大鼠C6胶质瘤模型的建立及MRI影像学特征

目的：探索建立大鼠C6胶质瘤模型的有效方法，了解MRI动态检测肿瘤的可行性。方法：采用立体定向仪种植C6胶质瘤细胞，建立C6胶质瘤模型，病理及MRI检测肿瘤生长情况。结果：所有大鼠均有肿瘤生长，并有一定规律性。MRI增强扫描及T2相均可显示肿瘤。结论：该方法可有效建立胶质瘤模型，采用MRI增强扫描可以较好地反映C6胶质瘤的生长情况。     

siRNA干扰Geminin基因对脑胶质瘤放疗敏感性的影响

目的 观察敲低Geminin对人脑胶质瘤细胞放疗敏感性的影响。方法 利用GEPIA和CGGA数据库分析Geminin在脑胶质瘤组织中的表达及与生存期的相关性。实验分为两组：si-GL2组(对照组)和si-Gem组(干扰组),设计siRNA干扰序列(si-Gem)和阴性对照序列(si-GL2),分别转染脑胶质瘤细胞LN229和U87,qRT-PCR和Western blot检测转染效率及蛋白表达水平。流式细胞术检测碘化丙啶(PI)染色后DNA含量分布，进而分析敲低Geminin对DNA再复制的影响。通过AnnexinⅤ-FITC/PI法，用流式细胞术检测敲低Geminin对细胞凋亡的影响。CCK-8细胞增殖实验检测敲低Geminin对胶质瘤细胞LN229和U87放疗敏感性的影响。Western blot检测Geminin相关分子Cdt1和DNA相关损伤蛋白γ-H2AX的表达水平。结果 脑胶质瘤组织中Geminin的表达水平高于癌旁正常组织，且Geminin表达越高，脑胶质瘤患者预后越差(P<0.05)。与si-GL2组相比，si-Gem组Geminin在LN229和U87细胞中的表...     

SYBR Green实时定量PCR检测人脑原发胶质瘤中LATS1和LATS2基因的表达

目的：运用实时定量PCR检测肿瘤抑制基因LATS1和LATS2的mRNA在人脑原发胶质瘤组织中的表达情况，并进一步分析其表达变化与临床资料之间的关系。 方法：建立SYBR Green 实时定量PCR的检测方法；通过标准曲线法对肿瘤抑制基因LATS1和LATS2的mRNA在30例原发胶质瘤（WHO分级：Ⅱ级10例，Ⅲ级10例，Ⅳ级10例）和10例正常脑组织中的表达进行定量检测；统计学分析不同级别胶质瘤及正常脑组织间的表达差异，并进一步结合临床资料分析不同性别和不同年龄组的表达差异。 结果：与正常脑组织相比，在各病理级别胶质瘤中LATS1和LATS2的mRNA表达均下调(P＜0.05)，但胶质瘤不同级别组之间的差异均无统计学意义(P＞0.05)。LATS1和LATS2在不同性别组和年龄组胶质瘤中的表达差异也无统计学意义（P＞0.05）。 结论：①成功地建立了SYBR Green实时定量PCR检测LATS1和LATS2基因表达的方法；②胶质瘤中LATS1和LATS2的mRNA表达水平均低于正常脑组织，但不同病理分级间的表达无明显差异。     

人脑胶质瘤Bcl—2蛋白及Fas受体表达的研究

目的：探讨凋亡基因bcl-2与凋亡信号受体FasR在胶质瘤中的表达以及与胶质瘤的发生和治疗的关系。方法：采用流式细胞术方法检测8例正常脑组织及36例胶质瘤组织中Bcl-2蛋白及FasR的表达水平。结果：正常脑组织中无Bcl-2蛋白及FasR的阳性表达，而胶质瘤组织中Bcl-2蛋白的阳性表达率为38．89％（14／36），FasR的阳性表达率为75％（27／36）。与低度恶性胶质瘤（WHOⅠ-Ⅱ级）相比，高度恶性胶质瘤（WHOⅢ-Ⅳ级）中Bcl-2蛋白的阳性表达率明显升高（P＜0．05）。结论：胶质瘤中高表达Bcl-2蛋白及FasR，提示Bcl-2基因过度表达与胶质瘤的发生有关，并为Fas配体或Fas单克隆抗体治疗胶质瘤提供参考。     

