基于指纹图谱及主成分分析法评价秦巴山区连翘的质量

摘要：目的:建立连翘药材的超高效液相（UPLC）指纹图谱,结合主成分分析法评价秦巴山区连翘的质量。方法:采用UPLC法,流动相2 ml·L-1甲酸水-乙腈梯度洗脱,获得13批连翘药材指纹图谱,进行相似度评价,确定共有峰,以连翘苷为参照峰,采用SPSS 19.0软件进行主成分分析。结果:13批连翘药材的UPLC指纹图谱有5个共有峰,相似度为0.732～0.944。经主成分分析,2个主成分因子的累计方差贡献率为87.674%,以S12（湖北十堰郧阳区）药材样品的主成分因子综合得分最高,整体质量最好。结论:秦巴山不同地区连翘存在一定质量差异,通过指纹图谱与主成分分析相结合,可为连翘药材的质量控制及开发应用提供参考依据。     

红外光谱三级鉴别法联合高效液相色谱-质谱法研究不同采收期黄芩药材的质量

目的:研究不同生长期春秋两季采收黄芩药材中有效成分种类及含量的差异,为确定黄芩的最佳采收期提供技术支持。方法:对赤峰产黄芩不同采收期药材样品(一年、二年、三年生长期,在各年份的春季和秋季分别采挖),应用红外光谱三级鉴别技术(IR-TL)分析其整体成分构成变化,以高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)分析药材中6种黄酮类成分(千层纸素A、白杨素、黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷)含量的变化。结果:IR-TL分析结果显示,不同生长期黄芩所含黄酮类、苷类、糖类、酯类等成分均有所不同,其中二年生黄芩中的苷类物质含量最高、药材质量更稳定;6种黄酮类成分含量测定结果显示,不同采收期对上述指标成分含量有较大影响,其中二年生春季采收样品的整体含量高于同年份秋季采收样品。结论:本研究可为黄芩药材质量的控制提供可靠的分析方法;二年生长期春季采收可能为黄芩的最佳采收时间。     

基于GC-MS和UPLC技术的河北产北苍术野生品与栽培品的比较研究

目的：研究河北产野生北苍术和栽培北苍术药材化学成分的异同。方法：水蒸气蒸馏法提取北苍术野生及栽培品药材的挥发油,GC-MS技术对挥发油成分进行分析,UPLC技术对样品中苍术素含量进行测定,并利用SPSS26.0软件对所测定的6份野生及栽培北苍术样品进行聚类分析。结果：北苍术野生品和栽培品的挥发油总含量均在2%左右;3个不同产地栽培品样品挥发油共鉴定出39种成分,其中共有成分34种,相对含量总和在总挥发油中占比90%以上,含量最高的挥发性成分为β-桉叶醇、苍术素和苍术酮。3个野生样品挥发油共鉴定出39种成分,其中共有成分20种,挥发油主成分β-桉叶醇和苍术素在各样品中含量差异较大。栽培品中苍术酮含量明显高于野生样品,栽培品中均含有一定量的香樟烯,该成分在野生品中未检测到。UPLC检测6份样品中指标性成分苍术素含量均能达到药典“不得少于0.30%”的标准。结论：河北产栽培北苍术指标性成分苍术素含量均能达到药典标准,栽培品总挥发油含量与野生品差别不明显,且挥发油的化学组成较稳定,野生样品之间挥发油含量和组成差异较大,可利用苍术酮和香樟烯来区分北苍术野生品和栽培品。     

四消丸HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的:建立四消丸HPLC指纹图谱方法,为评价其质量提供参考。方法:采用Waters Symmetry Shield TM RP₁₈色谱柱;乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速1.0mL·min^-1;柱温30℃;检测波长254nm;进样量10μL。通过相似度评价、聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析对6家生产企业不同批次的四消丸样品进行质量评价和分析。结果:6家生产企业17批样品共标定24个共有峰,相似度为0.747~0.972,并对24个色谱峰进行了药味归属,同时指认了12个色谱峰;通过聚类分析及主成分分析将所有样品分为2类;偏最小二乘判别分析筛选出包括大黄素甲醚、大黄素葡萄糖苷、大黄素等在内的8种质量差异标志物。结论:该方法操作简便、准确,可用于四消丸的质量控制和评价研究。     

