河南汉族精神分裂症患者线粒体DNA7445和5178位点突变分析

目的：了解线粒体DNA(mtDNA)7445、5178位点突变与河南汉族精神分裂症发生之间的关系。方法：应用PCR-限制性片段长度多态性技术结合直接测序的方法对随机抽取的无亲缘关系的296例精神分裂症患者和305例正常人进行mtDNA 7445和5178位点突变检测。结果：在精神分裂症患者组中发现mtDNA 5178 ...     

线粒体DNA tRNALeu(UUR)基因A3243G点突变糖尿病病人的监测

①目的 调查青岛地区糖尿病人群中线粒体DNA tRNALeu(UUR)基因np3243A→G点突变糖尿病流行情况，评价所用方法检测该点突变的灵敏度。②方法 制定调查人选条件，选择可疑病例。由外周血白细胞提取基因组DNA。基因检测采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)技术。③结果 糖尿病病人中该点突变检出率为5‰，在可疑病人中为14‰，在高危人群中为200‰。通过增加电泳上样量可以检测到7％的突变比例。④结论 该点突变在糖尿病人群中有一定流行。高危人群检出率高，提示对线粒体基因突变糖尿病的高危人群进行基因诊断非常必要。PCR—RFLP结合大的电泳上样量可以提高检测灵敏度。     

线粒体DNA3243、3316点突变与中国云南2型糖尿病的关系（摘要）

目的：研究中国云南2型糖尿病人群中线粒体水．NA^Leu（UUR）基因nt3243A／G突变和ND-1基因nt3316G／A突变的发生频率及其与2型糖尿病的相关性．寻求准确、快速、简易的临床糖尿病基因诊断技术．对象及方法：随机选择225例中国云南2型糖尿病患者和195例无糖尿病家族史的健康对照者作为研究对象．通过聚合酶链反应及限制性片断长度多态性分析（PCR-RFLP）检测tRNA^Leu（UUR）基因3243A／G突变和ND-1基因3316G／A突变，并经DNA直接测序确证.     

线粒体基因ND1/T3394C突变与糖尿病

【目的】调查线粒体NADH脱氢酶亚单位 1(ND1)基因的T3394C位点突变与中国人糖尿病的发病情况。【方法】随机收集 338例无血缘关系的糖尿病患者及 2 6 2例正常对照组 ,用聚合酶链反应扩增、限制性内切酶HaeⅢ消化进行突变筛查 ,DNA序列分析确认。【结果】糖尿病患者中T3394C突变者共 8例 (2 37%) ,正常对照组中只有 1例 (0 38%,P <0 0 1)。糖尿病突变患者中 4例有糖尿病家族史 ,4例病人由于胰岛素分泌功能下降和 /或出现并发症 ,需用胰岛素治疗。【结论】ND1/T3394C突变在糖尿病患者中的发生率明显高于正常对组 ,提示这个位点突变可能是导致线粒体糖尿病的易感基因之一。     

线粒体DNA 3243、3316点突变与中国云南2型糖尿病的关系(摘要)

目的:研究中国云南2型糖尿病人群中线粒体tR-NALeu(UUR)基因nt 3243A/G突变和ND-1基因nt3316G/A突变的发生频率及其与2型糖尿病的相关性.寻求准确、快速、简易的临床糖尿病基因诊断技术.对象及方法:随机选择225例中国云南2型糖尿病患者和195例无糖尿病家族史的健康对照者作为研究对象.通过聚合酶链反应及限制性片断长度多态性分析(PCR-RFLP)检测t RNALeu(UUR)基因3243A/G突变和ND-1基因3316G/A突变,并经DNA直接测序确证.结果:225例2型糖尿病患者及195例对照者中无1人携带线粒体3243A/G突变;225例2型糖尿病患者中检出线粒体3…     

线粒体DNA3316、3394等4个突变位点与2型糖尿病的关系研究

目的:探讨DNA tRNA Leu(UUR)基因及ND-1基因3316 G/A、3394 T/C等4个突变位点与2型糖尿病的关系。方法:对236例海南地区2型糖尿病患者和252例健康对照者进行空腹血糖测定并采用聚合酶链式反应—限制性核酸内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)的分析方法进行mtDNA的3243、3316、3394、和3593共4个位点进行突变筛选,并采用DNA测序方法确证。结果:实验组空腹血糖(9.37±3.01)mmol/L与健康对照组(4.96±0.76)mmol/L差异有统计学意义(P<0.05);实验组检出3316(G→A)突变8例,3394(T→C)突变3例;健康对照组未发现上述突变;突变检测结果与测序一致。两组间3316(G→A)突变率差异有统计学意义(P<0.05)。结论:线粒体DNAtRNALeu(UUR)基因及ND-1基因3316、3394位点的基因突变,尤其是3316位点(G→A)突变可能与某些核基因或环境因素协同促进了2型糖尿病的发生。     

