丙硫咪唑在猪体内的药物动力学研究

本文报道广谱抗寄生虫药丙硫咪唑在猪体内的药物动力学研究。选用6头健康杂种猪,体重为38.0±4.6kg,按10ng/kg的剂量胃管灌服丙硫咪唑混悬液,服药前后按计划定时从前腔静脉采集血样。用乙醚萃取法提取血浆中的药物,反相高效液相色谱法同时测定血浆丙硫咪唑及其代谢产物丙硫咪唑亚砜及砜的浓度。测定时以甲苯咪唑为内标,色谱条件:Zorbax ODS柱(25cm×4.6mm),流动相为甲醇:水(80:20.V/V),流速1.0ml/mir,UV检测波长292nm.测定结果表明,在给药后3分钟采的血样已不能测到丙硫咪唑的原形药物,而其两种主要代谢产物亚砜及砜在给药后36小时仍可测到(最低检测限:亚砜及砜均为0.02μg/ml)。亚砜及砚的主要动力学参数分別是:峰浓度3.22±0.39、1.91±0.80μg/ml,真达峰时间10.00±5.93、20.67±4.46小时,消除半衰期5.93±2.31、9.17±2.30小时,药时曲线下面积52.38±10.73、32.23±9.10μg.h/ml.丙硫咪唑在猪体内的抗蠕虫活性目前认为是由于在肝脏代谢生成的产物亚砜的作用。     

一个新的口服单环β-内酰胺抗生素Tigemonam的体内评价

Tigemonam是一个对革蓝氏阴性细菌有强大抗菌作用的口服单环β-内酰胺抗生素.本文观察了本品对动物药代动力学,小鼠全身感染、泌尿道感染和大鼠肺部感染等的保护作用,并与其他抗生素进行了对比.结果表明,小鼠口服50mg/kg,给药后10分钟血峰浓度(38μg/ml),其血峰浓度与头孢克罗、头孢氨苄和头孢羟氨苄等相似,但在2小时,本品血浓度明显高于上述对照药.狗口服25mg/kg的达峰时间为1小时,其血峰浓度与小鼠相似.其静脉和口服给药的AUC分别为158.3μg·hr/ml和133.1μg·hr/ml,两者比例为84.1%,本品两途径给     

氨苄西林、氨苄西林钠及注射用氨苄西林钠中二聚体及其他相关物质的HPLC检查法

目的:建立了HPLC测定氨苄西林、氨苄西林钠和注射用氨苄西林钠中氨苄西林二聚物及其他相关物质的方法.方法:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;取12%醋酸溶液0.5 ml、0.2 mol/L磷酸二氢钾溶液50ml和乙腈50ml置1000ml量瓶中,加水稀释至刻度,作为流动相A;取12%醋酸溶液0.5 ml、0.2 mol/L磷酸二氢钾溶液50ml和乙腈400ml置1000ml量瓶中,加水稀释至刻度,作为流动相B,进行梯度洗脱;流速:1.0 ml/min;检测波长为254nm.结果:氨苄西林峰与二聚物峰和其他杂质峰分离良好,在2.2～177.4μg/ml浓度范围内,氨苄西林峰面积与样品浓度呈良好的线性关系,回归方程为Y=3.096×106x 3.810×104,r=1.0000;在2.2～177.4μg/ml浓度范围内,氨苄西林二聚物峰面积与样品浓度线性关系良好,Y=3.266×106X 3.751×103,r=0.9999.结论:本法可同时检测氨苄西林、氨苄西林钠和注射用氨苄西林钠中二聚物和其他相关物质,操作简便、快速,结果准确,重现性好.     

蛇葡萄素钠协同卡铂对肺癌Lewis细胞增殖的抑制作用

目的:研究蛇葡萄素钠(AMP-Na)协同卡铂对肺癌Lewis细胞增殖的抑制作用。方法:以6.25、12.5、25、50、100μg/ml AMP-Na+3.125、6.25、12.5、25、50μg/ml卡铂培养细胞4 h,测定细胞活力并计算抑制率与半数抑制浓度(IC50)。以12.5、25、50、100μg/ml AMP-Na+12.5μg/ml卡铂培养细胞12 h,流式细胞仪检测细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)表达。结果:系列质量浓度AMP-Na与系列质量浓度卡铂联用后对细胞生长有明显抑制作用,随质量浓度的升高,卡铂对Lewis细胞的IC50逐渐降低;AMP-Na质量浓度范围在6.25~50μg/ml时,与3.125~25μg/ml卡铂联用后,对Lewis细胞增殖的协同抑制作用最强。AMP-Na与卡铂联合培养细胞12 h后,细胞Caspase-3表达明显增强。结论:AMP-Na与卡铂合用对Lewis细胞增殖具有协同抑制效应,其机制可能与AMP-Na激活细胞Caspase-3,从而诱导细胞凋亡有关。     

