兔的单引物PCR指纹分析

本研究结合ＤＮＡ指纹杂交和随机扩增多态性ＤＮＡ(ＲＡＰＤ)技术 ,探索了适用于动物基因组的操作简捷、快速以及敏感性可靠性强的分子标记方法———单引物ＰＣＲ指纹技术。应用单引物ＰＣＲ指纹技术 ,采用的 1条小卫星引物Ｍ13(5′ＧＡＧＧＧＴＧ ＧＣＧＧＴＴＣＴ3′)和 2条微卫星引物 { (ＧＴＧ) 5、(ＧＡＣＡ) 4}对Ｖｃ Ⅰ系、Ｖｃ Ⅱ系獭兔、日本大耳白兔 (ＺＤＢ)和青紫蓝 (ＱＺＬ)四个品系各8只 ,总计 32个个体的遗传结构进行了分析。根据结构应用ＰｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃＣｏｍｐｕｔｅｒＴｏｏｌｓ软件计算出四个品系间及 32个个…     

CHINESE JOURNAL OF LABORATORY ANIMAL SCIENCES INDEXES OF CONTENTS Vol.11 NO.1-4 2001

ＮＯ .1ＴｈｅＦｒｏｎｔｉｅｒｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ :ＭａｐｐｉｎｇｏｆＧｅｎｏｍｅｆｏｒＭｉｃｅＦＡＮＧＦｕｄｅ (5 )…………………ＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＮａｔｕｒａｌＣａｒｒｙｉｎｇＲａｔｅｏｆＨｅｐａｔｉｔｉｓＢＶｉｒｕｓｏｆＡｎａｓＰｌａｔｙｒｈｙｎｅｈｏｓＬｉｎｎａｅｕｓｆｒｏｍＴｗｏＦａｒｍｓｏｆＮａｎｈａｉＣｉｔｙｉｎＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅＺＯＵＹｉｈａｉ,ＺＨＡＮＧＷｅｉ,ＺＨＡＮＧＦｅｎｇｘｕｅ ,ｅｔａｌ (9)……………ＤＮＡＦ…     

克隆人胸腺素α原cDNA及RNA二级结构分析和带Xa因子的融？…

目的;克隆表达具有重要生物功能的胸腺素α原ｃＤＮＡ（ｈｕｍａｎ ｐｒｏｔｈｙｍｏｓｉｎα,ｈｕＰＴＭＡα）。方法：从健康中国人ＰＢＭＣｐｏｌｙ （Ａ）＾＋ＲＮＡ中采用ＲＴ－ＰＣＲ法克隆ｈｕＰＴＭＡα ｃＤＮＡ,并作ＲＮＡ二级结构分析。结果克隆出长度为３００ｂｐ,编码１００个氨基酸的ｈｕＰＴＭＡα ｃＤＮＡ,经氨基酸序列分析发现在３７－４１位缺失Ａｓｎ＾３７－Ｇｌｙ＾３８＝Ａｓｎ＾３９－Ａｌａ＾４     

An Analysis of 100 Cases of Obstructive Jaundice by CT Scans

ＡｎＡｎａｌｙｓｉｓｏｆ１００ＣａｓｅｓｏｆＯｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅＪａｕｎｄｉｃｅｂｙＣＴＳｃａｎｓ￥ＨｕａｎｇＱｉｎｊｕａｎ，ｅｔａｌ．ＡＣＴＡＡＣＡＤＥＭＩＡＥＭＥＤＩＣＩＮＡＥＮＡＮＪＩＮＧ，１９９４，１４（１）：６２－６４Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔ...     

