温针灸对兔膝关节退变模型血清MMP-1和MMP-13水平的影响

目的观察温针灸治疗兔膝关节退变模型前后血清基质金属蛋白酶1、13（MMP-1,MMP-13）及软骨形态的变化,探讨温针灸治疗膝骨性关节炎的作用机理。方法 30只雄性兔随机分为模型组、温针灸组和西药组,每组10只,采用右后肢伸直位固定制作兔膝关节退变模型。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测造模前、治疗前和治疗后兔血清中MMP-1,MMP-13水平,参考彭太平法观察膝关节组织形态学变化。结果治疗2周后,大体和光镜观察模型组膝关节软骨变薄,出现明显的关节软骨损伤,温针灸组可明显改善关节软骨组织学结构。各组治疗前较造模前血清MMP-1、MMP-13的浓度均显著升高（P〈0.05）;治疗两周后,与模型组比较,温针灸组MMP-1、MMP-13水平降低（P〈0.05）,但与西药组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论温针灸能治疗KOA的软骨损伤,可能与降低MMP-1和MMP-13表达有关。     

MMP-1、TIMP-1在兔实验性膝骨关节炎中的表达

目的 观察基质金属蛋白酶1(MMP-1)及其抑制剂(TIMP-1)在兔实验性骨关节炎中的表达,探讨骨关节炎的发病机制是否与MMP-1及TIMP-1的异常表达有关.方法 20只日本大耳白兔随机分为2组:A组正常对照组,B组模型组.B组用1.6%木瓜蛋白酶膝关节腔内注射,建立兔膝骨关节炎模型,4周后观察软骨组织形态学的变化及软骨中MMP-1、TIMP-1的表达.结果 B组软骨病理损害程度重于A组(P<0.01),MMP-1表达明显高于A组(P<0.01),TIMP-1表达高于A组(P<0.05).结论 MMP-1与TIMP-1与骨关节炎软骨退变有关,其异常表达在骨关节炎关节软骨退变的病理过程中发挥关键作用.     

抗骨增生片对兔膝骨关节炎软骨组织病理形态及MMP-1、TIMP-1的影响

目的：观察抗骨增生片对兔膝骨关节炎软骨组织病理形态、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）及其抑制剂（TIMP-1）的影响,探讨抗骨增生片是否能调节关节软骨MMP-1及TIMP-1的表达而起到对软骨的保护作用。方法：30只日本大耳白兔随机分为3组：正常对照组（A）,模型对照组（B）,抗骨增生片组（C）。用1.6%木瓜蛋白酶膝关节腔内注射,建立兔膝骨关节炎模型,C组灌胃给药4周后,观察软骨组织病理形态的变化及软骨中MMP-1、TIMP-1的表达。结果：C组软骨病理损害程度轻于B组（P〈0.05）,MMP-1表达明显低于B组（P〈0.01）,TIMP-1表达高于B组（P〈0.05）。结论：抗骨增生片能减轻膝骨关节炎关节软骨退行性改变,其对关节软骨的保护作用与调节MMP-1及TIMP-1的表达有关。     

跌打通痹膏对兔膝骨关节炎关节软骨MMP-13、Ⅱ型胶原mRNA表达的影响

目的：观察跌打通痹膏对兔膝骨性关节炎关节软骨基质金属蛋白酶-13（MMP-13）、Ⅱ型胶原mRNA （COL-Ⅱ mRNA）表达的影响。方法选用65只新西兰兔随机分成正常对照组、假手术组、模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组,每组13只。模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组采用改良Hulth造模法,正常组、假手术组不予处理,模型组、跌打通痹膏组、骨痛贴组分别用胶带、跌打通痹膏、骨痛贴膏贴敷4周,观察治疗后各组实验兔关节软骨改变情况,并检测关节软骨中 MMP-13、COL-Ⅱ mRNA的表达。结果（1）组织学关节软骨评分：跌打通痹膏组评分较模型组低（P<0.05）。（2）MMP-13mRNA检测：模型组MMP-13表达较正常对照组显著提高（P<0.01),跌打通痹膏组MMP-13 mRNA表达较模型组降低（P<0.01)。（3）COL-ⅡmRNA检测：跌打通痹膏组COL-Ⅱ表达较模型组升高（P<0.01）。结论跌打通痹膏能通过降低Ⅱ型胶原降解,抑制MMP-13 mRNA表达,从而有效保护膝骨关节炎模型兔关节软骨,延缓关节软骨退变。     