胶质瘤免疫生物标志物ORMDL2在胶质瘤诊断和预后中的作用

目的：探讨ORMDL2在人脑胶质瘤中的预后价值及其与免疫浸润的关系。方法：使用来自TCGA-LGG&GBM,CGGA和GEO的临床生存数据评估ORMDL2的临床预后价值。使用pROC包检测ORMDL2的cut-off值以绘制ROC曲线来证明其在鉴别胶质瘤诊断方面的价值。选择与ORMDL2最显著正相关的前300个基因通过STRING数据库建立PPI网络并进行GO和通路分析。利用ssGSEA和TIMER 2.0数据库探讨ORMDL2 mRNA表达与免疫细胞浸润的关系。结果：ORMDL2 mRNA在胶质瘤组织中的表达明显高于邻近正常组织，这种差异在高级别胶质瘤中最为明显。ORMDL2在人脑胶质瘤中表达增加，与胶质瘤患者的临床病理特征和预后不良相关。此外，ORMDL2表达升高与包括巨噬细胞在内的一系列免疫浸润细胞有关。结论：ORMDL2在胶质瘤免疫细胞浸润中起着重要作用，是胶质瘤患者预后的生物标志物。     

神经胶质瘤细胞对血管新生作用及其血管生成素-2表达的影响

目的：探讨人神经胶质瘤细胞对血管新生的影响及作用机制。方法：体外分离培养人神经胶质瘤细胞，用免疫细胞化学法检测不同级别的肿瘤细胞中血管生成素-2的表达，采用图像分析软件进行光密度（IOD）的测量；培养人脐带静脉内皮细胞并应用Matrigel建立血管形成的体外培养体系，检测肿瘤细胞对血管新生的影响。结果：血管生成素-2在神经胶质瘤细胞中的表达强度与瘤组织的分级呈正相关（P〈0．05）；肿瘤细胞诱导肿瘤血管形成呈浓度依赖效应（P〈0．05）。结论：神经胶质瘤细胞可以诱导肿瘤血管新生，血管生成素-2在神经胶质瘤细胞中的表达增强与肿瘤血管新生过程相关。     

p19和MDM2蛋白在神经胶质瘤中的表达及相关性研究

目的 探讨p19和MDM2基因在神经胶质瘤发生、发展中的可能作用及二的相关性。方法 本实验应用敏感而特异的免疫组化S-P法。对66例神经胶质瘤中的p19和MDM2蛋白进行检测。应用卡方检验进行统计学分析。结果 p19蛋白在神经胶质瘤Ⅰ级阳性率为57.89％，Ⅱ级阳性率为26.92％。Ⅲ-Ⅳ级阳性率4.76％，各级间阳性率比较。差异有统计学意义。MDM2蛋白在神经胶质瘤Ⅰ级阳性率为5.26％。Ⅱ级阳性率为30.77％，Ⅲ-Ⅳ级阳性率66.67％，各级间阳性率比较。差异有统计学意义。p19和MDM2的阳性表达呈负相关性。结论 p19和MDM2基因可能参与了神经胶质瘤的发生发展过程。其蛋白的检测有可能作为判定其恶性程度的一个辅助指标。     

