平菇双相培养基用于结核杆菌培养的研究

目的 以平菇浸出液为基础成分,研制培养结核分支杆菌的一种新型双相培养基。方法 经用H37Rv基础试验及对351份临床标本用酸性罗氏培养基对照。结果 两种培养基总阳性数为172份（49％）,其中平菇双相培养基166份（＋）,阳性检出率为47．3％。酸性罗氏培养基144份（＋）,阳性检出率为41．03％。分别占总阳性数的96．51％和83．72％,并且大多数结核杆菌在平菇双相培养基上的初生长时间明显快于酸性罗氏培养基时间。结论 结果表明平菇双相培养基成分来源丰富,价格低廉,制作方便,操作简单,适合于我国广大基层医院和结核院所使用。     

分支干菌干燥培养基用于结核杆菌分离培养的研究

本文报道上海地区17所结核病院、所,应用分支杆菌干燥培养基作结核菌分离培养,统计临床标本8247例,与改良罗氏、丙酮酸钠培养基比较,其阳性率相当而生长速度优于两种传统的培养基,结果报告时间为40天左右,可提前2周(6周).     

分支干菌干燥培养基用于结核杆菌分离培养的研究

本文报道上海地区１７所结核病院，所，应用分支杆菌干燥培养基作结核菌分离培养，统计临床标本８２４７例，与改良罗氏，丙酮酸钠培养基比较，其阳性率相当而生长速度优于两种传统的培养基，结果报告时间为４０天左右，可提前２周。     

利用7H12B液体培养基快速鉴别人型和牛型结核分支杆菌

应用含ＴＣＨ１μｇ／ｍｌ的７Ｈ１２Ｂ培养基检测人型和牛型参比株各１株，１３种常见非结核分支杆菌参比株各１株，临床标本检出的１５６株结核分支杆菌，１２株非结核分支杆菌。结果与含ＴＣＨ５μｇ／ｍｌ的罗琼氏培养基鉴定结果完全一致，且所需时间明显缩短，仅需２～４天。     

结核分支杆菌药物敏感性不同检测方法结果的比较

目的 比较不同标准和方法检测结构分支杆菌耐药性的结果。方法 对１５８株临床分离的结核分支杆菌同时采和我国现行标准绝对浓度法、ＷＨＯ／ＩＵＡＴＬＤ推荐标准１％比例法和绝对浓度法检测药物敏感性。结果 ＷＨＯ／ＩＵＡＴＬＤ规定的耐一标准检测的耐药离为５３．８％（８５／１５８）,我国现行标准检测结果为５０．０％（７９／１５８）（Ｐ〉０．０５,差异无显著性）。ＷＨＯ／ＩＵＡＴＬＤ规定的耐药性标准检测的耐药率     

分支杆菌快速变色培养基应用初探

结核分支杆菌 (ＭＴＢ)的快速培养历来是国内外学者关注的热门课题[1 3]。本文报道了快速变色液体培养基临床应用结果 ,并与涂片和罗氏培养结果进行比较。材料与方法　 ( 1 )分支杆菌快速变色液体培养基由深圳怡百世公司提供。 ( 2 ) 50份待检患者痰标本取自我市肺科医院住院患者。其中肺结核 3 9例 ,非结核性呼吸系疾病患者1 1例。 ( 3 )痰涂片和罗氏培养按常规方法进行。 ( 4)变色液体培养基接种标本量为 0 4ｍｌ,3 7℃培养 ,每天观察结果 1次 ,4周仍无生长为阴性。若培养基变紫色 ,底层有紫色颗粒状沉淀 ,且无混浊现象为分支杆菌培养阳…     

利用重组分支杆菌噬菌体快速筛选耐利福平结核分支杆菌

目的：采用基因工程技术构建的可表达荧光素酶的结核分支杆菌噬菌体进行结核分支杆菌利福平药敏试验研究,建立一种特异、灵敏、快速的利福平药敏试验方法。方法采用生物发光方法分别检测重组分支杆菌噬菌体对不同细菌在不同浓度利福平培养其中的发光水平,并与罗氏培养基进行药敏药比较。结果在不同细菌中,噬菌体均特异地对分支杆菌有发光反应,分支杆菌的养基进行药敏试验比较。结果在不同细菌中,噬菌体均特异对对分支杆菌有发光     

