NF-kB信号通路在食管鳞癌细胞系中的激活

目的核转录因子NF-kappaB（NF-kB）是一种重要的转录因子，参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。本研究拟通过检测NF-kB信号通路在食管鳞癌细胞系中是否存在，分析NF-kB在食管鳞癌细胞中的激活状态及其对食管鳞癌细胞的生存及转化作用。方法采用免疫细胞化学法和Western blotting法检测两株食管鳞癌细胞系中NF-kB亚单位p50和p65，阻遏物IKBα及其上游激酶IKKβ的蛋白表达。并采用EMSA法检测两株食管鳞癌细胞核中NP-kB与DNA的结合活性。结果食管鳞癌细胞中存在激活的NF-kB信号通路，p50、p65、IkBα及其上游激酶IKKβ的蛋白在细胞质中均表达，并且p50／p65在细胞核中具有较高的DNA结合活性。结论本研究发现NF-kB信号通路在两种食管鳞癌细胞系被激活，提示激活的NF-kB信号通路可能在食管鳞癌发生中起重要作用。     

食管鳞癌细胞中NF-κB与IκBα的mRNA、蛋白表达

目的：核转录因子NF—kappaB（NF—κB）是一种重要的转录因子，参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。本研究通过检测食管鳞癌细胞中NF—κB与IκBαmRNA、蛋白的表达及NF—κB的DNA结合活性．分析NF—κB在食管鳞癌细胞中的激活状态及其在食管鳞癌细胞的生存及转化中的作用。方法：采用Western blotting法检测两株食管鳞癌细胞胞质中NF—κB亚单位p50和p65、阻遏物IKBα及其磷酸化IKBα的蛋白表达．检测细胞核中p50和p65的蛋白表达并采用EMSA法检测其与DNA的结合活性。使用RT-PCR法检测p50、p65、IκBαmRNA的表达：结果：NF—κB的亚单位p50、p65、IκBα及磷酸化IκBα在食管鳞癌细胞质中均表达．p50、p65蛋白在细胞核中也表达并具有较高的DNA结合活性.RT-PCR结果表明．p50、p65、IκBα的mRNA在细胞中也存在过表达。结论：本研究发现NF—κ在两株食管鳞癌细胞系中被激活，基因的过表达及IκBα的磷酸化在维持NF—κB的活化中起着重要的作用．     

HCV C 蛋白调控肝门部胆管癌细胞中NF-κB活性的研究

目的探讨HCV C蛋白在肝门部胆管癌细胞中对核转录因子κB(NF-κB)调控作用.方法利用稳定表达HCV C蛋白的QBC939细胞株(QBC939 HCV C ),通过NF-κB报道基因分析法、凝胶迁移率分析(EMSA)检测HCV C蛋白增强肝门部胆管癌细胞NF-κB的DNA结合活性和反式激活活性.RT-PCR、Western blot检测HCV C蛋白对核转录因子κB抑制蛋白α(IκBα)mRNA及p50、p65、IκBα蛋白表达及IκBα蛋白磷酸化的影响.结果①EMSA结果显示QBC939HCV C 细胞系中NF-κB相对信号密度明显比QBC939细胞高.②将pNF-κB-lun表达质粒转染稳定表达HCV C蛋白胆管癌细胞系中,通过单光子检测仪检测荧光素酶活性,结果显示QBC939HCV C 细胞中活化NF-κB为12.8倍,而QBC939细胞中NF-κB为2.6倍.③RT-PCR显示IκBα mRNA在QBC939 HCV C 细胞和QBC939细胞中的表达无明显差异;Western blot结果显示稳定表达HCV C蛋白的QBC939 HCV C 细胞株的胞核中的p50、p65蛋白高水平表达,而未转染HCV C蛋白的QBC939细胞仅检测出极低水平的p50、p65蛋白.在QBC939HCV C 细胞胞浆中IκBα蛋白低水平表达,QBC939细胞高水平表达,但IκBα蛋白磷酸化水平则相反.结论HCV C蛋白通过增加IκBα降解激活的NF-κB在肝门部胆管癌的发生中起重要作用.     