基于主成分和聚类分析区分牡丹皮药材的差异性

目的：采用主成分和聚类分析对16批不同产地的牡丹皮药材进行分析,比较不同批次之间的差异。方法：选取每批牡丹皮药材色谱图中峰面积＞总面积1%的色谱峰作为变量,用SPSS 13.0软件进行主成分和聚类分析。结果：根据色谱图提取出3个主成分,累积贡献率84.011%,可基本描述30个变量的变异情况,不同产地的牡丹皮实现了良好的区分,共聚成四类。主成分分析和聚类分析的结果与牡丹皮药材产地有较好的一致性。结论：与指纹图谱相比,主成分和聚类分析对药材差异的区分更有效。     

小金胶囊的HPLC指纹图谱建立及主成分分析

目的:建立小金胶囊的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并进行主成分分析。方法:采用HPLC法。色谱柱为Agilent TC-C_(18)(2),流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为240 nm,柱温为25℃,进样量为20μL。以11-羰基-β-乙酰乳香酸为参照,绘制15批样品的HPLC图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2004 A版)进行相似度评价,确定共有峰,并采用Minitab 17.0软件进行主成分分析。结果:有1批样品相似度小于0.800,且与其他14批样品比较缺13、14、15号共有峰,可能存在质量差异而未进行相关分析。其余14批样品的HPLC图谱有15个共有峰,指认了3个色谱峰,分别为槲皮素、穗花杉双黄酮、11-羰基-β-乙酰乳香酸;14批样品的相似度为0.889～0.990。经主成分分析,2个主成分因子的累积方差贡献率为94.4%,样品中8、9、11、12、14号共有峰(特别是8、9号共有峰)对应成分的含量变化是导致样品质量差异的重要原因。结论:所建指纹图谱及主成分分析结果可为小金胶囊的质量评价提供参考。     

基于HPLC-Q-Exactive Orbitrap/MS技术分析我院不同剂型扶正方的差异化学成分

目的：为探讨不同剂型对我院协定处方"扶正方"代谢物合成积累的影响，采用高效液相色谱-串联四级杆轨道阱质谱（HPLC-Q-Exactive Orbitrap/MS）结合多元统计分析技术对传统扶正方中药饮片和扶正方配方颗粒的差异化学成分进行研究。方法：基于HPLC-Q-Exactive Orbitrap/MS代谢组学技术，结合软件数据库搜索进行成分鉴定。采用主成分分析主成分分析（PCA），偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）和正交最小二乘法判别分析（OPLS-DA）等方法筛选和鉴定差异化学成分。结果：结果显示，传统扶正方中药饮片和扶正方配方颗粒样品中化学成分能够显著区分，在正、负离子模式下分别找到124个和59个差异化学成分，这些差异化学成分主要集中在黄酮、有机酸、脂肪酸和氨基酸类化合物中且呈现不同的变化规律，主要涉及类黄酮生物合成及黄酮和黄酮醇生物合成2条代谢通路。结论：该结果可为揭示不同剂型对扶正方代谢物合成积累的影响规律提供基础资料。     

枳实、枳壳挥发油化学成分及抑菌活性的比较研究

目的:对比分析不同生长期枳实、枳壳挥发油成分差异,比较不同生长期枳实、枳壳挥发油的抑菌活性。方法:采用药典甲法提取挥发油,通过GC-MS分析枳实、枳壳挥发油的组成;结合枳实、枳壳挥发油的成分差异,对二者挥发油的抑菌活性进行了初步比较研究。结果:枳壳挥发油的抑菌活性总体上较枳实挥发油强。结论:同一来源的枳实、枳壳因生长期不同,挥发油成分和抑菌活性均存在差异。     

藤络宁胶囊指纹图谱的建立及化学模式识别研究

摘要：目的:建立藤络宁胶囊HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别方法评价藤络宁胶囊的质量。方法:采用Agilent 5 TC-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5μm）进行色谱分离,流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,流速为1.0 ml·min-1,柱温30℃,检测波长345 nm,进样量为10μl。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）》对指纹图谱进行相似度评价,确定共有峰,结合聚类热图分析、主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析等模式识别方法,对不同批次藤络宁胶囊进行质量评价。结果:10批藤络宁胶囊HPLC指纹图谱有18个共有峰,相似度均在0.950以上;通过聚类分析将样品按不同批次分为2大类;主成分分析与聚类分析结果一致;最后采用正交偏最小二乘-判别分析筛选出了不同批次藤络宁胶囊的5个差异标志物。通过与对照品图谱比对,确定了3号峰为绿原酸、7号峰为东莨菪内酯、13号峰为丹酚酸B。结论:建立的指纹图谱方法稳定、可靠、重复性好,可用于藤络宁胶囊的质量控制。     

