石杉碱甲预处理对七氟醚麻醉新生大鼠学习记忆的影响

目的探讨石杉碱甲预处理对七氟醚麻醉新生大鼠学习记忆的影响。方法 7日龄SD大鼠80只,雌雄不拘,体重15~20g,采用随机数字表法分为五组(n=16):对照组(C组)吸入30%的氧气6h,3%七氟醚麻醉2h组(S1组),预处理3%七氟醚麻醉2h组(AS1组),3%七氟醚麻醉6h组(S2组),预处理3%七氟醚麻醉6h组(AS2组),AS1组和AS2组麻醉前30min给予石杉碱甲0.2mg/kg腹腔注射。麻醉结束24h后,每组随机取8只大鼠断头取血,ELISA法检测血清S100β蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)浓度。五组余大鼠14日龄行Morris水迷宫实验。结果与C组比较,AS1组第1~6天逃避潜伏期、平台象限滞留时间、穿越平台次数无明显变化;AS2组第1~6天逃避潜伏期明显延长(P0.05),平台象限滞留时间、穿越平台次数无明显变化;余四组大鼠血清S100β及NSE浓度明显升高(P0.05)。与S1组比较,AS1组第1~6天逃避潜伏期无明显变化,平台象限滞留时间、穿越平台次数明显增加(P0.05),血清S100β和NSE浓度均明显降低(P0.05)。与S2组比较,AS2组第1~6天逃避潜伏期明显缩短、平台象限滞留时间、平台穿越次数明显增加(P0.05),血清S100β和NSE浓度均降低(P0.05)。结论石杉碱甲预处理能有效改善七氟醚麻醉新生大鼠学习记忆,对大脑神经细胞有一定的保护作用。     

趋化因子CX3CL1及其受体CX3CR1在肾脏纤维化中的表达和作用

目的 探讨趋化因子CX3CL1及其受体CX3CR1在慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者和单侧输尿管结扎(unilateral ureter obstruction,UUO)模型小鼠肾脏组织中的表达水平及其与肾脏纤维化的关系.方法 ①用免疫组化方法检测30例首诊CKD患者和10例健康对照组肾脏活检组织中CX3CL1和CX3CR1的表达;②分别用免疫印记和免疫组化方法,分析CKD患者第7、14天单侧输尿管梗阻(unilateral ureter obstruction,UUO)和正常对照组小鼠肾脏组织中CX3CL1和CX3CR1的表达水平;③用免疫荧光检测CX3CR1-/-小鼠与野生型UUO模型小鼠肾脏纤维化和巨噬细胞浸润的程度.结果 发现首诊CKD患者肾脏组织CX3CR1和CX3CL1表达水平明显高于健康对照组(P＜0.05);UUO模型小鼠肾脏CX3CL1和CX3CR1的表达水平较正常对照组明显增高(P＜0.05),且第14天较第7天小鼠肾脏组织CX3CL1和CX3CR1的表达水平也明显增高(P＜0.05);此外,与野生型UUO模型小鼠相比,CX3CR1-/-UUO模型小鼠肾脏组织中α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达和巨噬细胞数量明显减少(P＜0.05).结论 本研究表明,首诊CKD患者和UUO模型小鼠肾脏组织中CX3CL1和CX3CR1表达水平明显增高.肾脏组织中CX3CL1和CX3CR1的过表达可能与肾脏组织纤维化的发生、发展密切相关.     

不同浓度七氟醚对新生大鼠性成熟期空间学习记忆功能的影响

目的 探讨新生7d大鼠接受不同浓度七氟醚麻醉后对其性成熟期(出生后55 d～60 d)空间学习记忆能力的影响. 方法 出生7d龄SD大鼠48只,体重12 g～16 g,雌雄各半,采用随机数字表法分为3组(每组16只):3％七氟醚吸入6h组(A组)、1.5％七氟醚吸入6h组(B组)和空白对照组(C组).新生大鼠接受麻醉后次日(8 d)每组各取8只,采用直接断头法处死,取大脑海马CA1区组织,利用比色法测定乙酰胆碱酯酶(acetylcholine esterase,AchE)及胆碱乙酰转移酶(cholineacetyhransferase,ChAT)的活性.剩余大鼠继续生长至性成熟期(55 d～60 d)时,先利用Morris水迷宫实验测试其空间学习记忆能力,实验结束后再测定大脑海马CA1区AchE及ChAT的活性. 结果 ①8d时:A组及B组AchE活性分别为(0.34±0.07) U/mg和(0.33±0.07)U/mg,均较C组增加(P＜0.01);A组及B组ChAT活性分别为(81±22) U/mg和(96±29) U/mg,均较C组降低(P＜0.01).②性成熟期时:Morris水迷宫实验中,A组和B组平均逃避潜伏期、原平台象限活动时间及穿越原平台次数与C组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);60d时,AchE活性、ChAT活性各组间差异均无统计学意义(P＞0.05). 结论 新生7dSD大鼠接受不同浓度七氟醚麻醉后可短暂性升高大脑海马CA1区AchE活性,降低ChAT活性表达,但不影响其发育至性成熟期时的空间学习记忆能力.     