HPLC-MS/MS法研究PVP包衣去甲斑蝥素壳聚糖纳米粒在大鼠体内的药代动力学

目的:建立HPLC-MS/MS方法测定大鼠血浆中去甲斑蝥素(NCTD)浓度,并考察PVP包衣去甲斑蝥素-壳聚糖纳米粒制剂(PVP coated NCTD-chitosan nanoparticles,PVP-NCTD-NP)在大鼠体内药代动力学及相对生物利用度。方法:使用电喷雾电离负离子源(ESI-),多重反应离子(MRM)模式检测药物;采用高氯酸作为蛋白沉淀剂,测定大鼠尾静脉注射PVP-NCTD-NP和原药NCTD溶液后的血药浓度;利用3P97软件计算药代动力学参数。结果:NCTD在0.102 5～10.25μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 2),最低检测限为50 ng·mL-1;经3P97软件拟合,NCTD的药代动力学过程符合二室模型,与原药相比,PVP-NCTD-NP相对生物利用度为325.5%。结论:本法灵敏、准确、选择性高,适用于NCTD药代动力学的研究;PVP-N-CTD-NP可促进药物的吸收,显著提高NCTD的生物利用度。     

人鼻咽癌细胞CNE_2对各种抗肿瘤药敏感性试验

目的 :了解人鼻咽癌细胞CNE2 对各种抗肿瘤化疗药的敏感性。方法 :体外噻唑蓝还原 (MTT)试验法。结果 :1 3种抗肿瘤药对CNE2 细胞均有明显的杀伤作用 ,其中有 1 0种抗肿瘤药的半数抑制浓度 (IC50 )在 2 0 μg/ml以下 ,另 3种药的IC50 为 2 7.3～ 53.91 μg/ml。结论 :人鼻咽癌细胞CNE2 对临床应用的各类抗肿瘤药是敏感的。     

口服丙氟哌酸的药代动力学研究

用双盲法给6名健康受试者口服丙氟哌酸(CF)250mg 和500mg,给药前夜禁食,给药前及给药后0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、12和24h 采血;并留取0～2、2～4、4～8、8～12、12～24h 尿样,用琼脂打孔扩散法测血、尿药浓度。指示菌为肺炎杆菌ATCC 10031,数据由一室模型非线性最小两乘法分析得到。结果显示,给药250mg,血药浓度在1h 达高峰,为1.45±0.58μg/ml,8h和12h 血浓度为0.25 ug/ml 和0.12μg/ml;而500mg达峰时间为1.33h,峰浓度2.46±0.94μg/ml,8、12h血浓度分别为0.44和0.22 ug/ml;250mg 和500mg     

肾病患者连续腹膜透析头孢唑林的药物动力学及给药方案

本文报告5例肾病患者连续腹膜透析应用头孢唑林的药物动力学及给药方案。1g/2L头孢唑林灌入腹腔,留置4h后,流出液内药浓度为187±53μg/ml,吸收量为57±13％;同时测得血清内药峰浓度为76±8μg/ml。停药后20h,用不含头孢唑林的透析液交换3次后,血清内药浓度为50±9μg/ml,经腹膜累积排出率为体内药量的16±3％。建议给药方案为头孢唑林0.5-1.0g/d,分2次分别加于第二、四次交换的透析液中较为合适。     

超细粉体技术对当归药物代谢动力学的影响

目的 探讨超细粉体技术对当归中指标成分阿魏酸的药物代谢(药代)动力学影响.方法 采用高效液相色谱法测定服用普通粉或超细粉当归后家兔血浆中阿魏酸浓度,并用3P97软件计算相应药代动力学参数.结果 家兔分别给于两种粒径当归粉末后,药代物动力学过程均符合一室模型.超细粉当归组主要参数:吸收半衰期(5.3±2.9) min,消除半衰期(38.7±17.2) min,峰浓度(2.7±1.0) μg/ml,达峰时间(17.5±6.2) min, 药-时曲线下面积 (205.5±96.0) μg·ml-1·min-1;普通粉当归组主要参数:吸收半衰期(11.7±4.2) min,消除半衰期(34.7±11.3) min,峰浓度(1.9±0.7) μg/ml,达峰时间(27.8±9.1) min, 药-时曲线下面积(165.9±65.5) μg·ml-1·min-1;当归超细粉吸收半衰期、达峰时间与普通粉组相比差异有统计学意义(P＜0.01);峰浓度与普通粉组相比差异有统计学意义(P＜0.05). 结论当归超细粉在体内吸收快,生物利用度高.     