一个线粒体基因突变糖尿病家系的三年随访研究

目的探讨线粒体基因tRNALeu(UUR)m t3243A→G突变糖尿病的临床特征及病情演变。方法回顾性分析一线粒体基因tRNALeu(UUR)m t3243A→G突变糖尿病家系成员共10例,随访3年,观察其临床特点及胰岛功能变化。结果随访3年后tRNALeu(UUR)m t3243A→G突变者体质指数、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)较随访前显著下降,1例出现耳聋症状加重,2例出现了蛋白尿,2例演变为糖尿病,3例进展为糖耐量异常(IGT),其中1例突变阳性者新生1女也为该基因突变阳性。结论线粒体基因tRNALeu(UUR)m t3243A→G突变者是糖尿病的高危人群,易演变为IGT或糖尿病,其临床表现呈一定的异质性。     

线粒体DNA ND1基因G3316A突变与2型糖尿病相关性研究

目的 研究浙江台州地区汉族人群线粒体DNA ND1基因中G3316A突变的发生率与2型糖尿病的相关性.方法 应用聚合酶链反应技术对无血缘关系的270例2型糖尿病患者和185例健康对照者的外周血DNA进行检测.结果 发现10例T2DM患者存在G3316A突变(3.70%),对照组中有1例突变(0.54%),G3316A在两组间比较有显著性差异(P＜0.05).结论 线粒体DNA ND1 G3316A突变可能与浙江台州地区汉族人群2型糖尿病的发生与发展有关.     

线粒体基因ND1／T3394C突变与糖尿病

目的：调查线粒体NADH脱氢酶亚单位1（ND1）基因的T3394C位点突变与中国人糖尿病的发病情况，方法：随机收集338例无血缘关系的糖尿病患及262例正常对照组，用聚合酶链反应扩谱，限制性内切酶Hae Ⅲ消化进行突变筛查，DNA序列分析确认。结果：糖尿病患中T3394C突变共8例（2．37％），正常对照组中只有1例（0．38％，P＜0．01），糖尿病突变患中4例有糖尿病家族史，4例病人由于胰岛素分泌功能下降和／或出现并发症，需用胰岛素治疗。结论：ND1／T3394C突变在糖尿病患中的发生率明显高于正常对组，提示这个位点突变可能是导致线粒体糖尿病的易感基因之一。     

线粒体DNA ND1基因3394 T→C突变与2型糖尿病

线粒体基因（mitochondrial DNA，mtDNA）是目前发现的除核基因以外惟一存在于人类细胞质中的DNA分子，具有自我复制、转录、和编码功能。mtDNA缺陷可导致胰岛素分泌障碍，从而参与糖尿病的发生。有关糖尿病与mtDNA基因突变的研究国内外均有报道，但结果不一。我们采用PCR-RFLP、DNA测序和结构预测的分析方法，对武汉地区95例2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）患者和168例健康对照mtDNA的ND1基因（np3307-4263）的3394（T-C）突变位点进行筛选检测。     

Detection of A3243G point mutation in mitochondrial DNA from 10 cases of MELAS

目的：对10例MELAS型线粒体脑肌病患者进行线粒体DNA A3243G点突变的检测。方法：用PCR-限制性内切酶分析法（restriction analysis）,检测10例MELAS患者及其8名母系亲属的肌肉和/或外周血细胞中有无mtDNA的A3243G点突变,并进行突变型mtDNA的定量。结果：在10例患者的肌肉和/血细胞中,均检测到A3243点突变。突变型mtDNA的比例在血细胞（7例）中为10.8％-47.8％,在肌肉（5例）中为39.4％-67.7％。有2例患者同时进行了肌肉和血细胞标本的检测,突变型mtDNA的比例肌肉组织均高于血细胞。在血细胞中,年轻患者的突变型比例通常较高。在1个家系中可证实为母系遗传 。但在3例先证者的母亲及2例先证者抽胞均未检测到此突变。结论：10例MELAS综合征患者均携有mtDNA A3243G点突变。在6个家庭中,只有1个家庭可证实为母系遗传,另外5个家庭中此突变可能为散发性,提示在中国人MELAS的发病机制中,mtDNAA3243G点突变为新生突变的居多。     