胃癌组织中CX3CR1的表达研究

目的 探讨CX3CR1在胃癌组织的表达及其意义.方法 收集30例胃癌患者手术切除的癌组织及对应癌旁组织,采用Western blot和免疫组织化学法对CX3CR1在蛋白质水平上进行检测.结果 Western blot和免疫组织化学法显示30例胃癌组织和对应癌旁组织中均存在CX3CR1蛋白的表达,CX3CR1蛋白在胃癌组织中的表达水平高于对应癌旁组织（P＜0.05）;免疫组织化学法显示胃癌组织中CX3CR1蛋白的表达主要位于癌细胞.结论 胃癌组织中CX3CR1的高表达可能与胃癌的发生发展密切相关.     

不同浓度七氟醚可双向调节大鼠学习记忆及海马ARC蛋白表达

背景：术中知晓和术后认知功能障碍是困扰麻醉医师的棘手问题。以往多认为与全身麻醉药物对神经系统的影响有关。但近来不断有实验研究证实．低浓度吸入麻醉气体在特定环境下反而会兴奋大脑功能．甚至产生脑保护的作用。显然全麻药物对大脑认知功能的影响机制仍未明瞭。全身麻醉药物七氟醚已广泛应用于各类临床手术．其对哺乳类动物中枢神经系统是否及如何产生影响是我们一直在探讨的课题。细胞骨架蛋白ARC可在大脑海马结构大量表达．已证实可依据其表达情况来考察神经元的活性．以及突触可塑性的变化。目前认为其表达程度可作为检测学习记忆形成的指标。近来有学者发现，较低浓度的七氟醚可引发中枢神经兴奋现象．并猜测亚麻醉剂量对于中枢神经系统具潜在保护作用。为进一步证实这一现象．本研究拟结合ARC蛋白和抑制性逃避（inhibitory avoidance．IA）这一行为学实验来进行深入探讨。方法：250－300g雄性SD大鼠随机分为3组：空白组，极低浓度七氟醚吸入组（0．11％SEV）和低浓度七氟醚吸入组（0．3％SEV）。依据分组依次将大鼠安置于连接有低流量（0．5L／min）闭合环路吸入麻醉系统的特制容器内，分别给予吸入空气，0．11％SEV（0．05MAC）和0．3％SEV（0．14MAC）各45min。结束后马上进行单次IA训练（0．4mA,2s），24小时后进行IA记忆（潜伏期）检测。另取一批大鼠在IA初次训练后45min处死取材．以western-blotting方法检测脑内海马ARC蛋白的表达水平．以real—timePCR方法检测ARC的mRNA转录水平。结果：与吸入空气组相比。0．11％sEV组的24小时IA记忆潜伏期明显延长，而0．3％SEV组的24小时IA记忆潜伏期缩短：相应地．0．1196SEV组的海马ARC蛋白表达增加．而0．30％SEV组ARC蛋白的表达减少。但ARC的mRNA水平却始终无显著差异。结论：吸入不同浓度的七氟醚能对大鼠的学习记忆能力产生双相作用．这种现象伴有海马蛋白ARC表达的相应改变．却没有相应mRNA水平的改变。提示全麻药物七氟醚对于记忆的双向调节存在即可早期基因如NARC对神经元突触可塑性的作用．但这种干预可能体现在转录后水平。     

比较七氟醚、异氟醚和安氟醚对颅内压的影响

目的：为了观察七氟醚对颅内压的影响。方法：选择２４例颅内肿胶病人,测定七氟醚麻醉的时颅内压变化并与异氟醚和安氟醚进行比较。术前用药、麻醉诱导及维持的静脉用药相同。于Ｌ３－４穿刺蛛网膜睛腔测脑脊液压（代表颅内压,ＩＣＰ）。依吸入药不同随机分为七的氟醚（Ｓ）组,异氟醚（１）组和安氟醚（Ｅ）组,监测ＢＰ、ＭＡＰ、ＥＣＧ、ＳｐＯ２、ＰＥＴ、ＣＯ２和ＭＡＣ,调整ＶＴ和ＲＲａＣＯ２维持在４～４．６６ＫＰＡ。三     

