嵌合人源CTLA4抗体的重组流感病毒选择性杀伤肝癌细胞的研究

目的 拯救嵌合人源免疫检查点细胞毒性T淋巴细胞（huCTLA4）抗体的重组流感病毒株,对其选择性杀伤肝癌细胞的效果进行全面鉴定并评价。方法 通过反向遗传学（reverse genetics,RG）技术,以A/PuertoRico/8/34(PR8)为载体,将编码人源CTLA4(huCTLA4)抗体重链和轻链的基因分别插入到PR8病毒的PB1和PA基因片段,构建重组质粒pFlu-huCTLA4-PB1、p Flu-huCTLA4-PA,与PR8病毒的剩余6个骨架质粒p HW191-PB2、pHW194-HA、pHW195-NP、pHW196-NA、pHW197-M、pHW198-NS共转染COSⅠ和MDCK细胞,经病毒拯救、筛选、鉴定获得重组溶瘤病毒,命名为r Flu-huCTLA4。进一步通过血凝、TCID50测定重组流感病毒滴度;电镜观察病毒形态及大小分布;ELISA法测定huCTLA4抗体含量;结晶紫、MTS方法测定重组病毒对肝癌细胞的选择性杀伤效果;流式细胞术检测重组病毒诱导肝癌细胞死亡方式。利用人源肿瘤异种移植模型肝癌小鼠模型,评价rFlu-huCTLA4在动物体内抗肿瘤作用。...     

武装GV1001的重组溶瘤流感病毒构建及抗肿瘤作用研究北大核心CSCD

目的拯救嵌合GV1001的重组溶瘤流感病毒株,并通过体内外实验全面评价其选择性杀伤肝癌的效果。方法将编码GV1001肽的碱基序列串联重复3次序列优化设计后插入到A/PuertoRico/8/34(PR8)病毒的NA片段。采用反向遗传学技术,重组质粒pOV-GV1001-NA与pHW191-PB2、pHW192-PB1、pHW193-PA、pHW194-HA、pHW195-NP、pHW197-M、pHW198-NS PR87个质粒共同转染COS 1/MDCK细胞,拯救得到重组溶瘤病毒rOV-GV1001-NA。经过血凝实验、TCID_(50)、PCR、透射电镜、细胞免疫荧光等鉴定,流式细胞术检测rOV-GV1001-NA诱导肝癌细胞死亡的方式,进一步通过肝癌H22细胞小鼠皮下荷瘤模型评价rOV-GV1001-NA体内溶瘤效果。结果重组溶瘤病毒rOV-GV1001-NA血凝效价为2^(9),病毒滴度达5 LogTCID_(50)/ml,并可在SPF鸡胚中稳定传代;电镜观察形态大小符合流感病毒特点;细胞免疫荧光证明GV1001成功插入并表达;细胞凋亡实验表明rOV-GV1001-NA可选择性诱导肝癌细胞凋亡;肝癌小鼠皮下荷瘤模型证实rOV-GV1001-NA可显著抑制肿瘤生长,延长小鼠生存期,且具有剂量依赖性。结论利用反向遗传学技术成功构建了武装GV1001的重组溶瘤流感病毒,体内外实验表明rOV-GV1001-NA能够靶向杀伤肝癌细胞而对正常细胞无明显影响,该结果将为肿瘤疫苗研究提供新思路,有望为肝癌临床治疗开辟新途径。     

溶瘤流感病毒联合PD-1抗体增强对肝癌的抗肿瘤活性研究北大核心CSCD

目的探讨重组溶瘤流感病毒联合免疫检查点抑制剂PD-1抗体治疗肝癌的效果。方法全面鉴定重组溶瘤流感病毒delNS1-GM-CSF,通过血凝实验、TCID50测定重组溶瘤流感病毒滴度;电镜观察病毒形态和病毒粒子大小及分布;利用H22肝癌荷瘤Balb/c小鼠模型,研究delNS1-GM-CSF联合PD-1抗体对肿瘤杀伤和T细胞浸润的影响。结果重组溶瘤流感病毒delNS1-GM-CSF的血凝效价2^(8)~2^(9)。肝癌荷瘤Balb/c小鼠模型表明,重组溶瘤流感病毒delNS1-GM-CSF联合PD-1治疗组抑制肿瘤生长的能力显著强于单病毒组或单抗体组(P<0.01)。重组溶瘤流感病毒delNS1-GM-CSF和PD-1联合治疗组具有较强的杀伤肿瘤效果(P<0.01)。免疫组化和H&E染色结果表明,联合治疗组小鼠肿瘤中T淋巴细胞较丰富,肿瘤坏死严重。结论重组溶瘤流感病毒delNS1-GM-CSF联合PD-1抗体治疗可显著抑制肝癌细胞生长,增强体内抗肿瘤免疫应答。     

