上呼吸道良性病变的P_(53)蛋白表达

P53基因是一个肿瘤抑制基因。在多种肿瘤的发生过程中都有P53基因的丢失或突变，但在正常上皮和良性病变中有关P53基因的研究极少。该研究以109例喉良性病变为研究对象。其中，喉乳头状瘤52例（16例青少年型，36例成年型），声带小结和喉息肉各10例，内翻性乳头状瘤17例和鼻息肉20例。取患者的石蜡包埋的组织块为对象，以单克隆抗体DO-1进行免疫组化染色。结果显示P53蛋白在细胞核中的阳性率分别是：青少年喉乳头状瘤88％（14／16）；成年人喉乳头状瘤92％（33／36）；声带小结40／（4／10）；喉息肉80％（8／10）；内翻性乳头状瘤41％（…     

儿童喉乳头状瘤细胞的原代培养及生物学特性研究

目的 探讨人乳头状瘤病毒（human papilloma virus,HPV)感染阳性患儿喉乳头状瘤细胞在体外培养的生物学特性。方法 2000年3月－2001年4月采用组织块培养法培养10例12例次喉乳头状瘤患儿手术的标本－HPV感染阳性患儿喉乳头状瘤细胞，观察其生长情况，计数法绘制细胞生长曲线，运用共同引物聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR)法及核酸分子斑点杂交方法对喉乳头状瘤细胞在培养前后的HPV DNA进行检测。结果 HPV感染阳性的喉乳头状瘤细胞在体外生长时间可长达6周，培养前后细胞内均含有HPV的DNA。细胞生长分为3期，延缓期、生长期及停滞期。培养前1－4d细胞从组织块中大量游出，5－7d为延缓期，此期间细胞渐渐开始贴壁，8－18d为生长期，细胞数目迅速增多，生长速度很快，继而进入停滞期，细胞数目增长缓慢，细胞空泡化明显，渐渐走向死亡。结论 HPV感染阳性的喉乳头状瘤细胞在体外生长情况良好，但要建立HPV感染阳性的喉乳头状瘤细胞的动物模型尚需进一步研究。     

微小RNA-489调控脑源性神经营养因子在甲状腺乳头状癌中的作用机制研究

目的　分析微小RNA（microRNA，miR）-489在甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）发生发展过程的影响，并探讨其在甲状腺乳头状癌临床诊断的价值。方法　采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测甲状腺乳头状癌组织中脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）及miR-489的表达变化；TargetScan和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-489可靶调控BDNF；CCK-8、Transwell迁移侵袭实验等探究miR-489和BDNF对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1的影响；构建裸鼠植瘤模型探究miR-489在体内实验中对甲状腺乳头状癌的影响。结果　miR-489在甲状腺乳头状癌组织及转移的肿瘤组织中的表达降低（P＜0.01）；BDNF是miR-489的靶基因；过表达BDNF能逆转miR-489对TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用（P＜0.05)；miR-489可抑制裸鼠肿瘤的生长（P＜0.01）。结论　miR-489通过抑制靶基因BDNF的表达在甲状腺乳头状癌中扮演抑癌基因的角色。     

成人呼吸道乳头状瘤:乳头状瘤病毒类型及合并病毒感染与预后的关系

为确定乳头状瘤病毒（HPV）类型和（或）合并其它病毒感染，如巨细胞病毒（CMV）、单纯癌疹病毒（HSV）、EB病毒（EBV），是否能预测呼吸道乳头状瘤临床经过，对1980～1993年间29例已确诊为复发性呼吸道乳头状瘤（RRP）成年患者行回顾性分析，内容包括性别、目前年龄、开始发病时年龄、肿瘤复发次数、累及部位、治疗方式、烟酒史。临床经过可分为侵袭性和无危险性，侵袭性特点：肿瘤反复复发、扩散到气管支气管、青春期后病情进一步发展、上皮非典型化、发展为鳞状细胞癌（SCCA）；无危险性特点：病变仅限于喉，很少或不复发，发病…     

Survivin在喉鳞状细胞癌、喉乳头状瘤及喉黏膜白斑中的表达及意义

目的 探讨Survivin蛋白在喉鳞状细胞癌、喉乳头状瘤及喉黏膜白斑中的表达及其意义。方法 应用免疫组化对46例喉鳞状细胞癌、24例癌旁组织、20例喉乳头状瘤、28例喉黏膜白斑和16例正常喉黏膜中Survivin的表达情况进行检测。结果 Survivin蛋白在喉癌组织和癌旁组织、喉黏膜白斑及喉乳头状瘤中的阳性表达率分别为71．74％（33／46）、33．33％（8／24）、46．43％（13／28）；40％（8／20），在正常黏膜组织中无表达。喉癌组中的阳性表达率显著高于癌旁组织、喉黏膜白斑、喉乳头状瘤及正常黏膜组织中的表达率。且喉乳头状瘤组及喉黏膜白斑组中发生恶变的组织中Survivin蛋白均为阳性表达。Survivin蛋白的阳性表达与喉癌的发生部位、分级、分期、淋巴结转移以及病理分级无关。结论 Survivin在喉癌组织中过度表达参与了喉癌的形成，对喉癌的癌前病变发展成恶性肿瘤的潜在可能性有预测作用。     