地氟醚、七氟醚和异氟醚对犬冠脉血流的影响

目的：采用超声血流量监测仪观察地氟醚、七氟醚和异氟醚对犬冠脉血流的影响。方法：犬１８只，腹腔注射１．５％硫喷妥钠２０ｍｇ／ｋｇ，静脉注射阿曲库铵０．８ｍｇ／ｋｇ麻醉诱导，气管插管后取正中开胸，分离冠状动脉左前降支，将３ｍｍ或３．５ｍｍ超声Ｄｏｐｐｌｅｒ血管探头置于分离血管处，连接超声多普勒冠脉血流量监测仪测定冠脉血流量，然后随机吸入地氟醚、七氟醚或异氟醚，ＭＡＣ分别为７．２％、２．３％和１．２８％     

七氟醚对SD大鼠海马生物钟基因表达的影响

目的 七氟醚麻醉会导致学习记忆损伤,但其分子机制并不清楚.前期研究中,笔者利用基因芯片对SD大鼠海马的基因表达谱进行了分析,表明七氟醚能够改变海马内417个基因的表达,其中生物钟基因也有明显差异改变.本研究进一步系统调查了七氟醚对SD大鼠生物钟基因表达的影响,以期为七氟醚致学习记忆损伤研究提供理论基础.方法 1.5％～...     

地氟醚与七氟醚麻醉对老年病人术后认知功能的影响

目的 探讨地氟醚及七氟醚复合麻醉对老年病人术后认知功能恢复的影响。方法 70例择期行全膝或全髋关节置换术的病人,年龄均在65岁以上。静注芬太尼、异丙酚、琥珀胆碱快速诱导插管后随机分为地氟醚和异氟醚组。麻醉诱导前及手术后1、3、6及24h应用Mini-Mental State（MMS）测试方法评定其认知功能。结果 与术前相比,两组病人术后1h MMS值均明显降低。地氟醚组由29.5±0.5降至27.8±1.7;七氟醚组由29.2±1.0降至27.4±1.7。其中85％以上病人术后3h MMS恢复至术前水平。两组病人术前及术后1、3、6及24h MMS比较均无显著差异。结论 老年病人应用地氟醚或七氟醚麻醉,其术后认知功能恢复相似,仅有一过性认知障碍。     

七氟醚 异氟醚和安氟醚对离体兔胸主动脉环收缩功能的影响

目的：比较吸入麻醉药七氟醚、异氟醚和安氟醚对离体兔胸主动清脉环收缩功能的影响。方法：将取自２４只新西兰白兔的离体胸主动脉环随机分为七氟醚、异氟醚、安氟醚三组。衔用ＰＥ产生主动张力,稳定后分别吹入上述三种吸入麻醉药七氟醚记录不同浓度时的血管张力。结果：与基础值（麻醉药浓度为零时）相比,血管张力在三种吸入麻醉药２为１．０、１．５、２．０ＭＡＣ时均降低（Ｐ值分别小于０．０５、０．０５、０．０１）。安氟醚     

七氟烷对新生大鼠学习记忆功能的影响

目的 探讨七氟烷麻醉对新生大鼠学习记忆功能的影响.方法 新生7dSD大鼠80只,采用完全随机设计随机分为5组(每组16只):A、B组分别吸入3％七氟烷6h和2 h;C、D组分别吸入1.5％七氟烷6h和2h;E组吸入空气对照.新生大鼠麻醉后分别于第21～23天(Ⅰ期)和第60～62天(Ⅱ期)各组行Y型迷宫试验后立即处死,取大鼠脑海马组织,进行免疫组织化学染色,测定N-甲基-D-天冬氨酸受体1(N-nethy-D-aspatrate receptor 1,NMDAR1)的表达.结果 与E组比较,A组Ⅰ期Y型迷宫第1天测试结果中的全天总反应时间(total reaction time,TRT)和错误次数(error number,EN)分别为(100±19)s和(9.2±1.1)次(P＜0.05),第2天～第3天时无统计学差异,余各组Ⅰ期Y型迷宫测试结果无统计学差异(P＞0.05);与E组比较,Ⅱ期各组Y型迷宫测试结果均无统计学差异(P＞0.05).Ⅰ、Ⅱ期各组海马NMDAR1的表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 吸入1.5％七氟烷不会导致幼年大鼠学习记忆功能减退;吸入3％七氟烷6h对幼年大鼠早期可产生一过性学习记忆功能减退,对远期学习记忆功能未见明显影响.     