流感疫苗病毒株在MDCK细胞中的培养条件

 目的   研究4价流感疫苗所用病毒株在MDCK细胞中的扩增条件。方法 在6孔细胞培养板中以不同感染复数（multiplicity of infection,MOI）（0.100 0、0.010 0、0.001 0、0.000 1）和对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸氯甲基酮（TPCK）-胰蛋白酶（胰酶）浓度（0、2、4、8 μg/ml）进行病毒接种和扩增,感染后72 h收获细胞上清液,检测病毒血凝素效价,确定病毒最佳扩增条件。随后,在搅拌瓶中进行MDCK细胞微载体悬浮培养,研究不同起始细胞接种密度（1.5×10⁵、2.0×10⁵、3.0×10⁵ 个/ml）和微载体浓度（3、5、10 g/L）对MDCK细胞生长的影响,确定细胞最佳扩增条件。根据确定的最佳扩增条件,在搅拌瓶培养体系中扩增4种病毒。结果 6孔板中4种流感病毒的最佳接种条件分别是,A/Michigan/45/2015(H1N1) pdm09：MOI 0.010 0、TPCK-胰酶浓度2 μg/ml;A/Hongkong/4801/2014(H3N2)：MOI 0.010 0、TPCK-胰酶浓度4 μg/ml;B/Brisbane/60/2008：MOI 0.001 0、TPCK-胰酶浓度4 μg/ml;B/Phuket/3073/2013：MOI 0.010 0、TPCK-胰酶浓度4 μg/ml。在搅拌瓶中以3.0×10⁵ 个/ml初始细胞密度接种,3 g/L微载体浓度培养,MDCK细胞能够实现较好的扩增,最高密度可达2.1×10⁶ 个/ml;搅拌瓶悬浮培养,以最佳接种条件接种后,4种病毒的血凝素效价为：6.75~8.42log₂ 血凝素单位/50 μl。结论   通过摸索病毒接种最佳MOI、TPCK-胰酶浓度及优化MDCK细胞微载体悬浮培养条件,能够在MDCK细胞微载体悬浮培养体系中有效扩增4价流感疫苗用病毒株,为后期工艺放大研究奠定基础。     

CCK-8法检测AT#9对肿瘤细胞的生长抑制作用

目的:研究复方制剂AT#9 的体外抗肿瘤作用.方法:采用细胞毒性检测CCK-8 法检测AT#9 对小鼠乳腺癌细胞EMT6、人肺癌细胞A549 和人前列腺癌细胞PC3M 的体外抑制生长作用.结果:AT#9 对三种肿瘤细胞的半数抑制浓度IC50 分别为1824μg/ml、3219μg/ml 和5854μg/ml.结论:AT#9 在体外对三种不同的肿瘤细胞有不同程度的生长抑制作用,且呈浓度依赖关系.     

五味子甲素对大鼠肝微粒体CYP3A活性的影响

目的：通过体外药物代谢实验探讨五味子甲素对CYP3A活性的影响。方法：以大鼠肝微粒体为载体,选取咪达唑仑（MDZ）作为药物“探针”,建立高效液相色谱（HPLC）检测方法,体外给药测定五味子甲素对MDZ的IC50值以及相关酶动力学参数。结果：孵育体系内源性物质不干扰测定,方法快捷、稳定、灵敏度高。在肝微粒中,五味子甲素对MDZ的IC50浓度为6．26μmol／mL,相关酶动力学参数：Km=15．77μmol／L,K1=5．50μmol／mL。结论：五味子甲素对大鼠肝微粒体CYP3A活性具有抑制作用,其抑制作用为混合型,即：非竞争与反竞争抑制。     

藤茶双氢杨梅树皮素对人肝癌BEL-7404细胞增殖的抑制作用

目的：探讨藤茶双氢杨梅树皮素（APS）的抗肿瘤作用。方法：以MTT法、生长曲线法、克隆形成法观察APS对人肝癌BEL-7404细胞的体外抑制作用。结果：MTT法中，APS对BEL-7404细胞的IC50为22．99μg／mL；细胞生长曲线法提示其对BEL-7404细胞生长有明显抑制作用；克隆形成法中，药物浓度在9．88μg／mL以上时抑制率为100％，药物浓度为6．58μg／mL时抑制率为69．65％。结论：APS对BEL-7404细胞的增殖有明显的抑制作用。     

