小鼠肾囊膜下移植人体肺腺癌裸小鼠移植瘤的药敏实验研究

一株人肺腺癌裸小鼠异种移植瘤(LAX-83)移植于免疫正常小鼠(ICR)或裸小鼠(Swiss-n/n的肾囊膜下,在较短时间内进行9个药物的药敏试验。结果表明二者的药物敏感性是相平行的。     

The study of polyamine levels and enzyme activities in metabolic pathway of polyamine in spleen of mice inoculated tumor cells

Polyamine concentrations, ornithine decarboxylase (ODC) activity and S-adenosyl-L-methionine decarboxylase activity in the spleen of ICR mice after s.c. inoculation of 2 X 10(6) Sarcoma-180 ascites tumor cells were studied. ODC activity and putrescine concentration in spleen were markedly elevated at 1 and 5 d after inoculation of tumor cells, and spleen weight increased from 3 to 7 d after the inoculation. The elevations at 5 d after inoculation corresponded to the enlargement of spleen. By s.c. inoculation of 2 X 10(6) METH-A ascites tumor cells into BALB/c mice, ODC activity and putrescine concentration in the spleen were also elevated at about 1 d after inoculation. On the other hand, when normal cells (spleen cells) were inoculated into ICR mice, those variations were not observed. From these facts, it was thought that elevations of ODC activity and putrescine concentration in the spleen at 1 d after inoculation of tumor cells were related to the immune response. Further, those were elevated according to the number of inoculated cells, and when cell membranes of 2 X 10(6) Sarcoma-180 ascites tumor cells were inoculated, those were also elevated at about 1 d after the inoculation. From the above facts, it was proved that elevations of ODC activity and putrescine concentration in the spleen at 1 d after the inoculation of tumor cells were due to antigenicity of tumor cell membranes and those were dependent on the number of inoculated tumor cells.     

不同时间应用重组人血管内皮抑制素对小鼠肺腺癌SPC-A1生长的影响

目的观察在不同时间应用重组人血管内皮抑制素(恩度)后肺腺癌SPC-A1肿瘤组织的生长情况,为重组人血管内皮抑制素的临床应用提供理论依据。方法将24只小鼠按随机分组方法,分成4组(Ⅰ组:接种肿瘤日前6d开始给药;Ⅱ组:接种肿瘤当日开始给药;Ⅲ组:接种肿瘤日后第6天开始给药;Ⅳ组:对照组),每组6只,且各组给予的重组人血管内皮抑制素剂量均为3mg·kg-1·d-1;通过对各实验组与对照组小鼠体内肺腺癌SPC-A1肿瘤体积大小及肿瘤微血管密度的比较,观察在不同时间应用重组人血管内皮抑制素后对肿瘤血管生成的影响。结果在开始实验18d后,Ⅰ组肿瘤体积为(2078±185)mm3,肿瘤微血管密度为(42±4);Ⅱ组肿瘤体积为(928±126)mm3,肿瘤微血管密度为(36±5);Ⅲ组肿瘤体积为(2512±603)mm3,肿瘤微血管密度为(41±5);Ⅳ组肿瘤体积为(4009±780)mm3,肿瘤微血管密度为(47±6);Ⅱ组肿瘤体积和微血管密度与对照组(Ⅳ组)相比均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),而Ⅰ组和Ⅲ组分别与Ⅳ组相比肿瘤体积和微血管密度差异均无统计学意义。结论重组人血管内皮抑制素具有抗肿瘤血管生成作用,最佳给药时间是接种肿瘤当天。     

番茄红素对荷肝癌裸小鼠移植瘤生长的作用及机制研究

目的研究番茄红素(Lycopene,LP)对荷肝癌裸小鼠移植瘤生长的影响及其机制。方法通过背部皮下注射接种肝癌Hep G2细胞的方法建立荷肝癌裸小鼠模型,并分别腹腔注射5、10、20 mg/(kg·d)的LP和2 mg/(kg·d)的顺铂进行干预治疗,疗程为14 d。治疗后,观察各组裸小鼠的一般生存状态及肿瘤生长状况,称取瘤体质量并计算抑瘤率;通过苏木精-尹红(HE)染色观察肿瘤组织形态结构改变,末端标记法(TUNEL)检测肿瘤组织细胞凋亡状况,免疫组织化学法(IHC)观察肿瘤组织凋亡相关蛋白(caspase-3、Bax、bcl-2)表达。结果经LP治疗14 d,荷肝癌裸小鼠饮食状况和精神状态明显改善,瘤体减小,活动度和硬度降低,肿瘤组织呈现细胞皱缩、片状坏死等病理性改变,凋亡细胞数量明显增多;瘤体质量显著减轻、抑瘤率显著升高;肿瘤组织中caspase-3和Bax表达显著上调,而bcl-2显著下调,Bax/bcl-2比值显著升高;LP上述作用均具有一定的剂量依赖性。结论番茄红素对荷肝癌裸小鼠移植瘤生长具有一定的抑制作用,其机制可能与番茄红素调节凋亡相关基因蛋白表达而促进肿瘤组织细胞凋亡有关。     

靶向生存素基因的shRNA抑制膀胱癌细胞裸鼠移植瘤生长

目的 观察稳定转染靶向生存素(survivin)基因短发夹RNA(shRNA)对膀胱癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响.方法 将靶向生存素基因的shRNA真核表达载体转染人膀胱癌细胞T24并获得稳定的单克隆细胞,实时定量PCR检测转染后生存素mRNA表达的变化;分别将转染和未转染细胞种植于裸鼠皮下,观察肿瘤生长情况;通过免疫组化检测肿瘤组织生存素蛋白表达的差异.结果 RNA干扰使T24细胞生存素表达下调92.86%;未转染组在20～29 d均形成体积超过2000 mm3的肿瘤,转染组在43 d时经病理证实3只裸鼠形成肿瘤,最大体积62.5 mm3;免疫组化显示转染组形成的肿瘤生存素蛋白表达明显减弱.结论 靶向生存素基因的shRNA明显下调了生存素表达,并抑制了膀胱癌细胞T24裸鼠移植瘤的生长.     