重组腺病毒介导P21WAF1/CIP1诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的体外实验研究

目的：研究基因转移P21^WAF1/CIP1过量表达对人脑胶质瘤细胞凋亡的影响。方法：构建缺陷型重组腺病毒载体：在CMV启动子控制下的p21 cDNA(Ad-P21)，其编码人P21蛋白。通过流式细胞仪，RT－PCR进行P21表达检测；应用TUNEL法，荧光显微镜和流式细胞仪进行相关凋亡检测，分析。结果：RT－PCR检测5株亲本胶质瘤细胞表达p21 cDNA，而流式细胞仪未检测到P21表达；Ad-P21转染的胶质瘤细胞株均过量表达P21；在体外通过细胞形态学，分子生物学检测均证实Ad-P21能诱导胶质瘤2细胞向终末分化并诱导细胞凋亡。结论：基因转移P21^WAF1/CIP1为研究基因治疗恶性脑胶质瘤提供了有效的手段。     

TRAIL受体在脑胶质瘤中的表达

目的：研究TRAIL受体（TRAILR）在脑胶质瘤中的表达情况。方法：应用RT－PCR方法对43例脑胶质瘤及6例正常脑组织的TRAILR1－R4的mRNA表达进行检测。结果：43例脑胶质瘤中35例表达TRAILR1，41例表达TRAILR2，37例表达TRAILR3，其中有32例同时表达TRAILR1－R3，未检测到TRAILR4的表达。结论：脑胶质瘤中TRAILR1－R3普遍表达，“诱骗”受体模式可能受其它因素的影响与调控，TRAILR4在脑胶质瘤的细胞凋亡调控中可能不起重要作用。     

反义PCNA基因片断抑制胶质瘤U251细胞增殖

目的 研究反义PCNA基因片断对胶质瘤细胞株U251的细胞增殖的抑制作用。方法 用脂质体介导寡核苷酸转染培养的U251胶质瘤细胞，以MTT法检测细胞增殖活性，RT-PCR、原位杂交和免疫组织化学方法分别检测相关基因和蛋白的表达，通过流式细胞仪检测细胞周期和TUNEL法检测细胞凋亡。结果 不同浓度的反义寡核苷酸对肿瘤细胞的增殖活性均有抑制作用，且有一定的剂量依赖性。PCNA反义寡核苷酸能够诱导胶质瘤细胞凋亡，且与反义寡核苷酸浓度和作用时间有关。结论 反义PCNA寡核苷酸片断能有效地抑制胶质瘤细胞的体外增殖，且能够诱导胶质瘤细胞的凋亡。     

胶质瘤中LINC01152的表达及其对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的 探讨长链非编码RNA LINC01152在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法 应用LncSpA V2.0和GEPIA数据库分析LINC01152在胶质瘤中的表达；qRT-PCR检测10例正常脑组织、40例胶质瘤组织和5株胶质瘤细胞系中LINC01152 mRNA的表达。使用DAVID数据库对LINC01152共表达基因进行GO和KEGG富集分析，预测其功能。通过AnnoLnc2、TargetScan、LinkedOmics和miRDB数据库预测并筛选LINC01152相关miRNA和靶基因，构建ceRNA调控网络。利用小干扰RNA在胶质瘤细胞系下调LINC01152表达，通过CCK-8法测试、划痕愈合实验、Transwell迁移和侵袭实验、流式细胞术、Western blot等检测LINC01152对胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡等功能的影响。结果 数据库分析显示，与其他肿瘤类型相比，LINC01152在胶质母细胞瘤(GBM)和低级别胶质瘤(LGG)中高表达，且高于正常脑组织。qRT-PCR结果显示LINC01152 mRNA在胶质瘤组织中的表达显著高于...     

