术药材中白术内酯Ⅱ和Ⅲ的含量测定。     

气相色谱-质谱联用分析黄连、黄芩、白芍合煎液中挥发性成分

目的:定性分析黄连阿胶汤中黄连、黄芩、白芍单煎液与合煎液中的挥发性成分,研究其对合煎液中挥发性成分的归属以及在煎煮过程中可能发生的变化.方法:分别用石油醚萃取黄连、黄芩、白芍3味药的单煎液与合煎液,浓缩萃取物并定容至1 mL,使用Agilent GC-MS色质联用仪和HP-5 MS毛细管柱对样品进行分析.柱温程序为50℃保温5 min,8℃/min,升温至250℃.结果:共鉴定出了19个主要化合物.结论:除19号峰外,单煎液中的挥发性成分均在合煎液中检出.     

肝介安颗粒中黄芩和白芍的鉴别及延胡索乙素的含量测定

目的：建立肝介安颗粒剂的质量标准。方法：用薄层色谱法对处方中黄芩和白芍进行鉴别；用RP-HPLC法测定处方中延胡索乙素的含量，色谱条件：依利特ODS2柱，203．82mmol／L乙酸铵溶液-乙腈（75：25）为流动相，乙酸调pH4．4，流速0．8mL／min，检测波长280nm。结果：薄层色谱中，在对照品和生药的相应位置处，黄芩、白芍供试品分别显暗绿色和蓝紫色斑点，Rr值分别为0．65和0．40，阴性对照液没有斑点。RP-HPLC中，延胡索乙素的线性范围为10．08～120．96μg／mL，回归方程为A=17．855c＋1．8092（r=0．9996）。平均加样回收率为99．94％，RSD为1．60％（n=5）。结论：该方法简便、准确，可用于肝介安颗粒剂的质量控制。     

超高效液相色谱法同时测定白芍中芍药苷和芍药内酯苷的含量

目的 采用超高效液相色谱法(UPLC)同时测定白芍中芍药苷和芍药内酯苷的含量.方法 采用Agilent Extend-C18(4.6 mm×50 mm,1.8μm)色谱柱,以流动相乙腈(A)-0.2％乙酸溶液(B)梯度洗脱;柱温30℃;流速0.5 mL·min-1;检测波长230 nm.结果 芍药苷和芍药内酯苷分别在0.011 6～1.45(r=0.999 9)、0.008～lmg·mL-1(r=0.999 9)呈良好的线性关系;平均回收率分别为98.6％、97.5％,RSD分别为1.4％、2.2％.结论 该法快速简便,灵敏度高,准确可靠,可用于白芍中有效成分含量的快速测定及白芍的质量控制.     

正交试验优选“桂枝与白芍”药对煎煮工艺

目的优选"桂枝与白芍"药对最佳煎煮工艺。方法以浸泡时间、武火沸后微火煎煮时间、加水量为因素,设计L_9(3~4)正交表,以芍药苷含量、桂皮醛含量、浸膏得率为量化指标,通过数据分析,优选出最佳煎煮工艺。结果最佳煎煮工艺为:浸泡时间60 min、武火沸后微火煎煮时间60 min、10倍加水量,其中加水量影响因素有显著差异(P<0.05)。结论采用优选后煎煮工艺操作简便,稳定可行,重复性好,可控制煎出液内在质量,为"桂枝与白芍"药对规范化煎煮提供合理的依据。     

不同炮制方法对白芍质量的影响

目的：通过测定白芍及其炮制品中芍药苷和芍药内酯苷的量,探讨不同炮制方法对白芍质量的影响。方法：采用高效液相色谱方法,Diamonsil C18色谱柱（250mm×4．6mm,5um）,流动相为乙腈-0．05％磷酸溶液（14：86）,检测波长230nm,柱温：35℃。结果：芍药苷的量：生品〉酒制品〉醋炒品〉麸炒品〉清炒品〉土炒品〉酒麸制品;芍药内酯苷的量：土炒品〉麸炒品〉酒制品〉醋炒品〉清炒品〉酒麸制品〉生品。结论：白芍经炮制后芍药苷的量均有所下降,而芍药内酯苷的量均有所升高。     

同基原赤、白芍增强小鼠免疫作用的异同及成分相似度比较

目的:探讨同基原赤、白芍增强小鼠免疫作用的异同并比较其化学成分的相似度,寻求免疫作用的物质基础。方法:腹腔注射环磷酰胺复制免疫低下动物模型,随机分为赤、白芍高、中、低剂量组、空白组、阳性对照组,测定碳粒廓清、迟发型超敏反应、血清溶血素含量以及巨噬细胞吞噬功能;采用HPLC法分析比较起效赤、白芍提取物中的化学成分。结果:赤、白芍给药组与对照组相比,均能显著提高免疫低下模型小鼠免疫器官质量(P<0.05)、极显著增强巨噬细胞吞噬能力(P<0.01)、极显著升高血清溶血素的含量(P<0.01)。此外,HPLC图谱显示本次试验中的赤、白芍起效成分提取物在230nm下具有17个共有峰,相似性为81.29%。结论:同基原赤、白芍化学成分具有相似性,在本次试验中增强小鼠免疫的作用相似,提示其相似的化学成分可能为增强免疫的物质基础。     