超声诊断对木瓜蛋白酶致早期兔膝骨关节炎模型可行性研究

目的:探讨超声检查对兔膝关节炎模型早期病变的诊断效能。方法:将32只长耳大白兔随机分为正常组和模型组,每组16只。模型组以木瓜蛋白酶右侧膝关节腔内注射诱导建立兔膝骨关节炎模型,造模后第2、4周采用超声观察两组兔膝关节超声SZKUDLAREK评分,ELISA法检测血清金属基质蛋白酶3(MMP-3)含量水平、显微镜下观察膝关节炎评分、免疫组化观察膝关节软骨Ⅱ型胶原、骨形态发生蛋白(BMP)的表达,观察超声诊断与各观察指标相关性。结果:Spearman相关分析显示,造模2周时,超声学评分结果与血清MMP-3、病理学评分、膝关节软骨Ⅱ型胶原、骨形态发生蛋白的表达成正相关(P<0.05),相关系数分别为0.662、0.685、0.698、0.784;造模4周时,相关系数分别为0.762、0.752、0.717、0.802。结论:超声诊断对木瓜蛋白酶致早期兔膝骨关节炎模型具有确切诊断价值。     

MMP-13、TIMP-1在兔骨关节炎模型的表达及其意义

目的 评价切断家兔膝关节内侧副韧带、前交叉韧带,切除内侧半月板制作骨关节炎模型的方法的可行性;研究MMP-13、TIMP-1在软骨退变过程中的病理作用.方法 30只实验家兔随机平均分成3组,左侧膝关节仅打开后缝合作为自身对照,右侧膝关节制作骨关节炎模型.分别在术后4w、8w、12w处死动物,观察关节软骨的病理变化并按照标准给予评分.检测MMP-13、TIMP-1的蛋白表达.结果 三组模型的实验侧关节软骨退变程度随造模时间延长而逐渐加重.MMP-13、TIMP-1分别在术后4w、8w表达最强.MMP-13、TIMP-1积分光密度值比值逐渐减小.结论 MMP-13、TIMP-1在骨关节炎软骨退变过程中起着重要的作用.MMP-13/TIMP-1比值的大小与软骨退变程度成负相关,可以作为反映软骨退变程度的参考指标.     

益气化瘀补肾方对兔膝骨关节炎关节软骨细胞胶原和基质金属蛋白酶mRNA表达的影响

目的：探讨益气化瘀补肾方对兔膝骨关节炎（KOA）模型软骨细胞Ⅱ型前胶原基因（Col2A1）、X型胶原基因（ColX）及基质金属蛋白酶-13（MMP-13）mRNA表达的影响。方法：36只新西兰兔随机分为假手术组、模型组和益气化瘀补肾方组,每组12只。模型组和益气化瘀补。肾方组家兔采用改良Hulth方法复制KOA模型,假手术组仅切开膝关节表面的皮肤。益气化瘀补肾方组家兔于造模4周后连续用药1个月。观察各组软骨病理形态学变化及Col2A1、ColX和MMP-13mRNA变化。结果：模型组关节软骨结构破坏较严重,而益气化瘀补肾方组家兔关节软骨退变较模型组明显减轻。益气化瘀补。肾方组家兔膝关节软骨Col2A1mRNA表达明显高于模型组（P〈0．01）,ColX、MMP-13mRNA表达明显低于模型组（P〈0．05,P〈0．01）,但与假手术组比较仍有显著性差异（P〈0．05,P〈0．01）。结论：益气化瘀补肾方可通过促进软骨合成Col2A1和抑制MMP-13及ColX胶原以延缓KOA家兔关节软骨的退变。     

参麦注射液关节腔注射对兔膝骨关节炎IL-1β、IL-6、TNF-α表达的影响

目的 研究参麦注射液对兔膝骨关节炎模型的干预作用,并探讨其作用机理.方法 行前交叉韧带切除法(ACLT)复制兔膝骨关节炎模型,予膝关节腔注射参麦注射液、透明质酸钠4周后,取膝关节液及关节软骨组织,用ELISA法检测关节液白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,RT-qPCR检测关节软骨组织IL-1β、IL-6、TNF-α基因表达.结果 与正常对照组比较,模型组关节液IL-1β、IL-6和TNF-α的表达均明显升高(P＜0.01),软骨组织IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达均明显升高(P＜0.01);与模型组比较,参麦注射液组和透明质酸钠组关节液IL-1β、IL-6和TNF-α表达均显著降低(P＜0.01),软骨组织IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA均显著降低(P＜0.05).参麦注射液组与透明质酸钠组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 参麦注射液对兔膝关节软骨有一定的保护作用,其作用机制与下调关节液IL-1β、IL-6、TNF-α水平,降低软骨组织IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达有关.     