CX3CL1–CX3CR1 interaction mediates macrophage-mesothelial cross talk and promotes peritoneal fibrosis

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fractalkine/CX3CR1在肝肺综合征发病机制中的作用

目的：探讨趋化因子fractalkine及其受体CX3CR1在大鼠肝肺综合征（HPS）发病机制中的作用。 方法：将40只大鼠行胆总管结扎后随机均分为模型组与治疗组，5只大鼠仅游离胆总管不结扎，作为假手术组；治疗组大鼠于术后15~28 d腹腔内注射CX3CR1中和抗体，模型组组与假手术组大鼠给予等容量生理盐水代替。术后29 d检测大鼠肝功能、动脉血气，肺组织病理学、肺血管内巨噬细胞（PIM）、微血管密度（MVD）及CX3CR1的表达。 结果：与假手术组比较，模型组大鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）水平均明显升高，动脉血氧分压（PaO2）下降、肺泡-动脉血氧分压差（A-aDO2）升高，肺组织出现明显的病理改变、PIM（CD68表达量）、MVD增加（CD34表达量）、CX3CR1表达水平升高；治疗组大鼠肝功能也出现明显损伤，但好于模型组（均P<0.05），肺组织未见明显病理改变，血气指标、PIM、MVD、CX3CR1表达水平均无明显变化（均P>0.05）。 结论：fractalkine/CX3CR1在肺组织中表达增加并结合是HPS肺组织巨噬细胞聚积及微血管增生的关键信号通路，阻断该信号通路可抑制HPS的发生与发展。

     

Implant wear induced inflammation is mitigated in CX3CR1−/− mice

Wear debris‐induced monocyte recruitment plays a key role in the formation of chronic periprosthetic tissue inflammation associated with aseptic loosening. The purpose of this study was to investigate the role(s) of chemokine receptor CX3CR1 in ultra high molecular weight polyethylene (UHMWPE) particle‐induced tissue inflammation using a murine air pouch model developed in CX3CR1 knockout (CX3CR1^?/?) mice. UHMWPE debris or saline were introduced into established air pouches on CX3CR1^?/? and CX3CR1^+/+ mice. Pouch tissues were collected 7 days after UHMWPE inoculation. Results showed that UHMWPE stimulation induced strong pouch tissue inflammation in CX3CR1^+/+ mice, as manifested by inflammatory cellular infiltration (mainly macrophages), pouch tissue proliferation, and increased gene expression of IL‐1ß and TNFα. UHMWPE‐induced inflammation was significantly mitigated in CX3CR1^?/? mice, as manifested by reduction of tissue inflammation (pouch thickness and cell density), inflammatory cytokine production (IL‐1ß and TNFα) and macrophage accumulation. The observations support the hypothesis that the activation of the CX3CR1 chemokine pathway contributes to the severity of UHMWPE particle‐induced tissue inflammation, and suggests that CX3CR1 signaling is involved in the recruitment of monocytes to the wear debris‐containing inflammatory tissues. Blocking of CX3CR1 pathway may represent a viable therapeutic approach to the prevention and treatment of patients with aseptic loosening. © 2014 Orthopaedic Research Society. Published by Wiley Periodicals, Inc. J Orthop Res 32:1037–1043, 2014.

     