氟伐他汀对高血压大鼠血管结构和功能的影响及机制

目的　探讨内源性胆固醇合成途径的限速酶－ＨＭＧ－ＣｏＡ 还原酶的抑制剂一氟伐他汀对高血压血管肥厚、血管功能和高血压进程的影响,并揭示其可能的作用机制。　方法　（１）雄性ＳＨＲ（ｎ＝ ２６）,从８周龄起予氟伐他汀（ｆｌｕｖａｓｔａｔｉｎ,Ｆｌｕ）２０ ｍ ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１灌胃,分别治疗８ 周和１６周,年龄、性别配对的未治疗的ＳＨＲ（ｎ＝ ２０）和ＷＫＹ（ｎ＝ １８）作对照。分别测定收缩压（ＳＢＰ）,血脂（ＴＣ、ＴＧ 和 ＬＤＬ－Ｃ）（ＣＨＯＤ－ＰＡＰ和ＧＰＯ－ＰＡＰ法）;进行血管组织形态学观察,测定血管壁（中膜）／腔面积（Ｗ／Ｌ）比;应用离体动脉环试验观察血管的功能变化。（２）以培养８周龄的ＳＨＲ 和ＷＫＹ 大鼠胸主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣｓ）为模型,观察（ｌ）两种不同的有丝分裂原－血管紧张素Ⅱ（Ａｎｇ Ⅱ） 和血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）对ＡＳＭＣｓ 增殖（细胞计数）和ＤＮＡ 合成（３Ｈ－ＴｄＲ掺入率）的影响。（２）Ｆｌｕ 对２０％ ＦＣＳ、ＡｎｇⅡ和ＰＤＧＦ促ＡＳＭＣｓ 分裂增殖的抑制作用及（３）胆固醇合成代谢中间产物甲羟戊酸（ｍ ｅｖａｌｏｎｉｃ ａｃｉｄ,Ｍｅｖａ）对Ｆｌｕ 抑制ＡＳＭＣｓ增殖和ＤＮＡ 合成的逆转效果。     

人卵巢颗粒细胞雌激素β型受体cDNA的克隆和序列分析

目的 测定和分析人卵巢颗粒细胞中雌激素β型受体（ＥＲβ）ｃＤＮＡ的核苷酸序列结构。方法 采用ＤＭＥＭ培养基、以ＰＥＲＣＯＬＬ方法从人体外受精卵泡液中制备颗粒细胞。根据ＴＲｌｚｏｌ Ｒｅａｇｅｎｔ试剂盒方法抽提ＲＮＡ,并在Ｄｉｓｐｏｃｏｌｕｍｎ柱中用寡聚（ｄＴ）纯化ｍＲＮＡ。用ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐ＾ＴＭⅡＲＴ试剂盒反转录ＰＣＲ合成ｃＤＮＡ。扩增产物与ｐＧＥＭ－Ｔ载体连接,并转化大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕ     

人脑胶质细胞来源神经营养因子基因的克隆及测序

为研究人脑胶质细胞来源的神经营养因子（ｇｌｉａｌｃｅｌｌｌｉｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ, ＧＤＮＦ） 在神经系统疾病中的作用,根据ＧＤＮＦ 的ｃＤＮＡ 序列设计并合成引物,以流产胎儿脑组织为来源,分别提取ＲＮＡ 和基因组ＤＮＡ 作模板,经ＲＴ ＰＣＲ 和ＰＣＲ 技术扩增人ＧＤＮＦ 基因片段,采用ＤＮＡ 重组技术将其克隆于ｐＧＥＭ Ｔ Ｅａｓｙ 载体中并测序。结果：ＲＮＡ 和基因组ＤＮＡ 体外扩增得到的片段均是４１０ ｂｐ ,两者无差异。ＰＧＥＭ ＧＤＮＦ 经酶切鉴定正确,测序结果与Ｇｅｎｅｂａｎｋ 比较基本相同。由于ＲＮＡ 和基因组ＤＮＡ 扩增得到的片段大小相同,证实该基因片段内无内含子插入,该片段可用于真核及原核表达。     

腺病毒介导的人p27kipl基因高表达对大鼠血管平滑肌细胞增殖？…

ｐ2 7ｋｉｐ1是近年发现的一个细胞周期负调节物 ,可以抑制细胞周期由Ｇ0 /Ｇ1期向Ｓ期过渡 ,本实验中我们构建了含人ｐ2 7ｋｉｐ1ｃＤＮＡ的重组腺病毒载体并将此在体外转染原代培养的大鼠血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣ) ,以此观察外源性ｐ2 7ｋｉｐ1基因导入对ＶＳＭＣ细胞周期及增殖的抑制作用。一、材料与方法1 主要试剂 :人全长ｐ2 7ｋｉｐ1ｃＤＮＡ由纽约ＭｅｍｏｒｉａｌＳｌｏａｎＫｅｔｔｅｒｉｎｇＣａｎｃｅｒＣｅｎｔｅｒＭａｓｓａｇｕｅ博士惠赠 ;真核表达载体ｐＣＩｃｃ、Ｅ1区替代的腺病毒载体ｐＡｘｌｃｗ由日本东京大学Ｓａｉ…     

An Epidemiological Study on the Relationship between Musculoskeletal Disorders and Work Load

ＡｎＥｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎＭｕｓｃｕｌｏｓｋｅｌｅｔａｌＤｉｓｏｒｄｅｒｓａｎｄＷｏｒｋＬｏａｄ￥Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴＡＮＧＣｉ－ｂｉｎ；ＣＡＩＲｏｎｇ－ｔａｉ；ＹＡＮＧＬｅｉ；ＺＨＡ...     