表达PD1抗体的重组溶瘤流感病毒株的构建及效果评价

目的 拯救表达免疫检查点PD1抗体的重组流感病毒株,并评价其体内外靶向杀伤肝癌的效果.方法 利用反向遗传学技术,选择流感病毒株A/PuertoRico/8/34(PR8)为载体,将免疫检查点抑制剂PD1抗体的重链和轻链分别插入到PR8病毒株PB1、PA基因片段构建重组质粒pFlu-PD1-PB1、pFlu-PD 1-P...     

流感病毒为载体重组病毒株rHCV/FLU的构建及初步评价

目的构建及拯救以流感病毒为载体嵌合HCV抗原表位的重组病毒株r HCV/FLU并对其进行评价。方法利用反向遗传学技术,选择流感病毒A/Puerto Rico/8/34(PR8)为载体,将HCV 1b亚型的E1抗原基因经序列优化插入到PR8流感病毒NS1片段的特定位置,构建重组质粒p NS1-HCV,测序正确的重组质粒p NS1-HCV与PR8的7个重组质粒p HW191-PB2、p HW192-PB1、p HW193-PA、p HW194-HA、p HW195-NP、p HW196-NA、p HW197-M转染共培养的COS-1和MDCK细胞,经拯救、筛选、鉴定获得流感病毒为载体嵌合HCV抗原表位的重组病毒株,命名为r HCV/FLU,并通过血凝试验、RT-PCR、Western blot、电镜观察病毒形态等方法对重组病毒鉴定。接着,重组病毒接种SPF鸡胚扩大培养、超滤浓缩、蔗糖密度梯度离心纯化。纯化获得的重组病毒抗原,滴鼻免疫Balb/c小鼠,0 d、14 d免疫2次,设置104TCID50、105TCID50、106TCID503个剂量组,初步评价其免疫效果。结果成功拯救重组病毒株r HCV/FLU,血凝效价(HA)为29-10,病毒滴度Log10(TCID50/ml)为6.5。滴鼻免疫小鼠二免后14 d取小鼠血清及脾淋巴细胞,3个剂量组针对流感病毒的血抑(HI)效价均值分别为80、640和1 280,初步证明重组病毒株r HCV/FLU在小鼠体内能够产生较强体液免疫和细胞免疫应答反应。结论成功制备的重组病毒株r HCV/FLU在动物体内具有较好的免疫效果,为新型HCV疫苗的研制提供新的研究策略。     

小鼠感染流感病毒后可抵抗致死性流感病毒攻击的研究

目的 BALB/c小鼠初次感染流感病毒(A/California/7/2009(H1N1)(pCA07)和A/Guangzhou/333/99(H9N2)(GZ333))后,用流感病毒鼠肺适应株A/PR/8/34(H1N1)(PR8) 10倍致死剂量攻击,观察攻毒后小鼠的反应.方法 BALB/c小鼠150只,分成3组,空白对照组PBS滴鼻,实验组分别感染甲型H1N1流感病毒pCA07和禽源H9N2病毒GZ333；感染56 d后用10倍致死剂量的鼠肺适应株流感病毒PR8攻击两个实验组和对照组小鼠,比较PR8病毒攻击后,病毒载量和抗体水平,以及对小鼠存活率的影响.结果 感染过pCA07和GZ333的小鼠在致死病毒PR8攻击后全部存活,并分别在病毒攻击6d和9d后小鼠肺组织中检测不到攻击病毒.对初次感染病毒的抗体水平在病毒PR8攻击后迅速升高,在保持初次感染病毒抗体的同时能够产生针对PR8病毒的抗体.结论 不同亚型流感病毒感染小鼠后可以提供交叉保护.     