喉乳头状瘤53例报告

喉乳头状瘤（Laryngeal papilloma，LP）是发生在喉部的非浸润性良性上皮肿瘤，可发生于任何年龄，病因尚不十分清楚，复发率较高，有恶变倾向。本文对1993年1月-2003年1月收治的53例喉乳头状瘤进行临床分析，现报道如下。     

喉癌患者肿瘤浸润淋巴细胞抗肿瘤活性的研究

采用双梯度不连续密度梯度离心的方法，由喉鳞状细胞癌组织中分离出肿瘤浸润性淋巴细胞（ｔｕｍｏｒｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ，ＴＩＬ），经重组人类白细胞介素－２（ｒｅｔｕｒｎｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２，ｒＩＬ－２）激活，成为活化的ＴＩＬ细胞。采用￣５１Ｃｒ体外释放的方法，检查活化的ＴＩＬ细胞对自体肿瘤细胞、异体肿瘤细胞的杀伤特性；并观察了ＴＩＬ细胞在裸鼠体内对自体肿瘤细胞生长的抑制作用。结果发现活化的ＴＩＬ细胞对自体肿瘤细胞有较强的杀伤作用，但对异体肿瘤细胞的杀伤作用则较弱。实验还证明，在裸鼠体内，ＴＩＬ细胞能抑制自体肿瘤移植瘤系的生长。由新鲜喉鳞癌肿瘤组织中可成功地分离出ＴＩＬ细胞并可大量增殖，可望成为喉癌患者过继免疫治疗的有效来源。     

内淋巴囊乳头状癌和脉络丛乳头状瘤对TTR的不同表达

发生于颞骨的侵入性乳头状瘤临床较少见，近来已被证实肿瘤起源于内淋巴囊上皮或内淋巴管上皮，但也有人认为部分肿瘤起源于脉络丛或异位的脉络丛上皮，然而这两种肿瘤在光镜下形态学表现几乎完全相同。有关的文献报告，TTR（transthyretin）可以作为脉络丛上皮的标志，但又缺乏内淋巴囊乳头状瘤免疫组化研究的资料。为进一步区别这两种起源的乳头状瘤，对正常脉络丛上皮标本10例、脉络丛乳头状瘤5例和正常内淋巴囊上皮标本4例、内淋巴囊乳头状瘤4例进行免疫组化研究，使用TTR、CTK（cytokeratin）、S－100蛋白EMA（epithelialmembran…     

喉癌前病变恶变机理的探讨

选自北京同仁医院耳鼻咽喉科1992年5月～1994年6月收集的标本61例，其中喉癌前病变标本34例，利用免疫组化（P(53)、PCNA）及原位杂交技术，重点对不同病变阶段的10例慢性肥厚性喉炎、13例喉角化症和11例喉乳头状瘤（成人）进行检测，并与16例喉单纯息肉和11例喉原位癌标本进行了比较。分析了各种检测的阳性表达率在病变发展过程中的变化规律，对喉癌前病变的转归进行评估和预测。喉单纯息肉、喉癌前病变和原位癌三种病变中，P(53)蛋白的表达率分别是0％，35．29％和63.64％；PCNA指数分别是6．32％、26．16％和62．02％。在喉癌前病变和原位癌中，HPV(16.18)的阳性表达率分别是32．40％和63．63％。在癌前病变中重度非典型增生与轻、中度非典型增生P(53)和PCNA的阳性表达率有明显的差异（P＜0.05）。     

喉癌DNA倍体分析的临床意义

本文应用图像分析技术，研究３８例喉鳞癌和２９例喉部良性病变组织中，细胞ＤＮＡ倍体分布状况，分析了其临床意义，结果显示；（１）喉癌组２Ｃ细胞比良性病变组织明业减少，而３Ｃ－４Ｃ细胞，５Ｃ及５Ｃ以上，（以下简称ＤＮＡ５Ｃ－）细胞比后者明显增加，表明喉癌组织中细胞有较强的增殖活性；（２）以ＤＮＡ３Ｃ及３Ｃ以上（以下简称ＤＮＡ３Ｃ－）细胞百分率为指标，在喉癌的诊断和鉴别诊断中有较好的诊断性能，以ＤＮＡ３Ｃ     