siRNA阻断NF-κB信号通路联合5-Fu对食管鳞癌细胞周期的影响

目的利用RNAi技术特异性的抑制NF-κB亚单位p65的表达,探讨在食管鳞癌细胞中将NF-κB作为基因治疗靶点的价值。方法将荧光素标记的对照siRNA转染到食管鳞癌细胞中观察转染效率,p65siRNA转染到EC9706和Eca109细胞中,使用Western blot的方法检测p65和Cyclin D1蛋白的表达,使用EMSA法检测转染前后p65与DNA结合活性的变化;流式细胞仪检测p65siRNA与5-Fu(327μg/ml)单独或联合应用,对食管鳞癌细胞周期的影响。结果荧光素标记的siRNA转染食管鳞癌细胞的效率可达90%以上。在转染后的EC9706和Eca109细胞中,p65和Cyclin D1蛋白的表达水平下调;NF-κB与DNA的结合活性明显下降;G0/G1期的细胞开始增加,同时S期的细胞逐渐减少;当转染p65siRNA细胞联合使用5-Fu时,G0/G1期的细胞明显增加,同时S期的细胞明显减少。结论p65siRNA可以特异性的阻断NF-κB信号通路,下调NF-κB下游基因中细胞周期蛋白Cyclin D1的表达,表明活化的NF-κB信号通路可以成为食管鳞癌基因治疗中一个重要的分子靶点。     

肾癌中PPARα通过IKK改变NF-κB信号通路活性的实验研究

目的:观察对舒尼替尼耐药的肾癌细胞系(A498、Caki-1、786-O)中PPARα调控NF-κB信号通路活性的作用机制。方法:首先培养对舒尼替尼耐药的三种肾癌细胞系(A498、Caki-1、786-O),上调和下调PPARα的表达后,用Western blot法和荧光素酶法,分别检测耐药和敏感细胞系中NF-κB p65的表达水平以及NF-κB 活性。用RT-PCR和Westen blot法分别检测空白对照组和NF-κB+SN50（信号通路抑制组）中,PPARα 的 mRNA 和蛋白表达水平。在稳定过表达PPARα和低表达PPARα时用Westen blot法分别检测耐药细胞株(A498)中IKK,P-IKK,P-NF-κB p65蛋白的表达水平。结果:舒尼替尼耐药的肾癌细胞系中,下调PPARα,抑制NF-κB p65的表达。抑制NF-κB信号通路,PPARα表达变化未出现显著性差异。上调PPARα基因表达,IKK、P-IKK、P-NF-κB p65蛋白的表达显著性升高。结论:PPARα 可能通过改变上游基因IKK的表达来调控NF-κB 信号通路活性。     

食管鳞癌及癌旁粘膜中核转录因子κB p65及IκBα基因和蛋白表达及意义

目的:探讨核转录因子κB(NF-κB)p65基因及其抑制基因IκBα的表达与食管鳞癌发生的关系。方法:用RT-PCR及免疫组化SP法检测了61例食管鳞癌及其正常粘膜上皮、癌旁粘膜上皮中NF-κBp65基因、IκBα基因mRNA及蛋白的表达。结果:食管鳞癌中p65mRNA、IκBαmRNA的表达量明显高于正常上皮(P<0.01),p65蛋白、IκBα蛋白胞浆表达或胞核表达率均明显高于正常上皮(P<0.01)。癌旁粘膜中,NF-κBp65蛋白、IκBα蛋白在癌旁正常上皮中的胞浆或胞核阳性率均明显低于不典型增生上皮、原位癌和浸润癌(P均<0.05)。结论:NF-κBp65、IκBαmRNA表达和蛋白表达均与食管鳞癌的发生有关。     

核转录因子κBp65蛋白及其抑制蛋白IκBα表达与食管鳞癌浸润转移的关系

目的:探讨核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白及其抑制蛋白IκBα表达与食管鳞癌浸润转移的关系.方法:用免疫组化SP法检测了61例食管鳞癌中NF-κBp65、IκBα蛋白的表达.结果:p65、IκBα蛋白的胞浆表达与食管鳞癌的组织学分级、浸润深度和淋巴结转移无关,但p65蛋白的胞核表达与食管鳞癌的组织学分级、浸润深度和淋巴结转移均呈正相关(P值均＜0.01),IκBα蛋白的胞核表达与食管鳞癌的淋巴结转移有关(P＜0.05).在食管鳞癌中IκBα蛋白的胞浆和胞核阳性率均高于p65蛋白,但差异均无统计学意义,也无相关关系.结论:NF-κBp65蛋白的胞核表达与食管鳞癌的分级、浸润和淋巴结转移有关,IκBα蛋白的胞核表达与食管鳞癌的淋巴结转移有关.     