用反向遗传技术产生冷适应致弱的重组A型人流感病毒的研究

目的 以鸡胚高度适应株A/PR/8/34株为重组流感病毒骨架,利用反向遗传技术拯救冷适应致弱的重组A型人流感病毒.方法 对冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60(H2N2)流感病毒株的PB2基因片段,进行了全基因序列合成,同时人工引入PB2265(N265S)氨基酸的突变.PB2基因片段通过与改造后的转录/表达载体pAD3000连接,构建PB2基因的拯救载体.该重组质粒与PR8进行"7 1"组合的病毒拯救,共转染COS-1细胞.结果 经测序获得序列准确的拯救质粒pMDV-A-PB2,利用反向遗传技术成功拯救出了具有血凝性(1×25)的冷适应的重组A型流感病毒.结论 利用反向遗传技术成功拯救冷适应致弱的重组A型人流感病毒,该系统为深入研究甲型人流感病毒的基因功能和新型疫苗研发奠定了基础.     

H5N1流感疫苗株在Vero细胞中的研究[英文]

目的产生在Vero(非洲绿猴肾)细胞中能高适应生长的重配H5N1流感病毒疫苗株,并对其生物学特性进行初步测定。方法修饰A/Puerto Rico/8/34(H1N1)(PR8)的NS基因为Vero细胞适应型,并合成NS基因片段,构建质粒pHW2000-NS;通过RT-PCR方法,扩增疫苗株A/Anhui/01/2005(H5N1)的HA、NA基因片段,构建质粒pHW2000-HA、pHW2000-NA;以PR8的其它5个内部基因作为骨架,按照1+2+5模式8质粒共转染Vero细胞拯救流感病毒,并对拯救病毒的生物学特性进行检测。结果由Vero拯救出具有高适应生长特性的H5N1亚型人禽流感病毒疫苗株,并检测了重配疫苗株的生物学特性。结论成功从Vero细胞拯救了具有Vero细胞高适应性生长特性的H5N1亚型人禽流感病毒疫苗株,为应用Vero细胞大规模生产流感疫苗奠定了基础。     

表达PD1抗体的重组流感病毒株靶向胃癌溶瘤效果的研究

目的 探究表达PD1抗体的重组流感病毒株在体内外靶向杀伤胃癌细胞的效果。方法 使用MTS方法检测重组流感病毒rFlu-aPD1杀伤胃癌细胞的效果;流式细胞术检测重组流感病毒r Flu-aPD1诱导胃癌细胞凋亡的效果。利用小鼠胃癌模型,评价重组流感病毒在体内对胃癌的抑制效果。结果 MTS结果表明,r Flu-aPD1可选择性杀伤胃癌细胞,而对正常胃细胞无明显影响;凋亡实验显示,rFlu-aPD1主要通过激活细胞凋亡途径诱导胃癌细胞死亡。动物实验显示,重组流感病毒rFluaPD1可明显降低胃癌小鼠的肿瘤体积和质量,且肿瘤部位的病毒载量明显高于其他组织。结论 表达PD1抗体的重组流感病毒株rFlu-aPD1,在体内外均可杀伤胃癌细胞,有望为溶瘤病毒靶向治疗胃癌和肿瘤免疫治疗提供新方法。     

嵌合人偏肺病毒(hMPV)表位的重组流感病毒免疫保护效果

目的评价重组嵌合表达人偏肺病毒(hMPV)表位的流感病毒的免疫应答及免疫保护效果。方法用8质粒系统拯救出的在NS基因中嵌合hMPV表位的重组流感病毒免疫BALB/c小鼠,检测其刺激机体产生的针对hMPV和流感病毒的抗体滴度,及脾细胞分泌细胞因子含量。免疫后小鼠用hMPV和流感病毒进行攻击,对攻击后小鼠肺组织和鼻甲骨中病毒含量采用数字PCR方法进行测定,同时对肺组织进行HE染色,评价其对肺部损伤的保护作用。结果重组流感病毒株rFLU/hMPV/B(嵌入了hMPV的B细胞表位)免疫小鼠后,产生了针对hMPV和流感病毒的特异性抗体。rFLU/hMPV/CTL+Th(嵌入了CTL表位/Th细胞表位)免疫小鼠后,产生了针对流感病毒的特异性抗体及hMPV特异的细胞毒性T淋巴细胞反应(IFN-γ分泌增多)。rFLU/hMPV/B和rFLU/hMPV/CTL+Th引起了平衡的Th1/Th2免疫应答。用hMPV和流感病毒攻击重组病毒免疫后小鼠,肺组织病理HE染色结果显示重组病毒免疫后小鼠肺病变明显减轻,肺组织和鼻甲骨中hMPV和流感病毒含量也明显减少。结论重组的2株嵌合有hMPV B细胞表位和CTL表位/Th细胞表位的重组流感病毒株,可刺激机体产生针对hMPV和/或流感病毒体液免疫应答,嵌合有hMPV CTL表位/Th细胞表位的重组流感病毒株还可刺激机体产生hMPV特异性的细胞免疫应答,对hMPV和流感病毒攻击也有一定保护作用,该重组病毒株有潜在疫苗应用价值。     