UHPLC-Q-TOF-MS技术结合多元统计分析研究菟丝子盐炙前后化学成分变化

目的:明确菟丝子的化学成分,进一步分析菟丝子盐炙前后的差异性成分并筛选出质量标志物。方法:采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q/TOF-MS)分别在正、负离子模式下采集菟丝子盐炙前后的样品数据,并结合PeakView 2.1(AB SCIEX)数据分析软件和主成分分析(PCA)以及t检验等统计分析方法,对盐炙前后菟丝子的化学成分进行分析。结果:共鉴别出39种成分,分别包括黄酮类成分20种、有机酸类成分10种、甾类化合物2种、生物碱类2种、其他类化合物5种。应用Smica 14.1软件结合t检验统计分析方法从中筛选出10种主要的差异性成分。结论:本研究系统地分析了菟丝子盐炙前后的化合物,为阐明菟丝子的物质基础以及炮制机理提供了理论依据。同时该研究也初步明确了菟丝子的质量标志物,为后续的菟丝子质量评价提供理论指导。     

UPLC-波长切换法同时测定双黄连注射剂中5种成分含量及差异性分析

目的 建立UPLC波长切换法同时测定双黄连注射剂［双黄连注射液、注射用双黄连（冻干）、双黄连粉针剂］中5种特征成分,并对87批样品（注射液63批,冻干剂15批,粉针剂9批）进行测定,对批次间、企业间及剂型间样品结果差异性进行分析。方法 样品经提取后,采用UPLC波长切换法,同时测定了绿原酸、咖啡酸、连翘酯苷A、黄芩苷、连翘苷5种特征成分,色谱柱 ：Waters HSS T3 C₁₈（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.3 mL·min^-1,绿原酸、咖啡酸及连翘酯苷 A检测波长为 324 nm,黄芩苷检测波长为 276 nm,连翘苷检测波长为228 nm;进行专属性、线性关系、精密度、重复性、准确度、稳定性方法学考察;取样品3批,分别按建立的方法、现行质量标准测定方法检测,对比2种方法的检测结果;采用建立的方法对87批样品进行测定。绘制各测定指标结果的频率分布直方图或箱式图,进行注射液不同企业间、批次间各成分含量差异性分析;绘制5个成分及绿原酸和咖啡酸总量的平均含量分布情况雷达图,进行不同剂型之间结果差异性分析;采用 minitab软件对 87批样品测定结果进行主成分分析。结果 建立 UPLC波长切换法经方法学考察符合要求;与现行质量标准测定方法比对,建立的方法检测结果无差异。注射液 2个生产企业样本数相当,绿原酸和咖啡酸总量的均值及离散程度无差异,但不同企业2种成分比例存在差别;黄芩苷、连翘苷及连翘酯苷A含量均值一致,离散程度一致,不同生产企业、不同批次间无显著性差异。雷达图结果显示,冻干剂与粉针剂工艺除干燥方式外完全一致,其绿原酸、咖啡酸、两者总量及黄芩苷含量比例落点几乎重合;连翘苷与连翘酯苷A在粉针剂中含量是冻干剂的近2倍,且批次间差异性大;纵向比较3个剂型,除连翘苷含量相近外,其余成分含量差别均较大。主成分分析结果显示,3个不同剂型被明显区分,现行质量标准控制项目越多的剂型,样品越集中。结论 建立的方法准确可靠,在多样本测定的基础上为标准统一及药品质量标准制定的合理性提供参考。     