食管鳞癌细胞系中STAT3的激活及VEGF和Bcl-2的表达

目的：探讨信号转导子及转录活化子3（STAT3）在食管鳞癌细胞系中的激活情况以及STAT3与其下游靶基因产物VEGF和Bcl～2的表达情况方法：采用免疫细胞化学法和Western blotting法检测两株食管鳞癌细胞系中STAT3及p-Stat3（STAT3蛋白的活化形式），VEGF和Bcl-2蛋白的表达情况，并采用凝胶电泳迁移率（electrophoretic mobility shift assay，EMSA）法检测两株食管鳞癌细胞核中STAT3与DNA的结合活性结果：食管鳞癌细胞中存在激活的STAT3信号传导通路，通路蛋白STAT3、p-STAT3及其下游靶基因产物VEGF．Bcl-2在细胞中均有表达，蛋白在细胞核中具有较高的DNA结合活性结论：两种食管鳞癌细胞系中均有组成性激活的STAT3信号通路，提示STAT3信号通路可能在食管鳞癌发生、发展中起重要作用。     

CTSB在肝内胆管细胞癌中表达及对癌细胞增殖及NF-κB信号通路的影响

摘 要：［目的］探讨人组织蛋白酶B（CTSB）在肝内胆管细胞癌中表达及对癌细胞增殖及核因子-κB（NF-κB）信号通路的影响。［方法］ 采用Western blot检测肝内胆管癌细胞中CTSB蛋白表达,使用siRNA对CTSB沉默后采用Edu实验检测细胞增殖,同时检测NF-κB信号通路中相应蛋白表达情况。［结果］与正常肝细胞系相比,肝内胆管癌细胞RBE、HCCC9810、HUCCT1中CTSB蛋白表达水平均明显提高（t=7.724、8.839、7.983,P=0.002、0.001、0.002）。与Control组相比,CTSB-siRNA组的CTSB蛋白表达量明显下降（t=6.131,P=0.004）,细胞增殖比例明显下降（t=5.271,P=0.006）,且CTSB-siRNA组的NF-κB抑制蛋白α（IκB-α）、IκB激酶β（IKK-β）、IKKα和p-NF-κB蛋白水平明显下降（t=6.069、5.433、6.365、5.717,P=0.004、0.006、0.003、0.005）。［结论］ 肝内胆管细胞癌中CTSB蛋白表达水平明显上调,且CTSB能够通过活化NF-κB信号通路促进肿瘤细胞增殖。     

热休克蛋白70抑制剂PES对人胃癌BGC细胞NF-κB通路的影响

目的:探讨热休克蛋70(heat shock protein 70,Hsp70)抑制剂PES(2-phenylethynesulfonamide)对人胃癌BGC细胞活性、细胞迁移以及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的影响。方法 :采用Hsp70抑制剂PES处理人胃癌BGC细胞后,应用CCK-8(cell counting kit-8)法检测BGC细胞的活性,细胞划痕实验检测BGC细胞的迁移能力,蛋白质印迹法检测NF-κB信号通路成员及其下游血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,免疫荧光法观察BGC细胞质中p65的表达。结果 :与未经PES处理的BGC细胞(对照组)比较,5、10和20μmol/L的PES处理BGC细胞72 h后,BGC细胞活性和细胞迁移率被明显抑制(P值均<0.05)。20μmol/L的PES处理后,BGC细胞NF-κB信号通路中磷酸化p65(phospho-p65,p-p65)、p65、NF-κB抑制蛋白激酶α(inhibitory protein of NF-κB kinaseα,IKKα)、p-IKKα、p-IKKβ、IKKβ、p-Akt和Akt以及下游VEGF蛋白的表达水平均明显低于对照组(P值均<0.05),且细胞质中p65蛋白的荧光明显减弱。结论 :Hsp70抑制剂PES可抑制胃癌BGC细胞的活性和迁移,下调BGC细胞NF-κB信号通路活性以及下游VEGF蛋白的表达水平,降低BGC细胞质中p65的表达。     