表达呼吸道合胞病毒G蛋白胞外区的重组H1N1流感病毒单剂滴鼻免疫可在小鼠诱导强免疫应答与保护

目的基于重组流感病毒载体的呼吸道合胞病毒(RSV)疫苗的构建及在小鼠体内的免疫保护效果评价。方法构建并拯救表达RSV A2型G蛋白胞外结构域(Gecto)的重组甲型流感病毒, 将其命名为PR8NAGecto/WSN。体外验证重组病毒G蛋白表达与病毒生长动力学后, 单剂滴鼻免疫BALB/c小鼠, 并评价体液免疫、黏膜免疫与细胞免疫。免疫4周后, 分别用RSV A2与RSV B9320进行攻毒, 通过小鼠体重变化、肺组织病毒滴度及病理评价免疫保护效果。结果单剂滴鼻免疫PR8NAGecto/WSN能在小鼠体内产生较强的体液免疫、黏膜免疫及细胞免疫。与对照组比较, 免疫组小鼠经RSV A2或B9320两个亚型病毒攻毒后肺病毒载量与肺组织病理均明显改善。结论单剂滴鼻免疫重组PR8NAGecto/WSN疫苗可在小鼠体内诱导较强的RSV特异免疫应答与攻毒保护。本研究为新型RSV黏膜疫苗的研发提供新的思路与实验资料。     

分泌anti-PD-L1及IFNα的间充质干细胞联合治疗小鼠黑色素瘤

目的:为了提高免疫检查点阻断治疗的疗效,探讨以间充质干细胞(MSC)为载体,anti-PD-L1和IFNα对小鼠黑色素瘤的联合治疗效果.方法:构建重组质粒并生产慢病毒,利用慢病毒感染MSC细胞并获得MSC-anti-PD-L1-Fc和MSC-IFNα4-Fc两种细胞系.利用CCK-8细胞增殖实验及OT-Ⅰ小鼠T细胞杀伤...     

CTLA4-Ig重组腺相关病毒载体的构建及转染表达效果

重组腺相关病毒 (recombinantadeno associatedvirus,rAAV)载体是目前基因治疗领域中倍受瞩目的载体之一。本研究通过构建CTLA4 Ig基因重组腺相关病毒载体 (rAAV CTLA4 Ig) ,研究其对大鼠转染的表达效果及规律。大肠杆菌Sure 2和 2 93细胞均由武汉同济医院心血管内科研究室提供 ;质粒pUF1 CTLA4 Ig、pXX2和pXX6由美国匹兹堡大学分子生物实验室XiaoX教授提供 ;近交系Lewis大鼠 ,2 0 0～ 2 5 0g,雄性 ,购自中国医学科学院实验动物研究所。仓鼠抗小鼠的CTLA4 Ig购自Pharm ingen公司 ,辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG购自Vec…     

穿孔素介导的细胞凋亡机制在抗流感病毒感染免疫防御中作用的研究

目的：穿孔素介导的细胞凋亡机制在流感病毒初次感染中作用的研究。方法：用流感病毒A／PR／8／34经鼻感染穿孔素基因敲除鼠和同源对照C57BL／6小鼠，采用PFU方法测定肺内流感病毒增殖状况；免疫组织化学染色方法观察小鼠病毒感染后感染细胞的凋亡情况；利用乳酸脱氢酶释放法检测感染鼠脾淋巴细胞NK活性及CTL杀伤活性。结果：穿孔素基因缺乏导致流感病毒在小鼠肺内大量增殖；小鼠清除感染病毒所需时间延长；病毒感染细胞发生凋亡的时间亦因穿孔素的缺乏而延迟；感染小鼠脾淋巴细胞NK活性及CTL杀伤活性均显著降低。结论：穿孔素依赖的细胞介导的细胞毒效应在控制流感病毒初次感染，快速清除感染病毒方面起重要作用。     