丙双吗啉的抗肿瘤作用和吸收分布排泄研究

丙双吗啉(AT-2153)是丙亚胺(ICRF 159)的衍生物,ip 80～100mg/kg ×5d,对裸小鼠肾包膜下接种的人肺癌LAK-83移植瘤有显著的抑制作用。接种Lewis肺癌的小鼠,ig [~(14)C]AT-2153后,胃、肠和胆囊的放射性最高,其次为肺的肿瘤转移灶。给药后24和48h的尿和粪中,放射性总排出量分别为给药量的35.2和65.9％。     

树突状细胞瘤苗预防接种联合吉西他滨治疗可提高胰腺癌小鼠模型的生存率

目的应用胰腺癌小鼠模型来研究吉西他滨是否可以提高树突状细胞瘤苗接种的疗效。方法 C57B L/6小鼠成功负载经紫外线辐射后的PanO2癌细胞后,从小鼠体内获得骨髓源性DCs然后经皮下给药。预防性接种的小鼠在PanO2癌细胞形成肿瘤威胁前接种瘤苗,每隔一周接种3次,治疗性接种于肿瘤形成可触及结节时开始。吉西他滨经腹腔给药,每周两次。结果预防性DC瘤苗接种可全面阻止皮下及原位肿瘤的发展并且可诱导肿瘤抗原特异性CTLs及免疫记忆。对于已形成皮下肿瘤的模型,治疗性DC瘤苗接种与吉西他滨同样有效(肿瘤威胁形成后58天生存率分别为14%和17%,对照组0%)。以上两种方法联合可显著提高带瘤小鼠的生存率(肿瘤威胁形成后58天生存率为50%)。树突状细胞瘤苗接种也可以预防静脉注射PanO2细胞后肺转移导致的死亡。结论:树突状细胞免疫治疗不仅可以成功地与吉西他滨联合治疗晚期胰腺癌,还能够有效地预防无瘤患者的肿瘤局部复发及转移。     

ErbB2高表达的人乳腺癌原位移植瘤裸鼠模型的建立

目的采用人乳腺癌细胞株BT-474建立稳定高表达ErbB2的人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,选择合适的模型制作方法。方法实验前1d在36只裸鼠颈部皮下埋植0.5mg17β雌二醇缓释片,并随机分为3组:原位组将5×106个BT-474细胞接种于裸鼠左侧第二乳房垫内,胁部皮下组将同样数量的BT-474细胞接种于裸鼠左侧胁部皮下,腋窝组则接种于裸鼠左侧腋窝内;观察3组裸鼠荷瘤情况及移植瘤病理组织学特点,并采用免疫组化方法动态监测移植瘤的ErbB2表达情况。结果 3组裸鼠的荷瘤率均为100%,都保持了原发肿瘤高表达ErbB2的特点;和两组对照相比,原位组肿瘤形状、生长速度及细胞增殖与血管生成等生物学特征一致性更强;此外,原位组的肿瘤对治疗药物处理也有良好反应。结论 BT-474细胞接种于乳房垫内比胁部皮下及腋窝建立的裸鼠移植瘤模型更适于进行抗ErbB2抗体等药物的药理学研究。     

山药提取物联合树突细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞对荷MDA-MB-231乳腺癌干细胞瘤裸鼠的治疗作用研究

目的 研究山药Dioscorea opposita提取物联合树突细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞（DC-CIK）对荷MDA-MB-231乳腺癌干细胞瘤裸鼠的治疗效果。方法 制备荷MDA-MB-231乳腺癌干细胞Balb/c裸鼠模型,随机分为4组,每组8只：对照组裸鼠尾iv生理盐水,0.2 mL/次,2次/周;DC-CIK组裸鼠在肿瘤干细胞接种4 d后尾iv 1×10⁶个DC-CIK细胞,2次/周,给药3周;山药提取物组裸鼠ig山药提取物125 mg/kg,0.2 mL/d,给药3周;山药提取物联合DC-CIK组裸鼠ig山药提取物125 mg/kg,0.2 mL/d,同时尾iv 1×10⁶个DC-CIK细胞,2次/周,给药3周。各组裸鼠在治疗3周期间每2天测量瘤体大小及裸鼠体质量,治疗结束后处死裸鼠,取出瘤体称质量;qRT-PCR法检测瘤组织中Akt信号通路中关键原癌基因c-Myc表达水平。结果 治疗结束后,各组裸鼠瘤体生长速率为山药提取物联合DC-CIK组结论 对荷MDA-MB-231乳腺癌干细胞瘤裸鼠治疗效果中,各给药组裸鼠肿瘤生长均受到明显抑制,其中以山药提取物联合DC-CIK组效果最佳。