“舒筋”手法对家兔膝骨关节炎模型关节液中1L-1β、5-HT、β-EP的影响

目的观察"舒筋"手法对家兔膝骨关节炎模型中关节软骨病理改变及关节液中1L-1β、5-HT、β-EP含量的影响。方法家兔50只,按随机数表随机分为4组:空白组、模型组、玻璃酸钠组、"舒筋"手法组(以下简称手法组),每组12只。模型组、玻璃酸钠组、手法组采用关节腔注射木瓜蛋白酶方法复制膝骨关节炎模型,验证模型复制成功后,给予玻璃酸钠组家兔消关节腔注射玻璃酸钠5周,每周1次,给予"舒筋"手法组家兔进行"舒筋"手法治疗,隔日一次。模型组和正常组家兔不作处理。每组分别于第8周、第12周各处死6只家兔,肉眼及镜下观察膝关节软骨退变情况,并测定关节液中1L-1β、5-HT、β-EP的含量。结果(1)模型组与空白组比较,差异具有统计学意义(P0.05),说明造模成功。玻璃酸钠组,手法组与模型组比较,差异具有统计学意义(P0.05),说明璃酸钠组,手法组治疗有效。玻璃酸钠组与手法组比较,差异无统计学意义(P0.05)。(2)关节软骨观察中玻璃酸钠组、手法组改良Lequesne MG评分较空白组高;较模型组明显降低。(3)关节液中1L-1β、5-HT、β-EP检测:模型组、玻璃酸钠组、手法组与空白组相比较,1L-1β、5-HT、β-EP含量均明显升高(P0.05);玻璃酸钠组、手法组与模型组相比较,1L-1β、5-HT、β-EP含量明显降低(P0.05)。同一组内8周与12周相比,空白组、模型组无明显统计学差异,玻璃酸钠组、手法组均有所降低(P0.05)。结论 (1)KOA模型关节液中IL-1β、5-HT、β-EP异常升高,说明IL-1β、5-HT、β-EP与KOA发病有关;(2)玻璃酸钠组、手法组对KOA均有有治疗作用,可降低关节液中IL-1β、5-HT、β-EP的含量,且两者间无统计学差异。(3)手法组能明显降低兔膝骨关节炎关节液中IL-1β、5-HT、β-EP的浓度,有效阻止膝关节软骨的损伤,从而有效保护膝骨关节炎模型兔关节软骨,减轻疼痛,对兔膝骨膝关节发挥有效的治疗作用。     

乌头汤对膝骨关节炎大鼠细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3的影响

目的通过观察乌头汤对膝骨关节炎大鼠血清和关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α和MMP-3的影响,探讨其治疗膝骨关节炎的作用机制。方法采用随机数字法将60只SD大鼠分为空白组15只和造模组45只。造模组在第1、4、7天采用4%木瓜蛋白酶关节腔内注射复制膝骨关节炎模型。成功造模后,随机分为模型组、对照组和治疗组各15只。空白组和模型组灌服0.9%生理盐水;对照组灌服双氯芬酸钠缓释胶囊;治疗组灌服乌头汤。2周为1个疗程,疗程期间休息2d,共干预4个疗程。观察4组大鼠一般情况、关节液情况及血清和关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-3浓度变化。结果与空白组比较,模型组血清和关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α和MMP-3浓度明显升;与模型组比较,对照组与治疗组血清和关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α和MMP-3浓度均明显降;与对照组比较,治疗组血清和关节液中IL-6浓度明显升。结论乌头汤通过降低血清和关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α和MMP-3含量,抑制炎症反应,降低细胞外基质降解,减缓软骨退变,从而起到治疗KOA的目的。     

七叶亭对骨关节炎的修复作用

目的 :观察七叶亭对实验性骨关节炎关节液中一氧化氮 (NO)、前列腺素E2 (PGE2 )和软骨中基质金属蛋白酶 1(MMP 1)水平的影响 ,探讨七叶亭对骨关节炎的修复作用。方法 :2 4只日本大耳白兔随机分成对照组A、B和治疗组C、D。对照组A只行单侧膝关节切开术作假手术对照 ,对照组B及治疗组C、D均行单侧前交叉韧带切断术建立骨关节炎模型。治疗组C术后行小剂量 10 0mg·kg-1七叶亭腹腔注射 ,治疗组D术后行大剂量 2 0 0mg·kg-1七叶亭腹腔注射 ,对照组均给予生理盐水 ;8周处死 ,抽取关节液作NO、PGE2 测定 ,以免疫组织化学方法检测软骨中MMP 1的表达 ;对标本均行大体观察及光镜观察。结果 :治疗组软骨退变明显轻于对照组B ,MMP 1、NO、PGE2 含量明显低于对照组B ,治疗组D尤为明显。结论 :七叶亭能明显降低关节炎关节软骨中的MMP 1及关节液中的NO、PGE2 水平 ,减缓骨关节炎的发生。     