1-磷酸鞘氨醇受体2介导PI3K/AKT/eNOS通路抑制甲型流感病毒诱导的病毒性肺炎

目的:探讨1-磷酸鞘氨醇受体2(S1PR2)对甲型流感病毒诱导的病毒性肺炎的作用及机制。方法:采用甲型流感病毒鼠肺适应株FM1滴鼻感染野生C57BL/6小鼠和S1pr2~(-/-)小鼠,建立甲型流感病毒性肺炎动物模型。病毒感染4和6 d时观察比较对照组(模型组的野生小鼠)、JTE-013(S1PR2高效拮抗剂)处理的小鼠及S1pr2~(-/-)小鼠肺组织的病理改变,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的蛋白浓度、细胞总数及细胞因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)]的表达,Western blot法检测小鼠肺组织的AKT和e NOS的磷酸化水平。结果:与模型对照组的野生鼠比较,JTE处理组和S1pr2~(-/-)组甲型流感病毒性肺炎更加严重;BALF中的蛋白浓度,总细胞数及炎性细胞因子表达显著增加;且PI3K下游靶点AKT和e NOS磷酸化显著增高(P0.01)。结论:S1PR2通过介导PI3K/AKT/e NOS信号转导通路,调节NO生成,抑制血管通透性和炎性细胞因子释放,从而减轻甲型流感病毒诱导的病毒性肺炎。     

溶瘤病毒联合PD-1/PD-L1抑制剂的研究进展

溶瘤病毒常以两种方式与程序性死亡受体1/程序性死亡受体-配体1(PD-1/PD-L1)为代表的免疫检查点抑制剂联合使用,一种为PD-1/PD-L1抑制剂联合基因重组修饰以及天然弱毒性的溶瘤病毒,另一种则是携带PD-1/PD-L1抗体基因的基因重组溶瘤病毒.     

重组BCG的抑瘤活性及免疫学机制研究

目的:对重组GM-CSF和EB病毒LMP2A融合基因的BCG(卡介苗)进行抑瘤活性及免疫学机制研究。方法:建立EB病毒阳性肿瘤动物模型,对小鼠成瘤时间、存活情况、肿瘤重量进行分析,检测重组BCG的抑瘤活性;用ELISA方法对重组BCG刺激机体产生的特异性抗体进行检测,乳酸脱氢酶法检测特异性CTL杀伤效应,ELISPOT法检测IFN-γ的分泌水平,流式细胞术、HE染色检测重组BCG免疫小鼠的肿瘤组织中的淋巴细胞浸润情况。用统计学方法对重组BCG免疫效果进行初步分析和评价。结果:肿瘤成瘤时间与其他对照相比明显延迟,肿瘤生长明显缓慢,小鼠生存期延长。ELISA检测结果表明,重组BCG免疫后能产生针对GM-CSF和LMP2A的特异性Ig G抗体,重组BCG免疫组的小鼠能检测到特异性CTL活性,用ELISPOT法检测到免疫小鼠淋巴细胞有IFN-γ分泌;流式细胞术及形态学观察的方法检测到重组BCG免疫的小鼠肿瘤组织中有淋巴细胞的浸润生长。结论:重组BCG诱导C57BL/6小鼠机体产生了体液免疫和细胞免疫反应,重组BCG对EB病毒阳性肿瘤细胞具有明显抑制作用。     