基于指纹图谱结合化学计量学方法评价荆芥穗质量

建立HPLC指纹图谱、多指标成分含量测定及化学模式识别的荆芥穗药材质量控制评价方法,为药材的质量控制提供依据。采用高效液相色谱法对收集得到的25批次荆芥穗药材进行化学成分分析,建立指纹图谱共有模式,共标定22个共有色谱峰,其相似度均在0.9以上。通过聚类分析将样品按不同产地分为3类;主成分分析与聚类分析结果一致;最后采用正交偏最小二乘-判别分析筛选出了不同批次荆芥穗药材的5个差异标志物,通过对照品指认,确定了9号峰为橙皮苷、10号峰为迷迭香酸、13号峰为金合欢素-7-O-葡萄糖、14号峰为槲皮素、20号峰为胡薄荷酮。本研究建立的质量评价方法稳定可靠,适用于荆芥穗药材的质量控制。     

不同生长阶段白花蛇舌草高效液相色谱指纹图谱及化学模式识别

目的 建立生长期、开花期、结果期3个生长阶段白花蛇舌草的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并结合化学模式识别技术评价其质量。方法 色谱柱为Shiseido Capcell Pak MG CⅡ-C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.15%醋酸溶液(梯度洗脱),流速为0.9 mL/min,检测波长为238 nm(去乙酰车叶草酸酐和车叶草苷)、306 nm(4-香豆酸)、323 nm(阿魏酸)、369 nm(槲皮素、芦丁及山柰酚),柱温为30℃,进样量为10μL;并采用SPSS 24.0统计学软件和SIMCA 16.0软件对HPLC指纹图谱进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)。结果 HPLC指纹图谱共标定出白花蛇舌草的17个共有峰,并指认出7个色谱峰。PCA结果显示,白花蛇舌草3个生长阶段的综合质量排序为结果期>开花期>生长期。OPLS-DA模型可将3个生长阶段的样品进行分类,并筛选出导致不同生长阶段含量差异的6个标志物,分别为峰13、峰12(阿魏酸)、峰4、峰16(槲皮素)、峰3(去乙酰车叶草酸酐)...     

基于液相色谱及网络药理学的滇龙胆质量标志物(Q-marker)预测分析

滇龙胆(Gentiana rigescens Franch.)是我国的特色药用植物,具有抗炎、保肝等功效。目前,对于滇龙胆特征成分的含量测定方面研究较少,因此有必要建立科学有效的质量控制方法;本研究建立了高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,通过文献查阅及特征图谱指认,筛选滇龙胆质量标志物(Q-marker)的来源范围。网络药理学分析成分的有效性及其所对应的靶点和通路,绘制“成分-靶点-通路”图。HPLC定性和定量分析筛选组间差异的主要标志成分,最终确定滇龙胆的质量标志物;文献和HPLC特征图谱确定了5种环烯醚萜类成分为滇龙胆质量标志物的主要来源范围。多产地滇龙胆的网络药理学(有效性)和定性定量(检测性)分析确定獐芽菜苷、龙胆苦苷、獐芽菜苦苷3种成分可作为主要标志性成分,且不同产地间成分含量差异显著;通过网络药理学和指纹图谱对不同产地滇龙胆进行分析,确定可作为其潜在质量标志物的成分,为后期滇龙胆的质量控制提供充分的理论依据。     

基于主成分分析和判别分析的广地龙产地溯源研究

目的:通过测定不同产地的广地龙中多种金属元素含量,运用主成分分析和判别分析准确溯源广地龙的生产产地。方法:采用电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)和电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)对6个产地60个广地龙(又称参环毛蚓)样品(安徽AH,河南商水HNSH,江苏盐城JSYC,上海奉新SHFX,上海康桥SHKQ,上海泥城SHNC)中的25种元素含量进行了测定,并通过SPSS26软件对结果进行标准化,消除各元素间量纲差异,再对其进行主成分分析。结果:可以将25个指标元素提取5个主成分,方差贡献率达84.6%,基本保留了原变量的大部分信息。以5个主成分为原始变量,建立判别典型函数,利用判别典型函数可以对6个不同产地的60个广地龙样品100%进行正确判别。结论:该方法可为不同产地的广地龙溯源研究提供新方法。     