Immunosuppressive properties of deoxynivalenol

The immunosuppressive effect of deoxynivalenol (DON) was investigated in male Balb/c mice. The effect of the route of DON administration to the animals was first studied. The results showed that DON acted efficiently on the immune system per os. The administration of 100 ppm DON in the diet caused the death of all the animals within a few days. After oral administration of DON to mice, liver and kidney weights were not changed while the thymus weight was significantly reduced at concentrations greater than 10 ppm. The spleen weight was reduced less than the thymus weight. Histologically, the structure of the thymus was damaged and the high doses produced an atrophy of this organ. Serum levels of anti-sheep red blood cells (SRBC) antibodies were significantly reduced, this effect was dose-dependent. The stimulation of B and T cells by mitogens was depressed: the mitogenic responses were more reduced for thymic cells than for splenic cells. DON inhibited cellular proliferation in vitro, as estimated by [3H]thymidine incorporation:murine splenocytes were more sensitive (IC50 = 131 ng/ml of culture) than XP human fibroblasts (IC50 = 252 ng/ml of culture).     

Involvement of CYP2C9 and UGT2B7 in the metabolism of zaltoprofen,a nonsteroidal anti-inflammatory drug,and its lack of clinically significant CYP inhibition potential

AIMS: To identify the cytochrome P450 (CYP) and UDP-glucuronosyltransferase (UGT) isoforms responsible for the formation of the primary metabolite(s) of zaltoprofen, and to predict possible drug interactions by investigating the inhibition of CYP isoforms in vitro. METHODS: The metabolism of zaltoprofen was studied in vitro using recombinant CYP and UGT isoform cDNA-expression systems. The effects of selective isoform inhibitors on zaltoprofen metabolism were studied using human liver microsomes. The inhibitory effects of zaltoprofen on the metabolism of selective probe substrates for CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6, CYP2E1 and CYP3A4 were also determined in human liver microsomes. RESULTS: Zaltoprofen was extensively metabolized by CYP2C9 and UGT2B7. CYP2C9 catalysed sulphoxidation but not hydroxylation of zaltoprofen. In the human liver microsomal metabolism study, zaltoprofen metabolism was markedly inhibited by sulphaphenazole, a selective inhibitor of CYP2C9. In the drug interaction study, negligible inhibition (< 15%) of the activities of CYP1A2, CYP2C19, CYP2D6, CYP2E1 and CYP3A4 was apparent at 5 micro g ml(-1), the maximum plasma concentration observed in humans after oral administration of an 80 mg zaltoprofen tablet. However, zaltoprofen inhibited CYP2C9 by 26% at 5 micro g ml(-1). At higher concentrations, zaltoprofen produced some inhibition of CYP2C9 (IC50 = 19.2 micro g ml(-1); 64.4 micro m) and CYP3A4 (IC50 = 53.9 micro g ml(-1); 181 micro m). The free drug concentrations in plasma (0.02 micro g ml(-1), 67.0 nm) at the Cmax of the clinically effective doses are much lower than the IC50 values corrected for the nonspecific binding ratio of zaltoprofen to microsomal protein (15.5 micro g ml(-1) for CYP3A4, 49.5 micro g ml(-1) for CYP3A4). Furthermore, the maximum free drug concentrations in the hepatic intracellular was calculated to be 0.068 micro g ml(-1) and the increase in the AUC in the presence of zaltoprofen was estimated to be only 0.4% for CYP2C9 substrates and 0.1% for CYP3A4 substrates, respectively. CONCLUSIONS: Zaltoprofen is predominantly metabolized by CYP2C9 and UGT2B7, and is considered unlikely to cause significant drug interactions in vivo when coadministered with CYP substrates at clinically effective doses.     

异甘草酸镁对慢性髓细胞性白血病K562细胞系增殖的抑制作用

目的：观察异甘草酸镁对慢性髓细胞白血病K562细胞系增殖的抑制作用。方法：将异甘草酸镁以1640培养液倍比稀释成10,1,10-1,10-2,10-3,10-4,10-5,10-6g·L-1共8个浓度组,分别处理增殖期K562细胞,镜下观察不同时间点各浓度组细胞生长情况,应用CCK-8法检测细胞增殖能力,绘制生长曲线,计算抑制率和半数抑制浓度（IC50）。结果：在给药第3天,浓度大于10-3g·L-1的异甘草酸镁对K562细胞增殖具有抑制作用（P〈0.05）,细胞倍增时间为48h,并且具有时间和浓度依赖性。其中,10g·L-1和1g·L-1异甘草酸镁的抑制作用最强（P〈0.01）,IC50约为1.6g·L-1。结论：异甘草酸镁对K562细胞的增殖具有抑制作用,为临床应用异甘草酸镁预防和治疗白血病化疗相关肝损伤提供实验依据。     