分枝杆菌双相罗氏培养基在结核病诊断中的应用研究

目的 评价分枝杆菌双相罗氏培养基在结核病诊断中的价值,探讨其在我国基层实验室应用的可行性。方法采取多中心试验方法,在我国3个省的3个地市级结核病诊疗机构连续纳入2014年10月至2015年10月期间的初诊肺结核可疑症状者2320例,其中15例因分枝杆菌改良罗氏培养基(简称“罗氏培养基”)和分枝杆菌双相罗氏培养基(简称“双相培养基”)中的1种或2种培养污染或结果缺失,对两种培养基培养结果进行比较时不计入分析。每例患者留取3份痰标本(即时痰、夜间痰、晨痰)进行萋-尼染色法涂片镜检(简称“涂片”),并选取2份性状好的痰标本同时进行罗氏培养基培养、双相培养基培养。使用SPSS 24.0软件,采用配对χ²检验比较两种培养基的阳性检出率,以P<0.05为差异有统计学意义;分别以罗氏培养基培养结果、临床诊断为标准对双相培养基的检测效能进行评价;采用Wilcoxon秩和检验对罗氏培养基与双相培养基检出时间的差异进行统计学分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果罗氏培养基和双相培养基两种培养方法阳性检出率分别为19.65%(453/2305)和22.00%(507/2305),差异有统计学意义(χ²=22.091,P=0.000);以罗氏培养基培养结果为标准,双相培养基的敏感度为91.39%(414/453),特异度为94.98%(1759/1852),一致率为94.27%(2173/2305);以临床诊断为标准,罗氏培养基和双相培养基的ROC曲线下面积分别为0.694(95%CI:0.672~0.715)、 0.707(95%CI:0.685~0.728);罗氏培养基报阳时间中位数(四分位数)[M(Q₁,Q₃)]为28(21,34)d,双相培养基报阳时间M(Q₁,Q₃)为18(14,24)d,差异有统计学意义(Z=15.114,P=0.000)。结论双相培养基较罗氏培养基具有更高的阳性检出率,诊断价值较高,报阳时间明显缩短,是一种可以作为结核病临床诊断的参考方法,在我国基层实验室有一定推广应用价值。     

结核分枝杆菌接种菌量对异烟肼和利福平药敏试验的影响

目的比较接种不同菌量结核分枝杆菌（MTB）绝对浓度法药物敏感性（药敏）与比例法药敏的差异程度,为MTB药敏检测准确性提供参考。方法选择临界敏感或临界耐药MTB菌株53株,用比浊法制作MTB菌悬液,10倍梯度稀释,10^-4、10^-510^-6mg/ml菌悬液0.1 ml接种于改良L-J培养基上作活菌计数,10^-2、10^-3mg/ml菌悬液0.1 ml接种于含INH、RFP改良L-J培养基上作绝对浓度法药敏,10^-3、10^-5mg/ml菌悬液0.1 ml接种于含INH、RFP改良L-J培养基上作比例法药敏。结果MTB活菌计数值多在5×1065×10⁷CFU/ml。10^-2、10^-3mg/ml菌悬液绝对浓度法药敏一致率INH、RFP分别达98.1%、100.0%;绝对浓度法与比例法药敏符合率INH、RFP均达90.6%100.0%。结论不同菌量MTB绝对浓度法药敏结果与比例法药敏结果比较一致性好,在常规药敏检测中不会影响结果的准确性。     