MiR-26b通过下调COX-2表达抑制神经胶质瘤的增殖、侵袭和迁移

目的：观察不同级别神经胶质瘤中miR-26b和环氧化酶(COX)-2的表达情况,研究miR-26b对于神经胶质瘤 细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法：运用Western印迹和实时定量荧光PCR(qRT-PCR)检测不同级别神经胶质瘤中 miR-26b和COX-2的表达情况;使用miR-26b mimic转染人神经胶质瘤细胞U87,上调miR-26b的表达;qRT-PCR检测miR- 26b mimic转染后miR-26b和COX-2 mRNA的表达变化情况;双荧光素酶报告基因系统检测miR-26b对COX-2转录活性的 影响;使用Transwell侵袭实验检测miR-26b对人神经胶质瘤细胞U87侵袭能力的影响;使用划痕实验检测miR-26b对人 神经胶质瘤细胞U87迁移能力的影响;使用CCK-8(cell counting kit-8)检测miR-26对人神经胶质瘤细胞U87增殖能力的影 响;裸鼠体内成瘤实验检测过表达miR-26b后胶质瘤细胞成瘤能力的变化。结果：随着神经胶质瘤肿瘤级别的增加, miR-26b表达明显降低(P<0.05),而COX-2明显增加,差异有统计学意义(P<0.001);双荧光素酶实验证实miR-26b可以 直接靶向调控COX-2的蛋白表达水平;使用miR-26b mimic明显上调miR-26b的表达(P<0.05);上调miR-26b可以显著降 低COX-2的表达(P<0.05);上调miR-26b可以抑制神经胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力(P<0.05)。实验组和对照组相 比肿瘤的质量和体积都变小。结论：随着神经胶质瘤肿瘤级别的增加,miR-26b表达逐渐降低,而COX-2表达逐渐增 加。miR-26b可通过抑制COX-2表达从而抑制神经胶质瘤的增殖、侵袭和迁移。     

人脑胶质瘤中环氧化酶-2的表达和作用研究

目的研究环氧化酶-2（COX-2）在人脑胶质瘤中的表达状况，探讨其作用。方法对62例脑胶质瘤患者和3例脑外伤患者（对照组）运用免疫组化及Western blot方法检测COX-2蛋白表达。结果在正常脑组织中，仅少数神经细胞COX-2染色阳性；在脑胶质瘤中，都发现有较多肿瘤细胞COX-2染色阳性。脑胶质瘤中COX-2染色的表达强度与胶质瘤的病理分级呈正相关（1=-0．874，P〈0．01）。正常脑组织与胶质母细胞瘤、间变性星形细胞瘤和星形细胞瘤之间，COX-2表达强度的差异均有统计学意义（均P〈0．01）。在坏死区域周围肿瘤细胞有COX-2的高表达。正常脑组织与肿瘤组织的新生血管内皮细胞发现有COX-2染色阳性，在血管周围有COX-2染色阳性的肿瘤细胞聚集。结论COX-2在各级别的脑胶质瘤细胞中有表达，和脑胶质瘤的发生和发展有关系；COX-2在肿瘤的坏死区周围有强表达，在肿瘤细胞的凋亡和死亡过程起作用；COX-2在肿瘤的新生血管内皮上有表达，在血管周围有COX-2阳性的肿瘤细胞积聚，可促进肿瘤组织新生血管的生成；COX-2可作为判断脑胶质瘤恶性程度的辅助生物学标志。     

胶质瘤患者肿瘤组织中IGF2BP2的表达及临床意义

目的探讨胰岛素样生长因子2结合蛋白2（insulin-like growth factor2 binding protein2 IGF2BP2）在脑胶质瘤中的表达状况。方法应用实时荧光定量PCR技术检测47例不同病理级别（9例Ⅱ级,21例Ⅲ级,17例Ⅳ级）胶质瘤组织IGF2BP2表达情况,同时采用免疫组化法检测47例肿瘤组织中IGF2BP2的表达情况。结果Ⅱ级胶质瘤IGF2BP2蛋白阳性表达率阳性率（100%）明显高于胶质瘤Ⅲ级（52.38%）（P=0.013）和Ⅳ级（11.76%）（P=0.000）胶质瘤Ⅲ级高于Ⅳ级（P=0.015）;Ⅱ级胶质瘤IGF2BP2的基因表达量（0.075±0.020）高于Ⅲ级（0.047±0.011）（P=0.016）和Ⅳ级胶质瘤（0.026±0.004）（P=0.000）,Ⅲ级胶质瘤IGF2BP2的基因表达量高于Ⅳ级胶质瘤（P=0.000）。结论在Ⅱ级胶质瘤组织中IGF2BP2的表达水平高,并且随着病理级别的增高表达减弱,推测IGF2BP2可能在胶质瘤的发生发展中扮演重要的角色。     