制动致兔关节软骨损伤修复过程中IL-17和MMP-3表达的研究

目的研究制动造成兔关节软骨损伤的修复过程中IL（白细胞介素）-17及MMP（基质金属蛋白酶）-3在关节液中的表达水平及二者的相关性,探讨IL-17及MMP-3对关节软骨修复的影响。方法通过兔伸膝制动动物模型,采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测制动4周（A）组、解除制动自由活动2周（B）组、4周（C）组、6周（D）组及空白对照（E）组兔关节液中IL-17及MMP-3的含量,且在HE染色光镜下观察关节软骨的组织形态学变化。结果随解除制动后自由活动时间的延长,关节软骨破坏逐渐减轻,软骨修复越明显,且关节液中IL-17及MMP-3的含量逐渐降低（P〈0.05）,二者呈明显的线性相关性（r=0.981,P〈0.05）。结论 IL-17及MMP-3在关节液中的含量与损伤软骨的修复程度密切相关,二者可作为评测关节软骨损伤修复程度的重要参考指标。     

超微肿痛贴对兔膝骨关节炎模型的软骨中JNK/p38 MAPK信号通路的影响

目的 观察超微肿痛贴对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型的JNK/p38 MAPK信号通路的mRNA及蛋白表达的影响.方法 将50只3月龄新西兰兔随机分为空白组、模型组、氟比洛芬凝胶贴膏组、超微肿痛贴组,每组各12只,除空白组外,其他3组均采用木瓜蛋白酶膝关节腔注射方式造模.造模成功后,...     

木瓜蛋白酶与石膏制动建立兔膝骨关节炎模型的比较

目的 比较木瓜蛋白酶关节腔注射与关节石膏伸直位制动建立兔膝骨关节炎模型的效果.方法 将21只实验兔采用随机区组分组法分为正常组、木瓜蛋白酶组及石膏组,每组7只.木瓜蛋白酶组予6%木瓜蛋白酶生理盐水溶液于实验开始第1、4、7天行右膝关节腔注射,注射结束4周后造模完成;石膏组予膝关节伸直位固定6周;记录实验期间动物不良情况发生率,造模完成后处死实验兔,取软骨标本进行大体观察、Pelletier评分、Mankin′s评分,免疫组化测定软骨Ⅱ型胶原蛋白含量, ELISA法检测血清和关节液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)以及基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的含量.结果 大体观察显示木瓜蛋白酶组与石膏组均出现关节肿胀、关节间隙变窄、软骨缺损、滑膜增生硬化、炎症改变、骨赘形成;Pelletier 评分、Mankin′s 评分、Ⅱ型胶原蛋白含量、血清和关节液中TNF-α、COMP以及MMP-3的含量,木瓜蛋白酶组、石膏组与正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);木瓜蛋白酶组与石膏组比较,上述指标差异均无统计学意义(P>0.05).木瓜蛋白酶组动物不良情况发生率明显低于石膏组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 木瓜蛋白酶关节腔注射与石膏关节伸直位制动均能成功建立膝骨关节炎模型,但木瓜蛋白酶关节腔注射法更为快捷、简便,并发情况少,可行性好.     

降钙素对兔膝骨性关节炎关节软骨细胞凋亡及NO含量的影响

目的:探讨降钙素对兔膝骨性关节炎关节软骨细胞凋亡及NO含量的影响。方法:将36只健康大耳白兔随机分为空白对照组(A组)、模型组(B组)和CT治疗组(C组),B、C两组采用改良Hulth法复制膝骨性关节炎模型,A组除切开皮肤和关节腔外,不做其他处理,从术后第6周开始C组每天皮下注射CT 5u/kg,A、B组给与等量生理盐水皮下注射,连续注射20d后处死动物。观察降钙素对兔膝骨性关节炎关节软骨病理形态、关节软骨细胞凋亡情况及NO含量的影响。结果:与A组相比较,B组JP和Mankin’s评分明显升高,关节软骨损伤明显加重,血清及关节液NO含量和软骨细胞凋亡百分数均明显升高;与B组比较,C组JP评分和Mankin’s评分明显降低,软骨损伤明显减轻,血清及关节液NO含量和软骨细胞凋亡百分数均明显降低。结论:CT可能通过降低NO含量而减轻KOA的软骨损伤,对KOA起治疗作用。     