噬菌体生物扩增法与改良罗氏比例法在结核杆菌药敏检测中的比较

目的　采用噬菌体生物扩增法 (PhaB法)与传统比例法对结核分枝杆菌临床株进行利福平、异烟肼药物敏感试验,建立一种快速、敏感、特异、价廉的结核杆菌药敏试验方法。方法 分别采用噬菌体生物扩增法和改良罗氏比例法检测 52株结核分枝杆菌临床株对利福平、异烟肼的敏感性,将二者结果进行比较。结果 比例法检测结果为利福平耐药株的 34株中,噬菌体生物扩增法检测结果为 32株耐药,2株敏感 ;18株敏感株中噬菌体方法检测结果为 17株敏感,1株耐药。噬菌体方法检测结核菌对利福平的灵敏度为 94.1%(32/34),特异度为 94.4%(17/18),符合率为 94.2%(49/52)。比例法检测为异烟肼耐药的 38株菌中,噬菌体方法检测 35株耐药,3株敏感;14株异烟肼敏感株中,噬菌体方法检测 11株敏感,3株耐药。噬菌体方法检测异烟肼敏感性的灵敏度为 92.1%(35/38),特异度为 78.6%(11/14),符合率为 88.5%(46/52)。结论 用噬菌体生物扩增法可快速、准确地检测结核分枝杆菌对利福平的敏感性,灵敏度高,与WHO推荐使用的比例法符合率高,可在 48h得到结果。异烟肼耐药性检测用噬菌体方法的特异度不如利福平,有待进一步探讨其原因。     

微孔板稀释法检测结核分枝杆菌丙硫异烟胺耐药结果分析

目的以MGIT960快速药敏法为参照,微孔板稀释法检测结核分枝杆菌丙硫异烟胺耐药的效果。方法采用MGIT960快速药敏(MGIT法)和微孔板稀释法对248株结核分枝杆菌临床分离株进行丙硫异烟胺药敏试验,检测结核分枝杆菌对该药物的耐药性。随机选取117株菌株进行该药物的11个浓度梯度(0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16、32、64μg/mL)的药敏检测,比较两种方法最低抑菌浓度的一致性。结果 MGIT法的平均检测时间为10.1d,微孔板稀释法检测时间为8d,两者差异有统计学意义(P0.001)。与MGIT法测定结果比较,微孔板稀释法检测的敏感度为96.5%(55/57),特异度为93.2%(178/191),符合率为94.0%(233/248),Kappa值为0.84。两种方法所获得的MIC值的总一致率为81.2%(95/117),其中在MIC值8.0μg/mL的分离株中,两种方法的一致率为86.3%(82/95);在MIC值≥8.0μg/mL的分离株中,两种方法的一致率仅为59.1%(13/22)。结论两种方法对丙硫异烟胺进行耐药检测有较高的一致性,但也存在一定的差异。微孔板稀释法比MGIT法简单,快速,适合用于结核分枝杆菌对丙硫异烟胺耐药性的快速检测。     

临床分枝杆菌培养中同步筛检依赖利福平菌的应用价值探讨

目的 探讨分枝杆菌培养中同步筛检依赖利福平结核分枝杆菌（依R菌）的临床应用价值,以期为临床依R菌早期发现提供帮助。 方法 采用临床典型依R菌株在罗氏（L-J）培养基上的最佳生长利福平药物浓度100μg/ml（简称“L-J R100”）,建立临床依R菌初代筛检模式,即在临床分枝杆菌BD960快速分离培养中,平行接种L-J R100 管和罗氏空白对照管（L-J对照）培养;按照其模式对重庆市公共卫生医疗救治中心2011年3月7日至2012年2月15日期间共5362份临床标本平行培养结果进行统计分析（实验结果录入瑞美检验网络LIS系统）。 结果BD960、L-J R100和L-J对照管3种方法平行培养的总阳性检出率为43.92% (2355株/5362份),其中BD960阳性检出率39.56%（2121株/5362份）,L-J对照管阳性检出率25.57%（1371株/5362份）。BD960阴性但L-J对照管培养阳性者234份;L-J R100阳性703株,占检出阳性的29.85%(703株/2355株）;发现有依R菌现象的258株（合计221例,其中重复出现依R菌现象2次的33例、3次的1例、4次的3例,另外有14株L-J R100阳性而对照为阴性的绝对依赖株）,占L-J对照管阳性的18.82%（258株/1371株）,占L-J R100阳性的36.70%（258株/703株）。 结论 临床分枝杆菌培养中同步筛检依R菌能分离到绝对依赖株,可提早为临床提示分离阳性株是否为利福平依赖菌或耐药菌;同时可提高分枝杆菌培养阳性检出率;其方法简单易行,有较好的临床应用价值。     