脑胶质瘤靶向SPIO⁃PLA⁃P53分子探针的构建及磁共振成像实验研究

目的：探讨靶向磁共振SPIO-PLA-P53分子探针对大鼠脑胶质瘤的诊断效能。方法：合成超顺磁性氧化铁纳米粒子 SPIO-PLA和脑胶质瘤靶向纳米分子探针SPIO-PLA-P53。使用透射电镜和动态光散射检测分子探针的物理性质；CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测细胞活性；并检测分子探针体外透过血脑屏障的效能。利用7.0 T小动物专用磁共振仪及配套线圈检测纳米探针在胶质瘤中的分布。对荷瘤鼠脑组织进行病理染色，明确靶向分子探针在肿瘤组织中的蓄积。使用GraphPad Prism 软件对结果进行统计学分析。结果：脑胶质瘤靶向SPIO-PLA-P53纳米粒子大小均匀，分散度较好，具有良好的生物相容性及靶向聚集效应。磁共振扫描结果显示荷瘤大鼠在注射靶向SPIO-PLA-P53探针后瘤体T2WI信号减低，在注射SPIO-PLA探针溶液后瘤体信号无明显变化。病理结果证实注射SPIO-PLA-P53大鼠胶质瘤内大量铁离子蓄积。结论：SPIO-PLA-53可作为大鼠脑胶质瘤特异性显像的磁共振分子探针。     

扩散张量成像在评价脑胶质瘤周围脑白质浸润中的价值

目的 探讨脑肿瘤的扩散张量成像（DTI）是否可显示T2WI异常高信号远侧的异常，及其与肿瘤分级间的关系。方法 采用3T MRI对28例病理证实的幕上胶质瘤病人（23例高级和5例低级胶质瘤）进行T2WI和DTI检查，感兴趣区（ROI）分别在肿瘤内、与肿瘤不同距离的白质内以及T2WI正常但DTI异常的区域，分别计算相对各向异性指数（RAI）。结果 23例高级别胶质瘤（WHOm和Ⅳ级）中18例DTI上的异常范围大于T2WI，这些高级胶质瘤中T2表现正常的白质破坏区的RAI降低（0.18±0．06）。5例低级胶质瘤（WHOⅡ级）中，DTI上的肿瘤范围与T2WI一致．而且RAI值无降低（0.39±0．14）。结论 DTI可识别高级胶质瘤的轻微白质破坏，而低级胶质瘤却看不到这种破坏。DTI可能提供一种有用的检测胶质瘤潜在侵犯的工具。     

大鼠C6脑胶质瘤动物实验模型的建立

目的 为脑胶质瘤的基础理论、临床治疗和药效学研究提供简便、经济、实用的大鼠C6脑胶质瘤动物实验模型。方法 采用自制大鼠脑固定架，固定后，于脑靶点接种C6胶质瘤细胞。观察动物行为状态和生存期，并对脑肿瘤进行形态学，细胞学和分子生物学相关指标的检测。结果 接种C6胶质瘤细胞后，动物进食量减少，体重下降，有的动物出现眶周出血，眼球突出，自身旋转，癫痫发作，偏瘫等症状，大约在2至3周内，动物大多死亡，病理解剖显示颅内肿瘤形成。结论 该方法建立的脑胶质瘤具有与人脑胶质瘤相似的特性，肿瘤形成时间短，存活期较稳定，可供脑胶质瘤基础理论、实验治疗和药效学研究的需要。     