膝骨性关节炎患者滑膜和滑液中基质金属蛋白酶-3表达水平的研究

目的比较骨性关节炎和半月板损伤患者关节滑膜和滑液中基质金属蛋白酶-3的表达,探讨OA的发病机制。方法收集骨性关节炎患者关节滑膜和滑液43例,以单纯半月板损伤患者的关节滑膜和滑液45例为对照;采用免疫组织化学染色法,观察骨性关节和半月板损伤患者关节滑膜MMP-3阳性表达强度;采用ELISA法检测两种滑液标本基质金属蛋白酶-3的水平。结果MMP-3在OA滑膜组织中的表达与对照组相比差异有统计学意义（P（0.01）;MMP-3在OA滑液中的水平与对照组相比差异也有统计学意义（P（0.05）;MMP-3在OAX线分级为I度的关节滑膜和滑液中的表达和II度相比无统计学意义（P〉0.05）。结论MMP-3在OA发生发展中扮演着重要的角色。     

富血小板血浆对兔骨关节炎软骨中基质金属蛋白酶-13表达的影响

目的 探讨富血小板血浆(platelet-rich plasm,PRP)抑制兔骨关节炎软骨表达基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达而发挥软骨保护作用。方法 选取30只成年清洁级新西兰大白兔,采用数字表法随机分为对照组、关节炎组、PRP组,每组各10只。关节炎组和PRP组按Hulth法制备后肢左膝关节炎模型,对照组行假手术。造模后第1周开始,各组抽取耳缘静脉血制备PRP 0.2 mL,仅PRP组给予关节腔注射。至第6周处死实验动物,获取各组左膝关节,分别行软骨组织HE染色测量软骨厚度,免疫组织化学染色计数MMP-13阳性细胞数,免疫荧光及Western blotting法检测MMP-13表达量。结果 对照组显示关节软骨形态接近正常,关节炎组软骨破坏明显,而PRP干预组较关节炎组,关节厚度得以保留,MMP-13阳性细胞及其表达量明显受到抑制。结论 PRP可减少MMP-13软骨细胞的数量和抑制MMP-13表达而发挥软骨保护作用。     

青藤碱对膝骨性关节炎兔关节液及血清白细胞介素1β含量的影响

目的：探讨关节腔内注射青藤碱对膝骨关节炎兔关节液及血清中白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）含量的影响。方法：除正常对照组（n=4）外，36只免采用左后肢膝关节伸直位石膏管型制动法建立兔骨关节炎模型。造模6周后青藤碱组兔关节腔内注射青藤碱，1次／N，连续5周，透明质酸组关节腔内注射透明质酸，模型组关节腔内注射生理盐水，正常组不治疗。分别于治疗前及治疗后采用酶联免疫吸附测定法检测关节液及血清IL-1β含量，并对软骨组织进行Mankin评分。结果：与模型组比较，青藤碱组骨性关节炎兔血清及关节液中IL-1β含量下降（P〈0．01），且青藤碱组低于透明质酸组（P〈0．05）。青藤碱组的软骨Mankin评分明显低于透明质酸组（P〈0．05）。结论：青藤碱可能通过抑制关节液及血清中IL—1β表达降低兔骨性关节炎模型的关节退变程度。     

强力霉素对制动兔骨关节炎模型对侧膝关节早期退变的影响

目的：研究口服强力霉素对制动兔骨关节炎模型对侧膝关节早期退变的影响及作用机制。方法：36只新西兰大白兔随机分为空白对照组,模型对照4、8、12周组,给药8、12周组。模型组与给药组均给予石膏固定左下肢。石膏固定4周后,给药组给予强力霉素。分别在8周、12周处死动物,观察指标包括：软骨大体形态、软骨man—kin评分、软骨Ⅱ型胶原、uPA、MMP-13。结果：与模型对照组比较,给药组软骨面光滑,mankin评分较低,Ⅱ型胶原含量较高,uPA、MMP-13活性较低（P〈0．01）。结论：强力霉素对制动兔骨关节炎模型对侧膝关节软骨早期退变有缓解作用,作用机制与抑制MMP-13、uPA的表达有关。