舒尼替尼通过NF-кB旁路途径诱导人肝癌HepG2细胞NKG2DLs的表达

目的：探讨舒尼替尼通过NF-κB信号通路诱导肝癌HepG2细胞表达自然杀伤细胞2族成员D配体（natural killer group 2 member D ligands, NKG2DLs)的分子机制。方法： 常规体外培养HepG2细胞,单细胞凝胶电泳检测1 μmol/L舒尼替尼处理HepG2细胞24 h前后DNA损伤情况,实时荧光定量PCR检测药物处理前后细胞DNA损伤修复分子mRNA的表达,Western blotting 检测分别以NF-κB激动剂和抑制剂处理HepG2细胞前后NKG2DLs蛋白表达及IKKα和IκBα表达情况。结果： 舒尼替尼药物处理后,HepG2细胞均发生不同程度DNA损伤;且AP-1、ATM、ATR mRNA表达水平明显升高,而CHK1、CHK2、GSK3β mRNA表达水平明显降低;不同处理组间DNA损伤修复相关信号分子mRNA表达有显著差异（F=61.242,P=0.000）。NF-κB转录活性抑制剂JSH-23可降低HepG2细胞NKG2DLs蛋白表达量,而NF-κB转录活性激动剂TNF-α、PMA均可增加HepG2细胞NKG2DLs蛋白表达量（F=15.043,P=0000）;舒尼替尼处理肿瘤细胞后NF-κB的抑制分子IKKα被抑制,而激活分子IκBα被激活。结论： 舒尼替尼可通过DNA损伤修复分子激活NF-κB旁路途径诱导肿瘤细胞表达NKG2DLs。     

钙敏感受体对人单核巨噬细胞株THP-1细胞因子分泌功能的影响

目的 探讨钙敏感受体(Calcium sensing receptor,CaSR)对THP-1源性巨噬细胞分泌细胞因子能力的影响。方法 首先将人单核细胞株THP-1用佛波脂(PMA,100 nmol/L)诱导,使之转化为具有贴壁能力的巨噬细胞株THP-1(以下简称THP-1)。用CaSR特异激动剂氯化钆(GdCl₃,1 mmol/L)处理细胞后,用ELISA法检测CaSR的激活对THP-1分泌细胞因子IL-1β、TNFα的影响,并利用Western Blotting方法检测NF-κB信号通路中p65、p50和IκBα蛋白的表达变化。结果 (1)用GdCl₃处理后,THP-1细胞上清液中IL-1β、TNF-α的含量明显升高,但该作用可被CaSR特异抑制剂NPS2390(10 μmol/L)抑制;(2)在Gd³⁺作用组,THP-1细胞中NF-κB-p65表达明显上调,同时伴有IκBα的减少;在NPS2390预处理组,Gd³⁺所引起的NF-κB-p65和IκBα变化被抑制;各组NF-κB-p50变化不明显。结论 CaSR的激活可能通过激活NF-κB信号通路促进THP-1源性巨噬细胞株分泌细胞因子IL-1β、TNF-α,提示CaSR可能参与涉及单核巨噬细胞激活的各种疾病。     

姜黄素与p65siRNA促进食管鳞癌细胞凋亡的比较研究

背景与目的:活化的核转录因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路在多种肿瘤的发生、发展中起着重要的作用,参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关基因的表达.目前其在食管鳞癌中的作用尚不清楚.本研究旨在探讨p65siRNA和姜黄素能否通过阻断NF-κB信号通路,促进食...     