Cytotoxic Effects of Tris (2,3-dibromopropyl) phosphate and 2,4-diaminoanisole

Abstract The flame retardant tris(2,3-dibromopropyl)phosphate (Tris-BP) and the hair-dye component 2,4-diaminoanisole (2,4-DAA) were studied for possible cytotoxic effects in rat hepatoma cells grown in culture and in suspensions of isolated rat hepatocytes. Cell growth of Reuber cells was inhibited by 50% at 50 μg/ml Tris-BP and 20 μg/ml 2,4-DAA, respectively. At 200 μg/ml Tris-BP protein synthesis in Reuber cells was reduced by 40%, whereas 50% inhibition of protein synthesis in isolated hepatocytes was seen at 100 μg/ml. IC50 of 2,4-DAA with respect to protein synthesis was found at 400 μg/ml in Reuber cells and at 3600 μg/ml in MH₁C₁ cells, whereas in the isolated hepatocytes IC50 was 650 μg/ml. DNA synthesis was inhibited by 50% at 225 μg/ml Tris-BP in Reuber cells. At 500 μg/ml 2,4-DAA DNA synthesis in Reuber and MH₁C₁ cells was inhibited by more than 80%.     

XTT法和MTT法测定B淋巴细胞株细胞活性的实验研究

目的：比较两种常用的细胞活性检测方法MTT和XTT法间的异同。方法：以B淋巴细胞株Daudi细胞株为观察对象,分别采用MTT法和XTT法测出各自的OD值、抑制率及IC50,比较IC50敏感性及变异系数的差异。结果：MTT法和XTT法所求OD值变异系数无统计学差异;所求IC50分别为14.45μg/ml和11.24μg/ml,XTT法更敏感（P=0.031）。结论：MTT法价格便宜;XTT法价格较贵,但灵敏度更高,结果更稳定。     

某校大学新生乙肝疫苗接种情况及其影响因素的调查分析

目的：为促进大学生的乙肝防治工作提供参考。方法：采用问卷调查法,对大学新生中乙肝“两对半”全阴的学生进行乙肝疫苗接种情况调查,并分析其影响因素。结果：共调查3647人,乙肝疫苗接种率为85．66％（3124／3647）,接种人群中全程接种率为96．38％（3011／3124）。家庭人均月收入越高、父母文化程度越高、父母就职于企事业单位和医疗系统、周围有乙肝患者、对乙肝传播途径认识正确者、对乙肝疫苗信任者、对乙肝危害认识正确者更易接种乙肝疫苗,且接种针次更多。结论：家庭收入、父母文化程度、父母职业、对乙肝传播途径的认知、对乙肝疫苗的信任、对乙肝危害的认识是大学新生乙肝疫苗接种行为的主要影响因素。学校应加大对大学新生的乙肝防治宣传工作,以提高整个校园及周边的接种率。     

蛇毒心脏毒素诱导肺癌A549细胞的凋亡机制研究

目的:研究眼镜蛇心脏毒素(CTX)诱导肺癌A549细胞凋亡的机制。方法:MTT法测定CTX体外细胞毒性作用;吉姆萨染色法观察CTX对A549细胞形态学的影响;线粒体膜电位(JC-1)法检测CTX诱导A549细胞后细胞JC-1的变化;流式细胞仪检测CTX对A549细胞凋亡的影响;Western blot法测定细胞色素C、凋亡蛋白酶前体(Procaspase)-3、Procaspase-9的表达;通过S180小鼠肉瘤模型检测CTX体内抗肿瘤活性。结果:CTX作用于A549细胞的半数抑制浓度(IC50)为0.770μg/ml;0.5、1.0、2.0μg/ml CTX可引起A549细胞明显缩小,在高倍镜下可观察到胞核皱缩,形成染色质边集等形态学改变;流式细胞仪检测到CTX使A549细胞出现凋亡,并且具有量效关系;5μg/ml CTX作用于A549细胞0.5 h可使细胞JC-1降低;胞浆中检测到细胞色素C时,Procaspase-9的含量没有明显变化,随后逐渐减少,CTX诱导细胞凋亡具有时效关系;体内抑瘤实验显示在剂量为0.5、1.0、2.0 mg/kg时CTX对A549细胞有明显的抑制作用。结论:CTX对A549细胞有细胞毒性,可以使线粒体内细胞色素C释放,并激活Procaspase-9和Procaspase-3诱导A549细胞的凋亡。