儿童喉乳头状瘤与人乳头状瘤病毒的相关性及其免疫综合治疗

对2002～2005年收治的60例儿童喉乳头状瘤（JLP）的病变组织进行人乳头状瘤病毒（HPV）分型及体液、细胞免疫检测，并对其临床资料进行回顾性分析，以探讨JLP患儿HPV感染类型、途径及细胞、体液免疫水平，提高对其临床特点的认识，探讨有效的治疗方法。     

鼻窦癌P_(53)基因突变与人类乳头状瘤病毒感染

鼻塞内翻性乳头状瘤（IP）与鳞状细胞癌合并存在的比率＞9％，其中70％以上两种病变处于同一瘤体，其余为在原来切除IP部位继发鳞癌。两种肿瘤的病因均不清楚，有研究表明人类乳头状瘤病毒（HPV）感染是鼻窦IP和鳞癌发生的主要危险因素之一，P53抑瘤基因突变在癌的发生过程中起重要作用。该文检测24例鼻窦IP和鳞癌中巴。突变和HPV感染的发生率及P53突变和HPV感染的相关性。24例肿瘤标本分为以下四类：无非典型增生的良性IP7例，IP伴非典型增生8例，IP合并鳞癌4例，不合并IP的鳞癌5例。每一标本分别行免疫组化测定P53蛋白表达、P…     

喉鳞状细胞癌和喉乳头状瘤中Survivin表达的意义

目的：探讨Survivin蛋白在喉鳞状细胞癌和成人喉乳头状瘤中的表达及其意义。方法：应用免疫组化方法对46例喉鳞状细胞癌、24例癌旁组织和20例喉乳头状瘤以及16例正常喉粘膜标本中Survivin的表达进行检测。结果：Survivin蛋白在喉癌组织、癌旁组织和喉乳头状瘤中的阳性表达率分别为71.74%（33/46）、33.33%（8/24）和40.0%（8/20）,在正常黏膜组织中没有表达,喉癌组中的阳性表达率分别显著高于正常组织、癌旁组织及喉乳头状瘤中的表达率（均P〈0.01）。且发生恶变的喉乳头状瘤Survivin蛋白均为阳性表达。但Sur-vivin阳性表达与喉癌的发生部位、分级、分期、淋巴结转移以及病理分级没有关联。结论：Survivin在喉癌组织中过度表达,参与了喉癌的形成,是喉癌形成的一个早期事件,可望成为预测成人喉乳头状瘤恶变的一个诊断方法。     

PCR技术在耳鼻喉科的应用

PCR检测鼻咽癌组织中的EBV。全部未分化癌为阳性结果；PCR检测人乳头状瘤病毒，发现鼻内翻乳头状瘤、鳞状细胞癌及喉乳头状瘤、喉癌中均有不同程度的人乳头状瘤病毒感染。PCR是具有高特异性、高效率、高灵敏度的快体外扩增DNA的方法，并能用于常规处理（福尔马林固定、石蜡包埋）的小组织标本，这对大规模、回顾性研究提供了方法。     

淋巴管内皮透明质酸受体-1标记的喉鳞状细胞癌组织淋巴管密度测定及其临床意义

目的：探讨喉鳞状细胞癌组织中微淋巴管密度、位置及增殖情况与喉癌生物学行为和临床病理因素的关系。方法：利用LSAB免疫组化三步法研究淋巴管内皮特异性标记物淋巴管内皮透明质酸受体-1（LYVE-1）在喉鳞状细胞癌组织中的表达，光镜和图像分析观察微淋巴管密度并对淋巴管进行定位；EnVision免疫组化二步法研究Ki67在LYVE-1（＋）管腔的表达，评价淋巴管增殖情况。结果：①颈淋巴结转移组瘤巢内LYVE-1（＋）管腔密度高于非转移组，差异有统计学意义（P〈0．01）；T1组瘤巢内LYVE-1（＋）管腔密度低于T2、T3、T4组，差异具有统计学意义（均P〈0．01），T2组瘤巢内LYVE-1（＋）管腔密度低于T3、T4组，差异有统计学意义（均P〈0．05），T3组与T4组瘤巢内LYVE-1（＋）管腔密度相比差异无统计学意义（P=0．582）；瘤巢内LYVE-1（＋）管腔密度在声门型组与声门上型组、鳞癌Ⅰ级组与鳞癌Ⅱ级组之间差异无统计学意义（均P〉0．05）。②颈淋巴结转移组瘤巢周LYVE-1（＋）管腔密度高于非转移组，差异无统计学意义（P〉0．05）。⑧瘤巢内LYVE-1（＋）管腔存在Ki67核棕黄色着色，瘤巢周LYVE-1（＋）管腔未见这一现象。结论：喉鳞状细胞癌组织LYVE-1标记的瘤巢内淋巴管密度与肿瘤浸润、淋巴结转移正相关；喉鳞状细胞癌肿瘤淋巴管生成主要在瘤巢内，瘤巢内淋巴管在肿瘤的浸润、转移过程中发挥更为重要的作用。     