加巴喷丁对骨癌痛大鼠脊髓CX3CR1受体表达的影响

目的 观察加巴喷丁(gabapentin,GBP)对骨癌痛(bone cancer pain,BCP)大鼠脊髓CX3CR1受体表达的影响.方法 雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只,采用随机数字表法将其随机分为5组(每组8只):正常对照组(N组)、假手术组(右侧胫骨骨髓腔内注入生理盐水)(SN组)、BCP组、BCP+生理盐水组(BN组)、BCP+GBP 200 mg· kg-1·d-1组(BG 200组).术后7 d～14 d,GBP 200 mg·kg-1·d-1溶于5 ml生理盐水中饲喂BG 200组大鼠,SN组、BN组喂食等容积的生理盐水.分别于术前1d(T0)及术后1 (T1)、3(T2)、5(T3)、7(T4)、9(T5)、11(T6)、14 d(T7)测定大鼠50％的机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)及自发性疼痛评分(behavioral assays for ambulatory pain,BAAP),Western blot法测定脊髓CX3CR1蛋白的表达水平. 结果 与N组[(13.2±1.0)g]比较,术后第3天开始,BCP组大鼠PWMT[(10.5±0.4)g]减少;与N组(0分)比较,术后第5天BCP组BAAP[(2.0±0.8)分]增加.与BN组[(3.0±0.8)g]比较,术后第9天BG 200组大鼠PWMT[(6.1±0.9)g]增加;与BN组[(2.8±0.5)分]比较,术后第9天BG 200组大鼠BAAP[(1.6±0.7)分]减少;一直持续到第14天,差异仍有统计学意义(P＜0.01).与N组比较,术后第3天开始,BCP组大鼠脊髓CX3CR1表达增加.与BN组比较,BG 200组大鼠脊髓CX3CR1表达下调(P＜0.01). 结论 GBP可以减轻BCP大鼠的痛觉过敏,其机制可能与降低脊髓CX3CR1表达有关.     

CX3CR1 polymorphisms associated with an increased risk of developmental dysplasia of the hip in human

Developmental dysplasia of the hip, also termed congenital hip dislocation, is one of the major causes of children disability and early onset osteoarthritis. Previous study has identified a variant of CX3CR1 underlying this disorder in a large family. However, genetic evidence from population was still lacking. Here, we performed a case‐control association study by genotyping two SNPs of CX3CR1 , rs3732378, and rs3732379, in 689 unrelated hip dislocation patients and 689 normal controls. Genotyping results showed significant difference in genotype distributions of both two polymorphisms (p = 0.003 for rs3732378 and p = 0.017 for rs3732379). The minor allele frequency of rs3732378 was higher in cases (4.79%) than in controls (2.47%), predisposing carriers to hip dislocation with a 2.25‐fold risk (OR = 2.25, 95%CI 1.42–3.56) after adjustment for gender. Another SNP, rs3732379, was also significantly associated with an increased risk of hip dislocation (adjusted OR = 1.84, 95%CI 1.19–2.84). Through the population study, we demonstrated that CX3CR1 was candidate for the pathogenesis of the disorder, and identified rs3732378 and rs3732379 as susceptibility loci instead of disease‐causing mutations. © 2016 Orthopaedic Research Society. Published by Wiley Periodicals, Inc. J Orthop Res 35:377–380, 2017.

     

Chemoattraction of T cells expressing CCR5, CXCR3 and CX3CR1 by proximal tubular epithelial cell chemokines.

BACKGROUND: Chemokines produced by resident renal cells promote the infiltration of leukocyte subsets. We have analysed the chemotactic responses of CD3+ peripheral blood lymphocytes (PBLs) to factors secreted by proximal tubular epithelial cells (PTEC), assessing the role of chemokines and chemokine receptors in this process. METHODS: By FACS we analysed expression of the chemokine receptors CCR5, CXCR3, CX3CR1, CCR2, CXCR1 and CXCR2 on both freshly isolated and activated PBLs. Using Boyden chambers we studied the chemotactic activity of supernatant from resting and cytokine-stimulated (TNF-alpha and IFN-gamma) PTEC towards PBLs. Soluble recombinant chemokines and blocking antibodies were used to study the role of individual chemokine receptors. Chemokine secretion by PTEC was analysed by ELISA. RESULTS: Only a small proportion of freshly isolated cells expressed the chemokine receptors and there was low grade chemotaxis of these cells towards cytokine-stimulated PTEC supernatant compared with unstimulated PTEC supernatant. After activation, 84% of PBLs expressed CCR5, 90% expressed CXCR3 and 19% expressed CX3CR1. There remained low expression levels of CXCR1, CXCR2 and CCR2. Activated PBLs showed strong chemotactic responses to supernatant from cytokine-stimulated PTEC compared with unstimulated PTEC (P<0.001). Chemotaxis of these cells was inhibited by blocking CCR5, CXCR3 and CX3CR1 by 69%, 71% and 29% respectively, with complete inhibition following combined blockade. ELISA showed high levels of the chemokine RANTES/CCL5 (for CCR5) and IP-10/CXCL10 (for CXCR3) in cytokine-stimulated PTEC supernatant. CONCLUSIONS: Chemokines produced by cytokine activated PTEC promote the selective recruitment of activated T cells via the receptors, CCR5, CXCR3 and CX3CR1. These receptors may be amenable to therapeutic manipulation in renal inflammation.