Strategies of myocardial protection during cardiac surgery.

ＳＴＲＡＴＥＧＩＥＳＯＦＭＹＯＣＡＲＤＩＡＬＰＲＯＴＥＣＴＩＯＮＤＵＲＩＮＧＣＡＲＤＩＡＣＳＵＲＧＥＲＹＣｈａｒｌｅｓＣ．Ｈｓｉ，ａｎｄＲｕｓｅｌＦ．ＳｔａｈｌＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｈｉｓｔｏｒｙ．Ｔｈｅａｂｉｌｉｔｙｔｏｐｅｒｆｏｒｍｃｏｍ...     

WANG Jianhua(王建华)——A Pioneer Pharmacologist in the Research of Spleen-Stomach in TCM

Ｉｎ 1 974,ｈｅｍｏｖｅｄｔｏＧｕａｎｇｚｈｏｕＵｎｉ ｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ（ＴＣＭ）ａｎｄｄｅｖｏｔｅｄｈｉｍｓｅｌｆｔｏｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐ ｍｅｎｔｏｆＳｐｌｅｅｎ ＳｔｏｍａｃｈｉｎＴＣＭ,ｔｈｅｇａｓ ｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ（ＧＩ）ｆｕｎｃｔｉｏｎａｎｄｄｉｓｅａｓｅｒｅ ｓｅａｒｃｈｉｎｔｈｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．ＡｓｔｈｅｈｅａｄｏｆＳｐｌｅｅｎ ＳｔｏｍａｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ,ｈｅｎｕｒｔｕｒｅｄｈｕｎ ｄｒｅｄｓｏｆｓｔｕｄｅｎ…     

刺五加注射液对重型颅脑损伤患者的疗效观察

重型颅脑损伤 (Ｓｅｖｅｒｅｃｒａｎｉｏｃｅｒｅｂｒａｌｉｎｊｕｒｙ ,ＳＣＩ)约占颅脑伤的 2 0 % ,病死率高达 2 0 %～ 5 0 % ,创伤后脑继发性缺血缺氧损害是重要原因 ,为救治重点[1～ 3] 。为探讨刺五加注射液 (Ｉｎｊｅｃｔｉｏａｃａｍｔｈｏｐａｎａｃｉｓｓｙｎｔｉｃｏｓｉ,ＩＡＳ)治疗重型颅脑伤的机制和效果 ,我们从 1997年 7月至 1998年 12月对 30例急性期ＳＣＩ伤者行ＩＡＳ治疗前后的临床 (Ｇｌａｓｇｏｗｃｏｍａｓｃａｌｅ ,ＧＣＳ)、血液流变指标 (ＨＩ)、ＢＥＡＭ、ＴＣＤ及预后 (Ｇｌａｓｇｏｗｏｕｔｃｏｍｅｓｃａｌ…     

CEA单抗介导的间接细胞毒作用

用活化的抗癌药物氨甲喋呤（ＭＴＸ）和羊抗鼠ＩｇＧ（ＳＡＭＩｇＧ）共价结合，制备ＳＡＭＩｇＧ－ＭＴＸ结合物，通过ＣＥＡ单抗（ＭｃＡｂ）的介导，ＳＡＭＩｇＧ－ＭＴＸ能选择性地杀伤ＣＥＡ＋细胞，其选择细胞毒作用是ＣＥＡＭｃＡｂ－ＭＴＸ结合物的２倍，提示间接导向治疗具有简便、经济、高效的特点。     

期刊文摘

ＯＰＧ与ＭＢＰ融合蛋白在大肠杆菌中的表达[刘继中 ,纪宗玲 ,陈苏民 ,胡蕴玉 ,李　毅 ,张晓楠 .细胞与分子免疫学杂志 ,2 0 0 2 ;18(6 ) :5 5 1 5 5 3]　　目的　克隆人骨保护素 (ＯＰＧ)成熟肽段编码区基因 ,并在大肠杆菌中表达 .方法　采用ＲＴ ＩＦＣ ,扩增人ＯＰＧ成熟肽段编码区ｃＤＮＡ ,并克隆入原核表达载体 ｐＭＡＬ ｃ2ｘ中 ,转化ＢＬ2 1(ＤＥ3)ＰｌｙｓＳ大肠杆菌感受态细胞 .经 0 .1ｍｍｏｌ·Ｌ-1ＩＰＴＧ诱导后 ,收集菌体蛋白 ,进行ＳＤＳ ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定 .结果　获得人ＯＰＧ成熟肽段编码区ｃＤＮＡ …     

Clinical observation on radio- or chemo-therapy plus traditional Chinese medicine in treating brain metastases

ｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｅｆｆｉｃａｃｙｏｆｒａｄｉｏｏｒｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｐｌｕｓｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅ（ＴＣＭ）ｂｙＳｙｎｄｒｏｍｅＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｉｎｔｒｅａｔｉｎｇｂｒａｉｎｍｅｔａｓｔａｓｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｆｏｒｔｙｏｎｅｐａｔｉｅｎｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｉｎｔｏｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓ：ＧｒｏｕｐＡｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｐｌｕｓＴＣＭ,ＧｒｏｕｐＢｗｉｔｈｒａｄｉｏｔ…     

Chelex-100一步法快速提取外周血DNA

分子生物学的快速发展,使ＤＮＡ的抽提成为实验室的一项日常工作。传统的酚、氯仿、乙醇抽提和沉淀ＤＮＡ费时费力,且酚和氯仿是强烈的腐蚀剂,对人体有害。本实验室采用Ｃｈｅｌｅｘ１００一步法快速提取外周血ＤＮＡ,用于聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增目的基因片段,取得了良好的效果,本文作一介绍。１　材料与方法１１　材料　①Ｃｈｅｌｅｘ１００为ＢｉｏＲａｄ公司产品。②ＰＣＲ鉴定试剂为短串联重复序列ＨＵＭＴＨ０１［ＡＡＴＧ］ｎ的扩增引物分别为５’ＧＴＧＧＧＣＧＧＡＡＡＡＧＣＴＣＣＧＡＴＴＡＴ３;５’Ｔ…     

聚合酶链反应在MLCK表达载体构建中的应用

用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）方法扩增 出含有Ｓａｌ Ⅰ位点和转录起始点ＡＴＧ的肌球蛋白轻链激酶（ｍｙｏｓｉｎ Ｌｉｇｈｔ ｃｈａｉｎ ｋｉｎａｓｅ，ＭＬＣＫ）ｃＤＮＡ片段，并入质粒ｐＢＫｒｓｖ中，构建成能在宿主细胞中表达的表达本，并通过酶切图谱、ＳａｌⅠ位点ＤＮＡ序列是到证实。为进一步研究ＭＬＣＫ的表达奠定基础。     

人干细胞因子在大肠杆菌中的表达研究

目的 经过改造重组人干细胞因子（ｈｕｍａｎ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｆａｃｔｏｒ,ｈＳＣＦ）,提高其表达量。方法 应用人工合成寡核苷酸引物及ＰＣＲ技术,改变人工干细胞因子ｈＳＣＦ ｃＤＮＡ起始密码子ＡＴＧ与ＳＤ序列之间的距离及在翻译起始区（即Ｎ端氨基酸）部分采用大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）喜用型密码子的策略,使重组表达质粒ｐＢＶ２２０－ｈＳＣＦ在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得高效稳定表达。结果 ＤＮＡ序列测量证明基因     

人结核杆菌热休克蛋白70和卡介苗α抗原基因启动子序列测定

用Ｔ７ＤＮＡ聚合酶测序系统测定了人结核杆菌热休克蛋白７０（ｈｓｐ７０）基因的启动子序列和卡介苗（ＢＣＧ）α基因的启动子和信号肽序列，并比较了它们与大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）和其它分枝杆菌启动子之间的异同。结果所测的ｈｓｐ７０启动子序列为人结核杆菌ｈｓｐ７０编码基因起始密码（ＡＴＧ）上游１５０个脱氧核苷酸，其中在ＡＴＧ上游－１２￣－８核苷酸处有核糖体结合位点（ＳＤ序列）ＧＧＡＧＧ，在ＲＮＡ聚合酶的结合     

抗中性粒细胞胞浆抗体相关血管炎的病因和发病机制

抗中性粒细胞胞浆抗体相关性系统性血管炎(ＡＮＣＡａｓｓｏｃｉａｔｅｄｓｙｓｔｅｍｉｃｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ,ＡＡＳＶ)主要是指韦格纳肉芽肿病 (ＷＧ)、Ｃｈｕｒｇ Ｓｔｒａｕｓｓ综合征 (ＣＳＳ)和显微镜下型多血管炎 (ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃｐｏｌｙａｎｇｉｉｔｉｓ,ＭＰＡ)三种疾病。它们在临床、病理及发病机制方面有许多相似的特点 ,即血清学常表现为ＡＮＣＡ阳性 ;常有肺和肾受累 ;组织病理以小血管 (微小静脉、毛细血管和小动脉 )受累为主。因此 ,ＣｈａｐｅｌＨｉｌｌ血管炎会议制订的分类标准中将它们归类为小血管受累的血管…