Heteroplasmy Level of the Mitochondrial tRNA^Leu（UUR） A3243G Mutation in a Chinese Family Is Positively Associated with Earlier Age-of-onset and Increasing Severity of Diabetes

Objective To investigate the mutations of mitochondrial genome in a pedigree with suspected maternally inherited diabetes and deafness and to explore the correlations between the mutations and clinical features. Methods Genomic DNA was isolated from blood leucocytes of each member of the pedigree. The mitochondrial genome was amplified with 24-pair primers that could cover the entire mitochondrial DNA. Direct sequencing of PCR products was used to identify any mitochondrial DNA mutations. Results Family members on the maternal side all harbored the tRNA^Lcu（UUR） A3243G mutation. The paternal side family members did not have the mutation. The age-of-onset of diabetes of the 4 maternal side family members was 15, 41, 44, and 65 years old, and their corresponding heteroplasmy level of the mutation was 34.5%, 14.9%, 14.6%, and 5.9%, respectively. The age-of-onset of diabetes and heteroplasmy level of A3243G mutation were negatively correlated with a correlation coefficient of -0.980（P=0.02）. Meanwhile, patient with high heteroplasmy level of A3243G mutation had relatively low severity of disease. Moreover, 6 reported polymorphisms and 2 new variants were found. Conclusions The main cause of diabetes in this pedigree is the tRNA^Lcu（UUR） A3243G mutation. However, other gene variants may contribute to its pathogenicity. The heteroplasmy level of the tRNA^Lcu（UUR） A3243G mutation is positively associated with earlier age-of-onset and increasing severity of diabetes.     

非综合征性耳聋儿童GJB2 235delC及线粒体DNA 12S rRNA A1555G突变分析

目的 对耳聋患儿进行GJB2基因、线粒体DNA A1555G位点突变检测,为遗传性耳聋提供诊断依据.方法 对195例耳聋患儿进行遗传性耳聋问卷调查、全面的体格检查、耳鼻咽喉专科检查以及听力学评估(包括纯音测听、脑干诱发电位和耳声发射).对195例非综合征性感音神经性耳聋患儿及100例健康对照个体分别进行GJB2基因235delC突变、线粒体DNA 12S rRNA基因A1555G点突变的限制性内切酶分析.结果 195例患儿者中发现GJB2基因235delc纯合突变、235delC与176-191del16复合及235delC与299-300delAT复合突变等共46例耳聋患儿与GJB2基因突变有关,占23.58%.病患组235delC等位基因频率为18.44%,对照组为2.00%(P<0.01).同时在患儿组还发现了7例线粒体DNA A1555G突变,对照组未发现线粒体DNA A1555G突变.结论 重庆市非综合征型耳聋患儿存在较高的GJB2基因235delC和线粒体DNA 12S rRNA基因A1555G突变发生率,高于全国平均水平.耳聋基因诊断技术可以应用在地区性耳聋病因调查中有重要的意义.对基因型-表现型相关性的研究对遗传性耳聋的治疗及预期疗效判断、遗传咨询、产前诊断等具有重要意义.     

氨基糖甙类抗生素致聋家系线粒体基因突变的分析

目的：探讨线粒体DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)突变与非综合征性遗传性耳聋的关系，并且建立相应的基因诊断方法。方法：调查并收集2个非综合征性耳聋家系、6个散发病例及25例正常个体的外周静脉血样本．从白细胞中提取DNA，聚合酶链反应扩增mtDNA目的片段，分别用BsmAⅠ、ApaⅠ及XbaⅠ限制性内切酶检测1555^G、3243^G、7445^G和del961Cn点突变，对相关的扩增片段进行基因测序。结果：酶切检测，两家系中全部12例的耳聋患者均为1555^G点突变阳性。家系中的其他成员、6例散发病例及25例正常人均为阴性，调查的所有个体(包括患者)3243^G、7445^G和del961Cn点突变均为阴性。mtDNA测序：酶切显示，1555G突变阳性病例均发现(nt)1555A→G转换，3243^G、7445^G及del961Cn点突变阴性。结论：1555^G点突变呈母系遗传；1555^G点突变在母系遗传非综合征型耳聋家系中有较高的发生率，在散发型病例中发生率较低：提示1555^G点突变是该类耳聋分子诊断的有用指标。     