基于UPLC-Q-TOF-MS和多元统计分析的白术道地性研究

目的 对不同产地白术药材的化学成分进行系统分析,为白术的道地性研究提供依据。方法 采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS),结合质谱分子网络技术,快速鉴定白术的主要化学成分。应用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对安徽、河北、浙江的25批白术进行多元统计分析,用VIP值、t检验筛选出组间差异显著的指标性成分。结果 不同产地的白术化学差异较为明显,共鉴定出10个差异化合物,其中浙江白术的姜黄烯、Atractylmacrol D、白术内酯Ⅲ、3β-羟基苍术酮、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ、β-Vatirenene和苍术酮等成分显著高于安徽或河北样品,可作为潜在的道地性标志物。结论 本研究为全面评价白术药材的质量和道地性提供了依据,并发现不同产地白术的化学成分差异较大,可能与环境、品种和种植方式等有较大关系。     

中药虎杖等对犬胆囊运动及血浆胆囊收缩素影响的实验研究

目的探讨治疗胆石症、胆囊炎中药方剂中常用的虎杖等单味中药对犬胆囊运动的影响及其机制。方法用B超测量灌服单味中药前后犬胆囊大小 ,并通过放免法测血浆中灌服中药前后胆囊收缩素 (cholecystokininCCK)含量。结果犬在灌服虎杖后胆囊明显收缩 ,CCK明显升高并且两者之间呈显著正相关。犬在灌服黄芩后胆囊明显收缩 ,血浆CCK无明显改变。犬在灌服延胡索及白芍后胆囊无明显改变 ,血浆CCK含量也无明显变化。结论虎杖通过增加犬血浆中CCK含量使胆囊明显收缩。黄芩可使犬胆囊明显收缩 ,但对CCK无明显影响。延胡索、白芍对犬胆囊大小及血浆CCK均无明显影响     

附子白芍配伍对佐剂性关节炎大鼠的抗炎活性研究

目的 观察附子白芍配伍前后对佐剂性关节炎模型大鼠抗炎活性的影响。方法 采用完全弗氏佐剂诱导建立佐剂性关节炎大鼠炎性痛模型,随机分为模型组、附子组、白芍组、附子白芍配伍组,以雷公藤多苷为阳性药,另设正常组。分别测定各组大鼠足跖肿胀体积,ELISA法测定血清中PGE2、IL-1β和TNF-α浓度。结果 与模型组比较,雷公藤多苷组、附子组、白芍组,配伍组均能够降低大鼠左右后足的肿胀度以及血清中的PGE2、IL-1β和TNF-α浓度,其中附子白芍配伍组、雷公藤多苷组、白芍组作用最强(P<0.01),附子组和白芍组均弱于配伍组,附子组的抑制作用最弱,与配伍组有显著统计学差异(P<0.01)。结论 附子、白芍均有不同程度的抗炎活性,两者配伍能显著增强各单味药尤其是附子的抗炎活性,表明两者配伍具有明显的协同增效作用。     

基于肝脏代谢组学的柴胡-白芍药对抗抑郁作用机制研究

利用LC-MS代谢组学技术,分析柴胡-白芍药对对慢性不可预知温和应激抑郁(CUMS)大鼠肝脏内源性代谢物代谢紊乱的调控作用,明确柴胡-白芍药对"疏肝解郁"的代谢调控途径。将大鼠随机分为正常对照组、CUMS模型组、文拉法辛阳性药组和柴胡-白芍药对高、低剂量组,造模及给药持续28天。通过抑郁症传统药效学指标(大鼠体重、旷场实验、糖水偏爱实验及强迫游泳实验)评价柴胡-白芍药对的药效。动物实验获得山西大学伦理委员会的批准(批准号:SXULL2016036)。采用UHPLC-Q Exactive Orbitrap-MS代谢组学技术分析柴胡-白芍药对对CUMS模型大鼠肝脏代谢轮廓调节作用,探讨柴胡-白芍药对"疏肝解郁"的代谢调控机制。结果显示柴胡-白芍药对能显著改善CUMS模型组大鼠的抑郁样行为;通过LC-MS代谢组学技术共鉴定指认出25种与抑郁相关的生物标志物,柴胡-白芍药对能显著回调其中的16种;代谢通路分析显示D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,精氨酸和脯氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,谷胱甘肽代谢为其改善CUMS模型大鼠肝脏代谢紊乱的主要途径。