M2型TAMs激活NF-κB通路促进结肠癌细胞侵袭转移的实验研究

目的:观察M2型肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)对结肠癌LoVo细胞侵袭转移的影响,探讨其可能的作用机制。方法:建立M2型TAMs与LoVo细胞共培养体系。采用流式细胞术检测M2型TAMs生物标记分子CD163、CD206的表达情况以明确M2型TAMs诱导成功,细胞划痕实验检测M2型TAMs对细胞迁移能力的影响,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液IL-10、TGF-β1的浓度,蛋白印迹法(Western Blot）检测NF-κB通路及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达水平,免疫荧光技术检测NF-κB p65及E-cadherin入核情况。结果:流式细胞术检测结果显示,诱导后的TAMs高表达CD163、CD206;划痕实验结果显示,随着M2型TAMs浓度增加,LoVo细胞迁移能力增强(P<0.05);酶联免疫吸附测定结果显示,随着M2型TAMs浓度增加,细胞上清液中IL-10、TGF-β1的浓度增加(P<0.05);Western Blot结果表明,M2型TAMs可以明显上调IKKα、IKKβ蛋白表达(P<0.05),抑制IκBα蛋白表达(P<0.05),促进EMT相关蛋白N-cadherin、Vimentin及ZEB1的表达,抑制E-cadherin的表达(P<0.05);免疫荧光结果显示,随着M2型TAMs浓度增加,NF-κB p65入核增多,E-cadherin入核减少。结论:M2型TAMs可以激活NF-κB通路,进而介导EMT发生。     

姜黄素抗食管癌的机制

姜黄素可通过诱导细胞周期阻滞、阻断Notch信号通路来抑制食管癌细胞增殖,通过抑制核转录因子-κB(NF-κB)信号通路、抑制食管癌血管生成、抑制基质金属蛋白酶(MMP)来抑制食管癌细胞侵袭,通过核磷蛋白的表达与定位变化来调控食管癌细胞凋亡从而发挥抗食管癌作用.     

乳腺癌中核转录因子-κB p50表达及其与细胞凋亡的关系

 目的 研究核转录因子-κB p50 （NF-κB p50）在乳腺癌组织中的表达和意义及其与细胞凋亡的关系。方法 应用Elivision免疫组化染色法和脱氧脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）技术，对65例乳腺癌组织中NF-κB p50、凋亡细胞表达进行原位观察和比较,并结合临床资料进行分析。结果 65例乳腺癌标本NF-κB p50表达阳性率为70.8 %（46／65），细胞凋亡指数（AI）为（4.59±1.94）%； NF-κB p50表达强度与患者的肿瘤的大小、组织分级、孕激素受体（PR）无关（P＞0.05）；与腋淋巴结转移数、雌激素受体（ER）状况明显相关（P＜0.05）。NF-κB p50表达阴性的乳腺癌中AI明显高于NF-κB p50 表达阳性组（P＜0.05）。NF-κB p50活性强度与AI呈明显的负相关（P＜0.001）。结论 NF-κB p50的异常激活在早期乳腺癌的发生和转化中起重要作用，其抑制凋亡活性与肿瘤侵袭转移及恶性潜能密切相关，对NF-κB p50活性及细胞凋亡的检测有助于乳腺癌的临床分析，并有望成为预后的观察指标。     

姜黄素增强人乳头瘤状甲状腺癌细胞TPC-1放射敏感性的研究

目的 研究姜黄素对人乳头瘤状甲状腺癌细胞TCP-1放射敏感性的影响,并探索姜黄素可能作用的信号通路,为甲状腺癌放射增敏剂的开发提供新的思路。方法 使用姜黄素和放射性碘处理人乳头瘤状甲状腺癌细胞TPC-1,CCK-8法检测细胞增殖,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,western blot检测p50、p65、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达变化。使用NF-κB信号通路抑制剂PDTC抑制NF-κB信号通路活性,检测细胞增殖、克隆形成和凋亡变化。结果 姜黄素和放射性碘处理人乳头瘤状甲状腺癌细胞TPC-1后,细胞增殖率下降,克隆形成减少,凋亡上升,凋亡抑制蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax表达上调,并呈浓度依赖性。这些结果表明姜黄素可增加TPC-1细胞的放射敏感性。碘放射后TPC-1细胞NF-κB通路活化,姜黄素可以抑制碘放射后TPC-1细胞NF-κB通路的激活。使用抑制剂抑制NF-κB通路的活性,细胞增殖下降,克隆形成减少,凋亡上升,放射敏感性升高。结论 姜黄素可能靶向NF-κB信号通路,通过抑制NF-κB信号通路活性调节甲状腺癌细胞的放射敏感性。     