线粒体基因16189 T/C突变性糖尿病的特点

目的：研究线粒体基因16189 T/C突变性糖尿病在中国北方人群中的特点。方法：采用聚合酶链反应（PCR）和限制性片段长度多态性（RELP）分析方法对中国北方155例2型糖尿病患者（糖尿病组）和164例正常中国北方人（对照组）进行核心家系线粒体基因筛检和分析。结果：①线粒体基因 16189 T/C 突变在糖尿病组占32.26%（50/155）,在对照组占15.24%（25/164）,二者比较差异有显著性（P<0.05）。②在糖尿病患者中线粒体基因16189 T/C 突变组（n=50）与非突变组(n=105)比较,空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（GHbA₁c）、空腹C-肽及餐后2 h C-肽,差异均无显著性。③线粒体基因16189 T/C突变的糖尿病患者临床特点多为50岁左右发病,男女发病率无明显差异（1.3∶1）;发病时体重指数常较高（74%的患者BMI超过标准值）;65%患者伴血脂代谢异常;具有明显的母系遗传倾向。结论：线粒体基因16189 T/C点突变可能仅为人群中的基因多态现象,还不能确定其为糖尿病单基因致病突变。     

非综合征型耳聋GJB2基因和mtDNA 12SrRNA A1555G位点的突变分析

目的:分析南京聋校散发性耳聋患者GJB2基因突变率和线粒体DNA(mtDNA)12SrRNA A1555G基因突变率.方法:收集聋校学生135名和健康对照人群162名外周血样本,PCR扩增GJB2和mtDNA 12SrRNA基因,通过限制性内切酶酶切鉴定突变热点,对PCR产物直接测序进行突变确定.结果:对GJB2检测结果显示:散发性耳聋患者样本中发现9种碱基改变(V27I、E114G、I203T V37I、176-191del16、235delC、299-300delAT、T123N和504insGCAA),其中235delC为主要突变方式,携带率为27.41%,其中纯合突变18例,杂合突变19例;162例正常对照中发现了15种碱基改变,其中4种为常见多态.散发聋135例和正常对照162例共计297例样本中未发现有mtDNA 12SrRNA A1555G位点突变存在;结论:GJB2基因突变是引起散发性非综合征耳聋患者听力损失发生的重要原因,不同人种GJB2基因的突变热点存在差异,235delC是GJB2基因在中国人中的主要致病突变位点;GJB2基因在人群中存在较多类型的突变和较多形式的多态性;在散发性耳聋中mtDNA 12SrRNA A1555G位点的突变率明显低于全国平均水平.     

浙江汉族人群线粒体DNA ND1基因G3316A突变与2型糖尿病

目的：研究与日本人2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）相关的线粒体DNA（mitochondria DNA,mtDNA）ND1基因G3316A突变在浙江汉族T2DM人群中的发生率及其临床意义。方法：采用PCR产物直接测序法对浙江籍汉族人群中无血缘关系的315名T2DM患者及158名正常对照的外周血mtDNA进行检测,并用DNASTAR和Antheprot 5.0软件分析突变位点。结果：在T2DM患者中检测到6例（占1.90%）G3316A突变,对照组中发现3例（占1.90%）突变,突变发生率在两组间差异无显著性（P＆gt;0.05）。携带G3316A位点突变的T2DM组与无该突变的T2DM组之间的临床特点（发病年龄、体重指数和血糖水平等）比较差异亦无显著性。蛋白二级结构中α-螺旋、β-折叠、β-转角和不规则卷曲的构成比没有发生改变。结论：线粒体DNA ND1基因G3316A突变可能与浙江汉族人群T2DM的发生无关,仅为人群中的基因多态性。     

中国汉族人群SNPH基因多态性与精神分裂症的关联研究

 目的 探讨伸展蛋白（syntaphilin,SNPH）基因与中国汉族人群精神分裂症（schizophrenia,SZ）之间的关联性。方法 采用TaqMan探针基因分型技术对389例SZ患者（病例组）和433例健康对照（对照组）的SNPH基因5个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）位点（rs3764714、rs3795139、rs3803947、rs3803949、rs6134520）进行基因分型及连锁不平衡分析。分析等位基因、基因型以及单倍型频率分布有无差异,比较两组不同遗传模式下基因型分布有无差异。结果 SNPH基因5个SNP位点连锁不平衡分析结果显示,5个位点可构成一个5个基因位点所组成的单倍型区块（D’>0.8）。5个基因所组成的单倍型A-A-A-C-T、G-A-G-T-T、G-G-G-C-C频率分布在病例组与对照组间差异无统计学意义（P=0.978、P=0.535、P=0.524）。SNPH基因5个SNP位点等位基因及基因型频率分布在病例组与对照组之间差异均无统计学意义。在共显性、显性、隐性及加性遗传模式下,该5个SNP位点基因型频率分布在病例组与对照组之间差异也无统计学意义。结论 在中国汉族人群中,SNPH基因可能不是SZ的易感基因。