人乳头状瘤病毒与喉癌,喉内翻性乳头状瘤发病的关系

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）抗原，并在透射电镜下查找ＨＰＶ颗粒，在１３例喉内翻性乳头状瘤的标本中，有７例找到ＨＰＶ颗粒，８例ＨＰＶ抗原阳性；其中３例喉内翻性乳头瘤恶变的标本中２例找到ＨＰＶ颗粒且抗原阳性，证明喉内翻性乳头状瘤发病及其癌变与ＨＰＶ密切相关。     

喉癌中凋亡抑制基因Livin的表达

目的探讨凋亡抑制基因Livin在喉癌组织中的表达及其与喉癌临床病理的相关性。方法采用免疫组织化学染色方法检测了50例喉癌组织,45例癌旁组织,10例喉乳头状瘤及16例声带息肉中Livin蛋白的表达情况。RT-PCR方法检测41喉癌组织,41例癌旁组织和11声带息肉组织中Livin mRNA的表达情况。结果 RT-PCR检测结果显示Livin mRNA在喉癌组织中相对表达量明显高于癌旁组织及声带息肉组织（P〈0.01）。免疫组织化学检测结果显示Livin蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织、喉乳头状瘤及声带息肉（P〈0.05）。Livin蛋白表达与肿瘤的病理分级有关（P〈0.05）,而与患者年龄、肿瘤部位、临床分期、淋巴结转移无关（P〉0.05）。结论 Livin在喉癌组织中异常高表达,提示在喉癌的发生、发展中可能起重要作用。     

成人喉乳头状瘤复发的相关因素研究

目的 :研究成人喉乳头状瘤复发的相关因素。方法 :收集成人喉乳头状瘤复发标本 5 0例 ,另选 10例炎症病变黏膜组织作为对照。应用SP法检测石蜡标本中耐药基因胎盘型谷胱甘肽 S 转移酶 (GST π)、DNA拓朴酶Ⅱ (TopoⅡ )、P 糖蛋白 (Pgp)和Ki 6 7、血管内皮生长因子 (VEGF)的表达 ,并用形态计量方法检测肿瘤内微血管密度 (MVD) ,对所得的各项指标进行统计学分析。结果 :①耐药基因Pgp、GST π和TopoⅡ的表达与年龄、性别、肿瘤大小及肿瘤复发无显著相关 (P >0 .0 5 )。②Ki 6 7在复发肿瘤与非复发肿瘤组织之间差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。多元回归分析显示该指标是肿瘤复发的独立危险因素之一 ,以 39%为分界点 ,大于 39%者容易复发。③MVD >19(× 2 0 0 )的成人喉乳头状瘤比 <19的成人喉乳头状瘤容易复发。结论 :用Cox 逐步回归模型进行多因素分析 ,筛选出了与成人喉乳头状瘤复发有密切关系的 5个指标 :Ki 6 7阳性率是最重要的复发因子 ,其次为MVD ,而肿瘤耐药因子Pgp、TopoⅡ、GST π无明显意义。     

喉乳头状瘤治疗的长期临床观察

1968年3月～1991年3月，用4种不同方法治疗喉乳头状瘤86例，包括内窥镜下切除喉乳头状瘤58例，激光治疗14例，喉裂开术10例，免疫治疗4例。随访5年以上，68例无复发，18例复发，其中7例恶变。远期治愈率79．1／（68／86），复发率20．9％（（18／86），恶变率8．1％（7／86）。认为本病有复发及恶变倾向。治疗应以内窥镜下彻底切除肿瘤和激光治疗为首选，病变范围广泛者应行喉裂开术，免疫治疗也可选择。     

外泌体介导的miR-577在幼儿复发性喉乳头状瘤中的表达及其对细胞增殖和侵袭的影响

目的 探讨miR-577在幼儿复发性喉乳头状瘤中的表达及其对细胞增殖、侵袭的影响和潜在分子机制.方法 收集2016年6月至2019年12月确诊的30例幼儿喉乳头状瘤组织样本及其相匹配且远离病灶经病理检查证实的正常喉组织样本,并选取人正常喉上皮细胞株和喉乳头状瘤细胞(分为miR-577过表达组、阴性对照组及空白对照组)进...