手工MGIT法检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药的效果评价

目的 评价MGIT手工荧光判读法在检测结核分枝杆菌耐药的基层应用价值。方法 以常规L-J比例法为参照方法,比较分析手工荧光MGIT液体药敏法检测300株临床结核分离株异烟肼和利福平药敏效果。结果 手工MGIT液体药敏法检测异烟肼和利福平灵敏度和特异度分别为94.7%和92.6%、95.6%和98.8%。两种药敏方法的异烟肼符合率95.7%,利福平符合率97.7%,两种方法检测异烟肼和利福平敏感性的差异无统计学意义(P>0.05)。液体药敏阳性报告时间平均7.6 d,比传统比例法报告时间提前20.4 d。结论 手工MGIT液体药敏法与常规L-J比例法检测异烟肼和利福平敏感性结果一致性高,能快速、准确检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药,适合基层推广。     

187例结核性胸膜炎胸膜结核分枝杆菌药敏检测探讨

目的了解结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌的耐药情况,为指导临床制定合理化疗方案提供科学依据。方法采用胸膜活检技术获取胸膜组织接种在改良罗氏培养基内进行结核分枝杆菌的培养及药物敏感性测定。结果306例结核性胸膜炎胸膜组织结核分枝杆菌培养阳性者187例,阳性率61.1%。187例药敏测定结果对6种抗结核药物均敏感者148例,敏感率79.1%;耐药39例,耐药率20.9%。结论结核性胸膜炎与肺结核都同样存在着初始耐药性和继发耐药性的问题,同样必须高度重视其化疗原则和管理水平。     

结核分枝杆菌耐药性检测新进展

结核分枝杆菌(MTB)的耐药形势日趋严重,耐药结核病的及时诊断对患者的治疗结局及结核病的控制十分重要.MTB传统的培养及药敏结果回报需时2～3个月,MTB耐药性的快速准确诊断是一个急需解决的问题.本文总结了MTB耐药性检测的传统技术包括罗氏培养及快速培养,并对比分析了其优缺点.综合国内外文献阐述了显微镜观察药物敏感性测定法的研究进展及分子生物学快速诊断技术包括线性探针杂交技术、Xpert MTB/RIF检测技术、基因芯片诊断技术及滚环扩增技术对于MTB及其耐药性检测的最新动态、各种检测方法的适用范围,并对比分析了各种检测方法的优缺点,为临床医师选择快速准确的诊断工具提供最佳的选择.     

新型国产改良Middlebrook液体培养试剂对结核分枝杆菌培养效果的评价

目的: 评价新型国产改良Middlebrook液体培养试剂用于临床样本中结核分枝杆菌培养的效果。方法: 采集2021年3—4月西安市胸科医院诊治的疑似肺结核患者痰液和肺泡灌洗液标本,对其中质量合格的89份痰液标本和61份肺泡灌洗液标本进行分枝杆菌改良试剂培养(改良试剂法)和BACTEC MGIT 960(简称“MGIT 960”)培养。比较两种方法检测分枝杆菌的阳性率、报阳时间和污染率差异,并以MGIT 960培养结果为参照标准,评价改良试剂法的检测效能。结果: 改良试剂法检测痰液和肺泡灌洗液标本结核分枝杆菌的总阳性率[44.7%(67/150)]和报阳时间[中位数(四分位数):13.0(8.5,17.0)d]与MGIT 960培养结果[分别为42.7%(63/150)和13.0(8.0,17.5)d]相比,差异均无统计学意义(χ²=0.571,P=0.453;Z=-1.344,P=0.179)。两种方法检测肺泡灌洗液标本均未出现污染,但改良试剂法检测痰液标本的污染率[12.4%(11/89)]明显高于MGIT 960培养[4.5%(4/89)],差异有统计学意义(χ²=4.000,P=0.039)。 改良培养试剂的成本[(49.6±10.5)元/份]仅约为MGIT 960培养试剂[(75.4±15.8)元/份]的60%。以MGIT 960培养结果为参照标准,改良试剂法检测痰液和肺泡灌洗液标本结核分枝杆菌的总敏感度为96.9%(62/64)、总特异度为94.2%(81/86),Kappa值为0.905,一致性好。结论: 分枝杆菌改良Middlebrook液体培养试剂检测痰液和肺泡灌洗液标本与MGIT 960培养诊断结核病的一致性好,但应注意痰液标本检测污染率较高的问题。