CTLA4.FasL促进异种肝卵圆细胞在大鼠脾脏的定植

背景:CTLA4.FasL可有效抑制同种反应性T淋巴细胞及自身反应性T淋巴细胞,但CTLA4.FasL在异种肝卵圆细胞经脾移植中对异种反应性T淋巴细胞的抑制作用还不明确。目的:研究CTLA4.FasL对异种反应性淋巴细胞增殖的作用,监测CTLA4.FasL修饰的小鼠肝卵圆细胞(CTLA4.FasL-肝卵圆细胞)在大鼠脾脏内的存活与定植。方法:(1)于小鼠肝卵圆细胞悬液中,加入携带CTLA4.FasL融合基因的重组慢病毒载体Lv/CTLA4.FasL和聚凝胺进行感染,以未感染慢病毒的肝卵圆细胞和感染空白慢病毒-肝卵圆细胞为对照;在荧光显微镜下观察肝卵圆细胞的活力和红色荧光蛋白慢病毒载体的表达;(2)对行2/3肝切除的SD大鼠分别经脾移植CTLA4.FasL-肝卵圆细胞、空白慢病毒-肝卵圆细胞、肝卵圆细胞和PBS(不含肝卵圆细胞),分别于肝切除术后1,5,14和21 d,采用ELISA法测定大鼠血清CTLA4.FasL浓度,取受体大鼠脾脏进行CK-19的免疫组化检测;(3)以C57BL/6小鼠淋巴细胞作为刺激细胞,以SD大鼠淋巴细胞作为反应细胞;在混合淋巴细胞反应中,分别接种CTLA4.F...     

腺病毒载体介导的CTLA4-FasL基因转移联合应用供者脾细胞输注促进异基因小鼠皮肤移植耐受

目的:探讨腺病毒介导CTLA4 -FasL基因转移联合应用供者脾细胞输注延长小鼠皮肤移植物存活的作用及其机制。方法:在移植的第0天,C5 7BL 6 (H 2 b,B6 )小鼠经尾静脉注射BALB c(H 2 d)小鼠脾细胞和5×10 9空斑形成单位 毫升(pfu ml)CTLA4 - FasL重组腺病毒(AdCTLA4 - FasL) ,同一天进行皮肤移植,每天观察移植物存活情况。耐受小鼠尾静脉取血,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定CTLA4 FasL融合蛋白的体内表达;于第2 0天对受体小鼠进行迟发型超敏反应、单向混和淋巴细胞反应(MLR)、IL- 2逆转试验、过继转移实验和嵌合体检测等耐受状态的检测,以探讨耐受机制。结果:经尾静脉输注供体脾细胞及AdCTLA4 - FasL的B6小鼠,皮肤移植物的平均存活时间达(42 8±2 6 )天(n =6 ) ,而对照的未处理组,绿色荧光蛋白(EGFP)腺病毒处理组,重组腺病毒AdCTLA4Ig组和AdCTLA4 FasL处理组的平均存活时间为(10 .1±0 . 4 1)天(n =6 )、(10-.5±1.4 )天(n =6 )、(12 . 8±1. 1)天(n =6 )、(2 0 .0±2 .5 )天(n =6 ) ,差异具有显著意义(P <0 .-0 1) ;皮肤移植物长期存活的受体小鼠对供体抗原的低应答可以通过脾细胞被过继转移;DTH反应受到抑制、MLR活性特异性降低,且可以被外源性IL 2部分逆转。结论:供体脾细胞输注和腺病毒介导CTLA4 - F     

表达H1N1 亚型猪流感病毒三聚体HA 重组慢病毒的免疫原性研究

目的:探讨表达猪H1N1亚型流感病毒三聚体HA的重组慢病毒(rLV-HA-GCN4)对BALB/ c 小鼠的免疫保护效果。方法:将雌性BALB/ c 小鼠随机分为重组慢病毒rLV-HA-GCN4 组、重组慢病毒rLV-HA 组、慢病毒LV 空载体对照组及PBS 对照组,先后进行质粒和慢病毒2 次免疫,间隔为2 周,注射部位均为小鼠大腿内侧肌肉;于初次免疫后的第28天,各组小鼠鼻腔滴注50 l 100TCID50 的H1N1 病毒,采用淋巴细胞转化实验、流式细胞术、间接ELISA 和脾肺指数检测各免疫指标。结果:加强免疫后第14 天,rLV-HA-GCN4 组脾淋巴细胞转化率为0.3±0.11,与PBS 组相比,差异有统计学意义(P<0.01),产生以Th1 型CD4+ T 细胞为主的细胞免疫反应;rLV-HA-GCN4 组小鼠IgG 抗体效价可达1;8 000,攻毒后第14 天约为1 :7 000;攻毒后,rLV-HA-GCN4 组脾肺指数小于PBS 组,小鼠体重在前3 d 略有下降,随后逐渐上升,两个指标与PBS 组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:rLV鄄HA鄄GCN4 能够诱导小鼠良好的细胞与体液免疫应答,从而有效地保护小鼠抵御猪H1N1 流感病毒的感染。