Cyclin D1在胶质瘤细胞系中表达分布模式的初步研究

目的：探讨cyclin D1在胶质瘤细胞系中的细胞周期表达模式，将为从生物学功能上阐明cyclin D1在胶质瘤细胞周期演进中的作用．方法：利用流式细胞仪双参数法和细胞同步化，确定cyclin D1在胶质瘤细胞系SHG-44和BT-325中的细胞周期表达分布模式．结果：在胶质瘤细胞系SHG-44和BT-325中，Cyclin Dl的表达呈细胞周期依赖性：在SHG-44中，cyclin D1在G1期表达最高，4h左右达到峰值，S期及G2／M期下降，但仍可检测到；在BT-325中，cyclin D1在G1期表达最高，6h左右达到峰值，S期及G2／M期下降，但仍可检测到．结论：cyclin D1蛋白质的表达呈细胞周期依赖性，且与细胞周期行进有关；cyclin D1在SHG-44和BT-325胶质瘤细胞进入G1期的早期发挥着重要的生物学作用。     

乳酸诱导PLEKHA4的上调参与胶质瘤细胞增殖和凋亡的生物学进程

目的 探究乳酸诱导的PLEKHA4基因表达对胶质瘤细胞的生物学功能的影响以及潜在分子机制。方法 通过GEO数据库以及GEPIA2在线网站分析PLEKHA4表达水平与胶质瘤病理分级的关系,通过RNA小干扰技术设计PLEKHA4 siRNA后分别转染胶质瘤U251和T98G细胞处理1 d,通过实时细胞分析技术以及Edu实验检测胶质瘤细胞的增殖能力,平板克隆实验检测细胞的克隆形成能力,流式分析技术检测胶质瘤细胞的周期和凋亡;PCR检测临床收集的胶质瘤样本和对照以及乳酸和葡萄糖治疗下胶质瘤细胞中PLEKHA4的mRNA表达量的变化;体内异种移植小鼠实验检测裸鼠成瘤能力;Western blot检测cyclinD1、CDK2、Bcl2、β-catenin表达和MAPK信号通路关键蛋白的磷酸化表达水平。结果 GEO数据库和在线网站分析结果显示PLEKHA4在胶质瘤组织中高表达且与不良预后相关;RTCA以及Edu实验显示,敲降PLEKHA4抑制胶质瘤细胞的增殖（P<0.05）;平板克隆实验显示,敲降组的细胞克隆数目明显低于对照组（P<0.01）;流式细胞术分析结果显示敲低PLEKHA4后...     

SOX5在胶质瘤组织中的表达及对胶质瘤细胞株U87生物学行为的影响

目的：探究SBY-BOX转录因子5(SOX5)基因在胶质瘤组织中的表达及对胶质瘤细胞株U87增殖活性和侵袭能力的影响。方法：胶质瘤和正常脑组织标本各取10例，采用实时定量荧光PCR(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测SOX5基因的表达，培养胶质瘤细胞株U87，将其分为对照组、无义序列组和siRNA SOX5转染组。利用CCK8实验和Transell实验检测胶质瘤细胞株U87增殖活性及侵袭能力。利用Western印迹检测敲低SOX5表达后对基质金属蛋白酶（MMP-2）、MMP-9以及细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达的影响。结果：与正常脑组织相比，胶质瘤组织中SOX5蛋白和mRNA水平均明显升高（t=23.38、18.36，均P<0.01）。siRNA SOX5可有效敲低SOX5基因的表达，与对照组、无义序列组比较，siRNA SOX5转染组SOX5蛋白和mRNA水平均明显降低（F=89.31、123.34，均P<0.01）;CCK8实验结果显示，敲低SOX5表达后，胶质瘤细胞的增殖活性受抑制，第120小时胶质瘤细胞增殖活性仅为对照...