核因子κB在胰腺癌中的表达及与VEGF和p53表达的相关性

目的探讨核因子κB(NF-κB,p65)在胰腺癌组织中的表达及其与VEGF、p53蛋白表达的相互关系。方法电泳迁移率变动分析(EMSA)测定45例胰腺癌及癌旁组织、8例慢性胰腺炎和9例正常胰腺组织中NF-κB的活性,Western印迹法检测NF-κB、IκB-a蛋白表达;免疫组织化学法检测胰腺癌中VEGF、p53、p65蛋白表达。结果NF-κB在肿瘤组织中被激活;NF-κB在胰腺癌、旁组织、慢性胰腺炎、正常胰腺组织中阳性表达率分别为71.0%、20.0%、12.5%、0(P<0.05);NF-κB基因表达与胰腺癌的分化程度、临床分期、肿瘤大小无关(P>0.05),与淋巴结转移和周围浸润有相关性(P<0.05);转移癌中NF-κB蛋白表达与VEGF、p53蛋白表达显著相关。结论核因子κB基因在胰腺癌中过度表达并与VEGF、p53一起参与胰腺癌的浸润、转移过程。     

TGF-β1上调LSD1表达激活ERK/NF-κB p65通路促进胃癌增殖的实验研究

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)上调赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)表达激活下游细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)/核因子κBp65(NF-κB p65)信号通路促进胃癌细胞增殖的作用机制。方法利用外源性人重组TGF-β1作用于人胃癌细胞系MGC-803、SGC-7901、AGS和正常胃黏膜细胞系GES-1。MTT法检测各组细胞增殖活性。Western blotting法检测LSD1蛋白表达。将MGC-803细胞分为5组:空白对照组、TGF-β1组、TGF-β1+TCP(LDS1抑制剂)组、TGF-β1+SIS3(SMAD3抑制剂)组、TGF-β1+SCH772984(ERK1/2抑制剂)组。Western blotting法检测p-SMAD2、p-SMAD3、p-ERK1/2、p-p65蛋白和核p65蛋白表达。采用免疫荧光染色法检测p65在细胞核中的定位。结果TGF-β1可促进MGC-803、SGC-7901、AGS细胞的增殖活性,且上调LSD1蛋白表达,呈浓度和时间依赖性。与TGF-β1组比较,TGF-β1+TCP组MGC-803细胞LSD1蛋白表达下调,增殖抑制率降低(P<0.05)。与空白对照组比较,TGF-β1组MGC-803细胞LSD1、p-SMAD2、p-SMAD3、p-ERK1/2、p-p65和核蛋白p65蛋白表达量升高(P<0.05)。与TGF-β1组比较,TGF-β1+SIS3组LSD1蛋白表达无差异(P>0.05),TGF-β1+SCH772984组LSD1蛋白表达明显降低(P<0.05),p65蛋白核定位量也减少。结论LSD1在TGF-β1促进胃癌细胞增殖中发挥着重要作用,可能与TGF-β1上调LSD1表达与激活下游ERK/NF-κB p65信号通路,促进p65核转移有关。     

医学简讯

有研究报道小白菊内酯（parthenolide）具有抗肿瘤作用。药理研究表明，小白菊内酯是转录因子NF-κB的有效抑制剂，通过阻断IκB-α和IκB-β的降解，抑制NF-κB的正常活化，特异抑制IκB激酶复合物中的β-IκB亚基。此外，小白菊内酯还抑制DNA与转录因子NF-κB和STAT的结合，其抗肿瘤效应与激活氨基末端激酶（JNK）、减少有丝分裂原激活蛋白（mitogen-activated protein，MAP）激酶活性、增加活性氧（reactive oxygen species，ROS）等有关。