贵州不同产地女贞属苦丁茶挥发油化学成分的GC-MS分析

目的:分析贵州不同产地女贞属苦丁茶的挥发油化学成分。方法:采用水蒸气蒸馏法提取苦丁茶挥发油,运用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对挥发油成分进行分离鉴定,并采用面积归一化法确定各成分的相对百分含量。结果:从4种苦丁茶样品的挥发油中共鉴定出162个化学成分,有13个共有成分。4种样品中含量最高的2个成分均为沉香萜醇和α-萜品醇。结论:不同产地女贞属苦丁茶挥发油的含量及化学成分组成具有较大差异。本试验可为进一步开发利用女贞属苦丁茶提供科学依据。     

牛膝和川牛膝药材的特征提取与图像识别

目的:提取牛膝和川牛膝药材的特征,并建立其图像识别方法。方法:采用MATLAB软件编程拼接牛膝和川牛膝药材的横切面显微图像,提取颜色、不变矩、纹理和横切面维管束组织特征;将数据整理成数据矩阵,通过Zscore函数对数据矩阵进行标准化,通过Princomp函数进行主成分分析;采用BP神经网络识别模式。结果:药材样品显微图像拼接处的组织细节保持完整;测得每组药材样品图像的27个特征参数,经主成分分析,选取11个主成分参数建立BP神经网络,两种近缘药材样本(n=50)的BP神经网络平均识别率为100%。结论:该方法可用于中药材显微图像自动拼接,及牛膝和川牛膝药材的图像识别。     

地瓜藤的UPLC指纹图谱建立及聚类分析、主成分分析

目的:建立地瓜藤的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱。方法:采用UPLC法。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEF C18,流动相为0.2%乙酸水溶液-乙腈(梯度洗脱),检测波长为254 nm,流速为0.1 mL/min,柱温为25℃,进样量为2μL。以14号峰为参照,绘制10批地瓜藤药材样品及2批混淆品的UPLC指纹图谱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)进行相似度评价,确定共有峰;采用SPSS 20.0软件进行聚类分析,运用SIMCA 13.1软件进行主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析。结果:10批地瓜藤药材样品共有28个共有峰,相似度在0.839～0.935之间,2批混淆品的相似度分别为0.503、0.173,表明本方法可区别地瓜藤与混淆品。聚类分析和主成分分析结果均显示,10批地瓜藤药材样品可聚为2类,S3～S5、S9、S10聚为一类,其余聚为一类。正交偏最小二乘法判别分析结果显示,共筛选出变量投影值>1的7个成分,这7个成分可能是引起10批地瓜藤药材样品质量差异的主要成分。结论:所建指纹图谱及聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析可用于地瓜藤药材的鉴别和质量控制。     

傅里叶变换红外光谱-排序法鉴别土茯苓真伪的研究

目的 建立中成药土茯苓饮片的质量分析方法. 方法 采用水平衰减全反射傅里叶变换红外光谱（HATR-FTIR）法直接测定法获得样品的FTIR,以样品粉末作为比较标准,分别选取31组具有代表性吸收峰的吸光度数据为基础,以样品为分析对象进行主成分分析. 应用主成分析法比较了正伪品之间的差异程度. 结果 FTIR的主成分分析在反映同属不同种及不同属或科植物化学组成差异程度上具有应用价值. 结论 采用FTIR直接测定法并结合主成分分析应用于土茯苓的质量分析,简便、快速、准确,而且不需制备样品.     

基于HPLC指纹图谱及主成分分析的金蝉花不同溶剂提取物的化学组分研究

摘 要 目的：基于HPLC指纹图谱、主成分分析法（PCA）对金蝉花不同溶剂提取物的化学组分进行分析。方法: 采用HPLC法构建金蝉花不同溶剂提取物的指纹图谱,同时应用PCA和相似度分析软件对实验数据进行处理,找出6种不同溶剂提取物样品的相似性和差异性。色谱柱为Inertsil ODS-SP（250 mm×4.6 mm,5 μm）,柱温：25℃,检测波长：260 nm,流动相为甲醇 水梯度洗脱,流速：1.0 ml·min^-1。结果: 建立了金蝉花不同提取物共有模式图谱,相似度为0.760～0.988。主成分分析结果筛选出累计贡献率达到93.245%的3个主成分,以它们计算所有样本的综合得分,对金蝉花不同溶剂提取物进行排序,水提物化学组分最为丰富。结论:HPLC指纹图谱结合主成分分析可以对金蝉花不同溶剂提取物的化学组分进行客观、有效评价。